剪切波弹性成像诊断大鼠非酒精性脂肪肝病的实验研究

目的探讨剪切波弹性成像(SWE)诊断大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的价值。方法将52只雄性SD大鼠随机分为实验组40只和对照组12只,其中实验组喂养蛋氨酸和胆碱缺乏饲料建立NAFLD模型,对照组正常喂养,分别于实验1周、2周、3周和4周后随机抽取实验组10只、对照组3只大鼠,均于麻醉状态下及处死即刻行SWE检测肝脏硬度(LSM)及标准差(SD);然后解剖大鼠,获得离体状态下LSM及SD。对切除的肝脏组织进行病理学检查判断有无脂肪变性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析SWE诊断大鼠NAFLD的效能。结果根据病理学检查结果,将大鼠分为非脂肪变性组17只,脂肪变性组35只。脂肪变性组处死即刻和离体状态下LSM分别为(3.95±1.78)kPa、(1.53±0.32)kPa,均高于非脂肪变性组[(2.91±1.53)kPa、(1.23±0.16)kPa],差异均有统计学意义(均P<0.05);两组麻醉状态下LSM比较差异无统计学意义。非脂肪变性组、脂肪变性组麻醉状态下SD分别为(1.70±0.56)kPa、(1.86±1.21)kPa,均高于处死即刻SD[(0.92±0.65)kPa、(1.08±0.73)kPa]和离体状态下SD[(0.26±0.16)kPa、(0.33±0.16)kPa],差异均有统计学意义(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,处死即刻和离体状态下LSM诊断大鼠NAFLD的曲线下面积分别为0.69、0.86,灵敏度和特异度分别为60.0%、60.0%和82.4%、100%。结论应用SWE诊断大鼠NAFLD具有较好的价值,NAFLD大鼠不同状态下LSM均明显升高。

凯里酸汤对大鼠非酒精性脂肪肝病作用的分子机制

目的探讨凯里酸汤对大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)作用的分子机制。方法结合文献数据库及TCMSP、PubChem、SEA、SwissTargetPrediction、SuperPred等数据库获取凯里酸汤的化合物成分及其潜在靶点,用Genecards及DisGeNet建立疾病靶点数据集,数据通过Venn制作工具、Cytoscape软件、蛋白质相互作用网络数据库(STRING)及注释、可视化和综合发现(DAVID)等数据库进行分析及网络可视化;18只大鼠均分为对照(ND)组(予正常饲料)、模型(HF)组(予高脂饲料)及凯里酸汤干预(HS)组(予高脂饲料加1 mL/100 g酸汤灌胃),连续12周,结束时麻醉处死各组大鼠,取心脏血及肝脏,采用生化分析仪检测各组大鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、甘油三酯(TC)及总胆固醇(TG)水平,采用苏木精-伊红(HE)染色和油红O染色观察各组大鼠肝组织的形态学特征,采用实时荧光定量(RT-qPCR)、Western blot及免疫组织化学(IHC)染色检测各组大鼠肝组织中过氧化物酶增殖物激活受体α(PPARα)、雌激素磺基转移酶1E1(SULT1E1)及雌激素受体α(ERα)的表达。结果网络药理学方法获得凯里酸汤11个主要成分及PPARα、ERα等12个关键靶点,生物信息学分析显示凯里酸汤参与多个生物过程,并可能通过雌激素信号通路在NAFLD防治中起作用;RT-qPCR、Western blot及IHC结果显示,与ND组相比,HF组大鼠肝组织中SULT1E1表达增加(P<0.05),PPARα、ERα相对表达降低(P<0.05),HS组则相反(P<0.05)。结论凯里酸汤对大鼠NAFLD作用的分子机制可能与PPARα/SULT1E1/ERα/雌激素信号转导恢复有关。

