清达颗粒通过p38 MAPK通路抑制大鼠高血压心肌肥厚的作用机制研究

目的:探讨清达颗粒抑制高血压心肌肥厚的作用机制。方法:将12只5w龄雄性自发性高血压大鼠随机分为模型组、清达颗粒组,每组6只,选取6只雄性同周龄正常血压大鼠作为对照组。清达颗粒组按0.9g/(kg·d)给予清达颗粒干预,对照组和模型组给予等量生理盐水干预,每日1次,连续8w。监测大鼠血压和体重,观察各组大鼠心脏重量指数、心脏收缩功能和病理形态、心房钠尿肽(ANP)、脑利钠肽(BNP)的mRNA和蛋白的表达变化,以及p38 MPAK通路相关蛋白的活化。结果:干预8w后,与模型组比较,清达颗粒组大鼠血压显著降低(P<0.05),心脏收缩功能显著改善(P<0.05),心脏重量指数显著降低(P<0.05),心肌纤维增粗肿胀、排列紊乱、溶解断裂、炎性细胞浸润等病理情况明显改善,心脏组织ANP、BNP的mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05),心脏组织p-p38/p38 MPAK蛋白的表达显著降低(P<0.05)。结论:清达颗粒通过p38 MPAK通路抑制高血压心肌肥厚。

血脑屏障紧密连接损坏引起大鼠高血压性脑白质病变

目的探讨易卒中型肾血管性高血压大鼠(stroke-prone renalvascular hypertensive rats,RHRSP)血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)紧密连接(tight junction,TJ)变化引起脑白质病变(white matter lesions,WML)的机制。方法雄性SD大鼠90只,随机分为假手术组(n=15)和RHRSP组(n=75),定期监测血压,在4周、8周、12周、20周、30周分别进行WML分级,透射电镜观察白质区域血脑屏障超微结构,免疫荧光检测脑组织白蛋白漏出,Loyez染色观察神经纤维改变。结果模型组术后4周、8周血压明显升高(P<0.01),分别为(148.3±11.6)mm Hg、(169.9±10.7)mm Hg,12周为(188.9±13.6)mm Hg,此后血压趋于平稳;WML逐渐加重,胼胝体病变最明显,分级依次为(0.4±0.2)、(0.8±0.2)、(1.4±0.2)、(2.2±0.2)、(2.6±0.2);RHRSP 4周及8周TJ无明显变化,12周时27个中有8个、20周时24个中9个、30周时20个中有11个破坏;RHRSP 12周前脑实质及血管周围未见血浆白蛋白漏出,20周可见血管周围白蛋白漏出,30周可见颗粒状白蛋白漏出到脑实质内,白质区域以胼胝体及尾核漏出最明显;RHRSP 8周时出现神经纤维紊乱,12周可见空泡形成,20周可见明显的脑白质疏松,30周加重。结论RHRSP模型是合适的研究高血压性WML模型;长期高血压可以破坏BBB的TJ,从而引起血浆白蛋白的漏出,造成神经毒性,导致WML的发生。

肾血管阻力在大鼠高血压发生发展过程中的变化

本文采用离体肾脏灌流的方法 ,研究了不同周龄自发性高血压大鼠 (SHR)离体肾的最小肾血管阻力 (RVRmin) ,以了解RVR在高血压形成和发展过程中的变化规律 ,探讨RVR的变化是否与肾血管的形态学重建有关。结果如下 :4、16、2 6、40和 5 5周 ,SHR总体RVRmin分别为 11.97± 0 .81、5 .99± 0 .5 9、5 .77± 0 .5 6、5 .0 3± 0 .93和 4.5 6± 0 .81mmHg·ml-1·min ,随年龄增大而下降 ;单位肾重RVRmin分别为 3 .85± 0 .6 1、5 .0 1± 0 .79、5 .37±0 .6 8、5 .77± 0 .90和 6 .2 9± 0 .91mmHg·ml-1·min·g ,随年龄增大而增高。WKY两种RVRmin随年龄的增长均略呈下降趋势。除 4周外 ,各年龄组SHR的两种RVRmin都显著高于同龄的WKY。结果表明 ,已建立高血压的SHR ,RVRmin显著增高 ,且单位肾重RVRmin随年龄逐渐升高 。

