氧化苦参碱对高糖诱导乳鼠原代心肌成纤维细胞转分化的作用及机制

目的探讨氧化苦参碱(OMT)对高糖(HG)诱导乳鼠原代心肌成纤维细胞(CFBs)增殖和转分化的作用及机制。方法Sprague-Dawley(SD)乳鼠20只,取乳鼠心脏的心尖部分分离与培养原代CFBs,取对数生长期CFBs细胞分为空白(Control)组、40 mmol/L甘露醇(Mannitol)组、不同浓度(30、35、40、45及50 mmol/L)HG组及不同浓度(25、50、100、200、400 mg/L)OMT组,采用噻唑蓝比色法(MTT)法检测细胞的增殖情况并确定后续实验OMT的保护浓度;按前述OMT的保护浓度结果,取对数生长期CFBs细胞分为空白(Control)组、40 mmol/L甘露醇(Mannitol)组、40 mmol/L HG(HG)组、40 mmol/L HG+50 mg/L OMT(OMT低剂量)组、40 mmol/L HG+100 mg/L OMT(OMT中剂量)组及40 mmol/LHG+200 mg/L OMT(OMT高剂量)组,采用天狼星红和苏木素-伊红(HE)染色法观察各组细胞的胶原纤维表达及形态变化,采用羟脯氨酸(Hyp)试剂盒检测法和免疫荧光染色法检测各组细胞Hyp及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,采用流式细胞术检测各组细胞的周期分布比例,采用Western blot检测CFBs中α-SMA、结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)、血管内皮生长因子A(VEGFA)及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白的表达。结果与HG组相比,50、100及200 mg/L OMT组CFBs细胞活力下降(P<0.05);与HG组相比,50、100及200 mg/L OMT组CFBs细胞形态发生变化,细胞数量变少;与HG组相比,50、100及200 mg/L OMT组CFBs内Hyp含量减少,细胞在S期分布比例降低(P<0.05);与Control组相比,HG组CFBs细胞数量增多,α-SMA表达增多;与HG组相比,50、100及200 mg/L OMT组CFBs细胞数量减少,α-SMA表达减少;与HG组相比,50、100及200 mg/L OMT组HIF-1α、VEGFA、α-SMA、CTGF、CollagenⅠ、CollagenⅢ及FN表达下调(P<0.05)。结论OMT可抑制乳鼠CFBs增殖并诱导细胞转分化,其机制可能与调节HIF-1α信号相关。

竹节参总皂苷通过减轻成纤维细胞生长因子21抵抗改善自然衰老大鼠的认知功能障碍

目的探讨竹节参总皂苷对自然衰老大鼠认知功能障碍的改善作用及其相关机制。方法将40只18月龄SD雄性大鼠随机分为模型组、竹节参总皂苷低剂量组、竹节参总皂苷高剂量组、亚精胺组,另取10只5月龄雄性SD大鼠作为对照组。竹节参总皂苷低、高剂量组大鼠分别给予含有药物的混合饲料(给药剂量为10、30 mg·kg^(-1)),亚精胺组大鼠自由饮用含亚精胺的饮用水(浓度为1 mmol·L^(-1)),连续给药4个月。采用Morris水迷宫实验评价大鼠认知功能;HE染色法检测皮层及海马神经元的病理变化;Nissl染色法检测皮层及海马神经元尼氏体的变化;透射电镜检测皮层线粒体超微结构的变化;Western Blot法检测皮层及海马组织成纤维细胞生长因子21(FGF21)-FGFR1/β-Klotho信号通路相关蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期显著延长(P<0.01),目标平台穿越次数、目标象限停留时间均显著减少(P<0.01),首次到达目标平台路程显著增加(P<0.01);神经元损伤明显,尼氏体数目降低,神经元线粒体出现空泡化,嵴排布紊乱;大鼠皮层及海马组织中FGF21蛋白表达水平显著升高(P<0.01),FGFR1、β-klotho、P-ERK蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,竹节参总皂苷高剂量组大鼠的逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),目标平台穿越次数、目标象限停留时间均显著增加(P<0.01),首次到达目标平台路程显著减少(P<0.01);竹节参总皂苷低、高剂量组大鼠的神经元损伤明显减轻,尼氏体数目增加,线粒体空泡化、嵴排布紊乱现象消失;皮层及海马组织中FGF21蛋白表达水平显著降低(P<0.01),P-ERK、FGFR1、β-klotho蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论竹节参总皂苷能有效改善自然衰老大鼠的认知功能障碍,可能与通过FGF21-FGFR1/β-klotho信号通路减轻FGF21抵抗,并改善神经元线粒体结构损伤有关。