姜黄素治疗大鼠非酒精性脂肪肝病的实验研究

目的探讨姜黄素治疗大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的治疗作用。方法42只SD雄性大鼠分为正常对照组(14只)和NAFLD组(28只),以高脂饲料饲养建立NAFLD大鼠模型,将其随机平分为两组:NAFLD对照组和姜黄素治疗组,12周末,处死所有动物,检测血脂、肝功能、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、脂联素、肝脂质等指标,并观察肝组织病理学变化。结果姜黄素治疗组与NAFLD模型对照组比较,肝功能明显改善,谷草转氨酶AST(u/L)146±27与254±81,谷丙转氨酶ALT(u/L)48±24与106±41(P<0.01);胰岛素抵抗指数明显降低(HOMA-IR),分别为6.5±1.8与10.3±3.1(P<0.05);TNF-α明显降低,分别是132.7±26.9与316.2±36.1(P<0.01);脂联素水平明显升高,分别是20.6±2.5与14.3±0.9(P<0.05);肝TG、TC、LDL-C水平显著减低,分别是1.51±0.35与2.17±0.63、0.655±0.68与1.235±0.79、0.29±0.30与0.73±0.52(P<0.05);肝脂肪变性明显好转。结论姜黄素可以用来治疗大鼠NAFLD,其机制可能是通过抑制JNK酶的活性来起作用。

塞来昔布对2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪肝病相关的胰岛素抵抗的影响

目的探讨选择性环氧合酶2(COX-2)抑制剂塞来昔布对2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪肝病相关的胰岛素抵抗的影响。方法雄性SD大鼠36只,随机等分为对照组、模型组、模型+塞来昔布组。造模结束前1周行胰岛素耐量试验,造模结束时(共12周)取血清、肝脏组织及附睾脂肪组织。检测血清葡萄糖、胰岛素等相关生化指标;HE染色观察肝脏和脂肪组织病理改变;Western blot检测肝脏和附睾脂肪组织中COX-2蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组血清葡萄糖、胰岛素、总胆固醇、低密度胆固醇水平、肝内甘油三酯、肝内胆固醇水平均显著高于对照组;应用塞来昔布治疗后,上述生化指标较模型组均有显著下降。模型组胰岛素抵抗指数显著高于对照组,胰岛素敏感性指数及胰岛素耐量试验显示模型组胰岛素敏感性下降,应用塞来昔布治疗后胰岛素敏感性较模型组显著改善。模型组大鼠肝指数较模型+塞来昔布组显著升高,而模型组大鼠附睾脂肪组织质量及其相对质量(EAW/BW)显著少于模型+塞来昔布组。HE染色结果显示,模型组肝细胞脂肪变性评分显著高于对照组,应用塞来昔布治疗后模型+塞来昔布组肝细胞脂肪变性程度减轻,同时附睾脂肪组织脂肪细胞面积较模型组增加。Western blot结果显示模型组中肝组织和脂肪组织COX-2相对蛋白表达量显著高于对照组和模型+塞来昔布组。结论塞来昔布具有改善2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪肝病相关的胰岛素抵抗作用,其机制可能与抑制肝脏组织和脂肪组织的COX-2表达有关。

IL-18对大鼠非酒精性脂肪肝病形成的作用

目的:分析在高脂饮食诱发大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)形成过程中胰岛素抵抗(IR)与IL-18之间的相关性,并探讨IL-18对大鼠NAFLD形成的作用.方法:将48只♂SD大鼠随机分为正常饮食组(NG)及高脂饮食组(FG),各24只,喂养至第2、4、6、8周末时,2组各随机抽取6只,抽取门静脉血测空腹血糖(FBS)、空腹胰岛素(FINS),计算空腹胰岛素抵抗指数(FIRI);检测血清及肝组织匀浆IL-18浓度;光镜检查肝组织切片以评价肝脏脂肪变性程度.结果:FG第4周末开始出现IR,血清及肝组织匀浆IL-18均随喂养时间的延长逐渐升高,各期均高于NG,肝组织匀浆IL-18在第2、4、6、8周末均与同期NG比较均有统计学差异均P<0.05),而血清IL-18是第4、6、8周末与同期NG比较均有统计学差异(均P<0.05).FINS、FIRI、血清及肝组织匀浆IL-18均与肝脂肪变性呈正相关(r=0.951,0.971,0.950,0.937,均P<0.05).血清IL-18与FINS、FIRI及肝组织匀浆IL-18与FINS、FIRI均成正相关(r=0.951,0.933,0.929,0.913,均P<0.05).结论:IR在高脂饮食诱发的NAFLD的发生发展中有重要作用,IL-18与IR形成有关,并与NAFLD的形成相关联.

