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TBBPA-DHEE暴露对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤PC12细胞的影响及机制
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作者 曾政嘉 冯伟伟 +5 位作者 丁阳阳 钱显 罗梦娜 茆广华 仰榴青 吴向阳 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2023年第3期225-230,244,共7页
目的:研究四溴双酚A双(2-羟基乙基)醚[tetrabromobisphenol A bis(2-hydroxyetyl)ether,TBBPA-DHEE]对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的影响及潜在的作用机制。方法:将PC12细胞随机分为5组,分别为空白对照组、溶剂对照组(0.05%二... 目的:研究四溴双酚A双(2-羟基乙基)醚[tetrabromobisphenol A bis(2-hydroxyetyl)ether,TBBPA-DHEE]对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的影响及潜在的作用机制。方法:将PC12细胞随机分为5组,分别为空白对照组、溶剂对照组(0.05%二甲基亚砜)、TBBPA-DHEE低剂量组(5μg/mL)、中剂量组(20μg/mL)和高剂量组(35μg/mL),按分组对应处理48 h;通过MTT实验分析TBBPA-DHEE对PC12细胞的半数抑制浓度(IC_(50));采用试剂盒检测PC12细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛和活性氧含量,以及细胞培养液中NO和Ca^(2+)含量;采用ELISA法检测PC12胞内电压门控钙离子通道(voltage-gated calcium channel,VGCC)含量;采用蛋白质免疫印迹法测定钙离子信号通路相关蛋白表达。结果:TBBPA-DHEE(≥20μg/mL)暴露显著抑制PC12细胞活力,半数抑制浓度为33.4μg/mL;与对照组相比,5、20和35μg/mL TBBPA-DHEE组PC12细胞SOD活力、丙二醛及活性氧含量显著升高(P<0.05),细胞培养液中NO和Ca^(2+)含量显著增加(P<0.01或P<0.05),VGCC含量显著降低(P<0.01);5μg/mL TBBPA-DHEE组钙离子信号通路中p-CaMKⅡ、p-ERK1/2和p-CREB蛋白相对表达水平显著降低(P<0.01),20和35μg/mL TBBPA-DHEE组CaM、MKP-1、p-CaMKⅡ、p-ERK1/2和p-CREB蛋白相对表达水平显著降低(P<0.01)。结论:TBBPA-DHEE暴露可显著抑制PC12细胞活力并导致细胞氧化损伤,其可能通过下调VGCC表达,影响细胞钙离子稳态,进而影响钙离子信号通路相关蛋白的表达,从而产生神经毒性。 展开更多
关键词 四溴双酚A双(2-羟基乙基)醚 大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞细胞 电压门控钙离子通道 氧化应激 神经毒性
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槲皮素对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的诱导分化作用
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作者 张俊 牛朝诗 +3 位作者 韩暄 梅加明 汤深凤 李静 《中国微侵袭神经外科杂志》 CAS 北大核心 2011年第4期180-183,共4页
目的探讨槲皮素对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的诱导分化作用。方法 MTT法检测神经生长因子(NGF)、不同浓度槲皮素(5、12.5、25、50μmol/L)对PC12细胞增殖活性的影响。分别以NGF、不同浓度的槲皮素(5、12.5、25μmol/L)诱导PC12细胞... 目的探讨槲皮素对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的诱导分化作用。方法 MTT法检测神经生长因子(NGF)、不同浓度槲皮素(5、12.5、25、50μmol/L)对PC12细胞增殖活性的影响。分别以NGF、不同浓度的槲皮素(5、12.5、25μmol/L)诱导PC12细胞分化,以PBS作为对照组,诱导3 d后,显微镜下观察并记录PC12细胞分化情况,统计分析细胞分化率(轴索长度≥细胞直径的细胞百分数)、具有轴索的细胞数、细胞平均轴索数、梭形细胞比例等细胞分化的形态学参数。结果 MTT检测发现:50μmol/L槲皮素可明显抑制PC12细胞增殖(P<0.05)。与对照组比较,NGF组、槲皮素组(5、12.5、25μmol/L)的细胞均表现出显著分化特征(均P<0.05)。不同浓度槲皮素组(5、12.5、25μmol/L)诱导PC12细胞分化能力没有明显统计学差异。结论槲皮素可诱导PC12细胞分化,但没有明显剂量依赖性。 展开更多
关键词 槲皮素 肾上腺嗜铬细胞 大鼠 分化 神经生长因子
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DKK1基因过表达慢病毒载体构建及其在大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC12中的表达
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作者 李慧华 仝书严 +2 位作者 陈锐 张才溢 耿德勤 《山东医药》 CAS 2018年第5期17-20,共4页
