钙蛋白酶抑制剂对大鼠脑外伤后的神经保护作用分析

目的分析钙蛋白酶抑制剂对大鼠脑外伤后神经的保护作用。方法选取56只大鼠并进行分组,脑外伤后分别注射钙蛋白酶抑制剂和生理盐水,分析细胞凋亡情况。结果观察组的神经元凋亡比对照组少。结论钙蛋白酶抑制剂对脑外伤后的大鼠具有良好的神经保护作用。

草决明提取物对大鼠脑外伤的保护作用

目的:观察草决明提取物对脑外伤大鼠中枢神经损伤的保护作用。方法:随机将72只大鼠分为假手术组、脑外伤组和草决明(Cassia o btusifolial)提取物高(COB 20 g/kg)、低(COB10 g/kg)剂量组,除假手术组外,其他组均以Feeney’s自由落体法制备脑外伤模型,而假手术组仅做颅骨开窗,草决明提取物高、低剂量组灌胃给予治疗。假手术组和脑外伤组给予相应体积的等渗生理盐水,采用平衡木方法评估4组脑外伤大鼠的神经功能恢复情况。各组大鼠血清通过酶联免疫吸附测定法,测定其TNF-α和IL-6含量,取各组大鼠脑组织,通过免疫组化法去测定神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达情况,Western blot测定各组大鼠损伤侧脑皮层组织PI3K蛋白的表达情况。结果:损伤后的第6、24、60小时3个时间点提示,草决明提取物高、低剂量和脑外伤组的平衡功能受损恢复明显比假手术组低(P<0.01),但草决明提取物高、低剂量组的平衡功能受损恢复较脑外伤组快(P<0.05)。6,24,60 h 3个时间点脑外伤组和草决明提取物高、低剂量组的血清TNF-α和IL-6水平比假手术组明显增高(P<0.01),两给药组的大鼠血清TNF-α、IL-6水平低于脑外伤组(P<0.05),整体水平24 h逐渐下降,而60小时时略有反弹增高。与假手术组相比,两给药组的NSE阳性细胞表达明显降低(P<0.01),而明显高于脑外伤组(P<0.05);脑外伤组PI3K阳性表达明显低于假手术组(P<0.05),草决明提取物高剂量组PI3K阳性表达明显高于脑外伤组(P<0.05)且与假手术组持平。结论:草决明提取物能够减轻大鼠脑水肿,并增高脑外伤大鼠NSE阳性细胞表达,继而提高PI3K蛋白的表达水平从而加速脑损伤后神经功能的恢复。

上皮钙离子通道TRPV6在脑外伤合并骨折大鼠模型骨折部位表达的实验研究

目的研究大鼠股骨干骨折合并脑外伤时骨折部位瞬时性受体电位香草精受体6(TRPV6)的表达情况,探讨其与脑外伤促进骨折愈合的相关性。方法 12周雄性SD大鼠80只,随机分为5组,每组16只。A1组为骨折合并脑外伤1周组,A2组为骨折合并脑外伤2周组,B1组为单纯骨折1周组,B2组为单纯骨折2周组,C组为正常对照组。A组制作脑外伤合并股骨干骨折模型,B组制作单纯股骨干骨折模型。摄X线片后截取骨痂,HE染色及Masson染色观察骨痂生长情况及组织形态,免疫组化染色及RT-PCR检测TRPV6的表达。结果标本的HE染色及Masson染色可见骨折合并脑外伤组骨痂形成及成熟度快于单纯骨折组(P<0.05);免疫组化结果可见骨痂中TRPV6呈阳性反应,A2组TRPV6阳性表达的光密度平均值高B2组(P<0.05)。RT-PCR显示A、B组均有TRPV6 mRNA表达,A2组表达显著高于B2组(P<0.05)。结论脑外伤对骨折愈合有促进作用,其机制可能与脑外伤后骨折部位TRPV6表达水平升高相关。