NF-КB、血管紧张素Ⅱ-1型受体在大鼠非酒精性脂肪肝病中的作用及其机制

目的:探讨NF-КB,血管紧张素Ⅱ-1型受体(ATIR)在非酒精性脂肪肝病(NAFLD)发病中的作用及其机制。方法:采用改良高脂饮食建立大鼠NAFLD模型,随机分为正常组普通饲料喂养,模型组高脂饮食喂养,干预组高脂饮食饲养10周后吡咯烷二硫基甲酸酯(PDTC)腹腔注射4周,分别于10、14周处死各组大鼠,观察肝组织病理学形态;测定血管紧张素浓度;检测NF-KB蛋白、肝脏AT1R在肝细胞中的表达情况。结果:肝组织病理结果提示正常组肝组织结构正常;模型组大鼠肝组织出现脂肪变性并随造模时间的延长而加重,10、14周大鼠肝脏可见气球样变及程度不等的肝细胞坏死和小叶内炎症、腺泡内散在点灶状坏死,部分可见点灶状坏死成片,门管区轻中度炎症。14周大鼠出现胶原纤维生成。免疫组化结果提示模型组大鼠肝细胞内可见NF-КB明显活化,而且随造模时间延长,其表达随之增多;干预组表达低于同期模型组,但高于正常组。放免法结果提示模型组、干预组血管紧张素浓度均高于正常组,且随着造模时间的延长,其浓度逐渐增多;干预组血管紧张素浓度低于同时期模型组但高于正常组。RT-PCR法显示:AT1Rm RNA表达量在模型组中随着造模时间的延长,表达量逐渐增加,且均明显高于同时间段正常组;干预组表达低于同时期模型组但高于正常组。结论:NAFLD肝组织随着疾病程度加重,NF-КB活性增强,抑制其活性可降低NAFLD大鼠肝组织AT1R m RNA表达。

高热量饲料结合慢性应激致大鼠非酒精性脂肪肝病变过程的研究

为观察不同作用时间下非酒精性脂肪肝(NAFLD)相关因子的改变,研究高热量饲料结合慢性应激促进NAFLD病变的过程,将64只雄性大鼠分为正常对照组、高热量饲料(HFSD)组、慢性应激(EFNS)组及高热量饲料结合慢性应激(HFSD+EFNS)组。8周后,每组随机取8只动物,作为第1批实验动物;14周后,余下每组8只动物作为第2批实验动物,检测胰岛素抵抗、血液及肝组织脂质、氧化应激状态、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及基因表达,计算肝指数。另外,取肝脏做病理切片,比较各组肝组织病理改变程度。结果显示,8周后大鼠出现胰岛素抵抗、脂质紊乱、氧化应激、炎症状态及肝指数增加。2种刺激只对肝脂质代谢紊乱有交互作用。14周后,大鼠NAFLD进一步恶化,对脂质紊乱、肝脂质代谢、炎症、氧化应激状态均有协同作用,肝组织切片也显示出现脂肪性肝炎。高热量饲料结合慢性应激促进NAFLD有一个发展过程,14周后能够诱导大鼠非酒精性脂肪肝模型的形成。

薏苡仁提取物调节大鼠非酒精性脂肪肝病游离脂肪酸的代谢作用机制

目的探讨薏苡仁提取物调节大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)游离脂肪酸的代谢作用机制。方法选取成年大鼠30只制作NAFLD模型,随机分为模型组、高剂量组、低剂量组各10只,同时选取健康大鼠10只为对照组,对比4组大鼠代谢指标。结果与对照组比较,模型组的TC、FFA上升,同时ADP下降(P<0.05),治疗组TC、FFA明显低于模型组,同时ADP高于模型组(P<0.05),不同剂量大鼠组间对比差异有统计学意义(P<0.05);同正常组比较,模型组的ALT以及AST明显上升(P<0.05),治疗组ALT、AST水平明显低于模型组(P<0.05),高剂量组低于低剂量组大鼠(P<0.05);模型组AMPK活性降低,同时FAS、ACCa-se等表达明显上升(P<0.05),治疗组AMPK活性上升,同时FAS、ACCa-se等表达明显下降(P<0.05),不同剂量大鼠组间对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论薏苡仁提取物能有效提高NAFLD大鼠脂联素水平,诱发下游的脂质代谢反应,从而改善游离脂肪酸的代谢。

