甲基强的松龙预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤脊髓的相关分析

目的通过对比分析热休克蛋白(HSP27)表达的变化并探讨甲基强的松龙(MP)在预防脊髓缺血再灌注损伤脊髓中的最佳用药时间。方法 30只SD大鼠,分为甲、乙、丙、丁、戊组,每组6只。甲组暴露腹主动脉,无其他治疗;乙、丙、丁、戊组关闭30 min主动脉造成脊髓缺血再灌注损伤,乙组在损伤前30 min尾静脉注射生理盐水,丙、丁、戊组分别与损伤前30、60、180 min尾静脉注射生理30 mg/kg的MP。甲组于术后、其他组于损伤后180 min行免疫组化染色检测,观察对比各组HSP27的相对含量。结果 HSP27相对含量比较,乙组和戊组比较,差异无统计学意义(P>0.05);丙组和丁组比较,差异无统计学意义(P>0.05);丙组和丁组的HSP27表达强于乙组和戊组,比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论在脊髓缺血再灌注损伤前30 min应用MP,可减轻脊髓缺血再灌注损伤,提升HSP27的表达强度,具有极高的应用价值。

甘草酸二铵对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后NF-κB表达及神经元凋亡影响的研究

目的探讨甘草酸二铵(diammonium glycyrrhizinate,DG)对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后NF-κB的表达及神经元凋亡的影响。方法取健康雄性SD大鼠48只,体重220～270g,随机分为实验组和对照组,每组24只。实验组于缺血开始前10min舌下静脉注射DG(20mg/kg),对照组注射等量生理盐水。夹闭左右肾动脉之间腹主动脉制备脊髓缺血再灌注损伤模型。两组于缺血再灌注3、24、72、168h取腰段脊髓组织,切片,行HE染色、免疫组织化学染色观察及TUNEL法凋亡细胞检测,并进行相关性分析。结果HE染色示对照组缺血再灌注3h时,可见脊髓组织水肿,神经细胞形态基本正常;24h和72h时组织病理改变进一步加重;168h时灰质前角中大量空泡形成,尚残存多个结构清楚的运动神经元。实验组各时间点明显好于对照组。免疫组织化学染色示两组缺血再灌注3h表达NF-κB p65增强,24h达高峰,随后缓慢下降。实验组缺血再灌注各时间点吸光度(A)值分别为0.3060±0.0244、0.3964±0.0227、0.2966±0.0211和0.2679±0.0153;对照组分别为0.3611±0.0177、0.4966±0.0201、0.3563±0.0210和0.3014±0.0181(P<0.05)。DG对各时间点NF-κB p65表达的抑制率分别是15.40%、20.17%、19.28%和11.11%。细胞凋亡检测示两组于缺血再灌注后神经元凋亡表达增强。实验组各时间点A值分别为0.1710±0.0291、0.1755±0.0311、0.1751±0.0279和0.1832±0.0237;对照组分别为0.2368±0.0636、0.2412±0.0426、0.2015±0.0498和0.2501±0.0484(P<0.05)。DG各时间点对神经元凋亡表达的抑制率分别为27.79%、27.23%、13.08%和26.74%。实验组和对照组NF-κB表达和神经元凋亡表达成正相关(r=0.838,P<0.01)。结论脊髓缺血再灌注可导致NF-κB表达及凋亡神经元增多,DG可抑制脊髓神经元NF-κB的表达,减少神经元凋亡。

人参皂苷Rb1通过减轻线粒体损伤对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察人参皂甙Rb1预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后的干预效果,探讨人参皂甙Rb1对抗脊髓缺血再灌注损伤可能的线粒体干预机制。方法构建大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型,随机分为假手术组(n=12)、缺血再灌注损伤组(SCII组,n=12)和人参皂甙Rb1药物组(药物组,n=48),药物组(n=48)又分为10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg、80 mg/kg四个亚组,每组12只,术前30 min及术后每天,腹腔注射相应剂量人参皂甙Rb1。各组于损伤后48 h行大鼠后肢神经功能评分;分别检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;取脊髓组织检测SOD、MDA含量以及细胞色素C氧化酶(COX)活性。结果与SCII组比较,药物组BBB评分升高(P<0.05),血清及脊髓组织SOD含量升高,MDA含量减少,脊髓组织COX活性升高(P<0.05);且呈剂量依赖性,但40 mg/kg与80 mg/kg之间无明显变化。结论人参皂甙Rb1可以通过抑制线粒体损伤,减轻大鼠脊髓缺血再灌注损伤后的氧化应激,且在10~40 mg/kg范围呈剂量依赖性。