目的构建DKK1基因过表达慢病毒载体,并探讨其是否能在大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC12中高效、稳定表达。方法 PCR法扩增DKK1基因序列,将其转入质粒并整合到载体上,构建GV358-DKK1慢病毒表达载体;将构建成功的目的质粒和辅助包装质粒共转... 目的构建DKK1基因过表达慢病毒载体,并探讨其是否能在大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC12中高效、稳定表达。方法 PCR法扩增DKK1基因序列,将其转入质粒并整合到载体上,构建GV358-DKK1慢病毒表达载体;将构建成功的目的质粒和辅助包装质粒共转染293T细胞对慢病毒进行包装,荧光显微镜观察基因在293T细胞中的表达,用病毒梯度稀释法测定病毒滴度。将培养好的PC12细胞随机分为三组,空载体阴性对照组、PC12-DKK1组分别用制备的空载体慢病毒及GV358-DKK1颗粒进行感染,空白对照组常规培养。用qRT-PCR和Western blotting法分别检测PC12细胞中DKK1 mRNA与蛋白的相对表达量。结果限制性内切酶鉴定及测序结果提示GV358-DKK1慢病毒表达载体构建成功,转染293T细胞获得高滴度的病毒。PC12-DKK1组DKK1 mRNA及蛋白相对表达量均较空载体组、空白对照组高(P均<0.05)。结论 DKK1基因过表达慢病毒载体构建成功,且其可在PC12细胞中稳定表达。 展开更多
关键词 肾上腺嗜铬细胞 DKK1基因 pc12细胞
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大黄酚对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤分化株细胞缺氧损伤的保护作用 被引量:3
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作者 荔志云 张明 +5 位作者 季玮 周杰 田立桩 赵红斌 孙建军 李长栋 《中国脑血管病杂志》 CAS 2012年第8期418-422,427,共6页
目的观察大黄酚对缺氧引起的大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤分化株(PC12)细胞损伤的保护作用。方法培养PC12细胞,采用自制的密闭三气培养箱建立缺氧所致的PC12细胞损伤模型,根据不同条件,分为对照组、模型组、大黄酚组(包括1μg/ml组和5μg/m... 目的观察大黄酚对缺氧引起的大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤分化株(PC12)细胞损伤的保护作用。方法培养PC12细胞,采用自制的密闭三气培养箱建立缺氧所致的PC12细胞损伤模型,根据不同条件,分为对照组、模型组、大黄酚组(包括1μg/ml组和5μg/ml组)。于缺氧处理前及处理后1、2、6、12、24h,每个时间点取6个复孔。采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测PC12细胞增殖活性,高倍显微镜下观察PC12细胞核形态,测定各组上清液中超氧化物歧化酶(SOD)含量,免疫组化法测定各组线虫抗凋亡基因的人类同源基因表达蛋白(BCL-2)的表达,实时定量PCR测定p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和含半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)mRNA的表达。结果①缺氧处理后12 h,MTT法测定大黄酚1μg/ml组的细胞活力高于模型组;缺氧处理24 h,大黄酚1μg/ml组和5μg/ml组的细胞活力均高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。②从缺氧处理后1 h开始,大黄酚1μg/ml组和5μg/ml组的SOD值高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。③从缺氧后2 h开始,大黄酚1μg/ml组和5μg/ml的BCL-2阳性率均高于模型组。④从缺氧处理2h开始,模型组p38MAPK mRNA表达量高于大黄酚1μg/ml组和5μg/ml组,差异有统计学意义(P<0.05)。从缺氧处理6 h开始,模型组Caspase-3mRNA表达量高于大黄酚1μg/ml组和5μg/ml组,差异有统计学意义(P<0.05)。⑤缺氧处理后12、24 h,模型组细胞的细胞核皱缩、形态不清,内见颗粒样物质形成增多;大黄酚组的细胞核形态较清楚,少见颗粒样物质形成。结论大黄酚可以减轻缺氧所致PC12细胞的损伤,对PC12细胞有保护作用。 展开更多
关键词 缺氧 肾上腺髓质 嗜铬细胞 大黄酚 体外研究 大鼠 神经细胞保护药
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大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞的神经型烟碱受体电流(英文)
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作者 石丽君 何永勇 王春安 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期27-31,共5页
本实验采用膜片箝技术观察了神经生长因子分化 5~ 10 d的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 (PC12 )细胞上烟碱受体离子通道电流。在全细胞膜片箝条件下 ,当箝制电压为 -80 m V时 ,灌流乙酰胆碱 (ACh,3 0μmol/ L )诱发一内向电流 ,快速始发并衰减... 本实验采用膜片箝技术观察了神经生长因子分化 5~ 10 d的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 (PC12 )细胞上烟碱受体离子通道电流。在全细胞膜片箝条件下 ,当箝制电压为 -80 m V时 ,灌流乙酰胆碱 (ACh,3 0μmol/ L )诱发一内向电流 ,快速始发并衰减。此乙酰胆碱诱发电流 (IAch)随膜去极化和超级化而分别减小和增大 ,且被筒箭毒所阻断 ,可见此电流是由烟碱受体引起的。全细胞IACh呈较强的内向整流。其衰减相可被一双指数函数拟合 ,时间常数 (τ)分别在秒和分级。τf 对浓度的依赖性较τs强。 PC12细胞表面含有与交感神经元相似的烟碱受体 ,因此提供了一个交感神经元样的同源细胞株。 展开更多