鱼油对卒中易感型自发性高血压大鼠高血压发展过程的影响

观察饮食鱼油或花生油对卒中易感型自发性高血压大鼠（ＳＨＲｓｐ）血压、血脂和心、脑、肾结构的影响。大鼠喂养标准实验室饮食（对照组）或含１２％花生油（花生油组）或１２％鱼油（鱼油组）的饮食１７周。结果表明饮食鱼油能够缓解ＳＨＲｓｐ高血压的发展；降低总胆固醇（ＴＣ）和甘油三酯（ＴＧ）水平，显著升高高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬｃ）水平；饮食鱼油能够减缓左室肥厚的发展，减轻靶器官小血管的病理改变，对高血压靶器官具有明显的保护作用。与之相反，饮食花生油对ＳＨＲｓｐ的血压、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯无影响，饮食花生油升高总胆固醇水平，加剧高血压靶器官脑、心、肾的病变。

针刺捻转补泻手法对自发性高血压大鼠神经递质及炎症因子的影响

目的通过观察针刺捻转补泻手法对自发性高血压大鼠(SHR)下丘脑室旁核(PVN)中神经递质γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)含量以及血清中炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平表达的影响,探寻针刺调控血压的作用机制。方法27只雄性SHR大鼠随机分配到补法组、泻法组和模型组中。9只Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作为空白组。空白组和模型组只进行捉抓固定不做针刺干预,补法组和泻法组均取双侧的太冲穴进行针刺干预。各组每日上午干预1次,周期为14 d,2周之间休息1 d。于针刺第0、3、7、14日定期测量大鼠尾动脉收缩压并记录。实验第14日取材,采用ELISA法检测大鼠PVN中GABA、Glu的含量,以及检测血清中炎症因子IL-6、TNF-α的含量,最后使用HE染色法观察PVN组织病理学改变。结果与模型组相比,补法组和泻法组均能显著降低SHR大鼠血压(P<0.01),且泻法组降压效果更为显著(P<0.05)。针刺后,与模型组相比,补法组和泻法组PVN组织中GABA含量显著增加,Glu含量显著降低(均P<0.01);补法组和泻法组血清中IL-6、TNF-α水平相比模型组显著下降(P<0.05或P<0.01)。HE染色结果显示:与模型组相比,补法组和泻法组可改善病变情况,细胞总数增多。结论针刺捻转补泻手法可明显降低SHR大鼠血压,且捻转泻法降压效果更为显著,其作用机制可能与PVN中神经递质GABA含量升高、Glu含量降低,以及炎症因子IL-6、TNF-α水平下降相关。

苏尼特羊尾油对自发性高血压大鼠机能代谢的影响

旨在为羊尾油对动物健康效应的研究提供基础数据,创建了自发性高血压大鼠(SHR)模型,将8周龄SHR分为试验组苏尼特羊尾油组(Y组)、阴性对照大豆油组(D组)、阳性对照菜籽油组(C组)和芥花油组(J组),并分别饲喂添加10%相应油脂的饲料,记录日摄食量,每周测量血压,饲喂14周后解剖采血,摘取肝脏,检测血清血脂水平、肝脏功能指标和肝脏病理学特征。结果表明:第14周时,Y组雌、雄SHR日摄食量显著高于对照组(p<0.05),血压显著低于对照组(p<0.05);Y组SHR血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇含量以及谷丙转氨酶、谷草转氨酶、γ-谷氨酰转移酶和乳酸脱氢酶活性显著低于对照组(p<0.05),而高密度脂蛋白胆固醇含量显著高于对照组(p<0.05);C组和J组SHR肝脏病变严重,Y组SHR肝脏组织未出现病变。综上,与对照组植物油相比,苏尼特羊尾油具有缓和SHR血压升高、有效改善血脂和肝脏机能作用,是具有良好健康效应的动物性油脂。

活血利水复方对自发性高血压大鼠转化生长因子-β1/SMAD家族蛋白信号通路介导下游结缔组织生长因子及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达及血管重塑的影响

目的:基于转化生长因子-β1/SMAD家族蛋白信号通路探讨活血利水中药复方对自发性高血压大鼠血管重塑的保护作用及机制。方法:将自发性高血压大鼠随机分为模型组、卡托普利组、活血利水复方低剂量组、活血利水复方中剂量组、活血利水复方高剂量组,Wistar大鼠作为空白组,每组10只。给予相应药物灌胃,4周后采用酶联免疫吸附试验方法检测血清中C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6的含量;采用逆转录聚合酶链反应检测大鼠主动脉组织转化生长因子-β1、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达,并取冠状动脉组织进行马松三色染色。结果:与空白组比较,模型组血清中C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6的含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,各药物组大鼠干预后血清中C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6的含量不同程度降低(P<0.01)。其中,卡托普利组和活血利水复方高剂量组上述3项指标表达最低,与其他组的差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);卡托普利组和活血利水复方高剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,模型组大鼠主动脉转化生长因子-β1、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,卡托普利组及活血利水复方低剂量组、活血利水复方中剂量组、活血利水复方高剂量组大鼠主动脉组织转化生长因子-β1、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达不同程度降低(P<0.05或P<0.01)。结论:活血利水中药复方可通过调控转化生长因子-β1/SMAD家族蛋白信号通路及下游结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达水平,降低C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6等炎症因子的表达,抑制炎症反应,从而改善高血压病炎症状态及血管重塑,其机制可能与降低转化生长因子-β1、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原蛋白沉积有关。

