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半乳糖配体介导大鼠白介素10基因在大鼠肝脏内的靶向表达
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作者 黄月红 陈运新 +3 位作者 郑伟达 张莉娟 陈治新 王小众 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第1期32-35,共4页
目的 探讨大鼠白介素10(rIL-10)基因是否可通过半乳糖配体介导的脂质体转染法在大鼠肝脏内靶向表达。方法将已构建好的rIL-10基因真核表达质粒与半乳糖配体转染试剂按jetPEI.Gal/DNA(N/P=10)比例混合,通过尾静脉注射转移至大鼠... 目的 探讨大鼠白介素10(rIL-10)基因是否可通过半乳糖配体介导的脂质体转染法在大鼠肝脏内靶向表达。方法将已构建好的rIL-10基因真核表达质粒与半乳糖配体转染试剂按jetPEI.Gal/DNA(N/P=10)比例混合,通过尾静脉注射转移至大鼠体内。RT—PCR法和ELISA法检测rIL-10基因转移至体内0h、24h、7d和16d后大鼠肝、肾、脾和肺组织及血清中rIL-10的表达情况。结果rIL-10基因转移前大鼠肝、肾、脾和肺组织末扩增出明显rIL-10mRNA表达,转移7d后rIL-10表达主要分布在肝组织。肝组织中rIL-10mRNA表达在基因转移24h和7d时显著升高。血清中的rIL-10浓度在转移后24h和7d浓度分别为(107.92±12.26)pg/ml和(33.2±13.15)pg/ml。结论rIL-10基因通过半乳糖配体介导的脂质体转染法可有效的转移至大鼠体内,并可在肝脏靶向表达一周左右时间。 展开更多
关键词 大鼠白介素10 基因转移 配体介导脂质体转染 靶向表达
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肝脏靶向表达大鼠白介素-10基因对猪血清诱导的大鼠肝纤维化的抑制 被引量:6
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作者 黄月红 陈运新 +3 位作者 郑伟达 张莉娟 陈治新 王小众 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第13期1353-1357,共5页
目的探讨肝脏靶向表达rIL-10基因对猪血清诱导的大鼠肝纤维化的抑制作用。方法 rIL-10基因通过尾静脉快速大容量注射法转移至大鼠体内,RT-PCR法检测大鼠肝、肾、脾和肺组织rIL-10 mRNA的表达及S-P免疫组化法检测rIL-10蛋白在肝脏中表达... 目的探讨肝脏靶向表达rIL-10基因对猪血清诱导的大鼠肝纤维化的抑制作用。方法 rIL-10基因通过尾静脉快速大容量注射法转移至大鼠体内,RT-PCR法检测大鼠肝、肾、脾和肺组织rIL-10 mRNA的表达及S-P免疫组化法检测rIL-10蛋白在肝脏中表达。30只体质量100~120 g清洁级雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组(n=6)、纤维化模型对照组(n=8)、rIL-10基因干预组(n=8)和空质粒对照组(n=8)。正常对照组与其余3组大鼠腹腔分别注射生理盐水和猪血清,0.5 ml/只,每周2次。第5周开始造模同时,rIL-10基因干预组和空质粒对照组大鼠分别从尾静脉注射pcDNA3-rIL-10和pcDNA3空质粒,每周1次。第8周末处死全部大鼠收集组织和血清备用。HE、天狼星红染色分别检测各组肝组织病理形态学和Ⅰ、Ⅲ胶原的改变,生化检测血清ALT和AST含量。结果 RT-PCR和免疫组化证实rIL-10基因经尾静脉快速大容量注射转染到大鼠体内后主要在肝组织中转录及表达;纤维化模型和空质粒对照组:HE染色显示大鼠肝细胞脂肪变性,炎性细胞浸润,大量胶原沉积形成粗细不等的纤维隔,部分假小叶形成;天狼星红染色显示肝组织中大量Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维沉积;血清中ALT和AST表达水平较正常对照组明显升高(P<0.01)。与对照组比较,rIL-10基因干预组大鼠HE染色显示肝细胞变性坏死程度减轻、炎细胞的浸润减少,胶原沉积明显减少,天狼星红染色显示Ⅰ、Ⅲ型胶沉积面积显著下降(P<0.01),血清中ALT和AST表达水平显著降低(P<0.01)。结论 尾静脉快速大容量注射法可使rIL-10基因在肝组织靶向表达,靶向表达的rIL-10有效抑制猪血清诱导的大鼠肝纤维化形成。 展开更多
关键词 大鼠白介素-10 裸质粒DNA 尾静脉注射 基因干预 肝纤维化
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rIL-10基因干预对肝纤维化大鼠肝组织中胶原、MMP13及TIMP1表达的影响 被引量:2
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作者 黄月红 陈运新 +2 位作者 张莉娟 陈治新 王小众 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期613-617,共5页
目的:观察胶原、基质金属蛋白酶13(Matrix metalloproteinase 13,MMP13)及其抑制物基质金属蛋白酶抑制物-1(Tissue inhibitor of metalloproteinase 1,TIMP1)在猪血清诱导的肝纤维化大鼠肝组织中的表达及大鼠白介素10(rat interleukin-1... 目的:观察胶原、基质金属蛋白酶13(Matrix metalloproteinase 13,MMP13)及其抑制物基质金属蛋白酶抑制物-1(Tissue inhibitor of metalloproteinase 1,TIMP1)在猪血清诱导的肝纤维化大鼠肝组织中的表达及大鼠白介素10(rat interleukin-10,rIL-10)基因干预的影响,探讨rIL-10基因抗肝纤维化的作用机制。方法:30只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组(C组)和纤维化模型组。C组每周腹腔注射2次生理盐水,每次0.5 ml,共8周;纤维化模型组每周腹腔注射2次猪血清,每次0.5 ml,共8周。至造模第5周开始模型组随机分为纤维化组(M组),rIL-10基因干预组(I组)及空质粒对照组(P组)。