半胱氨酸天冬氨酸酶3在遗传性视网膜变性中的表达(英文)

目的 观察半胱氨酸天冬氨酸酶3（caspase 3）mRNA在RCS大鼠视网膜中的表达,分析caspase 3特异抑制剂 Ac-DEVD-CHO对视细胞凋亡的影响。方法 应用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）检测RCS大鼠出生后不同时间视网膜中caspase3 mRNA的表达。应用TUNEL方法检测玻璃体内注射Ac-DEVD-CHO后视细胞凋亡的改变。结果RCS大鼠出生后14天至60天视网膜 caspase 3 mRNA均有表达,25天水平明显升高,达到高峰。SD大鼠视网膜15至60天的表达量无明显差异,与RCS大鼠14天水平接近。caspase 3特异抑制剂 Ac-DEVD-CHO能显著抑制视细胞凋亡。结论 caspase 3可能在 RCS大鼠视网膜变性视细胞凋亡中起关键作用。

依托咪酯对视神经损伤成年大鼠视网膜神经节细胞的保护作用及对半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、脑源性神经营养因子蛋白表达的影响

目的:探讨依托咪酯对视神经损伤成年大鼠视网膜神经节细胞的保护作用及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达的影响。方法:选择成年雄性SD大鼠40只,随机选8只为正常照组,其余32只采用动脉夹夹持法损伤视神经建立视神经损伤模型并分组,即模型组(视神经损伤大鼠),依托咪酯低、中、高剂量组(依托咪酯腹腔注射),剂量分别为2、4、6 mg/kg。分析比较干预后各组大鼠眼压变化。并行HE染色观察视网膜组织结构,比较各组大鼠视网膜神经节细胞(RCGs)存活数目及存活率,Western blot法检测视网膜组织中Caspase-3、BDNF蛋白表达。结果:模型组、依托咪酯各组眼压高于正常组,依托咪酯各组末次给药后眼压降低,且呈剂量依赖性(均P<0.05)。模型组大鼠视网膜水肿增厚,以神经纤维层最为明显,且有空泡,RGC细胞肿胀,内、外核层细胞数量减少,排列紊乱。依托咪酯各组视网膜病理损伤均有改善,高剂量组好于中剂量组,中剂量组好于低剂量组。与正常组比较,模型组大鼠RCGs存活数目减少(P<0.05),与模型组比较,依托咪酯各组RCGs存活数目增多(P<0.05)。依托咪酯高剂量组RCGs存活数目、相对存活率高于中、低剂量组(均P<0.05)。正常组大鼠视网膜组织中BDNF蛋白表达高于模型组,Caspase-3低于模型组,依托咪酯各组视网膜组织中BDNF升高,Caspase-3下降,均呈剂量依赖性(均P<0.05)。结论:Caspase-3蛋白在大鼠视神经损伤中表达升高,BDNF蛋白表达降低,依托咪酯干预能够促进视网膜RGCs存活,对视神经损伤具有保护作用。

西洛他唑对全脑缺血大鼠海马磷酸化蛋白激酶B及半胱氨酸天冬酶-3表达的影响

目的研究西洛他唑对全脑缺血大鼠海马磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)及半胱氨酸天冬酶-3(caspase-3)的影响。方法用四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。将112只(模型成功率为75(,死亡后补充动物)约300g的健康成年SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=16)、缺血模型对照组(n=48)及治疗组(n=48)。治疗组于缺血前6h和2h各灌胃给予1次西洛他唑,以后每隔24h在相应时间点给药,其它各组灌胃给予等量二甲基亚砜。缺血模型对照组和治疗组于缺血10min再灌注0h、1h、12h、24h、72h、7d后断头取脑,免疫组织化学方法分析再灌注后不同时间点海马CA1区p-Akt和再灌注后caspase-3表达水平的变化。结果全脑缺血后0h、1h,治疗组海马CA1区p-Akt平均光密度值明显高于模型组(P<0.01;P<0.05)。缺血后24h、72h、7d,治疗组海马CA1区caspase-3平均阳性细胞数明显低于模型组(P<0.05)。结论西洛他唑可以降低大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区caspase-3表达水平,并可抑制再灌注后p-Akt水平的急剧降低。

