补肾化痰祛瘀类中药对PCOS模型大鼠生殖内分泌系统影响的实验研究

目的:观察PCOS模型大鼠血清性激素T、FSH、LH及卵巢重量、面积的变化,探讨补肾化痰祛瘀类中药对PCOS模型大鼠生殖内分泌系统的影响。方法:用Poresky法诱导多囊卵巢综合征大鼠,并分别以补肾化痰祛瘀类中药、西药(罗格列酮)、中西药联合用药治疗,观察治疗后对血清性激素T、FSH、LH的影响以及卵巢重量和面积的变化。结果:补肾化痰祛瘀类中药能降低降低血清T、LH水平,以及降低LH/FSH比值,降低卵巢重量及卵巢平均面积。结论:补肾化痰祛瘀类中药能改善PCOS大鼠的生殖内分泌功能。

Ki-67在肥胖PCOS大鼠模型卵巢颗粒细胞中的表达研究

目的:探讨子宫内膜生存素Ki-67在肥胖多囊卵巢综合(PCOS)大鼠模型卵巢颗粒细胞中的表达。方法:分别在来曲唑(Letrozole)和脱氢表雄酮(DHEA)造模基础上加用高脂乳剂,建立肥胖PCOS动物模型,结合血清性激素、大鼠处死时体重增加幅度及脏器指数改变进行模型验证,选用免疫组织化学法检测大鼠模型卵巢组织卵泡颗粒细胞中Ki-67的表达。结果:模型建立成功。Letrozole模型组和DHEA模型组Ki-67积分光密度总和、平均灰度均值显著低于空白对照组(P<0.05),此外,Letrozole肥胖模型组和DHEA肥胖模型组Ki-67积分光密度总和、平均灰度均值极显著低于空白对照组和高脂模型组(P<0.01);Letrozole肥胖模型组Ki-67平均灰度均值显著低于Letrozole模型组(P<0.05),DHEA肥胖模型组Ki-67平均灰度均值显著低于DHEA模型组(P<0.05),差异有统计学意义。结论:Ki-67在PCOS大鼠模型卵巢的卵泡颗粒细胞中表达降低可能是PCOS发生发展的重要原因,且Ki-67在肥胖PCOS大鼠模型卵巢卵泡颗粒细胞中表达降低更明显。

模拟肾虚痰湿特征信息PCOS大鼠模型中GDF-9、BMPR-2的表达研究

目的:探讨生长分化因子-9(GDF-9)及骨形态发生蛋白受体-2(BMPR-2)在有肾虚痰湿特征信息的肥胖多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型的卵巢颗粒细胞中的表达。方法:分别在来曲唑(Letrozole)和脱氢表雄酮(DHEA)造模基础上加用高脂乳剂,建立肥胖PCOS动物模型,结合阴道脱落细胞涂片、大鼠体质量增加幅度、血脂水平和卵巢形态学的改变进行模型验证,选用免疫组化法检测大鼠模型卵巢组织卵泡颗粒细胞中GDF-9、BMPR-2的表达。结果:模型建立成功,Letrozole模型组、Letrozole肥胖模型组GDP-9积分光密度总和均显著低于高脂模型组。此外,Letrozole肥胖模型组GDP-9平均灰度均值低于高脂模型组,DHEA模型组和DHEA肥胖模型组GDF-9积分光密度总和均显著高于空白对照组,Letrozole模型组BMPR-2积分光密度总和均显著高于高脂模型组,DHEA模型组BMPR-2积分光密度总和显著高于高脂模型组。结论:推测GDF-9、BMPR-2在肥胖PCOS大鼠模型卵巢的卵泡颗粒细胞中表达降低可能是肥胖PCOS发生发展的重要原因。

补肾调经汤对PCOS大鼠血清激素水平影响的实验研究

观察补肾调经汤对多囊卵巢综合症(PCOS)大鼠卵巢分泌激素LH、FSH、T值的影响。总结其临床疗效,探索其作用机理,为其临床应用提供科学依据。方法:规律发情周期SD雌性大鼠50只,应用人绒毛膜促性腺激素(HCG)联合胰岛素(INS)造模法制作为动物模型,随机分为正常对照组、模型对照组、二甲双胍组、补肾调经汤低剂量组、补肾调经汤高剂量组。运用放射免疫法测定血清性激素水平的变化。结果:补肾调经汤高剂量组通过调整内分泌,降低血清T、LH水平,以及降低LH/FSH比值,此可能是临床治疗多囊卵巢综合症高雄激素血症和高LH方法之一。

不同造模方法对大鼠多囊卵巢综合征模型的影响

目的采用不同方法诱导SD清洁级雌性大鼠多囊卵巢综合征(PCOS)动物模型,造模完成后检测大鼠血清相关激素并观察卵巢局部形态学改变,并探讨其意义。方法分别采用来曲唑、硫酸普拉睾酮钠、硫酸普拉睾酮钠联合HCG诱导大鼠PCO模型,RIA法测定血清LH、FSH、E2、P、T、PRL、INS水平,HE染色后光镜下观察卵巢局部形态。结果A组(对照组)和B组(来曲唑组)比较,B组较A组血清FSH浓度升高,血清P浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05);B组血清T浓度较A组明显升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。D组(硫酸普拉睾酮钠组)与C组(对照组)比较,两组间血清性激素及INS差异无显著性(P>0.05)。E组(硫酸普拉睾酮钠联合HCG组)与C组比较,E组血清T浓度、LH/FSH比值较C组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。E组与D组比较,血清P、T浓度升高,差异有统计学意义(P<0.05)。A、C两组卵巢局部形态基本正常,可见发育成熟的卵泡及优势卵泡,B、D、E三组未见优势卵泡,均可见卵巢多囊样改变。结论使用来曲唑或硫酸普拉睾酮钠联合HCG诱导大鼠PCOS模型,无论在影响血清性激素还是卵巢局部形态学改变方面与临床表现很接近,符合动物PCOS造模要求。