黄芪注射液对大鼠脊髓缺血再灌注损伤脊髓ICAM-1和HSP70表达的影响

目的探讨黄芪注射液对脊髓缺血再灌注损伤的保护治疗作用及其机制。方法采用肾下腹主动脉阻断法,建立脊髓缺血再灌注模型。实验动物随机分3组,即空白组(A),模型组(B),黄芪预处理组(C)。空白组阻断腹主动脉30min后开放灌注;黄芪注射液治疗组静脉注射黄芪12 ml/kg 30 min后阻断腹主动脉,阻断腹主动脉30 min后开放再灌注。术后进行神经功能评分,观察脊髓标本的病理改变,免疫组化染色ICAM-1和HSP70的表达。结果神经功能评分治疗组在各时间点明显高于模型组(P<0.05),组织病理学变化各时间点明显好于模型组,ICAM-1免疫阳性血管数较模型组减少,HSP70表达显著增加,且有显著差异(P<0.05)。结论黄芪注射液可显著改善大鼠脊髓缺血再灌注引起的后肢神经功能障碍和组织病理学改变,表明黄芪注射液对大鼠脊髓缺血再灌注损伤有明显的保护作用;黄芪注射液降低大鼠脊髓缺血再灌注后缺血脊髓ICAM-1的表达,显著增加HSP70表达,可能为黄芪注射液保护脊髓缺血再灌注损伤的机制之一。

甘草酸二铵对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后运动神经元Caspase-3表达的影响

目的:观察甘草酸二铵(DG)对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后脊髓前角运动神经元Caspase-3表达的影响。方法:60只大鼠随机分为3组,每组20只。两组采用手术夹闭大鼠左右肾动脉之间的腹主动脉30min致脊髓缺血,然后松开再灌注,其中一组在缺血前10min舌下静脉注射DG20mg/kg(DG干预组),一组仅造成脊髓缺血损伤(损伤组);另一组打开腹腔后即关腹,不进行缺血再灌注(正常对照组)。分别于术后3、24、72、16 8h处死大鼠取腰段脊髓行免疫组化染色,观察脊髓前角Caspase-3光密度变化情况;72、168h处死动物前先采用Behrmann 5点评分法评定大鼠后肢功能。结果:损伤组与干预组72h时后肢功能评分分别为4.2±0.45分、5.8±1.1分;168h时分别为5±0分、6.2±1.3分,两组相同时间比较有显著性差异。Caspase-3表达位于脊髓前角运动神经元胞浆。术后3、24、72、168h,正常对照组前角运动神经元的平均光密度为0.13±0.04、0.15±0.06、0.13±0.06、0.15±0.06,损伤组为0.18±0.04、0.18±0.03、0.20±0.04、0.20±0.05,DG干预组为0.17±0.06、0.15±0.02、0.16±0.04、0.15±0.02,损伤组各时间点与对照比较均有显著性差异,DG干预组在24、72、168h与损伤组比较差异有显著性。结论:DG可下调凋亡信号转导通路中Caspase-3的表达水平,从而抑制脊髓前角神经元凋亡的发生。