吡格列酮对SD大鼠非酒精性脂肪肝病形成的预防作用及其机制

目的:探讨吡格列酮(pioglitazone,PIO)对SD大鼠非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)形成的干预作用及机制.方法:♂SD大鼠72只,随机分为正常饮食组(NG)、高脂饮食组(HG)和PIO干预组(PIOG)各24只.PIOG喂饲高脂饲料,并同时予PIO药物灌胃8wk.正糖高胰岛素钳夹实验检测IR水平,放免法和全自动生化仪检测血清生化指标,RT-PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)mRNA表达,Western blot检测肝组织c-Jun氨基末端激酶(c-Jun amino-terminal kinase1,JNK1)和PPARγ蛋白表达.结果:HG大鼠GIR水平降低和JNK1蛋白表达增高,均呈明显时间依赖性(均P<0.05);8wk末HG大鼠肝细胞出现明显脂肪变性,与NG相比,体质量、肝指数,TG、ALT、AST、FFAs、FINS、TNF-α水平明显增高,IR加重,JNK1蛋白表达明显升高,肝组织PPARγ表达明显降低(TG:1.23±0.08vs0.62±0.12,ALT:92.80±7.09vs51.34±8.12;AST:153.22±20.65vs119.26±13.61;FFAs:511.94±24.88vs335.31±15.71;FINS:41.23±1.84vs22.65±2.25;TNF-α:1.02±0.12vs0.34±0.07,均P<0.05);而PIOG大鼠,上述各项指标均得到明显改善,但仍不能完全达到NG大鼠水平(均P<0.05).结论:PIO对于由高脂饮食诱导的NAFLD的形成及其他IR相关疾病有预防作用.

L-谷氨酰胺调节脂质代谢与大鼠非酒精性脂肪肝病的相关性

目的观察L-谷氨酰胺(L-Gln)对高脂诱导的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠血脂、肝功能的影响和对基辅酶A氧化酶(ACOX)1、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)1 mRNA和蛋白表达的影响。方法将SD大鼠随机分为空白组(CON组)、NAFLD模型组(NAF组)及L-Gln治疗组(L-Gln),给予NAF组以及L-Gln组大鼠高脂饮食建立NAFLD模型,造模成功后,L-Gln组给予L-Gln灌胃治疗,NAF组给予其生理盐水灌胃辅助参考,CON组不加以干涉,治疗6 w和12 w后处死大鼠,观察其ACOX1、SCD1及血脂、肝功能指标变化。结果 L-Gln组治疗12 w谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(UBIL)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)较NAF组有明显降低(P<0.05);总胆汁酸(TBA)较NAF组有显著降低(P<0.01);总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)较NAF组有明显升高(P<0.05);NAFLD大鼠ACOX1及SCD1 mRNA和蛋白表达经L-Gln治疗12 w明显升高(P<0.05)。结论 L-Gln可以明显提高高脂饮食诱导NAFLD大鼠肝脏ACOX1及SCD1 mRNA和蛋白表达,通过上述酶的表达,调节血脂代谢,进而降低了大鼠肝脏脂肪含量,改善肝功能,可能对NAFLD具有一定的防治作用。

荜茇-13味治疗大鼠非酒精性脂肪肝病的实验研究

目的:研究荜茇-13味对大鼠非酒精性脂肪肝病的疗效.方法:雄性Wister大鼠40只随机分组,每组8只.正常对照组仅喂饲普通饲料,其他大鼠喂饲高脂饲料(88%标准普通饲料+10%猪油+2%胆固醇)12周.分为模型对照组和荜茇-13味低(2mg/kg)、中(4mg/kg)、高(8mg/kg)给药组.治疗组于13周开始灌胃荜茇-13味.药物干预8周末结束实验,测定体重、肝湿重和肝指数,检测血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、丙氨酸转移酶(ALT)、门冬氨酸转移酶(AST)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和肝组织TG、TC.结果:与对照组比较,模型组体重、肝湿重、肝指数以及血清中TG、TC、LDL-c、、ALT、AST、MDA和肝组织TG、TC含量均增加,具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)而HDL-c和SOD下降(P<0.05);与模型组比较,药物干预组大鼠肝湿重和肝指数及血清TG、TC、LDL-c、ALT、AST、MDA和肝组织TG、TC降低,且肝脏脂肪变性和炎症坏死减轻(P<0.05,P<0.01).结论:荜茇-13味对大鼠高脂饮食诱导的NAFLD有治疗作用.

