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TBBPA-DHEE暴露对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤PC12细胞的影响及机制
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作者 曾政嘉 冯伟伟 +5 位作者 丁阳阳 钱显 罗梦娜 茆广华 仰榴青 吴向阳 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2023年第3期225-230,244,共7页
目的:研究四溴双酚A双(2-羟基乙基)醚[tetrabromobisphenol A bis(2-hydroxyetyl)ether,TBBPA-DHEE]对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的影响及潜在的作用机制。方法:将PC12细胞随机分为5组,分别为空白对照组、溶剂对照组(0.05%二... 目的:研究四溴双酚A双(2-羟基乙基)醚[tetrabromobisphenol A bis(2-hydroxyetyl)ether,TBBPA-DHEE]对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的影响及潜在的作用机制。方法:将PC12细胞随机分为5组,分别为空白对照组、溶剂对照组(0.05%二甲基亚砜)、TBBPA-DHEE低剂量组(5μg/mL)、中剂量组(20μg/mL)和高剂量组(35μg/mL),按分组对应处理48 h;通过MTT实验分析TBBPA-DHEE对PC12细胞的半数抑制浓度(IC_(50));采用试剂盒检测PC12细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛和活性氧含量,以及细胞培养液中NO和Ca^(2+)含量;采用ELISA法检测PC12胞内电压门控钙离子通道(voltage-gated calcium channel,VGCC)含量;采用蛋白质免疫印迹法测定钙离子信号通路相关蛋白表达。结果:TBBPA-DHEE(≥20μg/mL)暴露显著抑制PC12细胞活力,半数抑制浓度为33.4μg/mL;与对照组相比,5、20和35μg/mL TBBPA-DHEE组PC12细胞SOD活力、丙二醛及活性氧含量显著升高(P<0.05),细胞培养液中NO和Ca^(2+)含量显著增加(P<0.01或P<0.05),VGCC含量显著降低(P<0.01);5μg/mL TBBPA-DHEE组钙离子信号通路中p-CaMKⅡ、p-ERK1/2和p-CREB蛋白相对表达水平显著降低(P<0.01),20和35μg/mL TBBPA-DHEE组CaM、MKP-1、p-CaMKⅡ、p-ERK1/2和p-CREB蛋白相对表达水平显著降低(P<0.01)。结论:TBBPA-DHEE暴露可显著抑制PC12细胞活力并导致细胞氧化损伤,其可能通过下调VGCC表达,影响细胞钙离子稳态,进而影响钙离子信号通路相关蛋白的表达,从而产生神经毒性。 展开更多
关键词 四溴双酚A双(2-羟基乙基)醚 大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞细胞 电压门控钙离子通道 氧化应激 神经毒性
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大黄酚对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤分化株细胞缺氧损伤的保护作用 被引量:3
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作者 荔志云 张明 +5 位作者 季玮 周杰 田立桩 赵红斌 孙建军 李长栋 《中国脑血管病杂志》 CAS 2012年第8期418-422,427,共6页
目的观察大黄酚对缺氧引起的大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤分化株(PC12)细胞损伤的保护作用。方法培养PC12细胞,采用自制的密闭三气培养箱建立缺氧所致的PC12细胞损伤模型,根据不同条件,分为对照组、模型组、大黄酚组(包括1μg/ml组和5μg/m... 目的观察大黄酚对缺氧引起的大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤分化株(PC12)细胞损伤的保护作用。方法培养PC12细胞,采用自制的密闭三气培养箱建立缺氧所致的PC12细胞损伤模型,根据不同条件,分为对照组、模型组、大黄酚组(包括1μg/ml组和5μg/ml组)。于缺氧处理前及处理后1、2、6、12、24h,每个时间点取6个复孔。采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测PC12细胞增殖活性,高倍显微镜下观察PC12细胞核形态,测定各组上清液中超氧化物歧化酶(SOD)含量,免疫组化法测定各组线虫抗凋亡基因的人类同源基因表达蛋白(BCL-2)的表达,实时定量PCR测定p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和含半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)mRNA的表达。结果①缺氧处理后12 h,MTT法测定大黄酚1μg/ml组的细胞活力高于模型组;缺氧处理24 h,大黄酚1μg/ml组和5μg/ml组的细胞活力均高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。②从缺氧处理后1 h开始,大黄酚1μg/ml组和5μg/ml组的SOD值高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。③从缺氧后2 h开始,大黄酚1μg/ml组和5μg/ml的BCL-2阳性率均高于模型组。④从缺氧处理2h开始,模型组p38MAPK mRNA表达量高于大黄酚1μg/ml组和5μg/ml组,差异有统计学意义(P<0.05)。从缺氧处理6 h开始,模型组Caspase-3mRNA表达量高于大黄酚1μg/ml组和5μg/ml组,差异有统计学意义(P<0.05)。⑤缺氧处理后12、24 h,模型组细胞的细胞核皱缩、形态不清,内见颗粒样物质形成增多;大黄酚组的细胞核形态较清楚,少见颗粒样物质形成。结论大黄酚可以减轻缺氧所致PC12细胞的损伤,对PC12细胞有保护作用。 展开更多