半夏白术天麻汤通过AngⅡ/TGF-β1/smad通路干预合并血脂异常自发性高血压病大鼠心肌纤维化

目的探究半夏白术天麻汤通过调控AngⅡ/TGF-β1/smad通路对高脂喂饲的自发性高血压病大鼠心肌纤维化的影响。方法选取10只Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和48只自发性高血压病大鼠(SHR),将SHR大鼠随机分为6组,每组8只,分别为对照组(WKY-ND)、高血压病组(SHR-ND)、高脂高血压病组(SHR-HF)、半夏白术天麻汤低(BDL)、中(BDM)、高(BDH)剂量组和西药(Telmisartan)组。所有大鼠适应性喂养1周后,给予WKY-ND组和SHR-ND组大鼠普通饲料,其余各组给予高脂饲料,喂养8周。造模成功后,给予WKY-ND组、SHR-ND组和SHR-HF组等体积生理盐水,其余各组给予药物干预12周。之后进行大鼠心肌组织取材,采用苏木素-伊红染色(HE)观察大鼠心肌细胞形态、采用马松(Masson)染色观察心肌组织胶原纤维的含量;ELISA法检测血清中AngⅡ、IL-6、TNF-α、NO、ox-LDL、LOX-1、ROS的含量;免疫组织化学方法检测心肌组织α-SMA、ColⅠ、ColⅢ的表达;采用Western blot检测心肌组织TGF-β1、p-smad2、p-smad3、MMP2、TIMP1蛋白表达水平。结果HE、Masson染色显示,给药后心肌细胞大小更均匀,形态更完整,细胞核清晰,胶原纤维面积减少,以半夏白术天麻汤高剂量组给药后改变更为明显;与SHR-ND组相比,SHR-HF组大鼠血清中AngⅡ、IL-6、TNF-α、ox-LDL、LOX-1、ROS水平明显升高,NO水平明显降低;与SHR-HF组相比,各给药组AngⅡ、IL-6、TNF-α、ox-LDL、LOX-1、ROS水平明显降低,NO水平明显升高;与SHR-ND组相比,SHR-HF组大鼠心肌组织中ColⅠ、ColⅢ、α-SMA蛋白水平显著升高;与SHR-HF组相比,各给药组ColⅠ、ColⅢ、α-SMA蛋白水平显著降低;与SHR-ND组相比,SHR-HF组大鼠心肌组织中p-smad2、p-smad3、MMP2的蛋白水平显著升高,TIMP1的蛋白水平显著降低。与SHR-HF组相比,BD组大鼠心肌组织中的TGF-β1、p-smad2、p-smad3、MMP2显著降低,TIMP1显著升高。结论半夏白术天麻汤可通过调节AngⅡ/TGF-β1/smad信号通路,影响高脂喂养SHR大鼠心肌纤维化。

