血清天冬氨酸-天冬酰胺β羟化酶表达与肝细胞癌术后患者预后的关系研究

目的探讨血清天冬氨酸-天冬酰胺β羟化酶(ASPH)表达与肝细胞癌(HCC)术后患者复发或死亡的关系。方法选取2010年6月—2011年1月于东南大学附属南京市第二医院肝胆外科收治的HCC患者96例为研究对象,记录患者病理分级、肿瘤直径、肝纤维化病理分期、TNM分期,以及有无门静脉癌栓、微血管浸润,检测入院时清蛋白、总胆红素水平。检测术前甲胎蛋白(AFP)、高尔基体蛋白73(GP73),以及术前及术后1周、1个月、2个月ASPH水平。以手术时间为观察起点随访5年,以肿瘤复发或死亡为观察终点事件。分别采用Log-rank检验、多因素Cox比例风险回归模型分析HCC术后患者预后的影响因素。结果 HCC患者术前及术后1周、1个月、2个月ASPH水平分别为(128.3±19.3)、(91.2±16.2)、(33.7±9.4)、(22.4±5.7)ng/L,术后2个月患者ASPH水平均在参考范围内。单因素分析显示,不同肿瘤直径、TNM分期,有无门静脉癌栓、微血管浸润,以及不同术前ASPH表达的HCC术后患者复发或死亡率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Cox比例风险回归模型分析显示,TNM分期〔HR=1.378,95%CI(1.124,1.842)〕、门静脉癌栓〔HR=1.260,95%CI(1.012,1.356)〕、微血管浸润〔HR=1.583,95%CI(1.144,2.652)〕、术前ASPH表达〔HR=1.475,95%CI(1.875,2.011)〕是HCC术后患者复发或死亡的影响因素(P<0.05)。结论术前ASPH表达是HCC术后患者复发或死亡的独立影响因素,可作为判断HCC术后患者预后的潜在指标。

天冬氨酰-(天冬酰胺酰)β- 羟化酶在肿瘤中的作用 研究进展

人类天冬氨酰-(天冬酰胺酰)β-羟化酶(aspartyl/asparaginylβ-hydroxylase,ASPH,AAH)是一种高度保守的脱氧酶,属于α-酮戊二酸依赖型双加氧酶家族,可在二价铁存在的条件下羟化多种蛋白质(如Notch)和表皮细胞生长因子样结构域的天冬氨酸或天冬酰胺残基,参与一系列癌症相关通路,从而在细胞生长、分化及运动中发挥重要作用。ASPH在多种恶性肿瘤中过表达,参与并调节恶性肿瘤细胞的侵袭及转移,并可介导抗肿瘤免疫反应,在肿瘤靶向治疗、免疫治疗中的作用逐渐受到重视。本文综述了近年来ASPH在各系统肿瘤中的相关研究成果,旨在为探寻新的肿瘤防治策略提供参考。

膜联蛋白A3、天冬氨酸β-羟化酶与乳腺癌患者紫杉醇耐药的相关性分析

目 的探讨膜联蛋白A3(annexin A3,ANXA3)、天冬氨酸β-羟化酶(aspartateβ-hydroxylase,ASPH)与乳腺癌患者紫杉醇(paclitaxel,PTX)耐药的相关性。方法 选取2020年2月至2021年2月中国人民解放军联勤保障部队第九六○医院淄博医疗区收治的74例女性乳腺癌患者作为研究对象,根据是否发生PTX耐药将其分为PTX耐药组(23例)和无PTX耐药组(51例),检测其乳腺癌组织中ANXA3、ASPH的表达水平。比较两组患者的临床资料并分析影响乳腺癌PTX耐药的因素。结果 单因素分析结果显示,T分期、N分期以及细胞周期调节蛋白D1(cell cycle regulatory protein D1,Cyclin D1)、ANXA3、ASPH阳性表达是影响乳腺癌患者PTX耐药的因素(P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示,ANXA3阳性表达(OR=3.077,95%CI 1.104~8.577)、ASPH阳性表达(OR=1.548,95%CI1.149~2.085)是乳腺癌患者PTX耐药的独立影响因素(P<0.05);ANXA3、ASPH表达与Cyclin-D1的表达有关(P<0.05)。结论 ANXA3、ASPH高表达是乳腺癌患者PTX耐药的独立影响因素,可作为乳腺癌患者PTX耐药的重要评估指标之一。