关键词 膜片箝技术 离子通道电流 大鼠 肾上腺嗜铬细胞细胞 神经型烟碱受体
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科罗索酸对大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞缺氧缺糖损伤的保护作用 被引量:3
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作者 沈驹华 何洁 韦盛 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期932-935,共4页
目的研究科罗索酸(三萜类降血糖药)对PC12细胞缺氧缺糖损伤的保护作用。方法用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)合并缺糖,致PC12细胞缺氧缺糖损伤模型,用MTT法测定细胞活力;用紫外分光光度法测定细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)释放量、细胞内乳酸(LD)... 目的研究科罗索酸(三萜类降血糖药)对PC12细胞缺氧缺糖损伤的保护作用。方法用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)合并缺糖,致PC12细胞缺氧缺糖损伤模型,用MTT法测定细胞活力;用紫外分光光度法测定细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)释放量、细胞内乳酸(LD)和超微量ATP酶的活力。结果与模型对照组比较,2个浓度(10,1μmol.L-1)科罗索酸可显著升高细胞活力,降低上清液LDH和细胞内LD含量,增强损伤细胞内Na+-K+ATP酶活力(P<0.05,P<0.01)。结论科罗索酸对PC12细胞缺氧缺糖损伤模型有明显的保护作用。 展开更多
关键词 科罗索酸 大鼠嗜铬细胞pc12细胞 缺氧缺糖损伤
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过表达Seipin对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞凋亡的影响
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作者 胡玉梅 任真奎 +3 位作者 郭冬芬 刘颖 吴昌学 禹文峰 《贵州医科大学学报》 CAS 2021年第4期387-391,共5页
目的构建Seipin过表达PC12细胞株,探讨Seipin过表达后PC12细胞的凋亡情况。方法将PC12细胞分为正常组(未经任何处理的PC12细胞)、阴性组(不带Seipin过表达基因的慢病毒感染的PC12细胞株)和过表达组(带Seipin过表达基因的慢病毒感染的PC1... 目的构建Seipin过表达PC12细胞株,探讨Seipin过表达后PC12细胞的凋亡情况。方法将PC12细胞分为正常组(未经任何处理的PC12细胞)、阴性组(不带Seipin过表达基因的慢病毒感染的PC12细胞株)和过表达组(带Seipin过表达基因的慢病毒感染的PC12细胞株);进行相应处理后培养24 h,采用荧光显微镜观察红色荧光基因(慢病毒携带的Seipin基因和空载体都包含了红色荧光基因)在细胞中的表达,采用Real time PCR检测BSCL2 mRNA表达水平,Western blot检测凋亡相关蛋白BCL2-Associated X蛋白质(Bax)的表达水平;TUNEL染色观察细胞内断裂DNA情况。结果正常组未观察到红色荧光,阴性组和过表达组均出现红色荧光,感染效率>80%,提示成功构建Seipin过表达的PC12细胞株;Real time PCR结果显示,过表达组BSCL2 mRNA水平相较正常组和阴性组升高,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,过表达组Seipin蛋白表达水平高于正常组和阴性组、凋亡相关蛋白Bax低于正常组和阴性组,差异有统计学意义(P<0.01),TUNEL染色观察到过表达组细胞核荧光强度弱于正常组和阴性组。结论Seipin可能对PC12细胞有保护作用。 展开更多
关键词 大鼠肾上腺嗜铬细胞细胞 慢病毒感染 细胞凋亡 Seipin TUNEL
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微囊化人肾上腺嗜铬细胞瘤细胞在人工脑脊液中的生长和分泌特征 被引量:1
8
作者 栗晓 张新胜 +4 位作者 罗海杰 栾烁 万青 伍少玲 马超 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第38期6114-6120,共7页
背景:微囊化细胞是目前常用的免疫隔离工具,可以解决细胞蛛网膜下腔移植存在的免疫排斥问题,然而微囊化对人嗜铬细胞瘤细胞分泌功能的影响尚不明确。目的:观察微囊化的人嗜铬细胞瘤细胞在人工脑脊液中的生长及分泌功能。方法:取手术切... 背景:微囊化细胞是目前常用的免疫隔离工具,可以解决细胞蛛网膜下腔移植存在的免疫排斥问题,然而微囊化对人嗜铬细胞瘤细胞分泌功能的影响尚不明确。目的:观察微囊化的人嗜铬细胞瘤细胞在人工脑脊液中的生长及分泌功能。方法:取手术切除的人嗜铬细胞瘤组织,采用连续分次胶原酶消化法分离人嗜铬细胞瘤细胞,并用人工脑脊液进行原代细胞培养。用海藻酸盐-聚赖氨酸-海藻酸盐微囊包裹原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞,用倒置相差显微镜观察人工脑脊液中的微囊化和非微囊化的人嗜铬细胞瘤细胞的形态;用CCK-8试剂盒测定人嗜铬细胞瘤细胞的增殖情况;用Elisa试剂盒检测微囊化和非微囊化的人嗜铬细胞瘤细胞分泌的去甲肾上腺素和甲硫氨酸脑啡肽浓度。结果与结论:微囊化的人嗜铬细胞瘤细胞镜下呈悬浮、聚集生长状态,细胞突起观察不明显。与非微囊化组相比,微囊化人嗜铬细胞瘤细胞增殖较快,甲硫氨酸脑啡肽和去甲肾上腺素的分泌量较多。但不同病例来源的细胞,甲硫氨酸脑啡肽和去甲肾上腺素的分泌量差异较大。提示微囊化的人嗜铬细胞瘤细胞在人工脑脊液中具有良好的生长和分泌功能,并且不同病例来源的人嗜铬细胞瘤细胞可以相对稳定地分泌甲硫氨酸脑啡肽和去甲肾上腺素。 展开更多