β受体阻滞剂对自发性高血压大鼠血管老化的影响

[目的]探讨β受体阻滞剂在自发性高血压大鼠(SHR)血管老化中的防治作用及其潜在机制。[方法]将24只3月龄雄性SHR随机分为安慰剂组、硝苯地平组、硝苯地平+美托洛尔组、美托洛尔组,分别以食用淀粉、硝苯地平缓释片60 mg、硝苯地平缓释片40 mg+美托洛尔缓释片75 mg、美托洛尔缓释片150 mg灌胃治疗,普通饲料喂养9个月,动态观察大鼠血压、心率及一般情况。HE染色观察大鼠股动脉形态学特征,离体股动脉血管环灌流实验检测血管舒缩功能,免疫荧光组织学染色和实时聚合酶链反应(RT-PCR)测定衰老相关基因p53、p21及内质网应激相关基因CHOP、XBP1的表达。[结果]与安慰剂组相比,硝苯地平组、硝苯地平+美托洛尔组、美托洛尔组收缩压下降约30%,舒张压下降约20%,心率分别下降了9%、36%、41%(均P<0.01)。与安慰剂组相比,硝苯地平组、硝苯地平+美托洛尔组、美托洛尔组舒缩功能显著改善,内膜中膜厚度分别下降了24%、14%、37%(均P<0.01);与硝苯地平组、硝苯地平+美托洛尔组相比,美托洛尔组舒缩功能显著改善,内膜中膜厚度分别下降了18%、27%(均P<0.01)。与安慰剂组相比,硝苯地平组p53蛋白、p53 mRNA、p21蛋白、p21 mRNA、CHOP蛋白、CHOP mRNA、XBP1蛋白、XBP1 mRNA的表达水平分别下降了35%(P<0.01)、23%(P<0.05)、25%(P<0.01)、3%(P>0.05)、51%(P<0.01)、24%(P>0.05)、21%(P<0.01)、23%(P>0.05),硝苯地平+美托洛尔组分别下降了36%(P<0.01)、42%(P<0.01)、4%(P>0.05)、24%(P<0.05)、32%(P<0.01)、44%(P<0.05)、13%(P<0.01)、42%(P<0.05),美托洛尔组分别下降了47%(P<0.01)、43%(P<0.01)、42%(P<0.01)、49%(P<0.01)、78%(P<0.01)、56%(P<0.01)、32%(P<0.01)、81%(P<0.01)。与硝苯地平组、硝苯地平+美托洛尔组相比,美托洛尔组进一步抑制衰老和内质网应激相关基因的表达。[结论]SHR的动脉存在明显老化,β受体阻断剂在抑制SHR血管老化方面优于钙通道阻断剂,且高剂量β受体阻断剂改善血管老化程度优于联合用药,其机制可能与抑制内质网应激有关。

不同强度有氧运动对自发性高血压大鼠肾脏影响的研究

目的:研究有氧运动对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)肾脏内细胞焦亡相关蛋白表达的影响,探讨有氧运动对自发性高血压大鼠肾损害的作用。方法:8周龄雄性SHR和Wistar京都大鼠(wistar-kyoto rat,WKY),随机分为4组(n=6):安静组(WKY)、高血压安静组(SHR-N)、低强度有氧运动组(SHR-L)、中强度有氧运动组(SHR-M)。SHR-L组和SHR-M组分别在0°坡度的运动跑步机上以12~14 m/min和18~20 m/min进行有氧运动,每周5次,每次60 min,WKY和SHR-N安静饲养。10周后,训练结束72 h后检测血压。检测血清肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(urea nitrogen,BUN)。Masson染色观测肾脏病理学改变,并将肾脏功能指标(index of renal function,RFI)作为肾功能损伤指标。测定大鼠肾组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase-1)、cleaved-Caspase-1、Toll样受体4(Toll Like Receptor 4,TLR4)、IL-1β、IL-18、Gasdermin D、GSDMDC1等蛋白表达。检测血清中IL-1β和IL-18表达。结果:与WKY相比,SHR-N血压、血清Cr、BUN含量、RFI比值、NLRP3、Caspase-1、TLR4、IL-1β、IL-18、GSDMD、GSDMDC1蛋白、血清中IL-1β和IL-18表达升高;与SHR-N相比,SHR-M血压、血清Cr、BUN含量、RFI比值以及NLRP3、Caspase-1、TLR4、IL-1β、IL-18、GSDMD、GSDMDC1蛋白表达下降明显,而SHR-L组下降趋势不明显。结论:有氧运动强度差异与自发性高血压大鼠肾脏NLRP3炎症小体表达、血压以及肾功能损害均具有统计学意义。与低强度有氧运动相比,中强度有氧运动通过TLR4/NLRP3信号通路改善自发性高血压大鼠肾功能损害更明显。

全杜仲胶囊对自发性高血压大鼠肠壁微血流灌注的影响

目的 探讨全杜仲胶囊(QDZJN)和松脂醇二葡萄糖苷(PDG)对自发性高血压大鼠(SHRs)肠壁微循环血流灌注及其频谱特征的影响。方法 将SHRs随机分为SHR,SHR+QDZJN,SHR+PDG(L),SHR+PDG (M)和SHR+PDG (H)组。对照组为Wistar-kyoto(WKY)鼠。各组分别接受QDZJN或纯净水(对照组和SHR组)灌胃2个月。手术暴露大鼠小肠,激光多普勒血流探测仪(LDF)和血流成像仪(LDPI)检测并比较各组大鼠肠壁微血流灌注水平。小波分析比较各组肠壁内皮源性频段幅值。结果 与对照组相比,SHRs肠壁血流灌注水平显著降低(P<0.001)。QDZJN和各剂量PDG治疗2个月后,SHRs肠壁血流灌注水平显著升高(P<0.001)。SHRs组肠壁微血流灌注一氧化氮(NO)依赖和非依赖性内皮细胞源频段振幅均显著低于对照组(P<0.01)。QDZJN和PDG治疗可显著提高内皮细胞源频段幅值(NO依赖:P<0.0001;NO非依赖:P<0.01)。结论 QDZJN和PDG治疗2个月可显著改善SHRs肠壁的微血流动力学和内皮功能障碍。

