大鼠衰老与血浆中T_3、T_4、TSH含量变化相关性随机平行对照研究

[目的]观察大鼠衰老与血浆中T3、T4、TSH含量变化相关性。[方法]使用随机平行对照方法,将30只大鼠按鼠龄简单随机分成三组,10只/组。将大鼠血浆中T3、T4、TSH检测ELISA试剂盒从4℃冰箱中取出,采用酶联免疫吸附法(ELISA)温静置30min,进行稀释、加样、温育、配液、洗涤、加酶、温育、洗涤、显色处理。每孔加入终止液50μL,终止反应(此时蓝色立即转为黄色)。以空白孔调零,450nm波长下测定各孔的吸光度(OD)值,测定应在加完终止液后15min以内完成。观测血浆T3、T4、TSH含量。[结果]三组T3、T4、TSH、心率有明显差异(P<0.05)。T3指标,6月龄值高于8月龄(P<0.05),8月龄值高于12月龄(P<0.05);T4指标,6月龄值高于8月龄(P<0.05),8月龄值高于12月龄(P<0.05);TSH指标,6月龄值高于8月龄(P<0.05),8月龄值高于12月龄(P<0.05);心率指标,6月龄值高于8月龄和12月龄(P<0.05),而8月龄和12月龄值则没有显著差异(P>0.05)。[结论]SD大鼠月龄增长,SDH活性反应显示能量代谢水平逐渐降低,分泌甲状腺激素的功能亦逐渐降低,大鼠心率随T3、T4、促甲状腺素含量的降低而呈降低的趋势。

有氧运动上调硫氧还蛋白系统抑制衰老大鼠心肌细胞凋亡

背景:研究表明,心肌细胞凋亡与心脏功能减退及心脏衰老过程密切相关,适宜的运动可以改变心力衰竭患者的心泵功能以及减轻衰老引起的心肌细胞凋亡、肥大和纤维化损伤。目的:探究长期有氧运动对衰老大鼠心肌细胞凋亡及硫氧还蛋白系统的影响。方法:选取雄性SD大鼠36只,按照鼠龄分为青年组(3月龄)、中年组(9月龄)、老年组(18月龄),每组12只;每组又分为安静、运动2个亚组,每组6只,安静组常规饲养,运动组进行有氧运动训练(45 min/d,5 d/周,训练10周)。末次训练后24 h,采用ELISA法检测大鼠血清肌钙蛋白Ⅰ和血清肌酸激酶同工酶MB水平,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡,Western Blot检测大鼠心肌组织中Bax、Bcl-2、Caspase 3、硫氧还蛋白1、硫氧还蛋白2、硫氧还蛋白还原酶1、硫氧还蛋白还原酶2、硫氧还蛋白相互作用蛋白、凋亡信号调节激酶1、P38丝裂原活化激酶的蛋白表达。结果与结论:(1)老年安静组大鼠血清肌钙蛋白Ⅰ和肌酸激酶同工酶MB水平高于青年安静组、中年安静组、老年运动组(P <0.01),老年运动组大鼠血清肌钙蛋白Ⅰ和肌酸激酶同工酶MB水平高于青年运动组、中年运动组(P <0.01);(2)无论是安静状态还是运动训练后,随着鼠龄的增加,大鼠凋亡心肌细胞数量及Bax、Caspase 3蛋白表达逐渐升高,Bcl-2蛋白表达逐渐降低;与同龄段安静组相比,运动组大鼠凋亡心肌细胞数量及Bax、Caspase 3蛋白表达均不同程度降低,Bcl-2蛋白表达均不同程度升高;(3)老年安静组大鼠心肌硫氧还蛋白1、硫氧还蛋白2、硫氧还蛋白还原酶1、硫氧还蛋白还原酶2蛋白表达低于青年安静组、中年安静组、老年运动组(P <0.05,P <0.01);老年运动组大鼠心肌硫氧还蛋白1、硫氧还蛋白2、硫氧还蛋白还原酶2蛋白表达低于青年运动组(P <0.05,P <0.01),硫氧还蛋白还原酶1、硫氧还蛋白还原酶2蛋白表达低于中年运动组(P <0.01);(4)老年安静组大鼠心肌硫氧还蛋白相互作用蛋白、凋亡信号调节激酶1、P38丝裂原活化激酶蛋白表达高于青年安静组、中年安静组、老年运动组(P <0.01),老年运动组大鼠心肌硫氧还蛋白相互作用蛋白、凋亡信号调节激酶1、P38丝裂原活化激酶蛋白表达高于青年运动组、中年运动组(P <0.01);(5)结果表明,有氧运动可能通过下调硫氧还蛋白相互作用蛋白表达来增强硫氧还蛋白的表达,下调凋亡信号调节激酶1及P38丝裂原活化激酶蛋白的表达,从而减轻衰老大鼠心肌细胞的凋亡。