新型高脂血症易感(WSHc)大鼠非酒精性脂肪肝病模型的建立与病理特点研究

目的利用一种新型的高脂血症易感(WSHc)大鼠建立非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型,观察其血液生化指标变化及病理特点,探讨其应用与科研价值,为NAFLD疾病动物模型提供新的选择。方法 20只7~8周龄的WSHc大鼠,随机平均分为2组,分别饲喂普通饲料和高脂饲料;另取20只同周龄的Wistar大鼠,采取相同处理方式分组作为品系对照。持续饲喂12周后,检测血清TC、TG、ALT和AST水平,并进行弹性超声成像。处死动物后取肝进行HE、油红O、Masson和免疫荧光染色,观察各组大鼠肝大体细胞形态、脂质沉积、炎症反应和纤维化情况,分析高脂饲喂后WSHc大鼠肝的病变特点。结果与饲喂高脂饲料的Wistar大鼠比较,WSHc大鼠经高脂诱导后,血清总胆固醇显著升高并与临床高脂血症患者接近;肝脂质异常沉积并形成大泡性脂滴;脂滴周围有炎症细胞浸润形成炎症灶,巨噬细胞增多;可见散在的纤维化病变。然而,这些病理变化在高脂诱导的Wistar大鼠肝组织中并未发现。结论相较于Wistar大鼠,WSHc大鼠高脂诱导后血脂与肝酶接近临床水平,肝组织中有更严重的脂质沉积和炎症反应,且伴有散在的肝纤维化,因此可作为一种新的、理想的NAFLD动物模型。

艾塞那肽通过调控PPARα及ACOX1改善大鼠非酒精性脂肪肝病症状

目的研究艾塞那肽对高脂诱导的大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的作用。方法120只SD大鼠随机分为对照组(CON)、模型组(1FD)、艾塞那肽低、中、高剂量干预组(ELD、EMD、EHD)和阳性药物多烯磷脂酰胆碱治疗组(PDC),每组20只,成功复制NAFLD模型后,给予相应治疗,治疗4周和8周后分别处死大鼠各半,肝脏切片HE染色、相应试剂盒检测肝功能、血脂指标,RT-PCR及Western blot测定PPARα及ACOX1的mRNA和蛋白表达。结果治疗8周后,肝脏HE染色除ELD外,PDC、EMD及EHD看不到任何脂肪颗粒浸润;治疗4周后,PDC、ELD、EMD以及EHD组与HFD组相比,肝功能指标AST、ALT与CHE,血脂指标CHOL与TG,明显降低(P<0.05),8周后进一步降低;治疗后肝脏组织过氧化物酶增殖激活受体α(PPARα)和酰基辅酶A氧化酶1(ACOX1)表达有显著改善。结论艾塞那肽可通过调控PPARα及ACOX1表达改善NAFLD大鼠症状。

姜黄素对实验性大鼠非酒精性脂肪肝病氧化应激、炎性因子及细胞凋亡水平的影响

目的探讨姜黄素对实验性大鼠非酒精性脂肪肝病肝脏氧化应激、炎性因子及细胞凋亡等水平的影响并初步探讨其机制。方法将大鼠随机平均分为正常对照组(NC组)、高脂饮食组(HF组)和高脂饮食+姜黄素治疗组(HF+curcumin组),各组给予相应处理造模后,观察肝脏病理变化并分析相关血清学指标。结果 NC组、HF组和HF+curcumin组大鼠血GSHPx、T-AOC、SOD分别为28.5±2.5、21.7±3.1、24.1±1.2;4.3±0.9、1.8±1.1、2.9±0.7;163.7±13.4、123.5±21.1、143.1±16.7,MAD分别为1.3±0.5、3.2±0.8、2.4±0.6,血IL-6、TNF-α分别为67.5±12.4、114.5±15.2、91.3±16.1;32.8±5.5、40.5±4.2、34.5±6.1,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);各组间NF-κB/GAPDH及Bcl-2/Bax比值差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论姜黄素能够减轻NAFLD大鼠肝脏脂肪变性程度,改善胰岛素抵抗、肝功能及病理损伤,明显减轻其发病关键环节氧化应激,炎性反应及细胞凋亡的程度。

