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血清软骨寡聚基质蛋白结合硫酸软骨素846参数对大鼠骨关节炎模型的诊断价值 被引量:1
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作者 马天文 宋霄鹏 +4 位作者 胡海龙 赵明超 陈鸿 汤继浪 高利 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期12-16,共5页
为了全面评估血清中软骨寡聚基质蛋白(COMP)和硫酸软骨素846(CS846)在大鼠骨关节炎(OA)模型中的诊断价值。本试验将60只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=30)和模型组(n=30)。其中,模型组通过手术切断前十字韧带(ACLT)造模,对照组进行假手术... 为了全面评估血清中软骨寡聚基质蛋白(COMP)和硫酸软骨素846(CS846)在大鼠骨关节炎(OA)模型中的诊断价值。本试验将60只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=30)和模型组(n=30)。其中,模型组通过手术切断前十字韧带(ACLT)造模,对照组进行假手术。造模后第0、2、4、6、8周和第10周,收集血清和胫骨样本,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各时间点血清中COMP和CS846水平;对大鼠胫骨进行病理组织学检查和国际骨关节炎研究学会(OARSI)评分;用受试者工作特征曲线(ROC)比较单独和结合2个参数检测的曲线下面积(AUC)。结果显示,造模10周内,模型组血清中COMP和CS846水平明显高于对照组(P<0.05),并且COMP和CS846分别与软骨损伤程度呈正相关(P<0.01);结合2个参数检测的AUC值高于单独检测COMP或CS846。因此,结合血清COMP和CS486参数对评估和诊断OA具有潜在的价值。 展开更多
关键词 大鼠骨关节炎 软骨寡聚基质蛋白 硫酸软骨素846 早期诊断
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地榆皂苷Ⅰ对大鼠膝骨关节炎的作用机制研究 被引量:1
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作者 王哲纬 周安远 +3 位作者 王勇麟 裴晓敏 钟秋玲 杨渊 《中国临床新医学》 2024年第6期639-644,共6页
目的研究地榆皂苷Ⅰ对大鼠膝骨关节炎的作用机制。方法选择SD雄性乳鼠8只,提取乳鼠软骨细胞,采用CCK-8实验检测细胞增殖率以确定最佳药物浓度。将软骨细胞随机分为对照组、炎症组和治疗组,对照组在完全培养基中进行培养,炎症组在含有10... 目的研究地榆皂苷Ⅰ对大鼠膝骨关节炎的作用机制。方法选择SD雄性乳鼠8只,提取乳鼠软骨细胞,采用CCK-8实验检测细胞增殖率以确定最佳药物浓度。将软骨细胞随机分为对照组、炎症组和治疗组,对照组在完全培养基中进行培养,炎症组在含有10μg/mL白细胞介素-1β(IL-1β)的培养基中培养,治疗组在含有10μg/mL IL-1β和最佳浓度地榆皂苷Ⅰ的培养基中培养。采用Calcein-AM/PI染色观察各组软骨细胞生长情况。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测各组软骨细胞中白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶13(MMP13)mRNA相对表达量。取8周龄左右的SD雄性大鼠24只随机分为对照组、炎症组和治疗组,每组8只,对炎症组和治疗组建立骨关节炎模型,建模完成4周后,炎症组和对照组的关节腔内注射等体积生理盐水,治疗组的关节腔内注射100μL最佳浓度的地榆皂苷Ⅰ溶液,1次/周,连续给药4周。采用HE染色和番红O-固绿染色观察各组膝关节组织结构。采用免疫组化染色观察各组膝关节组织中IL-6、MMP13蛋白表达情况。结果CCK-8实验结果显示,各实验浓度均未表现明显细胞毒性,当地榆皂苷Ⅰ的浓度为20 mg/L时,软骨细胞增殖率最高。Calcein-AM/PI染色结果显示,炎症组和治疗组细胞增殖率低于对照组,治疗组细胞增殖率高于炎症组,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-qPCR检测结果显示,炎症组和治疗组IL-6、MMP13 mRNA相对表达量高于对照组,治疗组IL-6、MMP13 mRNA相对表达量低于炎症组,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色和番红O-固绿染色结果显示,对照组的膝关节组织结构比炎症组和治疗组完整,与炎症组相比,治疗组膝关节组织损伤有所减轻。免疫组化染色结果显示,炎症组IL-6、MMP13蛋白表达水平最高,治疗组IL-6、MMP13蛋白表达水平高于对照组。结论地榆皂苷Ⅰ可通过维持软骨细胞活力、降低炎症因子的释放以及减少软骨细胞外基质(ECM)的降解发挥抗炎作用,对膝骨关节炎有一定的药用潜力。 展开更多