关键词 缺氧 肾上腺髓质 嗜铬细胞 大黄酚 体外研究 大鼠 神经细胞保护药
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大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞的神经型烟碱受体电流(英文)
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作者 石丽君 何永勇 王春安 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期27-31,共5页
本实验采用膜片箝技术观察了神经生长因子分化 5~ 10 d的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 (PC12 )细胞上烟碱受体离子通道电流。在全细胞膜片箝条件下 ,当箝制电压为 -80 m V时 ,灌流乙酰胆碱 (ACh,3 0μmol/ L )诱发一内向电流 ,快速始发并衰减... 本实验采用膜片箝技术观察了神经生长因子分化 5~ 10 d的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 (PC12 )细胞上烟碱受体离子通道电流。在全细胞膜片箝条件下 ,当箝制电压为 -80 m V时 ,灌流乙酰胆碱 (ACh,3 0μmol/ L )诱发一内向电流 ,快速始发并衰减。此乙酰胆碱诱发电流 (IAch)随膜去极化和超级化而分别减小和增大 ,且被筒箭毒所阻断 ,可见此电流是由烟碱受体引起的。全细胞IACh呈较强的内向整流。其衰减相可被一双指数函数拟合 ,时间常数 (τ)分别在秒和分级。τf 对浓度的依赖性较τs强。 PC12细胞表面含有与交感神经元相似的烟碱受体 ,因此提供了一个交感神经元样的同源细胞株。 展开更多
关键词 膜片箝技术 离子通道电流 大鼠 肾上腺嗜铬细胞细胞 神经型烟碱受体
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过表达Seipin对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞凋亡的影响
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作者 胡玉梅 任真奎 +3 位作者 郭冬芬 刘颖 吴昌学 禹文峰 《贵州医科大学学报》 CAS 2021年第4期387-391,共5页
目的构建Seipin过表达PC12细胞株,探讨Seipin过表达后PC12细胞的凋亡情况。方法将PC12细胞分为正常组(未经任何处理的PC12细胞)、阴性组(不带Seipin过表达基因的慢病毒感染的PC12细胞株)和过表达组(带Seipin过表达基因的慢病毒感染的PC1... 目的构建Seipin过表达PC12细胞株,探讨Seipin过表达后PC12细胞的凋亡情况。方法将PC12细胞分为正常组(未经任何处理的PC12细胞)、阴性组(不带Seipin过表达基因的慢病毒感染的PC12细胞株)和过表达组(带Seipin过表达基因的慢病毒感染的PC12细胞株);进行相应处理后培养24 h,采用荧光显微镜观察红色荧光基因(慢病毒携带的Seipin基因和空载体都包含了红色荧光基因)在细胞中的表达,采用Real time PCR检测BSCL2 mRNA表达水平,Western blot检测凋亡相关蛋白BCL2-Associated X蛋白质(Bax)的表达水平;TUNEL染色观察细胞内断裂DNA情况。结果正常组未观察到红色荧光,阴性组和过表达组均出现红色荧光,感染效率>80%,提示成功构建Seipin过表达的PC12细胞株;Real time PCR结果显示,过表达组BSCL2 mRNA水平相较正常组和阴性组升高,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,过表达组Seipin蛋白表达水平高于正常组和阴性组、凋亡相关蛋白Bax低于正常组和阴性组,差异有统计学意义(P<0.01),TUNEL染色观察到过表达组细胞核荧光强度弱于正常组和阴性组。结论Seipin可能对PC12细胞有保护作用。 展开更多
关键词 大鼠肾上腺嗜铬细胞细胞 慢病毒感染 细胞凋亡 Seipin TUNEL
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槲皮素对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的诱导分化作用
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作者 张俊 牛朝诗 +3 位作者 韩暄 梅加明 汤深凤 李静 《中国微侵袭神经外科杂志》 CAS 北大核心 2011年第4期180-183,共4页