砷对大鼠生精细胞半胱氨酸天冬氨酸酶-3表达及血清中黄体生成素浓度的影响

目的研究亚慢性砷中毒对大鼠睾丸生精细胞半胱氨酸天冬氨酸酶-3(caspase-3)表达及血清黄体生成素(LH)的影响。方法将40只健康成年清洁级SD雄性大鼠随机分为4组,分别为对照组(蒸馏水)组和0.4、2、10 mg/kg亚砷酸钠染毒组,每组10只,采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒14周。测定大鼠血清LH浓度及生精细胞caspase-3阳性率。结果与对照组比较,各剂量亚砷酸钠染毒组大鼠生精细胞caspase-3阳性率均较高,2、10 mg/kg亚砷酸钠染毒组大鼠血清LH浓度均较低,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);且随着亚砷酸钠暴露剂量的升高,大鼠生精细胞caspase-3阳性率呈上升趋势,血清LH浓度呈下降趋势。结论砷暴露导致的生精细胞caspase-3表达增加可能是其雄性生殖毒性效应的机制之一。

锰对大鼠生精细胞半胱氨酰天冬氨酸酶-3和细胞色素C表达的影响

目的研究锰对大鼠生精细胞中半胱氨酰天冬氨酸酶-3(caspase-3)和细胞色素C(cytochrome-c)表达的影响。方法将健康雄性清洁级SD大鼠48只随机分为高(30mg/kg)、低剂量(15mg/kg)MnCl2染毒组和空白对照组(生理盐水),每组16只。采用腹腔注射方式染毒,每天1次,每周5天,连续染毒6周。分别于染毒第4、6周末称重,处死大鼠,分离睾丸,采用免疫组化法检测睾丸生精细胞中caspase-3与cytochrome-c的阳性细胞率。并进行病理学观察。结果与空白对照组比较,高、低剂量MnCl2染毒组大鼠生精细胞中caspase-3阳性细胞率均升高,cytochrome-c阳性细胞率均降低,差异有统计学意义(P<0.01);且随着锰染毒剂量的升高,大鼠生精细胞中caspase-3阳性细胞率呈上升趋势,cytochrome-c阳性细胞率呈下降趋势。与染锰第4周比较,高、低剂量MnCl2染毒组第6周大鼠生精细胞中caspase-3阳性细胞率均升高,cytochrome-c阳性细胞率均降低,差异有统计学意义(P<0.01)。直线相关分析发现,各组大鼠生精细胞caspase-3阳性细胞率与cytochrome-c阳性细胞率呈显著负相关(r=-0.876,P<0.01)。结论染锰可通过线粒体途径促进大鼠生精细胞caspase-3表达,而降低cytochrome-c表达,且存在一定的剂量-效应和时间-效应关系。这可能是导致大鼠生精障碍的主要机制之一。