罗格列酮对高糖条件下大鼠肾脏成纤维细胞TGF-β_1和PAI-1 mRNA表达的影响

目的:观察罗格列酮(RGZ)对高糖环境下大鼠肾脏成纤维细胞(NRK)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)mRNA表达的影响,探讨RGZ对糖尿病肾病的保护作用及其机制。方法:体外培养NRK细胞,分成正常对照组(NG,含1000mg/LD-葡萄糖)、高糖组(HG,含4500mg/LD-葡萄糖)、HG+RGZ(5μmol/L)组、HG+RGZ(10μmol/L)组和HG+RGZ(15μmol/L)组,作用24h后,提取细胞RNA,用RT-PCR检测各组TGF-β1和PAI-1mRNA的表达情况。结果:HG组细胞TGF-β1和PAI-1mRNA水平较NG组显著升高,RGZ可抑制这种高表达,其作用呈剂量依赖性。结论:RGZ可以改善高糖导致的肾脏成纤维细胞的损害,具有一定的肾脏保护作用。

野百合碱所致肺动脉高压大鼠模型中碱性成纤维细胞生长因子、内皮素-1及其受体的表达和外源性NO的作用

目的 :探讨野百合碱 (MCT)肺动脉高压模型大鼠肺组织中碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、内皮素 - 1(ET - 1)和内皮素A受体 (ETAR)的表达 ,并观察吸入外源性NO的作用。方法 :通过腹腔注射MCT建立肺动脉高压大鼠模型 ;使用NO吸入装置给予大鼠外源性NO ;采用免疫组织化学方法定量检测不同组间肺组织中bFGF、ET - 1及ETA 受体的表达。结果 :模型组肺动脉压、右心室肥厚程度、bFGF、ET - 1及ETA 受体的表达明显高于对照组 ,外源性NO吸入能明显减低肺动脉压、右室肥厚程度、bFGF、ET - 1及ETA 受体的表达。结论 :bFGF、ET -1及ETA 受体可能参与了MCT所致肺动脉高压的发生发展 ,外源性NO吸入可能通过ET - 1及ETA 受体途径阻止或逆转肺动脉高压的发展 ,但如何通过bFGF起作用还有待探讨。

形觉剥夺性近视模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达及Wnt/β-catenin信号通路的调控作用

目的:构建形觉剥夺性近视(FDM)大鼠模型,阐明FDM大鼠巩膜成纤维细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及其与Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的关系。方法: 40只大鼠随机分为对照组和FDM模型组,每组20只,FDM模型组大鼠建立FDM模型。测定大鼠眼轴长度;取大鼠眼球分离巩膜组织,采用Western blotting法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定大鼠巩膜组织中TGF-β1蛋白和mNRA表达水平。分离培养对照组和FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞,对照组大鼠巩膜成纤维细胞作为对照组,FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞分为FDM组和FDM+Dickkopf相关蛋白1(DDK1)组(加入DDK1培养),采用Western blotting法和RT-PCR法测定各组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、3型核糖核酸酶(DCL3)、结肠腺瘤样息肉蛋白(APC)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平。结果:与对照组比较,FDM组大鼠眼轴长度均明显增加(P<0.05),巩膜组织中TGF-β1蛋白和mRNA表达水平均明显降低(P<0.01)。对照组、FDM组和FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中GSK3β蛋白和mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05),TGF-β1、DCL3、APC、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平比较差异有统计学意义(P<0.01);与对照组比较,FDM组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平降低(P<0.05),DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05);与FDM组比较,FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05),DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论: FDM模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达水平降低,其水平受Wnt/β-catenin信号通路调控。