目的探讨槲皮素对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的诱导分化作用。方法 MTT法检测神经生长因子(NGF)、不同浓度槲皮素(5、12.5、25、50μmol/L)对PC12细胞增殖活性的影响。分别以NGF、不同浓度的槲皮素(5、12.5、25μmol/L)诱导PC12细胞... 目的探讨槲皮素对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的诱导分化作用。方法 MTT法检测神经生长因子(NGF)、不同浓度槲皮素(5、12.5、25、50μmol/L)对PC12细胞增殖活性的影响。分别以NGF、不同浓度的槲皮素(5、12.5、25μmol/L)诱导PC12细胞分化,以PBS作为对照组,诱导3 d后,显微镜下观察并记录PC12细胞分化情况,统计分析细胞分化率(轴索长度≥细胞直径的细胞百分数)、具有轴索的细胞数、细胞平均轴索数、梭形细胞比例等细胞分化的形态学参数。结果 MTT检测发现:50μmol/L槲皮素可明显抑制PC12细胞增殖(P<0.05)。与对照组比较,NGF组、槲皮素组(5、12.5、25μmol/L)的细胞均表现出显著分化特征(均P<0.05)。不同浓度槲皮素组(5、12.5、25μmol/L)诱导PC12细胞分化能力没有明显统计学差异。结论槲皮素可诱导PC12细胞分化,但没有明显剂量依赖性。 展开更多
关键词 槲皮素 肾上腺嗜铬细胞 大鼠 分化 神经生长因子
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海藻来源短肽对人原发性肝癌细胞增殖和大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞分化的影响 被引量:1
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作者 杨怀玉 吴文惠 +1 位作者 周培根 包斌 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2009年第B05期68-73,共6页
本文研究了从微劳马尾藻中提取的含氮化合物,检测其对肿瘤细胞的作用。采用阳离子交换树脂分离纯化微劳马尾藻的水浸提物,分析化合物的理化特性,检测该化合物对人原发性肝癌SMMC7721细胞株和大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC12细胞株的活... 本文研究了从微劳马尾藻中提取的含氮化合物,检测其对肿瘤细胞的作用。采用阳离子交换树脂分离纯化微劳马尾藻的水浸提物,分析化合物的理化特性,检测该化合物对人原发性肝癌SMMC7721细胞株和大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC12细胞株的活性作用。发现提纯的化合物物质B的氨基酸组成与其它来源多肽的氨基酸组成有显著不同;同时发现物质B对SMMC7721肿瘤细胞有加快细胞生长速度的作用,同时缩短细胞的凋亡周期;物质B对PC12细胞有类似于神经生长因子NGF作用的明显效果,这种效果与浓度有关,并且和NGF无协同效应。 展开更多
关键词 神经生长因子 大鼠肾上腺嗜铬细胞细胞 微劳马尾藻 神经细胞分化
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神经节苷脂对脂多糖损伤大鼠嗜铬细胞瘤细胞的保护作用 被引量:2
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作者 宋英 许西西 +1 位作者 丁维 茅东升 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期310-313,I0011,共5页
目的:研究内源性神经节苷脂对大鼠嗜铬细胞瘤细胞株(PC12)脂多糖(LPS)损伤后的作用及机制。方法:培养PC12细胞,建立LPS损伤模型,采用MTT法检测不同浓度LPS对PC12细胞存活率的改变、葡萄糖神经酰胺合成酶抑制剂D(D-PDMP)耗竭内源性神经... 目的:研究内源性神经节苷脂对大鼠嗜铬细胞瘤细胞株(PC12)脂多糖(LPS)损伤后的作用及机制。方法:培养PC12细胞,建立LPS损伤模型,采用MTT法检测不同浓度LPS对PC12细胞存活率的改变、葡萄糖神经酰胺合成酶抑制剂D(D-PDMP)耗竭内源性神经节苷脂时LPS对PC12细胞存活率的改变以及添加外源性神经节苷脂GM1后对PC12细胞存活率的保护作用;倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞状态;RT-PCR检测NF-κB的相对表达含量。结果:LPS能导致PC12细胞形态学的改变及存活率下降,且随着LPS浓度的增加细胞存活率逐渐降低;神经节苷脂GM1能明显改善LPS所致的细胞形态学以及存活率的改变;工具药D-PDMP耗竭内源性神经节苷脂后,LPS对PC12细胞的损伤更严重,添加外源性神经节苷脂GM1,细胞形态学及存活率得到明显改善,细胞存活率上升;LPS损伤时细胞内NF-κB含量增加;D-PDMP预先耗竭内源性神经节苷脂时NF-κB含量增加更多;添加外源性神经节苷脂GM1后NF-κB含量降低。结论:内源性神经节苷脂对PC12细胞LPS损伤具有保护作用,可能是通过NF-κB信号通路来发挥作用的。 展开更多
关键词 神经节苷脂GM1 大鼠嗜铬细胞细胞株 脂多糖 NF-ΚB
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大鼠神经胶质瘤和嗜铬细胞瘤中P2X受体表达特征的研究 被引量:1
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作者 茹琴 田香 +3 位作者 陈琳 乐凯 马宝苗 李超英 《神经药理学报》 2012年第4期1-7,共7页