关键词 地榆皂苷Ⅰ 骨关节炎 抗炎 白细胞介素-6 基质金属蛋白酶13 骨关节炎大鼠模型
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益母草碱对骨关节炎大鼠细胞自噬的机制研究 被引量:1
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作者 徐峥 孙晓旭 柳忠兴 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期684-688,693,共6页
目的探讨益母草碱对骨关节炎(OA)大鼠软骨细胞自噬和凋亡的影响以及PTEN诱导假定激酶1(PINK1)/帕金森病蛋白(Parkin)信号通路发挥作用。方法采用标准前交叉韧带横断术(ACLT)构建OA大鼠模型,将建模成功的大鼠分为OA组、益母草碱-L组、益... 目的探讨益母草碱对骨关节炎(OA)大鼠软骨细胞自噬和凋亡的影响以及PTEN诱导假定激酶1(PINK1)/帕金森病蛋白(Parkin)信号通路发挥作用。方法采用标准前交叉韧带横断术(ACLT)构建OA大鼠模型,将建模成功的大鼠分为OA组、益母草碱-L组、益母草碱-M组、益母草碱-H组,每组12只,另取12只为假手术组;HE染色检测各组大鼠软骨细胞形态变化;透射电镜观察各组大鼠软骨细胞超微结构;TUNEL法检测各组大鼠软骨细胞凋亡;RT-qPCR检测各组大鼠软骨组织PINK1、Parkin、P62、LC3B mRNA表达水平;Western blot检测各组大鼠软骨组织PINK1、Parkin、P62、LC3B蛋白表达水平。结果与假手术组相比,OA组大鼠软骨形态异常、结构模糊、表面出现裂缝、软骨细胞线粒体数量减少、少量自噬体存在,软骨细胞凋亡率、软骨组织P62 mRNA和蛋白水平显著升高,软骨组织PINK1、Parkin、LC3B mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.05)。与OA组比较,益母草碱-L、M、H组大鼠软骨形态逐渐恢复、结构逐渐清晰、表面裂缝减少、软骨细胞数量恢复、线粒体增多、自噬体数量增加,软骨细胞凋亡率、软骨组织P62 mRNA和蛋白水平显著降低,软骨组织PINK1、Parkin、LC3B mRNA和蛋白水平显著升高,呈剂量依赖性(P<0.05)。结论益母草碱可能通过激活PINK1/Parkin信号通路促进OA大鼠软骨细胞自噬,抑制软骨细胞凋亡。 展开更多
关键词 益母草碱 PINK1/Parkin信号通路 骨关节炎大鼠 软骨细胞自噬和凋亡
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补肾通络方对大鼠膝骨关节炎膝关节软骨细胞外基质代谢的影响 被引量:12
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作者 杨帆 袁芳 +1 位作者 侯秀娟 朱跃兰 《吉林中医药》 2018年第1期67-71,共5页
目的探讨补肾通络方对膝骨关节炎大鼠的膝关节软骨中基质金属蛋白酶-3/13(matrix metalloproteinase-3/13,MMP-3/13)、组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)m RNA和蛋白聚糖酶-1(aggrecanase-1即ADAMT... 目的探讨补肾通络方对膝骨关节炎大鼠的膝关节软骨中基质金属蛋白酶-3/13(matrix metalloproteinase-3/13,MMP-3/13)、组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)m RNA和蛋白聚糖酶-1(aggrecanase-1即ADAMTs-4)蛋白的表达影响。方法将42只雄性Wistar大鼠随机分为7组:正常组,模型组,西药组,成药组,补肾通络方低、中、高剂量组,向大鼠双侧后肢膝关节腔内分别注射4%木瓜蛋白酶生理盐水溶液0.2 mL,于第1、4、7天注射以建立膝骨关节炎(Knee osteoarthritis,KOA)模型。造模成功后,分别以蒸馏水、美洛昔康水溶液、抗骨增生胶囊水溶液、补肾通络颗粒方低、中、高浓度水溶液对大鼠进行灌胃给药干预,干预过程中观察大鼠的一般状态,于灌胃给药干预4周后处死,并刮取双膝关节内胫骨平台及股骨内、外侧髁软骨组织,置于冻存管中备用,用实时定量反转录酶-聚合酶链锁反应(Real-time reverse transcript polymerase chain reaction,RTPCR)法测定软骨中MMP-3/13和TIMP-1在m RNA水平表达的变化及Western blot法测定ADAMTs-4蛋白表达情况。