姜黄素对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后NF-κB和Hsp70的表达研究

目的研究姜黄素对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后NF-κB和Hsp70的表达,进一步明确其作用机制。方法 72只雄性SD大鼠随机分为姜黄素实验组、缺血模型组和正常对照组,每组24只,前两组经夹闭左右肾动脉之间腹主动脉制作脊髓缺血再灌注损伤模型,对照组不做任何处理。实验组缺血前10 min舌下静脉注射20mg/kg姜黄素;模型组缺血前10min舌下静脉注射同等量生理盐水;对照组经舌下静脉注射等量的生理盐水。再灌注3,12,24,72h不同时间点各取6只大鼠腰段脊髓组织,分别经HE染色、免疫组织化学法和Western blot法检测NF-κB和Hsp70的表达。结果 NF-κB、Hsp70在前两组脊髓组织中的表达均有统计学意义(P<0.05),姜黄素对各时间点脊髓组织中NF-κB表达的抑制率分别是13.12%,15.14%,19.18%和18.02%;同时可诱导Hsp70蛋白的表达,对Hsp70的诱导率分别为10.40%,12.71%,15.95%和13.18%。结论姜黄素对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后可抑制早期炎症反应的发生,同时对脊髓缺血再灌注损伤具有保护作用,调控Hsp70的表达可能是其作用机制之一。

大鼠脊髓缺血再灌注损伤后细胞间黏附分子-1的表达对损伤程度和预后的评估

目的:探讨细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在大鼠脊髓缺血再灌注损伤(I/R)后表达变化及其意义。方法:采用Zinen法建立脊髓缺血再灌注损伤模型。应用半定量RT-PCR方法、免疫组化及免疫荧光激光共聚焦显微镜定性、定量测定脊髓微血管内皮细胞表面ICAM-1mRNA表达变化。脊髓组织髓过氧化物酶(MPO)活性测定用于定量反映浸润到脊髓组织中的多形核白细胞(PMN)数量。结果:正常脊髓微血管内皮细胞表面仅有微量的ICAM-1表达,组织中未见PMN浸润,单纯缺血不引起ICAM-1表达。再灌注后损伤区I-CAM-1表达及PMN的浸润先后发生了改变;再灌注4h,ICAM-1mRNA表达量明显升高,再灌注12h其在单位微血管面积上的荧光强度约比单纯缺血组增加了二分之一,再灌注9～12h,脊髓组织中MPO活性约为单纯缺血组的两倍。提示脊髓损伤后微血管内皮细胞初始ICAM-1表达增加是由再灌注损伤激发,其后延迟递增表达增强,并相伴有PMN向脊髓内浸润,说明ICAM-1参与了脊髓再灌注损伤的炎症病理过程。结论:ICAM-1可作为评判脊髓损伤程度和脊髓I/R后炎症反应程度的监测指标。

短间隔高压氧预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后NFκ-B表达的影响

目的:探讨短间隔高压氧预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后NF-κB表达的影响。方法:80只成年雄性Wistar大鼠,随机分为2组(每组n=40):对照组为常压空气组;HBO组为短间隔高压氧预处理组。采用肾下腹主动脉阻断法造成脊髓缺血再灌注损伤,观察两组再灌注后4 h、12 h、24 h、48 h时的后肢运动神经功能评分;再灌注48 h时取出腰段脊髓组织(L5-7)行石蜡包埋、切片,采用免疫组织化学法检测各组动物脊髓组织中NF-κB表达变化。结果:再灌注4 h、12 h、24 h、48 h时,HBO组神经功能学评分均明显优于对照组(P<0.05)。HBO组各时间点NF-κB阳性表达均明显低于对照组。HBO组和对照组后肢运动神经功能学评分与脊髓组织NF-κB表达呈正相关(r=0.72,0.65,P<0.05)。结论:高压氧预处理对缺血再灌注损伤的脊髓具有保护作用,且其所诱导的脊髓缺血耐受的机制与NF-κB有关。