目的:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,研究P2X受体在大鼠神经胶质瘤和嗜铬细胞瘤及原代培养皮层神经元和星形胶质细胞上的表达差异。方法:取新生1-2 d SD大鼠大脑皮层,分离纯化神经元和星... 目的:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,研究P2X受体在大鼠神经胶质瘤和嗜铬细胞瘤及原代培养皮层神经元和星形胶质细胞上的表达差异。方法:取新生1-2 d SD大鼠大脑皮层,分离纯化神经元和星形胶质细胞,并采用实时荧光定量PCR技术,比较P2X受体在大鼠胶质瘤C6细胞、大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞、星形胶质细胞和皮层神经元上的表达差异。结果:C6细胞P2X2、P2X3和P2X5表达水平显著高于星形胶质细胞,P2X4、P2X6和P2X7表达水平显著低于星形胶质细胞,PC-12细胞P2X1、P2X2、P2X3和P2X6表达水平显著高于皮层神经元,P2X5和P2X7表达水平则显著低于皮层神经元。此外,还发现P2X2、P2X5和P2X6在C6和PC-12细胞上的表达水平存在显著差异。结论:大鼠胶质瘤和嗜铬细胞瘤细胞表达多种P2X受体,且与原代培养细胞存在表达差异,提示核苷酸介导的信号传递系统可能作为潜在的肿瘤治疗靶点。 展开更多
关键词 P2X受体 大鼠皮层神经元 星形胶质细胞 大鼠胶质 大鼠肾上腺嗜铬细胞
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钩藤碱调控微小RNA-181a抑制甲基苯丙胺大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞成瘾的研究 被引量:5
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作者 江明金 王珠 +2 位作者 吕燕妮 胡建兰 胡锦芳 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第17期2055-2059,共5页
目的 探讨钩藤碱对甲基苯丙胺成瘾大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞模型中微小RNA-181a(miR-181a)表达的影响。方法 将细胞分为9组:正常组、模型组、对照组、实验组、antagomiR negative control组((1)组)、miR-181a antagomiR组((2)组)... 目的 探讨钩藤碱对甲基苯丙胺成瘾大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞模型中微小RNA-181a(miR-181a)表达的影响。方法 将细胞分为9组:正常组、模型组、对照组、实验组、antagomiR negative control组((1)组)、miR-181a antagomiR组((2)组)、antagomiR negative control+甲基苯丙胺组((3)组)、miR-181a antagomiR+甲基苯丙胺组((4)组)和miR-181a antagomiR+钩藤碱+甲基苯丙胺组((5)组)。用实时荧光聚合酶链反应检测miR-181a的表达水平,用Western blot法检测A型γ-氨基丁酸受体α1亚基(GABRA1)蛋白的表达水平。结果 正常组、模型组、对照组、实验组、(1)组、(2)组、(3)组、(4)组和(5)组的miR-181a相对表达量分别为1.00±0.00,2.39±0.26,1.02±0.12,1.07±0.15,1.00±0.00,0.32±0.04,2.30±0.25,1.68±0.20和1.45±0.17;正常组、模型组、对照组、实验组、(1)组、(3)组、(4)组和(5)组的GABRA1蛋白相对表达量分别为1.00±0.00,0.54±0.06,0.98±0.12,0.91±0.12,1.00±0.00,0.53±0.06,0.88±0.09和0.92±0.11。与正常组相比,模型组的miR-181a表达升高、GABRA1蛋白表达降低,差异均有统计学意义(均P<0.01);与模型组相比,实验组的miR-181a表达降低、GABRA1蛋白表达升高,差异均有统计学意义(均P<0.01);与(3)组相比,(4)组的miR-181a表达降低、GABRA1蛋白表达升高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 钩藤碱可能通过调控miR-181a/GABRA1轴抑制甲基苯丙胺PC12细胞成瘾。 展开更多
关键词 甲基苯丙胺 微小RNA-181a 钩藤碱 大鼠肾上腺嗜铬细胞细胞 成瘾 A型γ-氨基丁酸受体α1亚基
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无肋马尾藻多肽的制备及其促进大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)分化特性的研究
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作者 陈志华 吴文惠 +2 位作者 王幸 张洁 包斌 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2011年第1期19-24,共6页
目的从无肋马尾藻中提取分离一种生物活性多肽(SFPP),分析其理化特性及对大鼠肾上腺嗜鉻细胞瘤PC12细胞分化的促进作用。方法采用葡聚糖凝胶层析分离和透析脱盐纯化无肋马尾藻的水浸提物,应用Tricine-SDS-PAGE电泳和差示扫描量热法(DSC... 目的从无肋马尾藻中提取分离一种生物活性多肽(SFPP),分析其理化特性及对大鼠肾上腺嗜鉻细胞瘤PC12细胞分化的促进作用。方法采用葡聚糖凝胶层析分离和透析脱盐纯化无肋马尾藻的水浸提物,应用Tricine-SDS-PAGE电泳和差示扫描量热法(DSC)分析SFPP的分子量和热变性温度,检测其对PC12细胞分化的促进作用。结果与结论提纯的SFPP分子量为17.0kD,热变性温度是51.4℃;SFPP对PC12细胞有类似神经生长因子(NGF)作用,这种效果与浓度有关,并且和NGF存在协同效用。 展开更多