高压氧及常压氧干预大鼠超长随意皮瓣细胞成纤维细胞生长因子1及转化生长因子β_1的表达

背景:常规皮瓣设计常遵循长∶宽≤2∶1的原则,在某些局部血运丰富的区域,可达3∶1,超出这个范围,皮瓣的远端易发生坏死。如何能实现超长随意皮肤皮瓣的一次转移成功,是组织移植希望解决的问题。目的:将超长随意皮瓣设计为6∶1,观察高压氧、常压氧对大鼠随意皮瓣细胞成纤维细胞生长因子1及转化生长因子β1水平的影响。设计、时间及地点:随机分组,组织细胞移植的对比观察实验,于2006-03/09在青岛大学医学院附属医院动物试验中心完成。材料:4月龄Wistar雄性大鼠60只随机分为3组。方法:每组于背部中线形成一蒂在尾端的超长随意皮瓣1cm×6cm大小,对照组不给予干预,常压氧组术后当天给予常压氧2次,每次1h,连续5d,高压氧组术后当天给予高压氧2次,每次1h,持续5d。主要观察指标:术后7d计算各组皮瓣成活率,并监测皮瓣组织中成纤维细胞生长因子1及转化生长因子β1的表达量。结果:高压氧组皮瓣成活率较常压氧组与对照组明显提高,免疫组织化学检测高压氧组中成纤维细胞生长因子1的表达均较其余两组为高,提示皮瓣成活率的提高可能与成纤维细胞生长因子的高表达有关,转化生长因子β1的表达3组比较无明显差异。结论:高压氧干预组皮瓣成活率高,皮瓣细胞中成纤维细胞生长因子表达较常压氧组明显提高,而转化生长因子β1表达3组比较无差异。提示转化生长因子β1在皮瓣存活的中的作用不明显。

醛固酮对新生大鼠心肌成纤维细胞分泌ET、NO和TGF-β_1功能的影响

目的 探讨醛固酮对新生大鼠心肌成纤维细胞 (CFs)分泌内皮素 (ET)、一氧化氮 (NO)和转化生长因子 β1(TGF β1)的影响。方法 采用胰酶消化法和差速贴壁分离法获取CFs,应用放射免疫分析法、硝酸还原酶法和ELISA法分别测定不同条件下培养的CFs培养液中的ET、NO和TGF β1水平。结果 一定浓度范围内的醛固酮可按剂量依赖方式促进CFs分泌ET和TGF β1,抑制CFs分泌NO ,使ET/NO比值上升 ;盐皮质激素受体 (MR)拮抗剂螺内酯可阻断醛固酮的上述作用 (P <0 0 1)。结论 醛固酮可通过MR促新生大鼠CFs分泌ET和TGF β1,抑制CFs分泌NO ,从而改变ET/NO比值。醛固酮可能通过影响CFs分泌的生物活性物质网络平衡关系改变 ,发挥其促心肌纤维化作用。

成纤维细胞生长因子受体1在大鼠各组织中的表达

目的研究成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)mRNA及蛋白在大鼠各组织中的表达。方法采用实时定量荧光聚合酶链式反应测大鼠脂肪、肝脏、心脏、血管、肾脏、肌肉等组织中FGFR1 mRNA表达;采用酶联免疫吸附法及免疫组织化学法检测各组织中FGFR1蛋白的表达。结果 FGFR1 mRNA和蛋白在大鼠脂肪、肝脏、心脏、血管、肾脏、肌肉中均有表达,主要分布于细胞膜。FGFR1 mRNA在大鼠脂肪、肝脏、心脏、血管、肾脏、肌肉中表达量分别为2.623 0±0.524 9、1.003 0±0.077 2、6.755 0±0.278 4、1.613 0±0.320 1、4.833 0±0.421 5、6.123 0±0.348 7,FGFR1蛋白在以上各组织中的表达量分别为(10.670 0±1.197 0)、(0.356 0±0.105 5)、(0.860 0±0.163 9)、(5.152 0±0.801 4)、(0.186 0±0.046 7)、(2.110 0±0.161 9)μg·g-1,FGFR1 mRNA在各组织中的表达从高至低依次为心脏、肌肉、肾脏、脂肪、血管和肝脏;FGFR1蛋白在各组织中的表达量从高至低依次为脂肪、血管、肌肉、心脏、肝脏、肾脏。FGFR1 mRNA和蛋白在各组织中的表达量比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 FGFR1在大鼠各主要组织器官中均有表达,主要分布于细胞膜,且在各组织中的表达存在一定差异。