关键词 pc12细胞 脑啡肽 甲硫氨酸 去甲肾上腺 生物材料 材料相容性 嗜铬细胞细胞 原代培养 人工脑脊液 微胶囊 微囊化细胞 免疫隔离 甲硫氨酸脑啡肽 国家自然科学基金
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海藻来源短肽对人原发性肝癌细胞增殖和大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞分化的影响 被引量:1
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作者 杨怀玉 吴文惠 +1 位作者 周培根 包斌 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2009年第B05期68-73,共6页
本文研究了从微劳马尾藻中提取的含氮化合物,检测其对肿瘤细胞的作用。采用阳离子交换树脂分离纯化微劳马尾藻的水浸提物,分析化合物的理化特性,检测该化合物对人原发性肝癌SMMC7721细胞株和大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC12细胞株的活... 本文研究了从微劳马尾藻中提取的含氮化合物,检测其对肿瘤细胞的作用。采用阳离子交换树脂分离纯化微劳马尾藻的水浸提物,分析化合物的理化特性,检测该化合物对人原发性肝癌SMMC7721细胞株和大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC12细胞株的活性作用。发现提纯的化合物物质B的氨基酸组成与其它来源多肽的氨基酸组成有显著不同;同时发现物质B对SMMC7721肿瘤细胞有加快细胞生长速度的作用,同时缩短细胞的凋亡周期;物质B对PC12细胞有类似于神经生长因子NGF作用的明显效果,这种效果与浓度有关,并且和NGF无协同效应。 展开更多
关键词 神经生长因子 大鼠肾上腺嗜铬细胞细胞 微劳马尾藻 神经细胞分化
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靶向HSP90抑制剂——VER-52296在嗜铬细胞瘤细胞系PC12中的作用及其机制
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作者 徐飞飞 林登强 +6 位作者 孟立 蒋文 徐云泽 廉建坡 汪成合 何竑超 祝宇 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2018年第2期102-106,共5页
目的体外检测热休克蛋白90(HSP90)抑制剂VER-52296对PC12细胞的迁移侵袭、细胞周期及凋亡等的影响,并探讨可能的分子机制。方法应用CCK8实验观察VER-52296对PC12细胞的生长抑制作用;应用流式细胞技术观察不同浓度VER-52296处理后细胞周... 目的体外检测热休克蛋白90(HSP90)抑制剂VER-52296对PC12细胞的迁移侵袭、细胞周期及凋亡等的影响,并探讨可能的分子机制。方法应用CCK8实验观察VER-52296对PC12细胞的生长抑制作用;应用流式细胞技术观察不同浓度VER-52296处理后细胞周期与细胞凋亡的改变;Western blot检测VER-52296对PI3K/AKT和MEK/ERK信号通路的影响。结果VER-52296呈时间、剂量依赖性抑制PC12细胞增殖,48h半数抑制浓度(IC50)为75nmol/L,72hIC50为30nmol/L;VER-52296有效阻滞细胞周期于G2期;VER-52296能下调PI3K/AKT和MEK/ERK信号通路的磷酸化水平。结论 VER-52296通过下调PI3K/AKT和MEK/ERK信号通路的磷酸化水平,抑制细胞的增殖和迁移侵袭,并诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡,最终发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 嗜铬细胞 pc12细胞 HSP90 VER-52296
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微小RNA-199a-5p调控Klotho表达对体外脑缺血再灌注大鼠氧-葡萄糖剥夺/再灌注诱导的肾上腺嗜铬瘤细胞损伤的保护作用 被引量:1
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作者 王小亚 杜旭辉 何晓刚 《安徽医药》 CAS 2022年第11期2285-2291,共7页
目的探究抑制微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)表达对体外脑缺血再灌注(I/R)损伤大鼠模型氧-葡萄糖剥夺/再灌注(OGD/R)诱导的肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12)损伤的保护作用,并进一步探讨Klotho在该过程中的作用。方法将PC12细胞分为Control组、OG... 目的探究抑制微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)表达对体外脑缺血再灌注(I/R)损伤大鼠模型氧-葡萄糖剥夺/再灌注(OGD/R)诱导的肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12)损伤的保护作用,并进一步探讨Klotho在该过程中的作用。方法将PC12细胞分为Control组、OGD/R组、miR-NC inhibitor组、miR-199a-5p inhibitor组、miR-199a-5p inhibitor+shRNA-pLKO.1组和miR-199a-5p inhibitor+shRNA-Klotho组。