大鼠脊髓缺血再灌注损伤后炎性细胞因子的变化及其意义

目的:探讨炎性细胞因子在脊髓缺血再灌注损伤中的作用。方法:实验于2004-04/2005-05在解放军第三军医大学附属西南医院神经医学中心完成。健康SD大鼠42只,随机分为对照组(6只)、单纯缺血组(6只)、缺血再灌注组(30只)。2%戊巴比妥钠35mg/kg腹腔注射麻醉后,制成脊髓缺血再灌注损伤模型。用PeriFluxPF3激光多普勒血灌流监测仪直视下监测脊髓血流量。分别取损伤段脊髓标本80～100mg,剥离脊髓组织外膜,冻存备用。同时取心腔血2mL于干燥管中,2000g离心10min,取血清-20℃保存待测,动态测定脊髓组织及血浆中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素8含量变化。缺血再灌注组再灌注1,2,6,12,24h各取6只进行检测。结果:实验大鼠42只均进入结果分析。①脊髓组织肿瘤坏死因子α含量于再灌注1h后即明显高于对照组[(9.11±0.96),(7.87±1.02)μg/g,P<0.05],随再灌注时间的延长,脊髓组织内肿瘤坏死因子α含量逐渐增高。血浆肿瘤坏死因子α含量于再灌注24h后才开始升高[再灌注24h:(2.13±0.24)μg/L,对照组:(1.68±0.28)μg/L,P<0.05]。②脊髓组织白细胞介素1β含量于再灌注6h后明显高于对照组[(3.21±0.28),(2.18±0.33)μg/g,P<0.05],于再灌注24h后仍维持于较高水平。血浆白细胞介素1β含量无明显改变。③再灌注6h后脊髓组织内白细胞介素8含量开始明显增加[(3.24±0.32),(2.50±0.41)μg/g,P<0.05],持续至再灌注24h后仍明显高于对照组。血浆中白细胞介素8含量无明显变化。结论:肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素8相继释放增加并持续至再灌注后24h仍维持较高水平,各因子的血浆变化滞后于脊髓组织变化。炎性细胞因子参与了早期脊髓缺血再灌注损伤的发生展过程。

内质网分子伴侣GRP78在大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的表达变化

目的观察在大鼠脊髓缺血再灌注损伤(SCII)过程中内质网分子伴侣GRP78的表达变化,并探讨其意义。方法健康成年Wistar大鼠55只,随机分为两组:(1)脊髓压迫缺血再灌注组50只,每个时间点10只,采用自制压迫装置制备脊髓压迫缺血再灌注模型;(2)假手术对照组5只,只做全椎板切除不做脊髓压迫。用免疫组化、West-ernblot和TUNEL等方法,分别于缺血再灌注后30min、3、7、11和23h,检测压迫段脊髓组织中GRP78的表达变化及细胞凋亡情况。结果再灌注30min后,GRP78在压迫段脊髓开始表达上调,7h达峰值,11h表达回落,23h显著减少。TUNEL染色显示,神经细胞的凋亡指数随着再灌注时间的延长而升高。结论GRP78在脊髓缺血再灌注损伤中呈现时序性的表达变化,这可能是脊髓内源性保护机制之一。

大鼠脊髓缺血再灌注损伤后caspase-12表达与细胞凋亡

目的:观察大鼠脊髓缺血再灌注损伤过程中细胞凋亡、caspase-12的表达变化规律,以探讨其分子机制。方法:采用自制压迫装置制备脊髓压迫缺血再灌注模型。运用形态学、分子生物学等方法,分别于缺血再灌注后3、7、11、23和47h,观察脊髓缺血再灌注损伤后,脊髓的病理变化和内质网的形态学改变、细胞凋亡及caspase-12的表达变化的规律。结果:脊髓缺血再灌注3h后,出现不同程度的细胞肿胀,神经元退行性变及内质网结构变化;随着再灌注时间的延长,神经元和神经胶质细胞凋亡数明显增加,并伴有caspase-12的表达增强;capspase-12表达与细胞凋亡的时空变化规律相一致。结论:在脊髓缺血再灌注过程中神经细胞凋亡是引起脊髓继发性损伤的主要病理因素,caspase-12可能参与了脊髓缺血再灌注损伤所导致的细胞凋亡。