基于GSK-3β/Fyn/Nrf2信号通路探讨槲皮素对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响及内在机制

目的:探究槲皮素在自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化中的作用机制。方法:50只SHR随机分为SHR组、卡托普利组、槲皮素低、中、高剂量组,每组10只;10只Wky大鼠为Wky组。卡托普利组灌胃给予卡托普利30 mg/kg,槲皮素低、中、高剂量组分别灌胃给予槲皮素20、50、100 mg/kg,Wky组、SHR组给予等量0.9%氯化钠溶液,每天1次,连续12周。尾袖法每2周测定大鼠尾动脉收缩压(SBP);给药结束,称定心脏质量,大鼠处死,称定其左心室质量(LVM),计算左心室肥厚指数(LVMI);比色法测血清超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)活性、丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量-聚合酶链式反应法和Western blot法检测左心室组织中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、非受体酪氨酸激酶Fyn、核因子相关因子2(Nrf2)的mRNA、蛋白表达,以及Ⅰ型、Ⅲ型胶原(Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ)蛋白表达。结果:与Wky组比较,SHR组大鼠SBP、心脏质量、LVMI显著升高(P<0.01);血清SOD、T-AOC活性显著降低,MDA含量显著增加(P<0.01);左心室Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ表达显著升高(P<0.01),Nrf2、GSK-3β的mRNA、蛋白表达显著降低(P<0.01),Fyn的mRNA、蛋白表达显著升高(P<0.01)。与SHR组比较,卡托普利组、槲皮素低、中、高剂量组大鼠SBP、心脏质量、LVM、LVMI均显著降低(P<0.01);血清SOD、T-AOC活性显著升高,MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01);槲皮素中、高剂量组左心室中Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ蛋白表达显著降低(P<0.01);槲皮素低、中、高剂量组左心室中Nrf2、GSK-3βmRNA、蛋白表达显著升高,Fyn mRNA、蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:槲皮素可抑制SHR心肌纤维化,其机制可能是通过下调GSK-3β/Fyn信号通路,激活Nrf2诱导的抗氧化通路,减少SHR心肌组织氧化应激反应。

钩藤降压解郁方对高血压并发抑郁大鼠血压及抑郁样行为的改善作用

目的观察钩藤降压解郁方对高血压并发抑郁大鼠血压及抑郁样行为的改善作用。方法40只自发性高血压大鼠(SHR),随机均分为模型组、阳性对照组和钩藤降压解郁方低、中、高剂量(6.345、12.69、25.38 g/kg)组,另取8只SD大鼠为正常组。以慢性不可预知性应激(CUMS)联合孤养大鼠的方法复制高血压并发抑郁模型。造模同时灌胃给药,每天1次,连续42 d。采用无创血压仪检测各组大鼠尾动脉血压,旷场实验、糖水消耗实验、强迫游泳实验检测各组大鼠总活动次数、糖水偏好率、强迫游泳不动时间,HE染色和尼氏染色观察海马区神经元的活性、排列情况以及神经元尼氏小体的数量,ELISA法检测大鼠海马组织单胺递质5-HT、NE、DA与炎性因子COX-2、MCP-1、TNF-α水平。结果造模42 d后,与模型组比较,阳性对照组和钩藤降压解郁方低、中剂量组尾动脉收缩压降低(P<0.01),阳性对照组和钩藤降压解郁方中、高剂量组旷场实验总活动次数、糖水消耗率升高(P<0.01),强迫游泳实验不动时间缩短(P<0.01),海马神经元细胞状态好转,排列整齐,少见凋亡细胞,尼氏小体丰富,海马组织中单胺递质5-HT、NE、DA水平升高(P<0.01),炎性因子COX-2、MCP-1、TNF-α分泌减少(P<0.05,P<0.01)。结论钩藤降压解郁方能通过减少海马组织炎性因子分泌,稳定单胺类神经递质表达,缓解海马神经元损伤,实现对高血压并发抑郁症大鼠血压及抑郁样行为的改善作用。