关键词 无肋马尾藻多肽 葡聚糖凝胶层析 大鼠肾上腺嗜鉻细胞细胞 神经生长因子
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肾上腺肿瘤
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 1999年第8期148-149,共2页
9930196 柯兴氏综合征或者原发性醛固酮增多症病例发现的复数肾上腺腺瘤的内分泌活性[日]/小岛元子//日内分泌志.—1997,73(2).—220 冀医情9930197 术前诊断的嗜铬细胞合并醛固酮产生性肿瘤1例[日]/三宅育代//日内分泌志.—1997,73(2).... 9930196 柯兴氏综合征或者原发性醛固酮增多症病例发现的复数肾上腺腺瘤的内分泌活性[日]/小岛元子//日内分泌志.—1997,73(2).—220 冀医情9930197 术前诊断的嗜铬细胞合并醛固酮产生性肿瘤1例[日]/三宅育代//日内分泌志.—1997,73(2).—220 冀医情9930198 左侧肾上腺产生的醛固酮腺瘤[德,英摘]/Laubach E//Mnch 展开更多
关键词 肾上腺 内分泌 原发性醛固酮增多症 嗜铬细胞细胞 醛固酮腺 肾上腺 柯兴氏综合征 术前诊断 分泌活性 病例发现
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β-淀粉样蛋白对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆株内质网钙库的影响 被引量:1
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作者 张雨桐 任启智 +2 位作者 姜楠 吴艳萍 任锐 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2015年第7期587-591,共5页
目的探讨β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆株(PC-12细胞)内质网钙库的影响。方法用已老化的Aβ25-35[浓度分别为0(对照)、10、15、20μmol/L]对经神经生长因子(NGF)处理过的PC-12细胞染毒24、48、72 h。测定PC-12细胞... 目的探讨β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆株(PC-12细胞)内质网钙库的影响。方法用已老化的Aβ25-35[浓度分别为0(对照)、10、15、20μmol/L]对经神经生长因子(NGF)处理过的PC-12细胞染毒24、48、72 h。测定PC-12细胞内[Ca2+]i及内质网Ca2+-ATP、IP3m RNA的表达水平。结果与对照组比较,15、20μmol/L Aβ25-35染毒各时间点PC-12细胞内[Ca2+]i均较高,差异均有统计学意义(P<0.05);与染毒24 h比较,各剂量Aβ25-35染毒48 h、72 h时PC-12细胞内[Ca2+]i均增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,各剂量Aβ25-35染毒各时间点PC-12细胞内质网IP3m RNA表达水平均较高,差异均有统计学意义(P<0.05);与染毒24 h比较,各剂量Aβ25-35染毒48 h、72 h时PC-12细胞IP3m RNA表达水平均增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,20μmol/L Aβ25-35染毒24、48 h及各剂量Aβ25-35染毒72 h后PC-12细胞内质网Ca2+-ATP mRNA表达水平均较高,差异均有统计学意义(P<0.05);与染毒24 h比较,20μmol/L Aβ25-35染毒48 h及各剂量Aβ25-35染毒72 h时PC-12细胞内质网Ca2+-ATP mRNA表达水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着Aβ25-35染毒剂量的升高和染毒时间的延长,PC-12细胞内[Ca2+]i及内质网Ca2+-ATP、IP3mRNA的表达水平均呈上升趋势。结论 Aβ具有神经毒性,可抑制PC-12细胞的生长,破坏神经细胞内质网及细胞内钙稳态。 展开更多
关键词 Β-淀粉样蛋白 大鼠肾上腺嗜铬细胞克隆株 内质网 游离钙离子 Ca2+-ATP 三磷酸肌醇
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神经生长因子对PC12细胞脂多糖损伤的保护作用及其机制 被引量:3
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作者 茅东升 宋必卫 +2 位作者 朱旭红 吴雅琦 宋英 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期93-97,138,共6页