RT-qPCR或蛋白质印迹法(Western blotting)确定各组PC12细胞转染效率;胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)和流式细胞术确定各组PC12细胞活力和凋亡率;试剂盒测量各组PC12细胞中活性氧(ROS)释放量、丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组PC12细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和白细胞介素-6(IL-6)水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-199a-5p与Klotho靶向关系。结果在OGD/R诱导的PC12细胞中,miR-199a-5p表达增高,Klotho表达降低;细胞活力降低,凋亡率增高;ROS释放量和MDA含量以及TNF-α、IL-1β、MCP-1和IL-6水平升高,SOD和GSH-Px活性降低(P<0.05)。转染miR-199a-5p抑制物减弱了OGD/R的诱导PC12细胞活力下降和细胞凋亡率增高;削弱了暴露于OGD/R的PC12细胞中ROS释放量和MDA含量以及TNF-α、IL-1β、MCP-1和IL-6水平,并提高了SOD与GSH-Px活性(P<0.05),而miR-199a-5p抑制物对OGD/R诱导PC12细胞的这些作用可被敲低的Klotho逆转(P<0.05)。另外,miR-199a-5p负靶向调控Klotho表达(P<0.05)。结论抑制miR-199a-5p通过靶向Klotho减轻氧化应激和炎症反应来改善OGD/R诱导的PC12细胞损伤。 展开更多
关键词 pc12细胞 再灌注损伤 嗜铬细胞 微小RNA-199a-5p 氧-葡萄糖剥夺/再灌注损伤 氧化应激 炎症反应 KLOTHO
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大鼠神经胶质瘤和嗜铬细胞瘤中P2X受体表达特征的研究 被引量:1
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作者 茹琴 田香 +3 位作者 陈琳 乐凯 马宝苗 李超英 《神经药理学报》 2012年第4期1-7,共7页
目的:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,研究P2X受体在大鼠神经胶质瘤和嗜铬细胞瘤及原代培养皮层神经元和星形胶质细胞上的表达差异。方法:取新生1-2 d SD大鼠大脑皮层,分离纯化神经元和星... 目的:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,研究P2X受体在大鼠神经胶质瘤和嗜铬细胞瘤及原代培养皮层神经元和星形胶质细胞上的表达差异。方法:取新生1-2 d SD大鼠大脑皮层,分离纯化神经元和星形胶质细胞,并采用实时荧光定量PCR技术,比较P2X受体在大鼠胶质瘤C6细胞、大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞、星形胶质细胞和皮层神经元上的表达差异。结果:C6细胞P2X2、P2X3和P2X5表达水平显著高于星形胶质细胞,P2X4、P2X6和P2X7表达水平显著低于星形胶质细胞,PC-12细胞P2X1、P2X2、P2X3和P2X6表达水平显著高于皮层神经元,P2X5和P2X7表达水平则显著低于皮层神经元。此外,还发现P2X2、P2X5和P2X6在C6和PC-12细胞上的表达水平存在显著差异。结论:大鼠胶质瘤和嗜铬细胞瘤细胞表达多种P2X受体,且与原代培养细胞存在表达差异,提示核苷酸介导的信号传递系统可能作为潜在的肿瘤治疗靶点。 展开更多
关键词 P2X受体 大鼠皮层神经元 星形胶质细胞 大鼠胶质 大鼠肾上腺嗜铬细胞
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TGF-α及TNF-α对大鼠和人嗜铬细胞瘤细胞增殖及凋亡的不同作用
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作者 童安莉 曾正陪 +3 位作者 李明 李汉忠 杨堤 孙梅励 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2005年第8期736-741,共6页
目的观察转化生长因子α(TGF-α)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞和原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞增殖及凋亡的不同作用.方法用MTT法观察TGF-α和TNF-α对嗜铬细胞瘤细胞增殖的作用;通过PI染色流式细胞分析、Hochest33... 目的观察转化生长因子α(TGF-α)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞和原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞增殖及凋亡的不同作用.方法用MTT法观察TGF-α和TNF-α对嗜铬细胞瘤细胞增殖的作用;通过PI染色流式细胞分析、Hochest33342染色和细胞基因组DNA电泳等方法检测细胞凋亡. 结果 TGF-α(0.25~100 μg/L)呈浓度依赖方式促进PC12细胞增殖,TNF-α(1~100 μg/L)呈浓度依赖方式抑制PC12细胞增殖;而TGF-α和TNF-α(0.1~100 μg/L)均呈浓度依赖方式刺激人嗜铬细胞瘤细胞增殖.高浓度(100 μg/L)的TGF-α和TNF-α分别抑制或刺激PC12细胞凋亡,但均对人嗜铬细胞瘤细胞凋亡无明显影响.结论 TGF-α及TNF-α均能影响人和大鼠嗜铬细胞瘤细胞的增殖及凋亡,但对不同来源的嗜铬细胞瘤细胞的作用不同. 展开更多
关键词 TGF-Α TNF-Α pc12细胞 嗜铬细胞细胞 增殖 凋亡