间断性热暴露导致自发性高血压大鼠的胸主动脉损伤:基于激活AMPK/mTOR/ULK1通路

目的 探讨不同热暴露方式对自发性高血压大鼠胸主动脉血管损伤的影响及其机制。方法 选用自发性高血压大鼠(SHR),构建热暴露大鼠模型,分为对照组SHR-CN(n=9,饲养在24℃室温下),间断性热暴露组SHR-8(n=9,每天接受任意连续8 h热暴露,其余时间饲养在与对照组相同的条件下)和持续性热暴露组SHR-24(n=9,持续暴露在32℃高温下)。进行自噬和通路干预的SHRs,分别于热暴露前30 min腹腔注射自噬激活剂Rapa,抑制剂3-MA和AMPK抑制剂Compound C(CC)。。通过苏木素-伊红染色(HE)观察大鼠胸主动脉形态的变化;利用Western blot和免疫荧光(IF)分别检测高血压大鼠胸主动脉自噬相关因子Beclin1、LC3B和p62的表达情况;利用TUNEL检测高血压大鼠胸主动脉凋亡的情况,Western blot检测Caspase-3,Bax和Bcl-2的表达情况;用自噬的激活剂和抑制剂干预高血压大鼠后,检测自噬和凋亡相关因子的表达情况;免疫组化(IHC)检测通路相关因子的表达情况,大鼠腹腔注射AMPK抑制剂Compound C(CC)后,进一步观察通路及自噬的表达情况。结果 HE染色显示,SHR-8组胸主动脉内膜排列分布不完整,细胞分布紊乱。Western blot显示Beclin1、LC3II/LC3I表达增高,p62降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。TUNEL结果表明SHR-8组中凋亡阳性细胞数明显高于对照组。Western blot表明热暴露后Bax表达升高,Bcl-2表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。3-MA抑制自噬的表达,同时凋亡表达降低,Rapamycin促进自噬和凋亡的表达。IHC显示,与SHR-CN相比,SHR-8组p-mTOR明显降低,p-AMPK和p-ULK1表达升高。腹腔注射CC降低了pAMPK和p-ULK1的表达,同时自噬相关因子LC3B和Beclin1表达降低。结论 不同热暴露下,间断性热暴露导致自发性高血压大鼠胸主动脉形态、自噬和凋亡相关因子表达变化显著,其作用机制可能是通过激活AMPK/mTOR/ULK1信号通路来实现的。

蛋白激酶Cs在咪达唑仑舒张自发性高血压大鼠主动脉平滑肌中的作用和机制

目的探讨蛋白激酶Cs(protein kinase C,PKCs)在咪达唑仑舒张自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)主动脉平滑肌中的作用和机制。方法利用离体血管环张力测定系统,观察咪达唑仑对SHR和Wistar-Kyoto(WKY)大鼠主动脉平滑肌的舒张作用。分别用PKCs广谱抑制剂GF109203X(GF)、PKCβ2特异性抑制剂LY333531(LY)和PKCθ假底物(PKCθpseudo-substrate inhibitor,PPS)预孵育后,观察咪达唑仑舒张幅度的变化。利用Western blot检测咪达唑仑对SHR主动脉平滑肌中PKCβ2磷酸化水平的影响,以及咪达唑仑、LY、GF和PPS对SHR主动脉平滑肌中钙敏感通路蛋白磷酸化水平的影响。结果咪达唑仑浓度依赖性地舒张SHR和WKY的主动脉平滑肌。GF明显抑制了咪达唑仑对SHR和WKY主动脉平滑肌的舒张幅度。LY和PPS对咪达唑仑舒张WKY主动脉平滑肌的幅度没有明显影响,而LY明显抑制了咪达唑仑舒张SHR主动脉平滑肌的幅度。咪达唑仑明显抑制了SHR主动脉平滑肌中NE诱导的PKCβ2磷酸化水平的升高。咪达唑仑、LY和GF均明显抑制了SHR主动脉平滑肌中NE诱导的钙敏感通路蛋白磷酸化水平的升高。结论咪达唑仑通过抑制PKCβ2介导的钙敏感通路,引起SHR主动脉平滑肌的过度舒张反应。