D-半乳糖致衰老模型大鼠的学习记忆和行为学观察及中药干预作用

目的观察D-半乳糖致衰老模型大鼠学习记忆能力和行为学情况,并探讨中药的干预作用。方法大鼠每日一次颈背部皮下注射5%D-半乳糖100 mg/kg。诱导大鼠衰老模型,连续7周,观察衰老模型大鼠的自主活动次数、空间记忆能力、主动回避遭受电击能力、探究活动等行为学表现和学习记忆能力,并用抗衰老片与首乌延寿片进行干预,观察中药的干预作用。结果皮下注射D-半乳糖造模后,衰老模型大鼠自主活动次数显著减少(P<0.05,P<0.01),水迷宫试验探索路径长度和搜台潜伏期显著延长(P<0.05,P<0.01),旷场试验移动路程长度和直立次数显著减少(P<0.01),穿梭回避试验平均潜伏期、进入错误区时间显著增加(P<0.05,P<0.01)。给予抗衰老片与首乌延寿片干预后,衰老大鼠的自主活动次数显著增加(P<0.01),水迷宫试验探索路径长度和搜台潜伏期显著缩短(P<0.01),旷场试验移动路程长度和直立次数显著增加(P<0.01),穿梭回避试验平均潜伏期、进入错误区时间显著减少(P<0.05,P<0.01)。结论D-半乳糖致衰老模型大鼠的自主活动次数减少,对新环境探索能力下降,学习记忆力下降;抗衰老片与首乌延寿片等中药可有效增强衰老模型大鼠的行为活动,提高衰老模型大鼠的学习记忆能力。

亚甲基蓝改善脑炎性衰老大鼠认知功能及机制探索

目的 探讨亚甲基蓝(MB)改善脑炎性衰老大鼠认知功能及机制。方法 选用健康12月龄SD大鼠38只,随机分为健康对照组8只,脂多糖组、MB溶剂组和MB组各10只。建立脂多糖诱导的脑慢性炎性衰老模型,MB经皮下缓释泵注射1周[0.5 mg/(kg·d)]。采用T型迷宫实验和新物体识别实验测试大鼠的空间学习记忆;使用免疫荧光染色检测大鼠海马CA1区小胶质细胞和星形胶质细胞的激活;应用酶联免疫吸附测定试剂盒检测炎性因子白细胞介素(IL)1β和IL-6的释放;检测海马CA1区神经元死亡数量。结果 脂多糖组和MB溶剂组探索新、旧物体时间比较无显著差异(P>0.05),MB组探索新物体时间显著多于旧物体[(22.50±4.32)s vs(11.60±3.01)s,P=0.000]。与健康对照组比较,脂多糖组和MB溶剂组新臂交替选择率、神经元核抗原(NeuN)表达显著降低,离子钙接头蛋白1(Iba-1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达和IL-1β、IL-6表达显著升高(P<0.05)。与MB溶剂组比较,MB组新臂交替选择率、NeuN表达显著升高,Iba-1、GFAP表达和IL-1β、IL-6表达显著降低(P<0.05)。结论MB皮下给药能显著抑制脂多糖诱导的脑炎性衰老对空间学习记忆的损害,其机制可能与MB对炎性小胶质细胞的抑制以及海马体神经元保护紧密相关。