抗转化生长因子β_1抗体对大鼠周围神经瘢痕中成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

周围神经损伤后修复是医学上的一大难题,由于周围神经解剖与功能上的特殊性,即使使用显微外科技术缝合,功能恢复一般只有70％左右.如何提高神经再生的速度与质量,寻找新的修复方法仍然是日前迫切需要解决的问题[1].神经吻合口处成纤维细胞大量增殖,导致组织纤维化和瘢痕形成是影响神经损伤后再生的主要因素.因此,控制损伤处成纤维细胞的过多增殖有利于神经的恢复.多种生长因子都能调控成纤维细胞的生物学行为,其中,转化生长因子β1（TGF-β1）被认为是伤口细胞外基质积聚、收缩和异常修复的关键性调控因素,在瘢痕形成过程中具有重要的作用.转化生长因子β1抗体（抗TGF-β1抗体）可以中和体内的TGF-β1,阻滞其发挥生物学效应.本研究建立了大鼠周围神经损伤模型,分离其中的成纤维细胞,测定了抗TGF-β1抗体对成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原蛋白的含量.

氧化苦参碱对转化生长因子β1诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖与分化的抑制作用

目的:观察氧化苦参碱(Oxymatrine,OM)干预对转化生长因子β1 (Transforming growth factor-β1,TGF-β1)刺激的SD大鼠心肌成纤维细胞(Cardialfibroblasts,CFs)增殖、分化的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:体外培养新生大鼠CFs,分离纯化后分为对照组(使用无血清DMEM培养)、TGF-β1组(单纯TGF-β1诱导)和观察组(使用TGF-β1加OM干预) 3组。MTT法检测CFs增殖情况,ELISA法检测Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ,CoL-Ⅰ)和Ⅲ型胶原(Collagen-Ⅲ,CoL-Ⅲ)含量,RT-PCR法检测Smad2 mRNA表达,Westorn blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad2及Smad3蛋白表达情况。结果:与对照组比较,TGF-β1组CFs增殖水平、CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ、PCNA、α-SMA、Smad2 mRNA及Smad2/3蛋白表达均明显升高(P <0.05);与TGF-β1组比较,观察组上述指标均降低(P <0.05),除CoL-Ⅰ外,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论:OM能够明显抑制TGF-β1诱导CFs增殖、分化水平,降低胶原蛋白的合成水平,作用机制与其能够干预Smad2及Smad3蛋白表达有关,具有临床应用价值。

转化生长因子β1对大鼠肺成纤维细胞内皮素受体类型的影响

目的:探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对大鼠肺成纤维细胞内皮素受体(endothelin receptor,ETR)类型的影响。方法:体外培养大鼠肺成纤维细胞株,并随机分为TGF-β1干预组、对照组。TGF-β1干预组加入含TGF-β1(10 ng/mL)的FM培养基1 mL,对照组加入1 mL FM培养基。分别培养1 d、3 d、5 d,每组每时间点设3复孔。采用荧光定量PCR法观察各组各时间点ETRA、ETRB mRNA的表达水平。用Western blotting法观察各组各时间点ETRA、ETRB蛋白的表达水平。结果:TGF-β1干预组ETRA表达随着时间变化呈降低趋势,3 d、5 d时显著低于模型组(P<0.01);而ETRB表达随着时间变化呈升高趋势,3 d时高于模型组(P<0.05),5 d时显著高于模型组(P<0.01)。结论:TGF-β1刺激可诱导大鼠肺成纤维细胞ETR类型发生变化,ETRA表达减少,ETRB表达增加。

缺氧和高糖对大鼠肾成纤维细胞ICAM-1mRNA表达的影响

目的:探讨缺氧和高糖对肾成纤维细胞(NRK)细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA表达的影响。方法:将大鼠NRK分6组进行体外培养:(1)正常浓度葡萄糖组(常糖组):5.6mmol/L葡萄糖;(2)常糖+缺氧组:5.6mmol/L的葡萄糖+100μmol/L的CoCl2;(3)高糖A组:15mmol/L葡萄糖;(4)高糖+缺氧A组:15mmol/L葡萄糖+100μmol/L的CoCl2;(5)高糖B组:30mmol/L葡萄糖;(6)高糖+缺氧B组:30mmol/L葡萄糖+100μmol/L的CoCl2。分别于24h、48h取各组NRK采用RT-PCR检测ICAM-1mRNA表达水平。结果:与常糖组相比,高糖A组,高糖B组ICAM-1mRNA表达量逐渐升高(P<0.01),常糖+缺氧组、高糖+缺氧A、B组ICAM-1mRNA表达量也升高(P<0.01);高糖+缺氧A、B组ICAM-1mRNA表达量分别比高糖A、B组明显升高(P<0.01);高糖A、B组和常糖+缺氧组、高糖+缺氧A、B组48hICAM-1mRNA表达量均高于24h表达量(P<0.01)。结论:高糖和缺氧均可导致ICAM-1mRNA高表达,缺氧可能进一步增加高糖上调ICAM-1的表达。