银杏叶对大鼠脊髓缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的探讨预先给予银杏叶提取物能否预防大鼠脊髓缺血再灌注损伤。方法将30只大鼠随机分为3组,假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、银杏叶提取物保护组(G组)。其中G组每日腹腔注射给予0.83 ml.kg-1GBE,连续给药5天。采用腹主动脉缺血法制备大鼠的脊髓缺血再灌注损伤模型。缺血45 min,再灌注24 h后进行Tarlov神经功能评价和病理组织学改变的观察。结果 G组与IR组相比较,神经功能评分结果显示IR组后肢神经功能改善明显,神经功能评分结果差异具有显著的统计学意义(P<0.05)。病理组织学结果表明,IR组出现明显的病理改变,神经细胞固缩、组织内血管充血等病理改变,G组的病理改变较轻,明显好于IR组。结论银杏叶对大鼠脊髓缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。

甲基强的松龙对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后钙蛋白酶表达的影响

目的:观察大鼠脊髓缺血再灌注损伤后应用甲基强的松龙(MP)对脊髓组织钙蛋白酶表达的影响。方法:用纯种雄性成年SD大鼠,夹闭右肾动脉分支下腹主动脉30min后恢复血供,缺血再灌注组(损伤组)不作任何治疗,造成动物脊髓缺血再灌注损伤模型,治疗组于恢复血供后即刻静脉应用MP(治疗组),观察再灌注后3h、24h、72h和7d时脊髓损伤节段钙蛋白酶Ⅰ的表达以及钙蛋白酶特异性底物68-KDNFP的降解。结果:脊髓再灌注后3h出现钙蛋白酶Ⅰ阳性细胞和68-KDNFP的降解产物,随着时间的延长,阳性细胞数目逐渐增多,染色深度逐渐增加,再灌注后72h最明显,MP治疗组较损伤组明显降低(P<0.01)。结论:脊髓再灌注损伤后静脉应用MP可以减少大鼠脊髓中calpain-Ⅰ阳性细胞的表达,对细胞骨架蛋白68-KDNFP具有明显保护作用。证实MP可以抑制钙蛋白酶的表达,可能是MP对脊髓损伤治疗的另一种机理。

重复高压氧预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤保护中环氧合酶-2表达的影响及机制

目的探讨重复高压氧预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤保护中环氧合酶-2(COX-2)表达的影响。方法雄性SD大鼠40只,体重260～320 g,应用随机数字表法分为四组(n=10):假手术组(Sham组)、脊髓缺血再灌注组(I/R组)、重复高压氧预处理组(HOP组)及COX-2抑制剂NS398预处理的HOP组(HOP-NS398组)。HOP实施高压氧预处理的参数为:氧浓度>97%,氧含量900 ml/L,压力2.5 ATA,1 h/d,连续5 d;最后一次处理后24 h,I/R、HOP及HOP-NS398组采用夹闭腹主动脉15 min再开放的方法制备脊髓缺血再灌注模型。再灌注48 h后评价后肢运动功能,而后处死大鼠,取L5～7节段脊髓组织,测定COX-2 mRNA及蛋白表达水平,光镜下观察病理学结果。结果与Sham组比较,I/R、HOP和HOP-NS398组后肢运动功能和正常脊髓前角运动神经元计数降低,L5～7节段脊髓组织中COX-2 mRNA及蛋白表达水平上调(P<0.05);与I/R组比较,HOP及HOP-NS398组后肢运动功能和正常脊髓前角运动神经元计数升高,L5～7节段脊髓组织COX-2 mRNA及蛋白表达水平下调(P<0.05)。与HOP组比较,HOP-NS398组后肢运动功能、正常脊髓前角运动神经元计数降低,COX-2表达升高(P<0.05)。HOP组脊髓组织病理学损伤程度轻于I/R组,而HOP-NS398组损伤程度重于HOP组,但仍轻于I/R组。结论重复高压氧预处理可减轻大鼠脊髓缺血再灌注损伤,其机制可能与调节COX-2表达有关。