用基因芯片筛选针刺衰老大鼠涌泉穴的318个差异基因初报

目的 :应用基因芯片研究针刺涌泉穴对D 半乳糖所致衰老大鼠基因表达的影响。方法 :将成年健康大鼠随机分为模型组与针刺组 ,两组每日皮下注射 10 %D 半乳糖 0 5ml造模 ,造模的同时针刺组予以针刺涌泉穴 ,7周后处死 ,并摘取肝脏提取mRNA ,作逆转录为cDNA以备检测。随机选用 2 30 5条大鼠cDNA制备成表达谱芯片 ,用Cy3和Cy5两种荧光物质分别标记两组大鼠肝组织的cDNA ,制备成探针与表达谱芯片进行杂交 ,通过计算机扫描后进行数据分析 ,初步筛选出了差异表达基因 318条 ,其中表达上调的有 137条 ,表达下调的有 181条 ,并对其中差异最为显著的 5 5条作了初步分析。结果 :针刺涌泉穴对衰老大鼠的基因表达的影响涉及免疫、生长发育、基础代谢和细胞骨架运动等多个方面 ,这从基因水平证明了针刺治疗是一整体调节作用。结论 :应用基因芯片技术能够同时半定量的研究数千条基因的表达状态 ,可以从微观基因水平研究针刺的整体机理 ,并判定其分子疗效 。

左归丸对自然衰老大鼠海马乙酰胆碱含量及学习记忆功能的影响

目的观察自然衰老大鼠海马组织乙酰胆碱(ACh)含有量、学习记忆功能和海马组织形态学的变化及左归丸(熟地、山药、枸杞子等)的作用,探索衰老的机理及左归丸延缓衰老的作用机制。方法 SD大鼠随机分为老年组和左归丸组,另设青年组(5月龄),共3组。老年组大鼠常规喂养至24月龄;左归丸组大鼠自20月龄始,喂以含有左归丸生药0.675 g/(100 g·d)的饲料,连续4个月。采用高效液相电化学法检测各组大鼠海马组织ACh含有量,水迷宫测试各组大鼠学习记忆功能,苏木素-伊红(HE)染色观察海马组织形态。结果与青年组比较,老年组大鼠海马组织ACh含有量显著下降,水迷宫测试潜伏期延长(P<0.05);与老年组比较,左归丸组大鼠海马组织ACh含有量显著升高,水迷宫测试潜伏期显著缩短(P<0.05)。结论左归丸可通过提高海马组织ACh含有量水平、增强学习记忆功能、改善海马组织形态的衰老性变化来延缓衰老。

草苁蓉提取物对衰老大鼠脑组织自由基的影响

目的 探讨草苁蓉提取物对D 半乳糖致衰老大鼠脑组织自由基的影响。方法 60只Wistar大鼠随机分成正常组、模型组、人参皂甙组和草苁蓉大、中、小剂量组 ,用比色分析法测定大脑皮质超氧化物歧化酶 (SOD)、单胺氧化酶 (MAO)的活性及丙二醛 (MDA)的含量 ,同步观察电子显微镜下的组织学变化。结果 草苁蓉提取物可提高D 半乳糖所致衰老大鼠脑组织SOD活性 ,降低MDA含量 ,抑制MAO活性。电子显微镜观察到草苁蓉提取物可以减轻D 半乳糖导致的线粒体等超微结构的改变。结论 草苁蓉提取物对D