血清同型半胱氨酸和半胱氨酸天冬酶-3水平与慢性阻塞性肺疾病患者认知障碍的关系研究

背景血清同型半胱氨酸(Hcy)和半胱氨酸天冬酶-3(caspase-3)水平与神经退行性病变有关,但二者与慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者认知障碍的关系尚未明确。目的分析血清Hcy和caspase-3水平与COPD患者认知障碍的关系。方法选取2016年1月—2019年6月邯郸市中心医院呼吸内科收治的COPD患者156例作为病例组,根据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分将其分为A组58例(认知功能正常)、B组65例(轻度认知障碍)及C组33例(中重度认知障碍);另选取同期体检健康者150例作为对照组。比较病例组和对照组受试者动脉血气分析指标〔包括动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)及pH值〕、肺功能指标〔包括第1秒用力呼气容积(FEV1)、呼气峰值流速(PEF)、最大呼气中段流量(MMEF)及用力肺活量(FVC)〕、MoCA评分,对照组、A组、B组、C组受试者血清Hcy、caspase-3水平;血清Hcy和caspase-3水平与COPD患者MoCA评分的相关性分析采用Pearson相关分析;绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)以评价血清Hcy和caspase-3水平对COPD患者认知障碍的预测价值。结果(1)病例组患者PaO2、pH值低于对照组,PaCO2高于对照组,FEV1和FVC小于对照组,PEF和MMEF慢于对照组(P<0.05)。(2)病例组患者视空间与执行功能、命名、记忆、注意、语言、抽象思维、延时回忆、定向评分及MoCA总分均低于对照组(P<0.05)。(3)A组、B组、C组患者血清Hcy和caspase-3水平高于对照组,B组和C组患者血清Hcy和caspase-3水平高于A组,C组患者血清Hcy和caspase-3水平高于B组(P<0.05)。(4)Pearson相关分析结果显示,血清Hcy、caspase-3水平与COPD患者MoCA评分呈负相关(r值分别为-0.553、-0.567,P<0.01)。(5)ROC曲线显示,血清Hcy水平预测COPD患者认知障碍的曲线下面积(AUC)为0.781〔95%CI(0.695,0.886)〕,最佳截断值为13.56 ng/L,灵敏度、特异度分别为70.75%、92.62%;血清caspase-3水平预测COPD患者认知障碍的AUC为0.776〔95%CI(0.691,0.873)〕,最佳截断值为7.83 ng/L,灵敏度、特异度分别为71.34%、91.08%。结论血清Hcy和caspase-3水平与COPD患者认知功能呈负相关,且二者均对COPD患者认知障碍具有一定预测价值。

染锰大鼠生精细胞凋亡中caspase-3 mRNA、凋亡蛋白酶活化因子-1及多聚ADP核糖聚合酶的表达变化

目的:研究染锰诱导的大鼠生精细胞凋亡过程中,天冬氨酸特异性半胱氨酸酶-3(caspase-3)mRNA和凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)、多聚ADP核糖聚合酶(PARP)的表达及其关系,探讨它们在生精细胞凋亡过程中的作用。方法:雄性SD大鼠,设立空白对照组、低剂量(15 mg/kg MnCl_2)和高剂量(30 mg/kg MnCl_2)组。实验组分别染锰4周和6周,空白对照组给予等容生理盐水,给药途径均为腹腔注射,TUNEL法检测生精细胞凋亡,原位杂交法和免疫组织化学法检测生精细胞caspase-3 mRNA、Apaf-1和PARP的表达。结果:与空白对照组比较,各染锰组生精细胞凋亡指数(AI)和caspase-3mRNA阳性细胞率均显著升高,Apaf-1和PARP阳性细胞率均显著降低。染锰剂量相同,6周与4周组比较,以及染锰时间相同,高剂量组与低剂量组比较,生精细胞AI和caspase-3 mRNA阳性细胞率均显著升高,Apaf-1和PARP阳性细胞率均显著降低。各组大鼠生精细胞AI与caspase-3 mRNA阳性细胞率呈正相关,与Apaf-1和PARP阳性细胞率呈负相关。结论:锰可影响大鼠生精细胞caspase-3 mRNA表达,促进Apaf-1和PARP分解,导致生精细胞凋亡,产生生殖毒性效应。