目的:细胞水平研究神经生长因子(NGF)对大鼠嗜铬细胞瘤细胞株(PC12细胞)脂多糖(LPS)损伤后的保护作用以及核转录因子(NF-κB)的活性影响,探讨药物作用机制。方法:PC12细胞常规培养后,建立LPS损伤模型,随后MTT观察不同浓度的LPS对PC12细... 目的:细胞水平研究神经生长因子(NGF)对大鼠嗜铬细胞瘤细胞株(PC12细胞)脂多糖(LPS)损伤后的保护作用以及核转录因子(NF-κB)的活性影响,探讨药物作用机制。方法:PC12细胞常规培养后,建立LPS损伤模型,随后MTT观察不同浓度的LPS对PC12细胞损伤及NGF对LPS损伤的保护作用,同时用倒置显微镜和荧光显微镜下观察细胞状态,最后RT-PCR检测NF-κB的含量。结果:①PC12细胞LPS损伤有浓度梯度,随着LPS浓度的增加,PC12细胞的存活率不断下降;LPS损伤的同时加入不同浓度NGF,LPS损伤均有明显的改善。②显微镜观察显示PC12细胞形态学上的改变,表明NGF对LPS损伤有保护作用。③RT-PCR结果显示,LPS损伤细胞的NF-κB的相对表达量明显高于正常对照细胞,而药物治疗组的NF-κB表达量则接近于正常细胞。结论:目前,神经生长因子在脑内炎症后的细胞修复作用报道甚少,而本实验研究神经生长因子对PC12细胞LPS损伤起到保护作用,尤其是损伤后再修复作用,且其作用机制可能与NF-κB信号通路的调控有关。 展开更多
关键词 神经生长因子 大鼠嗜铬细胞细胞株 脂多糖 核转录因子 细胞培养
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神经节苷脂调节PKC信号通路及其对PC12细胞去血清损伤的保护作用 被引量:2
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作者 宋英 李萌 +2 位作者 刘建仁 喻飒 李继承 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期315-319,共5页
目的研究去血清损伤中PKC信号通路的改变,同时阐明神经节苷脂对大鼠嗜铬细胞瘤细胞株(PC12)细胞去血清损伤的保护作用及其作用机制。方法采用去血清损伤24h作为损伤模型,MTT测定细胞存活率,Hoechst 33258/PI观察细胞损伤后的死亡类型及... 目的研究去血清损伤中PKC信号通路的改变,同时阐明神经节苷脂对大鼠嗜铬细胞瘤细胞株(PC12)细胞去血清损伤的保护作用及其作用机制。方法采用去血清损伤24h作为损伤模型,MTT测定细胞存活率,Hoechst 33258/PI观察细胞损伤后的死亡类型及坏死、凋亡的细胞数;Western blotting检测PCl2细胞在损伤后细胞浆和细胞膜PKC蛋白的变化。结果去血清损伤时间依赖性对PC12细胞有损伤,多数细胞呈凋亡征象,而神经节苷脂对去血清损伤有明显的保护作用;去血清损伤时,PKC信号通路被活化,主要表现为PC12细胞胞浆中的PKC蛋白减少,胞膜上的PKC蛋白逐渐增加,实现PKC蛋白转位;而神经节苷脂可以抑制这种转位,从而起到保护作用。结论神经节苷脂对去血清损伤有保护作用,其保护作用部分是由于神经节苷脂抑制PKC信号通路的活化。 展开更多
关键词 细胞分化 去血清损伤 神经节苷脂 PKC信号通路 免疫印迹法 大鼠嗜铬细胞细胞株(PC12细胞)
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雷帕霉素对β淀粉样蛋白25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用 被引量:2
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作者 林茂 王敏 +3 位作者 刘芳 金小小 王吉博 王春梅 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第8期813-817,共5页
目的雷帕霉素可通过提高自噬水平,改善阿尔茨海默病特征性病理,但其内在机制尚需进一步研究。文中旨在探讨雷帕霉素对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用机制。方法取对数生长期细胞PC12分为5组:对照组(等量无血清D... 目的雷帕霉素可通过提高自噬水平,改善阿尔茨海默病特征性病理,但其内在机制尚需进一步研究。文中旨在探讨雷帕霉素对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用机制。方法取对数生长期细胞PC12分为5组:对照组(等量无血清DMEM)、模型组及10μmol/L雷帕霉素组、40μmol/L雷帕霉素组、160μmol/L雷帕霉素组(分别用加入10、40、160μmol/L的雷帕霉素),除对照组外,其余各组均用20μmol/L的Aβ25-35作用于PC12细胞构建细胞损伤模型。结果 (1)与模型组细胞存活率[(51.47±2.59)%]、凋亡率[(52.22±2.33)%]比较,10、40、160μmol/L雷帕霉素组、对照组细胞存活率[(54.64±2.42)、(64.79±2.91)、(56.50±2.55)、(99.98±0.73)%]明显升高,凋亡率[(45.33±2.83)、(36.89±2.85)、(48.00±2.83)、(3.33±2.45)%]明显降低(P<0.05)。(2)模型组p-PKB表达量为0.33±0.01,p-m TOR表达量为1.97±0.05,p-tau表达量为2.09±0.19;与模型组上述指标比较,10、40、160μmol/L雷帕霉素组、对照组p-PKB表达量(0.37±0.01、0.42±0.01、0.40±0.01、0.44±0.02)明显升高(P<0.05),而p-m TOR表达量(1.64±0.05、0.66±0.04、0.35±0.01、0.62±0.01)和p-tau表达量(2.02±0.15、1.79±0.05、1.86±0.06、1.53±0.04)明显降低(P<0.05)。结论雷帕霉素能提高Aβ25-35损伤的PC12细胞的存活率,降低细胞凋亡率,对Aβ25-35致PC12细胞损伤有保护作用。其机制可能与雷帕霉素抑制p-m TOR,负反馈调节PI3K/PKB/m TOR信号转导通路,减少tau蛋白过度磷酸化有关。 展开更多