结果 MMP-3和MMP-13的m RNA表达情况在模型组最高(P<0.05),正常组表达最低(P<0.05),不同药物对其影响不同,其中补肾通络方的中剂量组表达水平在各给药组中最小,成药组表达含量在各给药组中最大,补肾通络方中剂量组与高剂量组相比,中剂量组表达低于高剂量组,然二者之间差异无统计学意义(P>0.05)。TIMP-1的m RNA含量在模型组中最低(P<0.05),正常组中表达最多(P<0.05),在各给药组中补肾通络方高剂量组含量接近正常组,而低剂量组表达最少。软骨ADAMTs-4蛋白表达情况,模型组含量最高,正常组含量最低,各给药组之间含量不同,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾通络方治疗KOA疗效明显,其作用机制可能是通过抑制MMP-3/13和ADAMTs-4的水平,增加TIMP-1的表达,减轻膝关节软骨的破坏情况,改善KOA的症状,从而达到治疗KOA的作用。 展开更多
关键词 补肾通络方 大鼠骨关节炎 软骨 MMP-3 MMP-13 TIMP-1 ADAMTs-4
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不同浓度补肾通络方对膝骨关节炎大鼠OPG/RANKL系统mRNA的影响 被引量:6
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作者 杨帆 袁芳 +1 位作者 侯秀娟 朱跃兰 《中医药信息》 2018年第3期25-29,共5页
目的:观察不同浓度补肾通络方对膝骨关节炎大鼠模型膝关节软骨组织OPG/RANKL系统的影响,分析本方对KOA骨破坏/重建的作用机制。方法:采用膝关节腔内注射木瓜蛋白酶溶液法复制KOA模型,36只Wistar大鼠采用随机数字表法分为6组,分别为正常... 目的:观察不同浓度补肾通络方对膝骨关节炎大鼠模型膝关节软骨组织OPG/RANKL系统的影响,分析本方对KOA骨破坏/重建的作用机制。方法:采用膝关节腔内注射木瓜蛋白酶溶液法复制KOA模型,36只Wistar大鼠采用随机数字表法分为6组,分别为正常组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,观察不同浓度补肾通络方对KOA大鼠膝关节软骨组织OPG/RANKL系统mRNA表达水平的影响。结果:软骨OPG的mRNA水平是在模型组中含量最低(P<0.05),正常组中含量最高(P<0.05),中药中剂量组含量接近正常组,而在低剂量组中表达最少,且中剂量组与高剂量组之间差异无统计学意义(P>0.05)。RANKL的mRNA表达情况是模型组最高(P<0.05),正常组最低(P<0.05),不同浓度的中药对其影响不同,但中药高、中、低三个剂量组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。二者的比值变化趋势与OPG相类似,以模型组最小,正常组最大,随着中药浓度的升高,其比值逐渐增加,且中剂量组与高剂量组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:补肾通络方能够提高KOA大鼠软骨OPG的mRNA表达水平,降低RANKL水平,具有双向调节OPG/RANKL轴的作用。既可促进成骨,又可抑制或延缓破骨,维持KOA大鼠模型中OB/OC活动的平衡,改善骨质代谢水平,缓解KOA病情进一步进展。 展开更多
关键词 补肾通络方 骨关节炎大鼠 软骨 OPG RANKL MRNA
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开诱导大鼠颞下颌关节骨关节炎样退变的实验性研究 被引量:4
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作者 孙莲 张卫兵 王林 《口腔医学》 CAS 2016年第5期390-393,410,共5页
目的研究过度张口对大鼠颞下颌关节软骨和软骨下骨的影响,建立异常负荷导致的关节炎动物模型。方法 10只6周龄SD雌性大鼠,随机分成两组,实验组被动张口3 h/d,持续5 d,开口度达25 mm。使用Micro-CT对髁突软骨下骨骨密度进行分析,使用甲... 目的研究过度张口对大鼠颞下颌关节软骨和软骨下骨的影响,建立异常负荷导致的关节炎动物模型。方法 10只6周龄SD雌性大鼠,随机分成两组,实验组被动张口3 h/d,持续5 d,开口度达25 mm。使用Micro-CT对髁突软骨下骨骨密度进行分析,使用甲苯胺蓝染色和免疫组化的方法观察髁突软骨细胞和细胞基质变化。结果实验组软骨下骨表面界限模糊,骨密度下降,关节后区有组织缺损。实验组关节软骨基质Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达较对照组下降,软骨层厚度变薄,尤其表现于增殖层的变薄。结论实验性开可以导致大鼠颞下颌关节出现早期的关节炎样变化,这一模型将有助于阐明异常负荷所致的颞下颌关节炎软骨破坏内在机制的研究。 展开更多