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17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素对大鼠嗜铬细胞瘤细胞凋亡及血管内皮生长因子表达的影响
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作者 马贵 祝宇 +3 位作者 吴瑜璇 沈周俊 盛佳燕 徐云泽 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1687-1691,共5页
目的探讨热休克蛋白90(HSP90)抑制剂17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素(17-AAG)对大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞生长及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将实验组PC12细胞分成两组:实验一组分别加入不同终浓度(0.005、0.025、0.05、0.... 目的探讨热休克蛋白90(HSP90)抑制剂17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素(17-AAG)对大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞生长及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将实验组PC12细胞分成两组:实验一组分别加入不同终浓度(0.005、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5、1.0、2.0μmol/L)17-AAG培养液;实验二组分别加入150μg/L VEGF(VEGF组)、0.1μmol/L17-AAG(17-AAG组)、0.1μmol/L17-AAG+150μg/L VEGF(17-AAG+VEGF组)培养液。另设DMSO组(阴性对照组)和空白对照组。采用MTT法检测细胞存活率;Wrights-Giemsa染色观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blotting检测细胞中VEGF-165蛋白的表达。结果 17-AAG呈时间、剂量依赖性抑制PC12细胞增殖(P<0.05);24 h半数抑制浓度(IC50)为0.1μmol/L。0.1μmol/L 17-AAG作用于PC12细胞6、12、24、48 h的细胞凋亡率均明显高于空白对照组(P<0.01)。0.1μmol/L 17-AAG作用于PC12细胞6、12、24、48 h,VEGF-165蛋白表达逐渐降低;各时点VEGF-165蛋白表达量与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 HSP90抑制剂17-AAG能抑制PC12细胞增殖,诱导细胞凋亡,抑制VEGF蛋白表达。 展开更多
关键词 pc12细胞 嗜铬细胞 热休克蛋白90 17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素 血管内皮生长因子 细胞凋亡
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miR-183通过PI3K/AKT信号通路促进肾上腺嗜铬细胞瘤生长
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作者 张炜 胡志 +6 位作者 付桥 孙伟 徐律 褚浩 王潇 张景宇 张志超 《山西医科大学学报》 CAS 2022年第8期957-964,共8页
目的探讨miR-183对肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞的影响及其可能的分子机制。方法将PC-12细胞分为对照组、阴性对照(negative control,NC)-mimic组、miR-183-mimic组、NC-inhibitor组和miR-183-inhibitor组。CCK-8法检测细胞增殖能力;流式... 目的探讨miR-183对肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞的影响及其可能的分子机制。方法将PC-12细胞分为对照组、阴性对照(negative control,NC)-mimic组、miR-183-mimic组、NC-inhibitor组和miR-183-inhibitor组。CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期及凋亡水平;划痕实验评估细胞的迁移能力;Transwell小室观察细胞侵袭情况;Western blot检测细胞中周期蛋白E1(Cyclin E1)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、磷酸酰肌醇3激酶蛋白(PI3K)和蛋白激酶B蛋白(AKT)表达水平。结果与NC-mimic组比较,miR-183-mimic组细胞活力显著增强(P<0.01),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),迁移能力增强且侵袭细胞数显著增多(P<0.01),Cyclin E1、PI3K和AKT蛋白表达显著升高(P<0.01),Bax蛋白表达显著降低(P<0.01)。与NC-inhibitor组比较,miR-183-inhibitor组细胞活力显著减弱(P<0.01),发生G1期阻滞,细胞凋亡率显著升高(P<0.01),迁移能力减弱且侵袭细胞数显著减少(P<0.01),Cyclin E1、PI3K和AKT蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01),Bax蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论miR-183在肾上腺嗜铬细胞瘤中发挥癌基因的作用,促进肿瘤细胞的增殖、迁移与侵袭,抑制凋亡,其作用机制与PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 miR-183 肾上腺嗜铬细胞 pc-12细胞 PI3K/AKT信号通路