不同剂量人参皂甙Rb1对大鼠脊髓缺血再灌注损伤及survivin的作用

目的观察不同剂量人参皂甙Rb1预处理对于大鼠脊髓缺血再灌注后的干预效果,并探讨其可能机制。方法 Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组,模型组以及药物10 mg/kg(D10)、20 mg/kg(D20)、40 mg/kg(D40)、80 mg/kg(D80)组,每组12只。药物组于造模前30 min腹腔注射相应剂量人参皂甙Rb1。构建大鼠脊髓缺血10 min再灌注模型。造模后48 h行BBB评分,HE染色及TUNEL检测观察细胞凋亡,免疫组化法观察survivin蛋白表达。结果各药物组BBB评分均高于模型组(P<0.05),以D40和D80组最高;survivin蛋白表达均高于模型组(P<0.05),以D40和D80组最高;神经细胞凋亡少于模型组(P<0.05),以D40和D80组最少。结论人参皂甙Rb1可以通过促进survivin的表达,抑制大鼠脊髓缺血再灌注造成的细胞凋亡,保护神经功能;在一定范围内,人参皂甙Rb1对脊髓缺血再灌注损伤的保护作用具有剂量依赖性。

鞘内注射右美托咪定对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后FGFR3表达及血-脊髓屏障的影响

目的：观察鞘内注射右美托咪定（dexmedetomidine,Dex）对大鼠脊髓缺血再灌注损伤（spinal cord ischemia reperfusion injury,SCIRI）后细胞生长因子受体3（FGFR3）表达、血-脊髓屏障（blood-spinal cord barrier,BSCB）结构及其相关结构蛋白occludin的影响。方法 ：120只SD大鼠随机分为4组：假手术组（Sham组）、缺血再灌注损伤组（IR组）、Dex预处理组（Dex组）和Dex＋阿替美唑（ATIP）预处理组（Dex＋ATIP组）,Sham组和IR组分别于造模前3d开始鞘内生理盐水30μl、Dex组鞘内注射10μg DEX（30μl）;Dex＋ATIP组鞘内注射右美托咪定10μg＋阿替美唑10μg（共30μl）,1次/d,连续3d。Sham组仅暴露主动脉弓而不结扎,其他3组开胸后用无创动脉夹夹闭主动脉弓14min后再开放,建立SCIRI模型。分别于造模后12h和48h取L4-L6脊髓,采用干湿法测定脊髓含水量;伊文思蓝（evans blue,EB）染色测定BSCB完整性;Weston blot和RT-PCR测定脊髓组织中FGFR3和occludin含量。结果：造模后12h和48h,与Sham组比较,IR组、Dex组和Dex＋ATIP组相应时间点脊髓组织中含水量、EB含量、FGFR3蛋白和基因表达均显著性增加,occludin表达显著性下降（P〈0.05）;Dex组与相应时间点与IR组和Dex＋ATIP组相比脊髓组织中含水量、EB含量和FGFR3蛋白和基因表达均显著性降低,而occludin表达增加（P〈0.05）;Dex＋ATIP组与IR组相应时间点比较均无显著性差异。造模后12h和48h,EB染色荧光显微镜下观察Sham组脊髓实质内几乎未见红色荧光,Dex组红色荧光有所增加,而IR组和Dex＋ATIP组红色荧光显著增加,48h变化较12h更为显著。结论 ：鞘内注射Dex可下调大鼠脊髓缺血再灌注损伤后脊髓组织中FGFR3蛋白表达,维持occludin蛋白含量,对血-脊髓屏障起到保护作用。

咯利普兰对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后神经运动功能及氧自由基的影响

目的探讨咯利普兰对大鼠脊髓缺血再灌注损伤(SCII)后神经运动功能及氧自由基的影响。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、SCII组及咯利普兰组,每组20只。SCII组及咯利普兰组建立大鼠SCII模型,Sham组仅于大鼠胸主动脉置管,不阻断血流。建模前30 min至实验结束,给予咯利普兰组大鼠腹腔注射咯利普兰,Sham组和SCII组注射相应体积的二甲基亚砜。于建模后6 h、12 h、24 h及48 h,每组分别取5只大鼠,进行体感诱发电位检测及后肢神经运动功能(BBB)评分,检测大鼠脊髓组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量。结果术后各时点,Sham组、咯利普兰组、SCII组BBB评分依次降低,体感诱发电位潜伏期依次延长而波幅依次减小,脊髓组织中SOD活力依次降低而MDA含量依次升高(均P <0. 05)。结论咯利普兰可减少大鼠SCII后氧自由基的生成,从而保护神经运动功能。