宫颈癌组织中钙激活中性蛋白酶6的表达及其与半胱氨酸天冬氨酸酶-3和微血管密度的相关性研究

目的探讨宫颈癌组织中钙激活中性蛋白酶6(Calpain 6)的表达及其与半胱氨酸天冬氨酸酶-3(caspase-3)和微血管密度(MVD)的相关性。方法选择2011年1月-2015年12月安吉县人民医院(浙江医院安吉分院)妇产科宫颈癌组织标本120例作为宫颈癌组,正常宫颈标本120例作为对照组。采用免疫组化法测定组织中Calpain 6、caspase-3和MVD表达。结果宫颈癌组Calpain 6阳性率明显高于对照组(P<0.05),宫颈癌组caspase-3阳性率明显低于对照组(P<0.05),宫颈癌组MVD水平高于对照组(P<0.05)。有淋巴结转移、低分化、宫颈癌Ⅲ期者Calpain 6阳性率高于无淋巴结转移、中-高分化、宫颈癌Ⅰ~Ⅱ期者(P<0.05)。低分化者caspase-3阳性率低于中-高分化者(P<0.05)。有淋巴结转移、低分化程度、FIGO分期Ⅲ期、腺癌者的MVD水平高于无淋巴结转移、中-高分化程度、FIGOⅠ~Ⅱ期、鳞癌者(P<0.05)。宫颈组织中Calpain 6与caspase-3呈负相关(P<0.05),与MVD呈正相关(P<0.05)。结论宫颈癌组织中Calpain 6阳性率和MVD水平升高,caspase-3阳性率下降,宫颈组织中Calpain 6与caspase-3呈负相关,与MVD呈正相关。

牵张性脊髓损伤后神经细胞中Caspase-3表达及其作用的实验研究

目的:观察大鼠牵张性脊髓损伤后脊髓神经细胞中半胱氨酸天冬氨酶3(Caspase-3)的表达及其在神经细胞凋亡中的作用.方法:大鼠脊髓T13～L2经牵张损伤,皮层体感诱发电位监测P1-N1波幅下降至术前波幅70%后维持10min,分别于术后6h、1、4、7、14、21d处死取材.采用流式细胞仪、原位末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法(TUNEL法)、免疫组织化学检测等方法观察大鼠脊髓神经细胞中Caspase-3表达变化及神经细胞凋亡情况,测定Caspase-3活性.结果:脊髓损伤后神经细胞凋亡率、TUNEL阳性细胞数、Caspase-3免疫组织化学阳性表达及Caspase-3活性测定均较空白对照组及椎板切除组显著升高(P＜0.05或0.01),前三项指标改变趋势大致相同,均为术后7d达高峰,而Caspase-3活性则术后4d达高峰.结论:大鼠牵张性脊髓损伤后神经细胞中Caspase-3表达增高、Caspase-3活性增强,是检测神经细胞凋亡的早期生物学指标,对认识脊髓损伤机制具有一定的意义.

乳腺浸润性导管癌组织中Caspase-3、XIAP、Smac的表达及意义

目的观察乳腺浸润性导管癌组织中含半光氨酸的天冬氨酸酶3(Caspase-3)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及第二个线粒体衍生的半胱氨酸蛋白酶激动剂(Smac)的表达变化,探讨乳腺浸润性导管癌的可能发病机制。方法选取71例乳腺浸润性导管癌患者,进行高、中、低病理组织分级,采用免疫组化SP法检测癌组织中的Caspase-3、XIAP、Smac表达。结果 Caspase-3、XIAP、Smac在高分化组织中的阳性表达率分别为76.2%(16/21)、42.9%(9/21)、85.7%(18/21),在中分化组织中的阳性表达率分别为69.7%(23/33)、45.5%(15/33)、84.8%(28/33),在低分化组织中的阳性表达率分别为35.3%(6/17)、82.4%(14/17)、47.1%(8/17),高、中分化癌组织中Caspase-3、Smac阳性表达程度明显高于、XIAP明显低于低分化癌组织(P<0.05)。Caspase-3与XIAP表达呈负相关(rs=-0.81,P<0.05),Caspase-3与Smac表达呈正相关(rs=0.79,P<0.05),XIAP与Smac表达呈负相关(rs=-0.69,P<0.05)。结论乳腺浸润性导管癌组织中Caspase-3、Smac蛋白低表达甚至缺失,XIAP蛋白过表达,三者可能在促进乳腺浸润性导管癌的发生发展中起重要作用。