何首乌饮对亚急性衰老大鼠的抗氧化和调血脂作用

目的:探讨何首乌饮对亚急性衰老大鼠的抗氧化和调血脂作用。方法:D-半乳糖连续腹腔注射致亚急性衰老大鼠模型,造模同时灌胃何首乌饮10,20,40 g.kg-1.d-1,qd,连续给药60 d后测大鼠血清中丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性和超氧化物歧化酶(SOD)活性,并检测血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)的含量。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清MDA,TG和TC含量明显升高,SOD,GSH-PX,TAOC和HDL-C明显下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,何首乌饮组血清MDA含量显著下降,血清SOD,GSH-PX活性,TAOC和HDL-C含量显著上升(P<0.05),呈现一定的剂量依赖性。结论:何首乌饮延缓D-半乳糖诱发的大鼠亚急性衰老的作用机制可能与其抗氧化和调血脂作用有关。

松花粉对亚急性衰老模型大鼠抗衰老作用的实验研究

目的通过对亚急性衰老大鼠模型血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化能力(T-AOC)的测定,观察大鼠精子数量、活动度和存活率的变化,从而探讨松花粉的抗衰老作用。方法D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老大鼠模型,采用生物化学方法检测了各实验组血清中SOD、MDA、GSH-Px和T-AOC的含量;观察了大鼠精子数量、活动度和存活率的变化。结果D-半乳糖所致亚急性衰老大鼠模型组SOD活力、GSH-Px活力和T-AOC均明显下降,MDA含量明显上升,与正常对照组比较差异显著(P<0.01);而经松花粉给药后SOD活力、GSH-Px活力和T-AOC三者均有显著提高,MDA含量明显下降;松花粉可提高D-半乳糖所致亚急性衰老大鼠精子的数量、活动度和存活率。结论松花粉可显著提高亚急性衰老大鼠抗氧自由基的能力,提高精子的数量、活动度和存活率,具有延缓衰老的作用。

有氧运动对衰老大鼠血清中抗氧化酶和过氧化脂质的影响

目的:研究有氧运动对衰老大鼠血清中抗氧化酶和过氧化脂质的影响。方法:建立衰老大鼠模型,随机分为对照组和三组运动组,运动组分别给予每天0.5,1,2 h游泳训练,12周后检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)含量。结果:三组运动组的GSH-px含量明显大于对照组(P<0.01),各运动组间均有明显差异性,1 h运动组高于其他两组;0.5 h运动组的CAT含量明显大于对照组(P<0.05);三组运动组的MDA含量明显小于对照组(P<0.01);SOD,H2O2含量四组间没有明显差异性。结论:长期有氧运动训练可以增强抗氧化酶系统对氧自由基清除能力,减少对机体的氧化损害,以中低强度运动较为适宜。

有氧运动对衰老大鼠大脑组织中抗氧化酶和过氧化脂质的影响

目的研究有氧运动对抗衰老影响的机制。方法建立衰老大鼠模型,随机分为对照组和3个运动组,运动组分别给予每天0.5、1、2 h游泳训练,12 w后检测大脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)的含量。结果3个运动组中的MDA含量明显低于对照组;3个运动组的SOD含量和GSH-Px含量明显高于对照组;CAT含量和H2O2含量4组间无明显差异。结论长期规律的有氧运动训练可以引起衰老大鼠大脑SOD活性和GSH-Px活性的升高,有效地减少MDA含量,降低脂质过氧化水平,并且在适宜的运动负荷之内,随着时间的延长其减少氧自由基损害作用越大。

虾青素对正常小鼠与衰老模型大鼠免疫指标的影响

虾青素是一种具有极强抗氧化和抗衰老活性的类胡萝卜素,在医药、食品和化妆品等方面有着广泛的应用价值.以小鼠和大鼠为研究对象,考察虾青素对生物体免疫性能的影响.通过对小鼠灌胃低(4mg/(kg·d))、中(20mg/(kg·d))、高剂量(100mg/(kg·d))的虾青素,考察实验组与对照组的免疫器官脏器指数、巨噬细胞吞噬功能和血清抗体水平.结果表明,各剂量组小鼠血清抗体水平均显著升高(p<0.01),中剂量组小鼠脾脏指数显著升高(p<0.05),中、高剂量组小鼠的胸腺指数和吞噬系数均显著升高(p<0.05).采用腹腔注射D-半乳糖的方式建立大鼠的致衰老模型,考察虾青素灌胃对其免疫器官脏器指数及其形态的影响.结果显示,衰老灌胃虾青素组与衰老对照组相比胸腺指数显著升高(p<0.01),同时D-半乳糖诱导致使的肝脏、胸腺和脾脏细胞损伤得到明显改善.由此可以看出,虾青素可提高非特异性免疫和体液免疫功能,该结果为虾青素免疫机理的进一步研究奠定了基础.