安宫牛黄丸对脑外伤大鼠脑内载脂蛋白E合成的调节

[目的]探讨安宫牛黄丸治疗脑外伤的机制。[方法]给脑外伤大鼠灌服安宫牛黄丸药粉,采用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)对外伤后大鼠脑组织的载脂蛋白E mRNA进行检测。采用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法测定脑外伤后脑脊液载脂蛋白E的浓度。[结果]安宫牛黄丸能显著增加外伤后脑组织载脂蛋白E mRNA的表达和脑脊液载脂蛋白E的浓度。[结论]安宫牛黄丸可以通过增加脑外伤大鼠脑内载脂蛋白E mRNA的表达和载脂蛋白E的合成,从而促进受损神经系统的修复。

大鼠颅脑损伤后Caspase-9的表达变化及其法医学意义

目的探讨大鼠颅脑损伤后Caspase-9随时间变化的规律及其法医学意义。方法将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、假损伤组以及损伤后1、6、12h及1、2、3、5、7、10d和14d共12组。采用免疫组织化学SP方法、ELISA和图像分析技术观测大鼠脑外伤后不同时间段平均光密度值、阳性面积比及血清中Caspase-9含量,并对所测数据进行统计学分析。结果 ELISA检测结果,正常对照组血清Caspase-9含量为(8.75±2.37)ng/mL,伤后12h组血清中Caspase-9含量明显高于对正常对照组,至伤后1d组血清中Caspase-9含量达到高峰,为(45.23±3.31)ng/mL,此后血清中Caspase-9含量逐渐下降,至伤后7d组血清含量降至正常范围。Caspase-9免疫组织化学染色结果,脑损伤后1～6h,损伤区周围及海马可见个别Caspase-9细胞,着色较浅,损伤后12h,出现较多的Caspase-9阳性产物,损伤至1d时阳性细胞进一步增多,达到高峰,染色明显加深,伤后2～5d有很明显的Caspase-9阳性细胞,染色较深,伤后7～14d,阳性细胞明显减少。同比之下,假损伤组阳性反应物的平均光密度值及阳性面积比均高于正常组,但差异无统计学意义(P>0.05),而在损伤1～12h之间,损伤组阳性反应物的平均光密度值及阳性面积比逐渐升高,在1d时达到高峰,分别为(0.424±0.017)OD和(19.31±1.96)%,且与正常对照组及假损伤组相比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),之后随着时间的延长,阳性反应物的平均光密度值及阳性面积比逐渐下降。结论大鼠脑外伤后Caspase-9的表达呈现出升高-高峰期-逐渐下降期的规律性变化,可能为法医学损伤时间推断和颅脑损伤鉴定提供一种新的指标。

芍药苷对脑外伤大鼠模型行为学及HPA轴的影响

目的探讨芍药苷对脑外伤大鼠模型行为学及下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的影响。方法将45只大鼠随机分为假手术组(n=15)、脑外伤组(n=15)、芍药苷组(n=15)。按照改良Feeney法制备脑外伤大鼠模型。芍药苷组术后3 h给予芍药苷2.0 mg/kg腹腔注射,假手术组不进行任何处理,脑外伤组注射等量生理盐水,2次/d。24 h后处死。采用定位航行试验和空间探索试验评价行为学,采用酶联免疫法测定下丘脑CRH和血清CS含量。结果与假手术组比较,脑外伤组、芍药苷组第1周和第2周大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05),而芍药苷组第4周大鼠逃避潜伏期比较无统计学差异(P>0.05);与脑外伤组比较,芍药苷第1、第2、第4周大鼠逃避潜伏期明显降低(P<0.05);与假手术组比较,脑外伤组、芍药苷组第1、第2、第4周大鼠游泳时间百分比明显减少(P<0.05);与脑外伤组比较,芍药苷组第1、第2、第4周大鼠游泳时间百分比明显增加(P<0.05);与假手术组比较,脑外伤组、芍药苷组下丘脑CRH及血清CS含量明显上升(P<0.05);与脑外伤组比较,芍药苷组下丘脑CRH及血清CS含量明显降低(P<0.05)。结论芍药苷可明显改善脑外伤大鼠模型行为学,且对脑外伤大鼠模型HPA轴具有一定的调节作用。