多氯联苯118诱导大鼠非酒精性脂肪肝病的研究

目的:探讨慢性低浓度多氯联苯118(polychlorinated biphenyl 118,PCB118)是否引起大鼠非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)及其机制。方法:Wistar大鼠随机分为4组,腹腔注射PCB118[10、100和1 000μg/(kg·d)]或玉米油[0.5 mL/(kg·d)]13周。检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平及白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达水平。HE及天狼星红染色观察肝脏脂肪变性、炎症细胞浸润及纤维化程度。结果:不同浓度PCB118刺激后与对照组比较,血清ALT、TG、TC、GLU、LDL-C、HDL-C水平显著增加(P <0.01),血清AST水平略有增加但差异无统计学意义。IL-1β、TNF-α、TGF-β1、MMP-2、α-SMA mRNA水平显著增加(P<0.05)。HE染色示肝脏脂肪变性、炎症浸润,天狼星红染色示肝小叶结构紊乱,明显纤维化。结论:慢性低浓度PCB118通过炎症机制促进肝脏纤维化,诱导大鼠NAFLD发生。

4-苯基丁酸对高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪肝病的治疗作用

目的:研究内质网应激(ERS)抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)对高脂饮食所致非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠的保护作用。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、4-PBA组,除正常组外,其余大鼠给予高脂饮食8周复制NAFLD模型,采取4-PBA(350 mg/kg)进行灌胃,连续干预4周。计算大鼠体重变化,肝、肾、脾指数;测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、总蛋白(TP)、白/球比(A/G);测定肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;饱和油红O染色观察大鼠肝脏脂滴沉积;免疫组织化学法检测肝脏葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达水平。结果:与模型组比较,4-PBA组大鼠体重增加量、肝指数明显降低(P<0.05);血清中ALT、AST、GLB、TP、TC、TG、LDLC水平显著下降,HDL-C、A/G显著上升(P<0.05);肝脏中SOD、GSH、GSH-Px活性显著升高,MDA含量显著降低(P<0.05);油红O染色证实,肝细胞脂滴沉积面积显著减少(P<0.05);免疫组化表明,肝脏中GRP78表达水平显著降低(P<0.05)。结论:4-PBA对高脂饮食诱导NAFLD大鼠有一定的治疗作用,可能与改善氧化应激、调节脂质代谢紊乱及减轻ERS有关。

健脾理气活血方对2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪肝病的保护作用

目的探讨健脾理气活血方对2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的干预作用及其机制。方法随机取10只SD雄性大鼠作为正常组,另取20只SD雄性大鼠以高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射方法建立2型糖尿病伴NAFLD模型。将19只造模成功大鼠随机分为模型组10只和中药组9只。中药组给予健脾理气活血方17.1 g/(kg·d)灌胃,正常组及模型组给予等量蒸馏水灌胃,均连续灌胃16周。取血检测肝功能指标[谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)]、胰岛功能相关指标[空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbAlc)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]、血脂指标[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)],Western blot法检测肝脏组织中葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)、叉头转录因子O1(FoxO1)、胰岛素受体底物1(IRS1)的蛋白表达情况,HE染色和油红O染色观察肝脏病理表现。结果与正常组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、FPG、FINS、HbAlc、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C水平及肝脏组织中G-6-Pase、FoxO1蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),血清HDL-C水平及肝脏组织中IRS1蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05);HE染色示模型组大鼠肝细胞核位置偏移,染色变浅或消失,胞浆中可见较多脂肪空泡与炎性浸润;油红O染色见广泛红色脂滴分布在肝细胞中。与模型组比较,中药组血清ALT、AST、FPG、FINS、HbAlc、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C水平及肝脏组织中G-6-Pase、FoxO1蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),血清HDL-C水平及肝脏组织中IRS1蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05);HE染色和油红O染色示中药组大鼠肝细胞形态变化、脂肪变性及炎性浸润程度均较模型组轻,胞浆内脂滴减少。结论健脾理气活血方可以改善2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪肝病病理变化,机制可能与调控FoxO1相关通路、减轻胰岛素抵抗有关。