甲钴胺对大鼠缺血-再灌注损伤神经细胞凋亡及Caspase-3 mRNA表达的影响

目的探讨甲钴胺对缺血-再灌注大鼠脑组织半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)mRNA表达的影响。方法将大鼠按随机原则分为假手术组、模型对照组、尼莫地平组、甲钴胺小剂量组、甲钴胺大剂量组,每组30只。假手术组与模型对照组分别灌胃给予0.9%氯化钠溶液20 m L·kg^(-1)·d^(-1);尼莫地平组灌胃尼莫地平1 mg·kg^(-1)·d^(-1);甲钴胺小、大剂量组分别灌胃甲钴胺50,100μg·kg^(-1)·d^(-1),给药1周。采用线栓法栓塞大脑中动脉3 h制作大鼠脑缺血-再灌注模型;观察再灌注24 h后神经功能缺损评分,于6,12,24 h用TUNEL法检测顶叶皮质细胞凋亡、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Caspase-3 mRNA的表达。结果模型对照组神经功能缺损评分为(2.70±0.52)分,尼莫地平组、甲钴胺小剂量组、甲钴胺大剂量组分别为(1.30±0.51),(2.20±0.75),(1.30±0.81)分,与模型对照组比较,均差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与尼莫地平组比较,甲钴胺大剂量组差异无统计学意义(P>0.05),与甲钴胺小剂量组比较,甲钴胺大剂量组差异有统计学意义(P<0.05)。尼莫地平组、甲钴胺小、大剂量组各时间点神经细胞凋亡较模型对照组明显减少;甲钴胺大剂量组24 h时较尼莫地平组差异有统计学意义(P<0.01);6~24 h较甲钴胺小剂量组差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。假手术组Caspase-3 mRNA少量表达,与假手术组比较,模型对照组6~24 h Caspase-3 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.01);与模型对照组比较,尼莫地平组、甲钴胺大、小剂量组6~24 h Caspase-3 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与尼莫地平组比较,甲钴胺大、小剂量组各时间点Caspase-3 mRNA差异无统计学意义(P>0.05),与甲钴胺小剂量组比较,甲钴胺大剂量组于24 h差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲钴胺对脑缺血-再灌注损伤保护机制与抑制Caspase-3 mRNA表达有关,且以大剂量效果较好。

不同基因分型乳腺癌中Caspase-3、XIAP、Smac表达情况及与临床病理参数的关系

目的探讨天冬氨酸酶3(Caspase-3)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、第二个线粒体衍生半胱氨酸蛋白酶激动剂(Smac)在不同基因分型乳腺癌中表达情况,及其与乳腺癌临床病理参数的相关性。方法选取行手术切除治疗的73例乳腺癌患者为研究对象,其中Luminal A型30例,Luminal B型12例,HER-2过表达型9例,BLBC型22例,同期取20例癌旁正常乳腺组织作为对照组,采用免疫组织化学(SP)方法检测乳腺组织中Caspase-3、XIAP、Smac蛋白表达情况,分析三者在不同基因分型乳腺癌中表达水平及其与乳腺癌病理参数的相关性。结果乳腺癌组织中Caspase-3蛋白阳性表达率为39.73%(29/73),明显低于癌旁正常乳腺组织Caspase-3蛋白阳性表达率90.00%(18/20),差异有统计学意义(P <0.05)。乳腺癌组织中XIAP蛋白阳性表达率为86.30%(63/73),明显高于癌旁正常乳腺组织XIAP蛋白阳性表达率40.00%(8/20)(P <0.05)。乳腺癌组织中Smac蛋白阳性表达率为31.51%(23/73),明显低于癌旁正常乳腺组织Smac蛋白阳性表达率95.00%(19/20)(P <0.05)。Caspase-3、XIAP、Smac蛋白表达在Luminal A型、HER-2过表达型、BLBC型之间两两比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。Caspase-3、XIAP、Smac蛋白表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小、绝经情况无关(P> 0.05),与TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(P <0.05)。Spearman相关性分析结果显示,乳腺癌组织中Caspase-3与XIAP蛋白表达呈明显负相关(γ=-0.796,P <0.01),与Smac蛋白表达呈明显正相关(γ=0.803,P <0.01),XIAP与Smac蛋白表达呈明显负相关(γ=-0.712,P <0.01)。结论 Caspase-3、Smac蛋白在乳腺癌组织中明显低表达,XIAP蛋白呈明显高表达,三者与乳腺癌基因分型、发生发展密切相关。