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PP242对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤的抑制作用
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作者 赵跃广 余志贤 +2 位作者 朱军华 吕海鸥 张小华 《实用肿瘤杂志》 CAS 2015年第6期516-520,共5页
目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)双靶向抑制剂PP242对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤生长和血管生成的抑制作用。方法用大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12接种于裸鼠皮下,建立移植瘤模型,裸鼠成瘤后随机分为3组,... 目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)双靶向抑制剂PP242对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤生长和血管生成的抑制作用。方法用大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12接种于裸鼠皮下,建立移植瘤模型,裸鼠成瘤后随机分为3组,每组10只,分别为PP242组(PP242灌胃10 mg/kg,1天1次)、雷帕霉素组(雷帕霉素灌胃1 mg/kg,1天1次)和对照组(生理盐水灌胃10 m L/kg,1天1次),用药2周,期间测量裸鼠移植瘤的体积变化。给药结束后,切取肿瘤组织采用TUNEL法检测肿瘤组织凋亡情况,Western blot检测肿瘤组织中VEGF的表达。结果给药结束后,PP242组的移植瘤体积为(893.01±31.22)mm3,雷帕霉素组为(1 519.01±32.61)mm3,对照组为(2 341.98±23.07)mm3,3组间差异有统计学意义(P<0.05)。TUNEL结果表明,PP242组的肿瘤组织细胞凋亡率高于雷帕霉素组,雷帕霉素组细胞凋亡率高于对照组(均P<0.05)。Western blot结果表明,PP242组肿瘤组织的VEGF表达低于雷帕霉素组,而雷帕霉素组低于对照组(P<0.05)。结论 m TORC1/C2复合体双靶向抑制剂PP242对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤有明显抑制作用,并可有效降低肿瘤组织中VEGF的表达,其作用强于m TORC1抑制剂雷帕霉素。 展开更多
关键词 嗜铬细胞/药物疗法 pc12细胞 信号传导 西罗莫司/拮抗剂和抑制剂 蛋白激酶类 哺乳动物
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一氧化氮和caspase-3在多巴胺诱导PC12细胞凋亡中的作用 被引量:9
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作者 陈晓春 朱元贵 +2 位作者 王小众 朱理安 黄春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期971-975,共5页
目的 :探讨一氧化氮 (NO)和半胱氨酸蛋白酶 3 (caspase - 3 )在多巴胺诱导PC12细胞凋亡中的可能作用。方法 :流式细胞仪定量检测PC12细胞的凋亡率 ,原位末端标记法 (TUNEL)观察凋亡细胞的形态 ,Griess法测定NO-2 的浓度 ,荧光分光光度... 目的 :探讨一氧化氮 (NO)和半胱氨酸蛋白酶 3 (caspase - 3 )在多巴胺诱导PC12细胞凋亡中的可能作用。方法 :流式细胞仪定量检测PC12细胞的凋亡率 ,原位末端标记法 (TUNEL)观察凋亡细胞的形态 ,Griess法测定NO-2 的浓度 ,荧光分光光度计法检测caspase - 3的活力 ,半定量RT -PCR法检测诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA的表达水平。结果 :多巴胺 ( 0 .15 - 0 60mmol/L)可剂量依赖性地诱导PC12细胞凋亡 ,表现为凋亡细胞的TUNEL染色阳性 ;iNOSmRNA的表达、NO的合成及caspase - 3的活力均有明显的增加 (P <0 .0 1) ;特异性的iNOS抑制剂aminoguanidine和caspase - 3抑制剂Ac -DEVD -CHO通过减少NO的生成和抑制caspase- 3的激活阻断PC12细胞凋亡。结论 :NO的生成可能是多巴胺诱导PC12细胞凋亡的触发因子 ,caspase- 3的激活是其中的效应因子。 展开更多
关键词 多巴胺细胞 凋亡 一氧化氮 CASPASE-3 pc12细胞 嗜铬细胞 大鼠
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锰对PC12细胞生长增殖及对ERK信号转导通路的影响 被引量:3
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作者 李妍 陈景元 +3 位作者 蔡同建 郑刚 杜可军 骆文静 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第12期1134-1136,共3页