基于NOD样受体3/嘌呤能受体P2X7通路探讨芪蛭真武汤对盐敏感高血压肾病大鼠的机制

目的基于NOD样受体3(NLRP3)/嘌呤能受体P2X7(P2RX7)通路探讨芪蛭真武汤对盐敏感高血压肾病大鼠的机制。方法选取Dahl/SS盐敏感大鼠28只,按随机数字表法分为模型组、芪蛭真武汤高、常剂量组和阳性对照组,每组各7只,SS-13BN盐不敏对照大鼠(含有肾素基因13号染色体替换的大鼠)7只(空白对照组)。各组大鼠行HE和Masson染色和免疫组化反应。记录动物一般状态观察,肾脏指数,全自动生化分析仪检测血清肌酐、尿素氮,Western blot检测蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组大鼠血压明显升高,与模型组比较,中药不同剂量治疗组血压水平降低,其中阳性对照组呈现血压下降趋势;真武汤高剂量组治疗28 d后血压水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);真武汤常剂量组治疗第14、21天后血压水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组大鼠24 h尿蛋白、尿素氮和肌酐比较,模型组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);芪蛭真武汤高、常剂量组和阳性对照组较模型组有不同程度降低,常剂量组下降,差异有统计学意义(P<0.05);模型组较对照组肾间质增宽,肾小管出现散在的空泡状,有部分蓝色胶原纤维沉积;芪蛭真武汤高、常剂量组和阳性对照组胶原纤维沉积分数较模型组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组比较,模型组NLRP3、P2RX7、CCL2和IL-1β蛋白水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);芪蛭真武汤高、常剂量组和阳性对照的NLRP3、P2RX7、CCL2和IL-1β蛋白表达较空白对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),芪蛭真武汤常剂量组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对盐敏感高血压肾病大鼠应用芪蛭真武汤治疗,可有效改善大鼠肾组织病理损害,通过调控P2RX7/NLRP3通路降低大鼠炎症指标,改善盐敏感高血压肾病大鼠症状,以常剂量芪蛭真武汤效果最佳。

多种认知障碍的危险因素对高血压大鼠脑组织病理形态和铁含量的影响

目的 观察高脂、高盐、高糖饲料等多种危险因素结合高血压大鼠(SHR)造成认知障碍复合模型大鼠的脑组织病理形态和铁沉积的变化。方法 14周龄SPF级大鼠,每组8只,正常对照组(同遗传背景WKY大鼠,WKY组),SHR大鼠随机分4组:对照组(SHRs组)、高脂组(HFAT-SHRs组)、高盐组(HSAIL-SHRs组)、高糖-脂组(DM-SHRs组,同时给予1%的链脲佐菌素腹腔注射,以血糖含量检测在11.1 mmol/L以上作为糖尿病模型标准),WKY组和SHRs组予普通饲料,模型组分别予高脂、高盐和高糖饲料,干预32周。检测大鼠血清及脑组织铁含量的变化、光镜下观察大鼠脑组织病理形态和亚铁含量(普鲁士蓝染色)变化,ELISA法检测大鼠炎症因子水平、胆碱能水平和β-AP的含量。结果 与WKY组比较,各模型组大鼠脑组织存在细胞排列紊乱,细胞核固缩,尼氏小体减少或消失的情况,铁染色显示铁的面积增加,以DM-SHRs组更为显著;SHRs组与3个模型组大鼠乙酰胆碱(ACh)、乙酰胆碱酯酶(AChE)水平降低,白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平升高(P<0.05,P<0.05),血清和脑组织铁含量不同程度增加(P<0.05,P<0.05),组间比较无统计学意义(P>0.05)。结论 高脂、高盐和高糖因素能改变脑细胞组织形态,促使铁沉积,抑制内源性抗氧化活性,铁含量超载是高血压脑损害中导致认知障碍的可能因素之一。