有氧运动对衰老大鼠骨骼肌抗氧化能力的影响

目的研究有氧运动对衰老大鼠股四头肌组织中抗氧化酶和过氧化脂质的影响。方法建立衰老大鼠模型,随机分为对照组和运动组,运动组分别给予每天0.5、1、2 h游泳训练,12 w后检测骨骼肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、H2O2含量。结果有氧运动训练可以引起衰老大鼠股四头肌SOD、GSH-Px和CAT活性的升高,以1 h运动组效果最优,并且有效地减少MDA含量。结论长期规律的有氧运动可以提高骨骼肌的抗氧化能力,有效地减少MDA含量,降低脂质过氧化水平,并且在适宜的运动负荷之内,随着时间的延长其减少氧自由基损害作用越大。

松花粉对D-半乳糖亚急性衰老模型大鼠下丘脑-垂体-睾丸轴的调节作用

目的探讨松花粉的抗下丘脑-垂体-睾丸衰老作用。方法D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老雄性大鼠模型,分别采用放射免疫和酶联免疫法检测血清中黄体生成激素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、睾酮(T)含量以及下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)浓度的变化。结果D-半乳糖所致亚急性衰老大鼠模型组LH、FSH、GnRH均明显上升,IGF-1、睾酮含量明显下降,与正常对照组比较差异显著(P<0.01);而经松花粉给药后LH、FSH、GnRH三者均有显著下降,IGF-1、睾酮含量明显提高。结论松花粉具有改善衰老雄性大鼠下丘脑-垂体-睾丸轴功能紊乱的作用。

黄芪、枸杞子对衰老大鼠血浆LPO、SOD及某些激素的影响

将Ｗｉｓｔａｒ大鼠（３、８、１５及２６月龄）随机分为三组：（１）对照组（包括３、８、１５、２６月龄）；（２）黄芪组（包括１５和２６月龄）；（３）枸杞子组（包括１５和２６月龄），黄芪组和枸杞子组分别以６％黄芪和３％枸札子水煎剂代替饮水喂饲５个月。测定各组动物血浆ＬＰＯ含量、ＳＯＤ活力及Ｔ３、Ｔ４、皮质醇水平。结果表明：大鼠血浆ＳＯＤ活力随增龄而降低，ＬＰＯ含量则随龄增高。黄芪和枸杞子煎剂均可使老年大鼠降低的ＳＯＤ活力显著升高，血浆ＬＰＯ含量显著下降；血浆Ｔ３、Ｔ４、皮质醇含量随增龄而降低。

枸杞多糖对自然衰老雌性大鼠卵巢保护作用机制的探讨

目的:研究枸杞多糖(Lyceum barbarum Polysaccharides,LBP)对自然衰老雌性大鼠雌二醇(E2)、孕酮(P)、IGF-Ⅰ、IGFR和IGFBP-1水平的影响,初步探讨枸杞多糖对自然衰老雌性大鼠作用的机制。方法:14月龄SD大鼠随机分为模型组、阳性对照组及枸杞多糖高、中、低剂量组,4月龄SD雌性大鼠为正常对照组。给药30 d后,取血及卵巢组织,放射免疫(RIA)法测定血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)水平,酶免疫法测定血清中的IGF-Ⅰ与IGFR及卵巢组织中的IGFBP-1与IGFR水平。结果:卵巢功能衰退与激素(如雌激素、孕激素及IGF-Ⅰ)分泌能力呈正相关,而与IGFBP-1水平呈负相关。灌服不同剂量的LBP后能明显升高雌激素、孕激素及IGF-Ⅰ的水平,降低IGFBP-1水平,提示LBP能积极对抗卵巢功能的下降。结论:枸杞多糖对大鼠卵巢系统具有保护作用。