罗格列酮对环孢素A作用下大鼠肾脏成纤维细胞转化生长因子-β1和层黏连蛋白表达的影响

目的:观察罗格列酮(RGZ)对环孢素A作用下大鼠肾脏成纤维细胞(NRK)转化生长因子-β1(TGF-β1)和层黏连蛋白(FN)表达的影响,探讨罗格列酮对环孢素A肾毒性的改善作用及其机制。方法:体外培养NRK细胞,在无血清DMEM低糖培养基同步化24h后,随机分为7组:正常对照组,CsA0.25mg/L组,CsA0.5mg/L组,CsA1.0mg/L组,CsA2.0mg/L组,CsA1.0mg/L加RGZ10μmol/L组,CsA1.0mg/L加RGZ15μmol/L组,继续培养24h后,收集细胞,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组细胞中TGF-β1mRNA表达,用蛋白印迹(Western blotting)方法检测FN蛋白的表达。结果:不同质量浓度的CsA均可促进TGF-β1 mRNA和FN蛋白表达(P<0.05),罗格列酮能显著下调CsA引起的TGF-β1 mRNA和FN蛋白的高表达。结论:罗格列酮可通过下调CsA引起的TGF-β1和FN的高表达,抑制CsA导致的肾脏成纤维细胞外基质的蓄积。

神经调节蛋白-1与碱性成纤维细胞生长因子对大鼠神经干细胞增殖和分化的影响

目的：探讨神经调节蛋白-1（NRG-1）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对神经干细胞（NSCs）增殖和分化的影响。方法：从新生大鼠大脑组织分离NSCs，进行体外培养，分别用bFGF、NRG-1和NRG-1加bFGF处理，观察各组神经球的形成情况；应用免疫细胞化学法鉴定NSCs及检测分化后神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、2，3-环核苷酸磷酸二酯酶（CNP）的表达。结果：NRG＋bFGF组和bFGF组形成的神经球数量和直径的差别不明显，但都明显多于和大于NRG组和对照组。免疫细胞化学显色结果显示，NRG＋bFGF组、bFGF组中的神经球分化出的NSE、GFAP、CNP阳性细胞数量明显多于NRG组和对照组，尤其是NRG＋bFGF组分化的NSE、CNP阳性细胞的突起较bFGF组更长和增多。结论：NRG-1与bFGF合用能促进NSCs的增殖和分化，促进分化的神经元、少突胶质细胞突起的生长。

甲状旁腺素1-34对新生Wistar大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响

目的观察人甲状旁腺素1-34(hPTH)对原代培养新生Wistar大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖的影响,通过细胞内钙离子([Ca^(2+)]i)的变化,探讨诱导CFs增殖的发生机制。方法培养新生Wistar大鼠心肌成纤维细胞,根据加入不同浓度的hPTH(10^(-10)、10^(-9)、10^(-8)mol/L)分组、同时设维拉帕米(L型钙通道拈抗剂)组。四氮唑盐比色法(MTT)、~3H-TdR掺入法检测细胞增殖；激光共聚焦显微镜(LSCM)测定细胞内[Ca^(2+)]i。结果①CFs增殖活性组间比较,差异有统计学意义(F=9．20,P＜0．01)。随着hPTH的增加,CFs增殖活性呈明显递增性升高,10^(-10)、10^(-9)、10^(-8) mol/L组CFs增殖活性分别为(0．408±0．016)、(0．518±0．019)、(0．778±0．034),与对照组(0．365±0．013)比较,差异有统计学意义(P＜0．01)。②~3H-TdR的掺入量组间比较差异有统计学意义(F=8．82,P＜0．01)；~3H-TdR的掺入量也随着hPTH的升高而呈递增趋势,10^(-10)、10^(-9)、10^(-8) mol/L组分别为(36．79±2．03)、(39．13±1．98)、(45．51±2．64)Bq,与对照组(24．08±1．23)Bq比较,差异有统计学意义(P＜0．01)；维拉帕米组~3H-TdR掺入量(41．68±2．72) Bq,明显低于10^(-8) mol/L组(P＜0．01)。③CFs内[Ca^(2+)]j组间比较,差异有统计学意义(F=9．16,P＜0．01)；10^(-10)、10^(-9)、10^(-8) mol/L组CFs内[Ca^(2+)]i(38．28±4．40、63．78±5．15、78．39±6．87)也明显高于对照组(36．18±3．57)；维拉帕米组CFs内[Ca^(2+)]i为(52．14±4．69),明显低于单独应用hPTH 10^(-8) mol/L组。结论PTH能刺激CFs增殖,增殖活性与PTH浓度有关,L型钙通道开放引起的细胞外钙内流增加为其重要的机制之一。