关键词 雷帕霉素 Β淀粉样蛋白 大鼠肾上腺嗜铬细胞细胞 蛋白激酶B 磷酸化TAU蛋白
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依达拉奉减轻毒死蜱诱导的PC12细胞损伤 被引量:2
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作者 宋英 寿丽蒙 陈曼婷 《浙江工业大学学报》 CAS 北大核心 2016年第6期654-659,共6页
验证毒死蜱对神经细胞的损伤作用,并探究依达拉奉对毒死蜱诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制.MTT法摸索毒死蜱最佳损伤浓度以及依达拉奉最佳保护浓度,设立正常空白对照组、毒死蜱损伤模型组和依达拉奉保护毒死蜱损伤组,倒置显微镜下观... 验证毒死蜱对神经细胞的损伤作用,并探究依达拉奉对毒死蜱诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制.MTT法摸索毒死蜱最佳损伤浓度以及依达拉奉最佳保护浓度,设立正常空白对照组、毒死蜱损伤模型组和依达拉奉保护毒死蜱损伤组,倒置显微镜下观察PC12细胞形态,Hocehst33342染色,荧光显微镜下观察各组细胞凋亡情况,western-blot检测各组全细胞Nrf-2蛋白表达变化情况.结果表明:MTT法确定最佳毒死蜱损伤浓度为200μmol/L,依达拉奉最佳保护浓度为25μmol/L;光学显微镜下观察细胞形态,依达拉奉可减轻毒死蜱诱导的PC12细胞损伤;Hocehst33342染色显示毒死蜱可诱导PC12凋亡,依达拉奉减轻了毒死蜱对PC12的损伤;western-blot结果显示依达拉奉组全细胞Nrf-2蛋白表达明增加,多于正常组和毒死蜱损伤组,正常组和毒死蜱组表达量相近.毒死蜱对PC12细胞具有损伤作用,可诱导细胞凋亡;依达拉奉具有减轻毒死蜱对PC12细胞损伤作用的功能,其保护机制可能是通过Nrf-2作用的. 展开更多
关键词 依达拉奉 毒死蜱 大鼠嗜铬细胞细胞株 Nrf-2
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Preso在PC12细胞氧化应激损伤中的作用 被引量:1
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作者 徐小龙 徐浩翔 +1 位作者 杨甜 应奇 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2016年第3期205-208,共4页
目的通过建立大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(PC12)氧化应激损伤模型,研究一类新型结构蛋白脊椎形态发生突触后致密物质95(PSD-95)相关调节因子(Preso)在氧化应激损伤中的作用以及有可能的作用方式。方法建立PC12细胞氧化应激损伤模型... 目的通过建立大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(PC12)氧化应激损伤模型,研究一类新型结构蛋白脊椎形态发生突触后致密物质95(PSD-95)相关调节因子(Preso)在氧化应激损伤中的作用以及有可能的作用方式。方法建立PC12细胞氧化应激损伤模型,通过Western blot法检测损伤后Preso蛋白表达变化;通过干涉Preso蛋白表达,四甲基啖唑蓝(MTT)检测细胞存活率及乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞损伤程度评价Preso在氧化应激损伤中的作用;使用地佐环平(MK-801)阻断离子型谷氨酸受体(NMDAR)激活,然后通过MTT法检测细胞存活率及LDH法检测细胞损伤程度,分析Preso在氧化应激损伤中可能起作用的途径。结果氧化应激损伤能够使Preso蛋白表达增高,而干涉Preso蛋白表达能够有效提高氧化应激损伤后细胞存活率,而抑制NMDAR激活会削弱干涉Preso蛋白表达的细胞保护作用。结论 Preso对于氧化应激损伤起到了促进的作用,干涉Preso表达可减轻细胞氧化应激损伤;Preso蛋白很可能通过结合突触后致密物质95进而促进NMDA受体激活,起到加重细胞氧化应激损伤作用。 展开更多
关键词 氧化应激损伤 脊椎形态发生突触后致密物质95相关调节因子 突触后致密物质95 离子型谷氨酸受体受体 大鼠肾上腺髓质嗜铬分化细胞株
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苗药黑骨藤种子幼芽与黑骨藤不同部位对PC12细胞氧化损伤的影响 被引量:4
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作者 党荣敏 龚莉莉 《深圳中西医结合杂志》 2016年第3期16-17,F0003,共3页
目的:研究黑骨藤种子幼芽与黑骨藤不同部位提取物对过氧化氢(H_2O_2)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)氧化损伤的保护作用。方法:使用H_2O_2氧化压力诱导PC12出现氧化损伤,检测黑骨藤种子幼芽、颈、叶乙醇提取物对PC12细胞的保护作用... 目的:研究黑骨藤种子幼芽与黑骨藤不同部位提取物对过氧化氢(H_2O_2)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)氧化损伤的保护作用。方法:使用H_2O_2氧化压力诱导PC12出现氧化损伤,检测黑骨藤种子幼芽、颈、叶乙醇提取物对PC12细胞的保护作用。结果:黑骨藤不同部位对PC12细胞的保护作用存在差异;与模型对照组比,黑骨藤幼芽、叶乙醇提取物能保护PC12细胞免受H_2O_2诱导的氧化损伤;幼芽的半数有效浓度(EC50)大约为34μg/m L,叶的EC50大约为16μg/m L;黑骨藤颈乙醇提取物缺乏保护PC12细胞的作用。结论:黑骨藤叶、幼芽乙醇提取物具有抗氧化损伤作用。黑骨藤叶具有开发的潜质。 展开更多