赤芍总苷对D-半乳糖诱导衰老大鼠脑组织TOLL受体和IL-33的实验研究

目的观察赤芍总苷(total paeony glucosides,TPGs)对D-半乳糖(D-galactopyranos,D-gal)诱导衰老大鼠脑组织TOLL受体(Toll like receptors,TLR4)mRNA和白细胞介素-33(interleukin-33,IL-33)mRNA的影响。方法 50只SD大鼠随机分为5组,即空白对照组,模型组,TPG高、中、低剂量组,每组10只。空白对照组给予皮下注射等容量生理盐水,其余40只均皮下注射10%D-gal0.125mL/g,每天1次,连续8周,诱导衰老大鼠模型。从制备模型的第5周开始,对TPG高、中、低剂量组大鼠腹腔注射D-gal同时,分别按300、150和75mg/kg的剂量给予TPG灌胃,每天1次,连续4周。模型组和空白对照组给予灌胃等容量的生理盐水,每天1次。采用Morris水迷宫测定法检测学习记忆能力,RT-PCR检测大鼠脑组织中TLR4mRNA和IL-33mRNA变化。结果与空白对照组比较,模型组大鼠学习记忆能力下降,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠治疗后学习记忆能力明显增强,并且存在剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组大鼠TLR4mRNA和IL-33mRNA含量明显增多,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠用药后TLR4 mRNA和IL-33mRNA明显下降,并且存在剂量依赖性,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TPG通过调节TLR4mRNA和IL-33mRNA的变化,改善D-gal诱导衰老大鼠学习记忆能力。

D-半乳糖诱导性亚急性衰老大鼠模型皮肤胶原代谢及相关通路分子的表达

目的:明确D-半乳糖诱导的亚急性衰老大鼠皮肤胶原代谢及TGFβ1/smads通道分子的表达。方法:20只大鼠随机分为对照组和衰老组,衰老组大鼠颈背部皮下注射D-半乳糖125 mg/kg·d,连续6周,对照组以同样的方法注射相同剂量的无菌生理盐水。活体皮肤共聚焦显微镜观察两组大鼠皮肤胶原纤维密度的变化。RT-PCR检测TGFβ1、Smad3、Ⅰ型前胶原蛋白、Ⅲ型前胶原蛋白及脂质金属蛋白酶抑制剂-1的mRNA水平。结果:衰老组大鼠皮肤胶原纤维密度及TGFβ1、Smad3、Ⅰ型前胶原蛋白、脂质金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA均低于正常对照组(P<0.05);脂质金属蛋白酶-1mRNA表达量高于对照组(P<0.05);Ⅲ型前胶原蛋白mRNA表达量在两组间没有差异。结论:D-半乳糖可通过下调TGFβ1/Smads通路分子的表达量抑制Ⅰ型前胶原蛋白合成,并通过调节脂质金属蛋白酶-1/脂质金属蛋白酶抑制剂-1促进胶原蛋白降解,使皮肤出现亚急性衰老效应。

何首乌饮对D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺EGF、EGF mRNA表达的影响

目的观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺表皮生长因子(EGF)及EGFmRNA表达的影响。方法采用D-半乳糖衰老大鼠模型,何首乌饮干预分为治疗和预防两部分,用免疫组化及原位杂交法检测下颌下腺EGF、EGF mRNA阳性表达的改变。结果预防性实验部分EGF、EGF mRNA表达以正常组最高,模型组最低,各预防组中预防中剂量组最高,组间比较有高度统计学意义(P<0.01)。治疗性实验部分以正常组最高,自然恢复组最低,各治疗组中以治疗中剂量组最高,组间比较差异显著(P<0.01)。结论何首乌饮可提高下颌下腺EGF、EGF mRNA的表达而达到抗衰老的作用。