鸦胆子油对大鼠增生过长子宫内膜碱性成纤维细胞生长因子和血小板反应素-1表达的影响

目的检测不同浓度鸦胆子油在祛除大鼠增生过长子宫内膜中对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血小板反应素-1(TSP-1)表达的影响,明确其间的量效关系,探讨鸦胆子油治疗功能性子宫出血的机制。方法建立大鼠增生过长子宫内膜模型,分为正常对照组(A组),模型对照组(B组)及用药小、中、大剂量组(C、D、E组),通过免疫组化法检测各组中bFGF和TSP-1的表达情况。结果①bFGF:B组与A组比较有显著性差异(P<0.05);C、D、E组分别与B组比较有显著性差异(P均<0.05);C、D、E组间两两比较,均有显著性差异(P均<0.05)。②TSP-1:B组与A组比较无显著性差异(P>0.05);C、D、E组的表达程度较B组有增强趋势,但与B组比较无显著性差异(P均>0.05)。结论鸦胆子油对大鼠增生过长子宫内膜有祛除作用,可使大鼠增生过长子宫内膜中bFGF的表达减弱,对TSP-1表达无影响。

人甲状旁腺素(1-34)对新生Wistar大鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的:研究外源性人甲状旁腺素(1-34)hPTH(1-34)对原代培养新生Wistar鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖及胶原合成的影响。方法:分离、培养Wistar乳鼠心肌成纤维细胞,加入不同浓度的hPTH(1-34)共培养,四氮唑盐比色法(MTT)、3H-TdR掺入法检测细胞增殖;3H-Proline掺入法测定胶原合成。结果:随着一定浓度hPTH(1-34)的升高,CFs MTT法A490值及3H-TdR的掺入量、3H-脯氨酸掺入率呈明显的递增趋势(P<0.01);维拉帕米预处理组与单独应用组10-8mol/L hPTH相比,以上指标均显著降低(P<0.01)。结论:PTH可显著刺激成纤维细胞增殖及胶原合成,L型钙通道开放引起的细胞外钙内流增加为其重要机制之一。

PDTC对高糖培养大鼠肾成纤维细胞中MCP-1表达的影响

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)对高糖培养大鼠肾成纤维细胞(NRK)中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响。方法:将NRK分4组进行体外培养:(1)正常组:5.6mmol/L的葡萄糖;(2)高糖组:30mmol/L葡萄糖;(3)高糖+PDTC1组:30mmo/L葡萄糖+5μmol/LPDTC;(4)高糖+PDTC2组:30mmo/L葡萄糖+10μmol/LPDTC,分别于培养24h、48h取各组NRK采用RT-PCR检测其MCP-1mRNA表达水平,采用WesternBlot检测MCP-1蛋白表达水平。结果:与正常组相比,高糖组MCP-1mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),不同浓度PDTC干预后,MCP-1mRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05),且随PDTC浓度增大,下降更明显。结论:高糖可使NRK中MCP-1表达增高,PDTC能抑制NRK中MCP-1表达。

^(238)Puα粒子辐射体外诱发大鼠肺成纤维细胞(WAL-F_1)恶性转化

本文报告了（233）ρμα粒子辐射体外诱发成年Wistar大鼠肺成纤维细胞（WAL-F1）恶性的特性。实验结果表明,在0.01～1.50Gy剂量范围,α粒子照射的WAL-F1细胞的剂量一存活曲线符合单次击中单靶模型,S=e0-D/D,D0=0.172Gy,没有肩峰（D0）。（238）Puα粒子照射后,WAL-F1