RCS大鼠视网膜中caspase 3 mRNA的表达

目的观察半胱氨酸天冬氨酸酶３ （ｃａｓｐａｓｅ ３） ｍＲＮＡ在ＲＣＳ大鼠视网膜中的表达，分析ｃａｓｐａｓｅ ３ ｍＲＮＡ表达与ＲＣＳ大鼠视网膜发育的关系。 方法应用逆转录－多聚酶连反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＲＣＳ大鼠出生后不同时间视网膜中ｃａｓｐａｓｅ ３ ｍＲＮＡ的表达。结果ＲＣＳ大鼠出生后１４～６０天视网膜ｃａｓｐａｓｅ ３ ｍＲＮＡ均有表达，２５天ｃａｓｐａｓｅ ３ ｍＲＮＡ水平明显升高，达到高峰。ＳＤ大鼠视网膜１５～６０天的表达量无明显差异，与ＲＣＳ大鼠１４天水平接近。结论ｃａｓｐａｓｅ ３ ｍＲＮＡ的表达升高可能对ＲＣＳ大鼠视网膜变性中细胞凋亡起着关键的作用。

马齿苋多糖干预大鼠溃疡性结肠炎Caspase-3 Caspase-8表达的研究

目的:观察大鼠溃疡性结肠炎结肠黏膜上皮细胞凋亡及其凋亡关键酶Caspase-3、Caspase-8的表达,以及马齿苋多糖对上述指标的影响,探讨马齿苋多糖干预溃疡性结肠炎的效应机制。方法:48只雄性SD大鼠按体重随机分为正常组、模型组、治疗组,对照组,每组12只。用5%2,4,6TNBs100mg/kg灌肠建立大鼠UC模型,第3天开始,除正常组外,各组分别给予等剂量0.9%氯化钠、马齿苋多糖,惠迪(美沙拉嗪)处理,连续给药7天后处死动物。应用HE染色结合肉眼评价各组大鼠组织病理学变化;应用TUNEL染色技术检测结肠上皮细胞凋亡率;应用免疫组化染色技术检测Caspase-3、Caspase-8阳性表达。结果:结肠组织形态学评分表明,治疗组与对照组比较,无统计学意义(P>0.05);治疗组与模型组相比,有统计学意义(P<0.01)。治疗组结肠黏膜上皮细胞凋亡呈下降趋势,与模型组比较,有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,无统计学意义(P>0.05)。治疗组Caspase-3、Caspase-8蛋白阳性表达减少,与模型组比较,有统计学意义(P>0.05);与对照组比较,无统计学意义(P>0.05)。结论:马齿苋多糖可能通过下调结肠黏膜上皮细胞凋亡关键调控酶Caspase-3、Caspase-8的表达,延缓肠上皮细胞凋亡,促进肠黏膜屏障修复,发挥缓解溃疡性结肠炎的效应。