大鼠脊髓缺血再灌注损伤后血清内皮抑素和VEGF的相关性研究

目的探讨大鼠脊髓缺血再灌注损伤后血清中内皮抑素(endostatin,ES)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及相关性。方法采用Naslund腹主动脉阻断方法建立脊髓缺血动物模型。HE染色观察脊髓组织病理学变化,ELISA法分别检测脊髓缺血30min、90min再灌注后6h,2d,7d血清ES和VEGF水平;计算血清ES与VEGF含量的比值。结果与对照组相比,大鼠脊髓缺血30min再灌注后病理改变较轻,血清中VEGF、ES及e/V值无明显变化;缺血90min再灌注后神经元损伤较重,多数呈不可逆性坏死改变,ES[(107.750±9.692)ng·mL-1]及e/V值[(4.963±1.097)×103]均明显升高。结论大鼠脊髓缺血90min导致不可逆的脊髓损伤,血清e/V值的高低可能是影响缺血脊髓损伤程度和愈后的关键因素。

大鼠脊髓缺血再灌注损伤后ERK、Akt的表达与细胞凋亡关系的研究

目的:观察在大鼠脊髓缺血再灌注损伤过程中ERK、Akt的表达规律及其与神经细胞凋亡的关系。方法:采用胸主动脉阻断法建立脊髓缺血(25分)/再灌注损伤模型。健康成年SD大鼠118只,用随机数字表法分为两组:1脊髓缺血再灌注组96只,每个时间点12只;2假手术对照组12只大鼠,只置入球囊而不阻断。用形态学、分子生物学等方法,分别于缺血再灌注后0,1,2,4,12,24,48和72小时检测缺血段脊髓组织中细胞凋亡以及P-ERK、P-Akt的表达水平变化情况。结果:TUNEL染色结果显示,脊髓缺血再灌注损伤后12小时凋亡细胞明显增加,48小时达高峰。损伤后4小时细胞的P-ERK表达水平达高峰,损伤后12小时表达至低谷。损伤后2小时细胞的P-Akt表达水平至高峰,损伤后12小时表达至低谷。假手术组:P-ERK、P-Akt少有表达,少见TUNEL阳性细胞。结论:P-ERK、P-Akt均参与脊髓缺血再灌注损伤后的神经细胞凋亡,ERK、Akt信号通路被调控的有效时间窗可能在再灌注后12小时内。

锌对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨锌预处理对脊髓缺血再灌注损伤的预防作用,为锌预防脊髓缺血再灌注损伤提供实验依据。方法:40只大鼠随机分为高锌组、低锌组、假手术组和模型组。锌处理组(高锌组,低锌组)每天腹腔注射硫酸锌(20和10mg·kg-1)1次,模型组和假手术组每天注射等量生理盐水1次,连续5d。于第6天制备脊髓缺血再灌注损伤模型。缺血45min再灌注24h后进行神经功能评分以及HE和Fastblue染色进行病理组织学观察。结果:模型组大鼠出现不同程度的下肢瘫痪。锌预处理组大鼠与模型组比较,后肢神经功能明显改善,神经功能评分比较显著增高(P<0.01)。病理组织学观察发现,模型组大鼠神经细胞固缩深染、形态异常,血管充血,并出现白质内髓鞘松散、脱失等病理改变;锌处理组大鼠病理组织学改变明显改善,细胞形态基本正常且高锌组优于低锌组。结论:一定剂量范围内的锌对大鼠脊髓缺血再灌注损伤具有保护作用。