C组和M组大鼠尾静脉注射林格氏液作为试剂对照,I组大鼠尾静脉注射rIL-10质粒pcDNA3-rIL-10,P组大鼠尾静脉注射pcDNA3空质粒,每周1次。于第8周末处死所有大鼠。天狼猩红染色检测各实验组大鼠肝组织胶原沉积情况,S-P免疫组化检测各组大鼠肝脏MMP13及TIMP1表达的情况。结果:天狼猩红染色显示:与C组比较,猪血清诱导的肝纤维化模型M组及空质粒对照P组大鼠肝组织中胶原沉积面积显著增多(P<0.01);与M组和P组比较,rIL-10基因干预I组大鼠肝组织中胶原的沉积面积显著减少(P<0.01);免疫组织化学染色结果显示:与C组比较,猪血清诱导的肝纤维化模型M组及空质粒对照P组大鼠肝组织中MMP13及TIMP1表达明显增强(P<0.01),I组纤维化大鼠肝组织中MMP13表达上调而TIMP1表达显著减少(P<0.01),与M组和P组比较,I组纤维化大鼠肝组织中MMP13及TIMP1表达显著减少(P<0.01)。结论:rIL-10基因抑制肝纤维化大鼠肝脏胶原沉积与其抑制基质金属蛋白酶抑制物TIMP1的表达相关。 展开更多
关键词 肝纤维化 大鼠白介素10 基因治疗 基质金属蛋白酶-13 基质金属蛋白酶抑制物-1
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Electroacupuncture on serum interleukin level in rat models of cerebral ischemia-reperfusion injury 被引量:8
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作者 王平 穆艳云 +7 位作者 程洁 沈洁 沈梅红 陈霞 李茜 孙永 龚美蓉 洪珏 《Journal of Acupuncture and Tuina Science》 CSCD 2015年第1期9-14,共6页
Objective: To observe the effect of electroacupuncture (EA) on serum interleukin (IL)-6, IL-8 and IL-10 in rat models of cerebral ischemia-reperfusion, and to discover the mechanism of EA in preventing and treati... Objective: To observe the effect of electroacupuncture (EA) on serum interleukin (IL)-6, IL-8 and IL-10 in rat models of cerebral ischemia-reperfusion, and to discover the mechanism of EA in preventing and treating cerebral ischemia. 〈br〉 Methods:Male Sprague Dawley (SD) rats were randomized into a sham-operation (SO) group, a model control (MC) group, and an EA group, which were sub-grouped into a 6-hour group and a 24-hour group. In the SO group, rats only received vessel separation with filament placed inside without any treatment. In the MC and EA groups, the focal cerebral ischemia-reperfusion model was induced by using modified Longa method with intraluminal filament. The MC group didn’t receive any treatment;the EA group received EA at Baihui (GV 20) and Dazhui (GV 14) with sparse-dense wave for 30 min. The levels of serum IL-6, IL-8 and IL-10 were detected by using Elisa test. 〈br〉 Results: Six hours after ischemia-reperfusion injury, the levels of serum IL-6, IL-8 and IL-10 in the MC group were significantly higher than those in the SO group (P〈0.01, P〈0.05, P〈0.05);the level of serum IL-8 in the EA group was significantly lower than that in the MC group (P〈0.05), while there were no significant differences in comparing IL-6 and IL-10 between the EA group and the MC group. Twenty-four hours after ischemia-reperfusion injury, the levels of serum IL-6 and IL-8 in the EA group were significantly lower than those in the MC group (both P〈0.05), while there were no significant differences in comparing the level of IL-10 among the three groups. 〈br〉 Conclusion:Early intervention by EA can regulate the levels of serum IL-6 and IL-8 in cerebral ischemic injury. 展开更多
关键词 Acupuncture Therapy ELECTROACUPUNCTURE Brain Ischemia Reperfusion Injury INTERLEUKIN-6 INTERLEUKIN-8 Interleukin-lO Rats
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