清肠栓对大鼠溃疡性结肠炎caspase-3影响的研究

目的:观察大鼠溃疡性结肠炎结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及其凋亡调控关键酶caspase-3的表达以及清肠栓对相关表达的影响,探讨清肠栓(马齿苋、青黛、三七、五倍子)治疗溃疡病性结肠炎的作用机制。方法:64只SD大鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、SASP组、清肠栓组,每组各16只。除正常组外,其余大鼠用5%2,4,6-三硝基苯磺酸100 mg/kg灌肠建立大鼠溃疡性结肠炎模型后,分别予0.9%生理盐水、SASP、清肠栓处理7 d后,处死大鼠。运用电镜,免疫组化染色、RT-PCR、Western-blot等技术,分别检测溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及固有层淋巴细胞caspase-3的表达。结果:清肠栓组结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡呈上升趋势;其结肠黏膜固有层淋巴细胞上caspase-3的表达率上升,与模型蛆相比(P<0.01)。结论:清肠栓可能增加结肠黏膜淋巴细胞凋亡效应酶caspase-3表达,诱导结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡,降低淋巴细胞毒作用,缓解大鼠溃疡性结肠炎效应。

Livin、Caspase-3、MTA1在结肠癌组织中的表达及相关性的研究

目的探讨Livin、Caspase-3及MTA1蛋白的表达与结肠癌的临床病理学特征的关系,以及它们三者之间的相互关系。方法采用免疫组织化学染色方法检测88例结肠癌组织中Livin,Caspase-3及MTA1的表达情况。结果(1)结肠癌组织中Livin的阳性表达率显著高于癌旁组织,且Livin的表达与结肠癌的组织分化程度及淋巴结转移程度显著相关。(2)结肠癌组织中Caspase-3蛋白的阳性表达率显著高于癌旁组织,且Caspase-3蛋白的表达与结肠癌的组织分化程度显著相关。(3)结肠癌组织中MTA1的阳性表达率显著高于癌旁组织,且MTA1的表达与结肠癌的组织分化程度及淋巴结转移程度显著相关。(4)Caspase-3蛋白的表达又与Livin的表达呈显著负相关。结论(1)Livin在结肠癌组织中过表达,它可能是促进结肠癌发生的重要因素之一。(2)Caspase-3蛋白在结肠癌组织中表达被抑制而降低,且与Livin的表达呈负相关。因此,抑制Caspase-3蛋白的活性是Livin促进结肠癌发生的途径之一。(3)MTA1对结肠癌的组织分化及淋巴转移发挥重要作用。

盐酸纳美芬对大脑中动脉缺血再灌注模型大鼠脑组织的作用及其机制研究

目的探究盐酸纳美芬对大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型大鼠的神经保护作用。方法将36只大鼠随机分为假手术组、模型组、盐酸纳美芬组,各12只。盐酸纳美芬组大鼠复制MCAO/R模型前10 min尾静脉注射20μg/kg盐酸纳美芬注射液,假手术组和模型组注射等体积生理盐水。随后除假手术组外,其余两组采用线栓法复制MCAO/R模型。采用Longa评分标准评估大鼠神经功能,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,苏木精-伊红(HE)染色和TUNEL染色观察脑组织病理变化和细胞凋亡情况,Western blotting检测脑组织Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果假手术组大鼠神经功能评分低于模型组和盐酸纳美芬组(P<0.05);盐酸纳美芬组大鼠神经功能评分低于模型组(P<0.05)。模型组、盐酸纳美芬组SOD活性低于假手术组(P<0.05),MDA含量高于假手术组(P<0.05);与模型组比较,盐酸纳美芬组SOD活性升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05)。HE染色结果显示,假手术组细胞轮廓清晰,排列有序;模型组细胞破损,数量减少,炎症浸润严重;盐酸纳美芬组细胞数量较多,轮廓清晰,炎症浸润减少。模型组、盐酸纳美芬组凋亡细胞数多于假手术组(P<0.05);盐酸纳美芬组凋亡细胞数少于模型组(P<0.05)。模型组、盐酸纳美芬组Caspase-3、Bax蛋白相对表达量高于假手术组(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量低于假手术组(P<0.05);与模型组相比,盐酸纳美芬组Caspase-3、Bax蛋白相对表达量降低(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量升高(P<0.05)。结论盐酸纳美芬可以降低MCAO/R大鼠脑组织氧化应激水平,减少神经细胞凋亡,具有良好的神经保护作用,其作用机制与调节Caspase-3/Bcl-1/Bax通路有关。