水蛭对非酒精性脂肪肝病小鼠的保护作用及其机制

目的探讨水蛭对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠的保护作用及潜在机制。方法将雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠随机分为模型组和水蛭低、高剂量组(0.45、0.9 g/kg),每组10只;另取同周龄野生型雄性C57BL/6J小鼠10只,作为对照组。对照组小鼠以基础维持饲料喂养,其余各组小鼠以高脂饲料喂养12周以建立NAFLD模型。第13周,各药物组小鼠灌胃相应药液,每天1次,连续8周。末次给药后,测定各组小鼠的体重、肝脏质量,并计算肝脏指数;检测其血清核因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;观察其肝组织病理形态学变化,并检测肝组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白的表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠肝组织可见较多的脂肪空泡和炎症细胞浸润,并有明显的脂质堆积;其体重、肝脏质量及肝脏指数和血清NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、TC、TG、LDL-C水平均显著升高,血清HDL-C水平和肝组织中PPARγ、SIRT1蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,水蛭低、高剂量组小鼠肝组织病理改变均有所缓解;其体重、肝脏质量及肝脏指数和血清NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、TC、TG、LDL-C水平均显著降低,血清HDL-C水平和肝组织中PPARγ、SIRT1蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论水蛭可能通过激活PPARγ、SIRT1蛋白的表达来调节肝脏脂质代谢、抑制炎症反应,从而发挥对NAFLD的改善作用。

非酒精性脂肪肝动物模型和疾病表型的研究进展

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种以肝细胞脂肪堆积为特征的疾病,随着患病率的不断增高,NAFLD已成为全人类的健康问题。在NAFLD数十年的研究历史中,动物模型在发病机制、病理生理、治疗和预防的研究设计中发挥了不可替代的作用。NAFLD的动物模型种类繁多,按照动物的品种品系、造模时间和方法、造模判定指标进行总结,根据不同动物和方法得到的模型进行评估,比较模型与人类NAFLD的相似度和优缺点。

黄连-红曲药对干预非酒精性脂肪肝病的临床疗效观察及网络药理机制分析

目的观察黄连-红曲药对干预非酒精性脂肪肝病的临床疗效,并基于网络药理学分析其潜在的药理学机制。方法80例非酒精性脂肪肝病患者按照随机数字表法分为对照组、治疗组各40例。两组均采用西医常规治疗,治疗组在对照组的基础治疗上加入黄连-红曲药对。在患者连续治疗8 w后,对患者治疗前后的门冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转移酶(ALT)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)进行对比研究。通过TCMSP数据库和文献检索黄连、红曲成分,SwissTarget Prediction数据库预测成分作用靶点,Genecards获取脂肪肝相关靶点。对药物和疾病共同靶点构建PPI网络,同时进行GO和KEGG富集分析。结果经治疗后,两组患者AST、ALT、γ-GT、TC、TG、LDL-C较治疗前均明显降低(P<0.05),HDL-C均明显升高(P<0.05)。将治疗后的两组对比,治疗组较对照组AST、ALT、γ-GT、TC、TG、LDL-C均明显降低(P<0.05),HDL-C均明显升高(P<0.05)。网络药理分析显示黄连、红曲干预脂肪肝的生物学功能包括脂质代谢过程的调节、小分子代谢过程的调节、炎症反应、蛋白质磷酸化、离子传输的调节;关键的生物学通路为胰岛素抵抗、PPAR信号通路、NF-κB信号通路。结论黄连-红曲药对治疗非酒精性脂肪性肝病效果较好,能有效改善肝功能、血脂水平。网络药理学初步揭示了其治疗脂肪肝的机制,为临床用药提供参考,为后续实验研究提供支撑。