目的:研究不同浓度的锰对PC12细胞生长增殖及细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号转导通路的影响.方法:体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞,以100-900μmol/L MnCl2染毒后进行四唑盐比色实验(MTT)筛选锰的细胞毒性剂量,平... 目的:研究不同浓度的锰对PC12细胞生长增殖及细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号转导通路的影响.方法:体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞,以100-900μmol/L MnCl2染毒后进行四唑盐比色实验(MTT)筛选锰的细胞毒性剂量,平板克隆形成实验观察MnCl2对细胞的抑制作用.Western blot检测ERK1/2及磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)表达情况.结果:MTT、平板克隆形成实验结果显示100~900μmol/L MnCl2对细胞的生长增殖有不同程度的抑制作用(P〈0.05).Western blot结果显示随着染锰浓度的增高,PC12细胞p-ERK1/2表达量与对照组相比有显著性差异(P〈0.05).结论:一定浓度的MnCl2对PC12细胞的生长增殖有明显的抑制作用,这一作用可能是通过下调胞内p-ERK1/2表达实现的. 展开更多
关键词 MnCl2 大鼠 嗜铬细胞pc12细胞 P-ERK1/2
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神经节苷脂调节PKC信号通路及其对PC12细胞去血清损伤的保护作用 被引量:2
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作者 宋英 李萌 +2 位作者 刘建仁 喻飒 李继承 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期315-319,共5页
目的研究去血清损伤中PKC信号通路的改变,同时阐明神经节苷脂对大鼠嗜铬细胞瘤细胞株(PC12)细胞去血清损伤的保护作用及其作用机制。方法采用去血清损伤24h作为损伤模型,MTT测定细胞存活率,Hoechst 33258/PI观察细胞损伤后的死亡类型及... 目的研究去血清损伤中PKC信号通路的改变,同时阐明神经节苷脂对大鼠嗜铬细胞瘤细胞株(PC12)细胞去血清损伤的保护作用及其作用机制。方法采用去血清损伤24h作为损伤模型,MTT测定细胞存活率,Hoechst 33258/PI观察细胞损伤后的死亡类型及坏死、凋亡的细胞数;Western blotting检测PCl2细胞在损伤后细胞浆和细胞膜PKC蛋白的变化。结果去血清损伤时间依赖性对PC12细胞有损伤,多数细胞呈凋亡征象,而神经节苷脂对去血清损伤有明显的保护作用;去血清损伤时,PKC信号通路被活化,主要表现为PC12细胞胞浆中的PKC蛋白减少,胞膜上的PKC蛋白逐渐增加,实现PKC蛋白转位;而神经节苷脂可以抑制这种转位,从而起到保护作用。结论神经节苷脂对去血清损伤有保护作用,其保护作用部分是由于神经节苷脂抑制PKC信号通路的活化。 展开更多
关键词 细胞分化 去血清损伤 神经节苷脂 PKC信号通路 免疫印迹法 大鼠嗜铬细胞细胞株(pc12细胞)
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雷帕霉素对β淀粉样蛋白25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用 被引量:2
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作者 林茂 王敏 +3 位作者 刘芳 金小小 王吉博 王春梅 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第8期813-817,共5页
目的雷帕霉素可通过提高自噬水平,改善阿尔茨海默病特征性病理,但其内在机制尚需进一步研究。文中旨在探讨雷帕霉素对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用机制。方法取对数生长期细胞PC12分为5组:对照组(等量无血清D... 目的雷帕霉素可通过提高自噬水平,改善阿尔茨海默病特征性病理,但其内在机制尚需进一步研究。文中旨在探讨雷帕霉素对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用机制。方法取对数生长期细胞PC12分为5组:对照组(等量无血清DMEM)、模型组及10μmol/L雷帕霉素组、40μmol/L雷帕霉素组、160μmol/L雷帕霉素组(分别用加入10、40、160μmol/L的雷帕霉素),除对照组外,其余各组均用20μmol/L的Aβ25-35作用于PC12细胞构建细胞损伤模型。结果 (1)与模型组细胞存活率[(51.47±2.59)%]、凋亡率[(52.22±2.33)%]比较,10、40、160μmol/L雷帕霉素组、对照组细胞存活率[(54.64±2.42)、(64.79±2.91)、(56.50±2.55)、(99.98±0.73)%]明显升高,凋亡率[(45.33±2.83)、(36.89±2.85)、(48.00±2.83)、(3.33±2.45)%]明显降低(P<0.05)。(2)模型组p-PKB表达量为0.33±0.01,p-m TOR表达量为1.97±0.05,p-tau表达量为2.09±0.19;与模型组上述指标比较,10、40、160μmol/L雷帕霉素组、对照组p-PKB表达量(0.37±0.01、0.42±0.01、0.40±0.01、0.44±0.02)明显升高(P<0.05),而p-m TOR表达量(1.64±0.05、0.66±0.04、0.35±0.01、0.62±0.01)和p-tau表达量(2.02±0.15、1.79±0.05、1.86±0.06、1.53±0.04)明显降低(P<0.05)。结论雷帕霉素能提高Aβ25-35损伤的PC12细胞的存活率,降低细胞凋亡率,对Aβ25-35致PC12细胞损伤有保护作用。其机制可能与雷帕霉素抑制p-m TOR,负反馈调节PI3K/PKB/m TOR信号转导通路,减少tau蛋白过度磷酸化有关。 展开更多
关键词 雷帕霉素 Β淀粉样蛋白 大鼠肾上腺嗜铬细胞细胞 蛋白激酶B 磷酸化TAU蛋白
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