关键词 实验性开 大鼠颞下颌关节骨关节炎样损伤 动物模型 大鼠
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大鼠滑膜组织中S100A12、IL-1β、Galectin-3与早期膝骨关节炎相关性研究 被引量:5
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作者 代凤雷 尹宏 +3 位作者 张斌 曾怿 王振 何强 《四川医学》 CAS 2020年第6期570-574,共5页
目的检测早期膝骨关节炎大鼠滑膜组织中的S100A12、IL-1β、Galectin-3水平表达,探讨大鼠滑膜组织中三种炎性细胞因子与早期膝骨关节炎相关性的研究。方法 28只成年雄性Wistar大鼠,随机数字表法分成对照组、实验组。实验组大鼠采用左膝... 目的检测早期膝骨关节炎大鼠滑膜组织中的S100A12、IL-1β、Galectin-3水平表达,探讨大鼠滑膜组织中三种炎性细胞因子与早期膝骨关节炎相关性的研究。方法 28只成年雄性Wistar大鼠,随机数字表法分成对照组、实验组。实验组大鼠采用左膝关节腔内注射木瓜蛋白酶诱导早期膝骨关节炎;对照组大鼠相同方法及部位注射等量生理盐水。分别于造模成功后第1、28天提取大鼠滑膜组织,采用免疫组化法和酶联免疫吸附法检测滑膜组织中的S100A12、IL-1β、Galectin-3水平表达。结果①实验组造模成功后第1天检测S100A12、IL-1β、Galectin-3水平表达均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);②实验组造模成功后第28天检测S100A12、IL-1β水平表达均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但Galectin-3水平表达仍较明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论滑膜组织中S100A12、IL-1β、Galectin-3三种炎性细胞因子均与早期膝骨关节炎密切相关,为临床早期诊断膝骨关节炎提供理论依据,同时明确Galectin-3在早期膝骨关节炎病情进展中的持续表达。 展开更多
关键词 早期膝骨关节炎大鼠模型 木瓜蛋白酶 S100A12 IL-1Β GALECTIN-3 免疫组化法 酶联免疫吸附法
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miR-125a-3p对骨关节炎大鼠软骨细胞活性、氧化应激反应及SIRT1/Foxo1蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 王乐 《临床骨科杂志》 2023年第2期293-298,共6页
目的 探讨miR-125a-3p对骨关节炎大鼠软骨细胞活性、氧化应激反应及细胞沉默信息调节因子1/叉头框转录因子o1(SIRT1/Foxo1)蛋白表达的影响。方法 将40只大鼠随机分为对照组(健康大鼠)、模型组(骨关节炎大鼠,造模后不做其他处理及干预)、... 目的 探讨miR-125a-3p对骨关节炎大鼠软骨细胞活性、氧化应激反应及细胞沉默信息调节因子1/叉头框转录因子o1(SIRT1/Foxo1)蛋白表达的影响。方法 将40只大鼠随机分为对照组(健康大鼠)、模型组(骨关节炎大鼠,造模后不做其他处理及干预)、miR-125a-3p组(骨关节炎大鼠,造模成功7 d后于大鼠左膝关节关节腔内注射miR-125a-3p抑制剂)、阿利吉仑组(骨关节炎大鼠,造模成功7 d后给予大鼠50 mg/kg阿利吉仑灌胃),每组10只。通过氧化应激反应检测超氧物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、乳酸脱氢酶(LDH),HE、番红O、Masson染色检查大鼠软骨损伤情况,TUNEL检测软骨细胞凋亡,RT-PCR与免疫印迹检测SIRT1、Foxo1基因及蛋白水平。结果 软骨细胞凋亡率模型组高于miR-125a-3p组与阿利吉仑组(P<0.05),miR-125a-3p组与阿利吉仑组比较差异无统计学意义(P>0.05)。HE、番红O、Masson染色显示,模型组大鼠关节软骨面骨裂隙形成;miR-125a-3p组与阿利吉仑组大鼠关节软骨表面变得光滑,无明显裂隙。RT-PCR与免疫印迹检测显示,与模型组相比,miR-125a-3p组与阿利吉仑组SOD、GSH、SIRT1水平均升高(P<0.05), MDA、LDH、Foxo1水平均降低(P<0.05)。结论 miR-125a-3p通过调控SIRT1/Foxo1信号通路,可降低氧化应激反应,抑制软骨细胞凋亡,改善骨关节炎病情。 展开更多