关键词 黑骨藤 大鼠肾上腺嗜铬细胞 抗氧化
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麦芽酚铝致大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞铁死亡及其机制研究
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作者 李壮 程丽婷 +4 位作者 任敬娟 梁瑞峰 杨守林 余红梅 牛侨 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2020年第2期95-99,共5页
目的探讨麦芽酚铝(aluminum-maltolate)染毒致大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(rat pheochromocytoma cells,PC12cells)铁死亡及其可能机制。方法将分化型PC12细胞分别暴露于含终浓度为0(对照)、50、100、200、400μmol/L麦芽酚铝的DMEM高糖... 目的探讨麦芽酚铝(aluminum-maltolate)染毒致大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(rat pheochromocytoma cells,PC12cells)铁死亡及其可能机制。方法将分化型PC12细胞分别暴露于含终浓度为0(对照)、50、100、200、400μmol/L麦芽酚铝的DMEM高糖培养基中染毒12、24和48 h,采用CCK-8法检测细胞存活率。将分化型PC12细胞分别暴露于含终浓度为0(对照)、50、100、200μmol/L麦芽酚铝的DMEM高糖培养基中染毒12、24和48 h,检测细胞铁离子含量、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力。结果与对照组相比,400μmol/L麦芽酚铝染毒12、24、48 h和200μmol/L麦芽酚铝染毒24、48 h及100μmol/L麦芽酚铝染毒48 h均可使PC12细胞存活率降低,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着麦芽酚铝染毒剂量的升高和染毒时间的延长,PC12细胞的存活率整体均呈下降趋势。与对照组相比,200μmol/L麦芽酚铝染毒12、24、48 h和100μmol/L麦芽酚铝染毒24、48 h及50μmol/L麦芽酚铝染毒48 h均可使PC12细胞线粒体平均膜密度升高,而使线粒体嵴平均面积降低,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着麦芽酚铝染毒剂量的升高和染毒时间的延长,PC12细胞的线粒体平均膜密度呈上升趋势,线粒体嵴平均面积呈下降趋势。与对照组相比,200μmol/L麦芽酚铝染毒12、24、48 h和100μmol/L麦芽酚铝染毒12、48 h及50μmol/L麦芽酚铝染毒12 h均可使PC12细胞铁离子含量升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。各浓度麦芽酚铝染毒不同时间均可使PC12细胞GSH含量和GSH-Px活力降低,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着麦芽酚铝染毒剂量的升高和染毒时间的延长,PC12细胞GSH含量均呈下降趋势,而同一染毒剂量组GSH-Px活力随染毒时间的延长均呈先下降后上升的趋势。结论麦芽酚铝可通过增加PC12细胞铁离子含量,降低细胞GSH含量、GSH-Px活力,损伤线粒体结构而最终导致铁死亡。 展开更多
关键词 麦芽酚铝 大鼠肾上腺嗜铬细胞细胞 铁死亡 氧化损伤 铁离子
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雌激素减轻β-淀粉样蛋白所致PC12细胞毒活性的机制 被引量:2
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作者 罗蔓 谢瑞满 《中国老年保健医学》 2006年第3期33-36,共4页
目的观察17β雌激素对β淀粉样蛋白25~35片段(Aβ25~35)所致PC12细胞毒活性影响的可能机制。方法用逆转录一聚合酶链反应(RT PCR)技术,观察雌激素对Aβ25~35损伤的PC12细胞的Bcl^2mRNA及Bax mRNA表达的影响。结果用Aβ25~35处理PC12细胞... 目的观察17β雌激素对β淀粉样蛋白25~35片段(Aβ25~35)所致PC12细胞毒活性影响的可能机制。方法用逆转录一聚合酶链反应(RT PCR)技术,观察雌激素对Aβ25~35损伤的PC12细胞的Bcl^2mRNA及Bax mRNA表达的影响。结果用Aβ25~35处理PC12细胞24h,与对照组相比,Bcl^2mRNA的表达水平降低,Bax mRNA的表达水平升高;而Aβ25~35加17β雌激素引起Bcl^2mRNA的表达水平较单纯Aβ处理组增高,Bax mRNA的表达水平较单纯Aβ处理组降低。结论17β雌激素在Aβ25~35所致PC12细胞毒性的神经保护作用中,其机制是通过上调Bcl^2mRNA的表达与下调Bax mRNA的表达来实现的。 展开更多
关键词 17β-雌激素 大鼠肾上腺嗜铬细胞细胞 凋亡 β-淀粉样蛋白25-35片段
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