补中益气汤对A549荷瘤小鼠脾脏上Caspase-3蛋白表达影响研究

目的研究补中益气汤对半胱氨酸天冬氨酸酶—3(Caspase—3)在人肺腺癌细胞株(A 549)荷瘤小鼠脾脏上表达的影响。方法随机对照法将24只A 549荷瘤BALB/c小鼠分为空白对照组,补中益气汤低剂量组、补中益气汤高剂量组,顺氯氨铂(cisplatin,DDP)组,补中益气汤每日给药2次连续10天,顺铂每日给药1次连续3天,在连续15天后将所有荷瘤小鼠的脾脏取出。将新鲜的脾脏组织固定后制作石蜡切片。免疫组织化学法检测各组脾组织中Caspase—3蛋白表达的部位与含量多少,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测各组组织中Caspase—3 mRNA的表达。结果免疫组化结果显示与空白对照组相比,补中益气汤低剂量组Caspase—3蛋自的表达量显著增多(P<0.05),补中益气汤高剂量组蛋白的表达量增多(P<0.05)。而DDP组与空白对照组相比无统计学意义,DDP组与补中益气汤低剂量组、补中益气汤高剂量组相比的差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。RT—PCR结果同免疫组化结果具有一致性。结论补中益气汤可增加A 549荷瘤小鼠脾脏上Caspase—3蛋白的表达,从而使Caspase—3诱导肿瘤细胞凋亡的作用增强。

丁酸诱导结肠癌细胞凋亡机制的实验研究

目的:探讨膳食纤维在结肠中的酵解产物丁酸(butyrate)诱导人结肠癌细胞凋亡的作用机制。方法:人传代结肠癌细胞株SW 1116经不同浓度(0、2、3、4、7和10 mmol/L)丁酸处理后,在不同时段(6、24、48和72 h)分别收集细胞,用RT-PCR和W estern B lotting检测肿瘤细胞bcl-2和bax基因及其蛋白表达的变化,并用流式细胞仪和荧光定量法分别测定其p53蛋白浓度和caspase-3活性的变化。结果:实验过程中,肿瘤细胞的bc l-2 mRNA及其蛋白均无表达,但随着培养液中丁酸浓度的不断增加和培养时间的延长,其bax mRNA及其蛋白的表达则逐渐增强,同时伴有p53蛋白浓度和caspase-3活性的增加。结论:丁酸以p53依赖方式通过上调肿瘤细胞bax mRNA及其蛋白的表达而诱导SW 1116细胞凋亡。

姜黄素对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1及Caspase-3表达的影响

目的:观察姜黄素(Cur)对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化及对其肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)及半胱天冬酶-3(Caspase-3)表达的影响.方法:采用皮下注射400g/L四氯化碳复制模型,造模后给予姜黄素治疗,观察肝组织病理改变并进行肝纤维化分级和血清生化学检测;免疫组化法测定肝组织中TGF-β1及Caspase-3蛋白表达的变化,RT-PCR检测肝组织中TGF-β1mRNA表达.结果:Cur治疗组大鼠肝纤维化程度较模型组显著减轻(P<0.01);并且大鼠血清ALT(nkat/L),AST(nkat/L),ALP(nkat/L)水平明显降低[(757±234)vs(1677±252),(2776±238)vs(4865±403),(1850±191)vs(4310±728),P<0.05或P<0.01],A/G比值提高[(0.89±8.06)vs(0.60±7.48),P<0.05];Cur治疗组TGF-β1mRNA,TGF-β1表达较模型组显著下降[(3.13±1.55)vs(9.56±2.01),(0.32±0.12)vs(0.87±0.40),P<0.05或P<0.01];Caspase-3表达较模型组显著升高[(5.47±1.06)vs(1.56±0.61),P<0.05].结论:Cur对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化具有显著的治疗作用,其作用机制可能与抑制TGF-β1表达、促进Caspase-3表达相关.