关键词 miR-125a-3p 骨关节炎大鼠 软骨细胞活性 氧化应激 细胞沉默信息调节因子1/叉头框转录因子o1蛋白
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Effect of Bushenhuoxue formula on interleukin-1 beta and discoidin domain receptor 2 levels in a rat model of osteoarthritis 被引量:7
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作者 Li Nianhu Xia Lei +3 位作者 Yi Sheng Yu Jianhui Zhai Yi Xu Zhanwang 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 2015年第2期192-196,共5页
OBJECTIVE:To determine the effects of Bushenhuoxue formula(BHF) on interleukin-1 beta(IL-1β),transforming growth factor beta 1(TGF-β1),discoidin domain receptor 2(DDR2) and matrix metalloproteinase-1(MMP-1) levels i... OBJECTIVE:To determine the effects of Bushenhuoxue formula(BHF) on interleukin-1 beta(IL-1β),transforming growth factor beta 1(TGF-β1),discoidin domain receptor 2(DDR2) and matrix metalloproteinase-1(MMP-1) levels in a rat model of osteoarthritis(OA).METHODS:Sprague-Dawley rats were used to establish an OA model and subjected to various treatments over 6 weeks.Rats were treated with BHF,glucosamine sulfate(G5),or starch as a control.Serum levels of IL-1β and MMP-1 and joint fluid levels of IL-1 β were determined by means of ELISAs.We used immunohistochemistry to determine DDR2 levels in knee cartilage.Gene expression levels of MMP-1 in joint synovial tissue were assessed using reverse transcription polymerase chain reaction assays.RESULTS:Serum IL-1β levels were unchanged throughout the study.Levels of IL-1β in joint fluid and MMP-1 in sera from the BHF- and GS-treated groups were significantly reduced.DDR2 levels in knee cartilage were also significantly reduced in the BHF group.Expression of the MMP-1 gene was significantly reduced by BHF treatment.CONCLUSION:BHF might be beneficial in the inhibition and alleviation of local inflammatory responses and cartilage degeneration in OA. 展开更多
关键词 Osteoarthritis Cytokines Discoidin receptor Matrix metalloproteinase 1 Bushenhuoxue formula
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