黄连阿胶汤及其拆方对自发性高血压大鼠交感神经活性的影响

目的 探究黄连阿胶汤及其拆方对自发性高血压大鼠交感神经活性的影响。方法 将45只10周龄SPF级自发性高血压大鼠(SHR)按随机数字表法分为清热组(黄连黄芩组分)、滋阴组(阿胶赤芍组分)、全方组(黄连阿胶汤全方组分)、西药对照组(美托洛尔组)和空白对照组,每组各9只。灌胃药量全方组大鼠26.4 g/(kg·d),清热组大鼠14.4 g/(kg·d),滋阴组大鼠12 g/(kg·d),西药组大鼠8.1 g/(kg·d),空白对照组予等量蒸馏水灌胃,1次/d。连续灌胃4周后,观察比较各组大鼠静息状态下的收缩压(Systolic Blood Pressure, SBP)、舒张压(Diastolic Blood Pressure, DBP)、平均血压(Mean/Mid Blood Pressure, MBP)、心率;收集各组大鼠造模后的尿液和主动脉血,采用酶联免疫法(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测尿去甲肾上腺素(Noradrenaline, NE)排泄量和大鼠血清中神经肽Y(Neuropeptide, NPY)水平,以反映交感神经活性。结果 (1)心率:造模后,与西药组比较,滋阴组与全方组心率加快,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,清热组与西药组心率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)血压水平:造模后,与西药组比较,滋阴组与全方组SBP,MBP,DBP均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,清热组与西药组SBP,MBP,DBP均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)NPY:造模后,与西药组比较,滋阴组与全方组NPY升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,清热组与西药组NPY降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)NE:造模后,与空白对照组比较,清热组、滋阴组、全方组及西药组NE降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 黄连阿胶汤清热组分抑制SHR交感神经活性的作用较强,是产生降压及减慢心率的主要成分,滋阴组分及全方组分对抑制SHR交感神经活性的作用不明显。

蟠桃丸化裁方对自发性高血压大鼠血压的影响及作用机制探讨

目的:探讨蟠桃丸化裁方对自发性高血压大鼠(SHRs)的降压作用及可能机制。方法:以SHRs为动物模型,将其随机分为模型组、蟠桃丸化裁方高剂量组和蟠桃丸化裁方低剂量组,Wistar-Kyoto(WKY)大鼠为正常血压对照组,每组12只,雌雄各半,灌胃给药11周。通过尾套法监测大鼠收缩压和舒张压;使用Masson和苏木素-伊红(HE)染色法观察主动脉的病理形态学变化;采用放射免疫法检测血清中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮水平,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清肾素水平;蛋白质印迹法(Western Blot)分析主动脉的转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))、Smad3、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化Smad3(p-Smad3)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)蛋白表达水平。结果:蟠桃丸化裁方对SHRs的血压可能有一定的调节作用,能够改善其主动脉结构,降低血清醛固酮水平(P<0.05);蟠桃丸化裁方可分别上调主动脉p-PI3K及p-Akt、下调主动脉p-ERK1/2及p-Smad3的蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论:蟠桃丸化裁方可能通过调节TGF-β1/Smad3、ERK1/2、PI3K/Akt信号通路及肾素-血管紧张素-醛固酮(RAAS)系统,发挥调节SHRs血压、改善主动脉重构的作用。

基于16S rDNA测序探究电针干预对自发性高血压大鼠肠道菌群的影响

目的:通过检测电针双侧足三里对自发性高血压大鼠(SHR)肠道菌群的影响,分析其降压的可能机制。方法:12周龄的雄性SHR随机分成模型组、电针组,同周龄雄性WKY大鼠作为对照组,每组10只。电针组用自制鼠袋捆绑固定后于每天09:00:00—12:00:00给予电针刺激,连续5 d,休息2 d,共持续6周,对照组和模型组采用和电针组相同的方法固定,不进行干预。干预结束后,观察3组大鼠血压变化,并收集大鼠大肠内容物(新鲜粪便),选用16S rDNA测序进行生物信息分析。结果:3组大鼠不同时间点收缩压总体比较,差异有统计学意义(P<0.05),对照组大鼠收缩压随时间推进变化不明显(P>0.05),模型组和电针组大鼠收缩压随时间推进分别呈现明显升高和下降趋势(P<0.05)。3组大鼠在各时间点收缩压总体比较,差异有统计学意义(P<0.05)。干预前电针组大鼠收缩压与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其余各时间点电针组大鼠收缩压均明显低于模型组(P<0.05),且电针组和模型组大鼠在各时间点的收缩压均明显高于对照组(P<0.05)。时间因素与分组因素之间存在交互效应(P<0.05)。Simpson指数表明,与对照组比较,模型组大鼠肠道菌群多样性降低(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠肠道菌群多样性明显升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)F/B值明显升高(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)F/B值明显降低(P<0.05)。在菌群属水平构成方面,SHR具有较高水平的乳酸产生菌(Lactobacillus、Turicibacter)与较低水平的与降压相关的短链脂肪酸(SCFAs)产生菌(Ruminococcus、Anaerostipes和Prevotellaceae_Ga6A1_group)丰度,电针干预后上述菌群丰度回调,且Ruminococcus、Anaerostipes和Prevotellaceae_Ga6A1_group可能是电针发挥降压作用的关键菌属。结论:电针可能是通过调节肠道菌群结构和组成,重塑肠道动态平衡,增加降压相关SCFAs产生菌与降低乳酸产生菌而发挥降压作用。