不同造模方法对大鼠多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗模型的影响

目的:采用不同方法诱导SD清洁级雌性大鼠多囊卵巢综合征(PCOS)伴胰岛素抵抗(IR)动物模型,造模完成后检测大鼠血清相关激素、空腹血糖(FPG)及空腹胰岛素(FINS)并观察卵巢局部形态学改变。方法:分别采用来曲唑、脱氢表雄酮、左旋-十八甲基炔诺酮硅胶棒联合HCG诱导大鼠PCOS伴IR模型,ELISA法测定血清促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、空腹胰岛素(FINS)水平,并用血糖仪测定FPG,HE染色后光镜下观察卵巢局部形态。结果:A组(对照组)和B组(来曲唑组)比较,B组较A组血清FSH、FINS及T浓度升高,差异有统计学意义(P<0.05);B组血清LH浓度较A组明显升高,差异有显著统计学意义(P<0.05)。D组(左旋-十八甲基炔诺酮硅胶棒联合HCG组)与C组(对照组)比较,D组血清LH、E2浓度较C组升高,差异有统计学意义(P<0.05);D组T浓度较C组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。E组(脱氢表雄酮组)中途失败剔除。A、C 2组卵巢局部形态基本正常,可见发育成熟的卵泡及优势卵泡,B、D二组未见优势卵泡,均可见卵巢多囊样改变。结论:使用来曲唑或左旋-十八甲基炔诺酮硅胶棒联合HCG诱导大鼠PCOS伴IR模型,无论在影响血清激素及FPG、FINS,还是卵巢局部形态学改变方面与临床表现很接近,符合动物PCOS伴IR造模要求。

改良多囊卵巢综合征大鼠模型卵泡颗粒细胞中凋亡调控蛋白Bcl-2 Bax表达的研究

目的:探讨凋亡调控蛋白Bcl-2和Bax在改良多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型卵巢的卵泡中颗粒细胞中的表达。方法:分别在来曲唑(Letrozole)和脱氢表雄酮(DHEA)造模基础上加用高脂乳剂,建立改良PCOS动物模型,结合阴道脱落细胞涂片、大鼠血清性激素水平、处死时体重增加幅度和卵巢形态学的改变进行模型验证,选用免疫组织化学法检测大鼠卵巢组织Bcl-2、Bax的表达。结果:模型建立成功。免疫组织化学结果显示高脂模型组、Letrozole模型组、Letrozole改良组、DHEA模型组和DHEA改良组Bax平均灰度均值均高于空白对照组,Bcl-2平均灰度均值均低于空白对照组,差异无统计学意义。结论:Bcl-2在卵巢的卵泡颗粒细胞中表达下调,Bax表达上调,推测两者表达改变可能是导致改良PCOS模型大鼠卵巢中颗粒细胞凋亡增多的关键因素。

PGC-1ɑ在多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢组织的表达变化

目的 探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠模型及肥胖PCOS大鼠模型卵巢组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α(PGC-1α)的表达,以及PCOS发生的可能机制.方法 SD大鼠30只,随机分为对照组、PCOS组及肥胖PCOS组,PCOS两组大鼠每日一次予脱氢表雄酮〔DHEA,60 mg/(kg·d)〕溶于0.2 mL注射用大豆油中皮下注射,共21 d,制备PCOS模型,肥胖PCOS模型组大鼠在DHEA制模基础上加入高脂饮食,每组大鼠各10只.造模前(0 d)和造模后第22天称体质量,取腹主动脉血检测血清睾酮(testosterone,T)水平,取大鼠卵巢组织,HE染色观察组织形态学改变,免疫组织化学染色和Western blot检测PGC-1ɑ蛋白表达.结果 造模前3组大鼠体质量差异无统计学意义,造模后第22天,大鼠增加的体质量以及大鼠血清T质量浓度,均为肥胖PCOS组>PCOS组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).大鼠卵巢组织HE染色结果显示,对照组大鼠卵巢组织镜下可见不同发育时期的卵泡和少量黄体,颗粒细胞排列多为4~6层;PCOS组及肥胖PCOS组大鼠卵巢组织中未成熟的小卵泡数量明显增加,颗粒细胞1~3层排列、较松散,部分卵泡闭锁,肥胖PCOS组大鼠卵巢闭锁卵泡直径增大,颗粒细胞层数减少,卵母细胞消失等现象更明显.免疫组化染色结果显示,对照组大鼠卵巢组织PGC-1ɑ蛋白阳性表达主要分布于卵丘及颗粒细胞.从PGC-1ɑ蛋白在卵巢组织的表达平均灰度均值来看,PCOS组(0.53±0.06)和肥胖PCOS组(0.36±0.03)均低于对照组(0.75±0.03),差异有统计学意义(P<0.05),肥胖PCOS组PGC-1ɑ表达低于PCOS组(P<0.01).Western blot检测结果与免疫组化染色结果一致.结论 PGC-1ɑ表达降低与高脂环境下卵巢颗粒细胞损伤有关.PGC-1ɑ在卵巢卵泡的颗粒细胞中表达降低可能是PCOS发生发展的重要原因.