人天冬氨酸-β-羟化酶树突状细胞疫苗对肝癌细胞系的体外作用研究

目的:通过对携带人天冬氨酸-β-羟化酶(aspartate-β-hydroxylase,AAH)基因的树突状细胞杀伤肝癌细胞系的研究,探索可用于防治肝癌的树突状细胞疫苗。方法:重组腺病毒(Ad-AAH-IRES2-EGFP)感染C57BL/6小鼠骨髓未成熟树突状细胞(dendritic cells,DCs)制备携带AAH基因的DCs(AAH-DCs),与同体小鼠脾脏T淋巴细胞共培养后作为效应细胞,以肝癌细胞株HepG2和Huh7分别作为靶细胞,效应细胞分别和靶细胞共培养24 h,CCK-8法检测效应细胞对靶细胞增殖的影响;流式细胞术检测效应细胞对靶细胞凋亡的影响。将AAH-DCs连续3次皮下注射免疫C57BL/6小鼠,乳酸脱氢酶释放法检测免疫后小鼠脾脏T淋巴细胞对靶细胞的裂解效应。结果:AAH-DCs与T淋巴细胞共培养组靶细胞的增殖能力明显低于对照组(P=0.000),凋亡率明显高于对照组(P=0.000);实验组靶细胞的裂解率明显高于对照组(P=0.000)。结论:荷载AAH基因的树突状细胞疫苗能够诱导产生细胞毒性T淋巴细胞从而杀伤表达AAH的肝癌细胞。

可卡因-苯丙胺调节转录肽对缺血性脑损伤及其神经元半胱天冬氨酸蛋白酶活性的影响

目的探讨可卡因-苯丙胺调节转录(CART)肽对缺血性脑损伤及其半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)活性的影响。方法将12只小鼠随机分为CART组与对照组,CART组小鼠侧脑室注射CART多肽,对照组注射生理盐水,然后制作脑缺血模型,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测量梗死体积。体外培养小鼠皮质神经元,制作缺糖缺氧神经元模型,加入CART多肽或生理盐水,用噻唑蓝染色测细胞生存率,酶联法检测Caspase-3活性。结果CART组脑梗死体积[(0.225±0.044)mm3]显著小于对照组[(0.389±0.055)mm3](P<0.05);CART组神经元生存率(0.494±0.056)显著高于对照组(0.348±0.174)(P<0.05);CART组神经元Caspase-3活性(45674±9780)显著低于对照组(51172±2776)(P<0.01)。结论CART多肽可明显减少缺血性脑梗死体积,提高缺氧神经元的生存率,并降低缺氧神经元的Caspase-3活性。

N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸对基质金属蛋白酶-1和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1的调节在大鼠矽肺纤维化形成中的作用

目的：探讨N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对大鼠肺内基质金属蛋白酶-1（MMP-1）和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达的调节在拮抗矽肺纤维化形成过程中的作用。方法：气管内灌注染尘法制作大鼠矽肺模型，将含有AcSDKP的微量药物释放泵埋入腹腔。实验动物随机分为矽肺模型对照4周组，矽肺模型对照8周组，矽肺模型4周组，矽肺模型8周组，抗纤维化治疗组及预防治疗组。H—E染色和免疫组织化学显色对矽肺纤维化病变和MMP-1和TIMP-1在肺组织内的表达进行形态学观察；免疫印迹法对肺内MMP-1和TIMP-1酶蛋白表达进行检测。结果：与模型对照组比较，矽肺大鼠肺内MMP-1和TIMP-1表达增强。与矽肺模型组比较，AcSDKP能够上调矽肺大鼠肺内MMP-1的表达，下调TIMP-1的表达，使MMP-1／TIMP-1的比值升高。结论：AcSDKP能够促进矽肺大鼠肺内MMP-1的表达，抑制TIMP-1的表达，从而加速了细胞外基质（包括胶原）的降解，这可能与AcSDKP抗矽肺纤维化的作用有关。

基于N-((3-吡啶基)磺酰基)天冬氨酸的Co(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Cd(Ⅱ)配位聚合物的合成、磁性和荧光性质（英文）

以N((3-吡啶基)磺酰基)天冬氨酸(H_2L)为配体,采取水热合成的方法,合成了配位聚合物[M(HL)_2]_n(M=Co,1;Zn,2;Cd,3).X射线单晶衍射分析表明,它们的晶体同构。1的磁性分析表明,1的Curie常数为4.66 cm^3·mol^(-1)·K,Curie-Weiss常数为-21.23 K;与配体H_2L相比,2和3的发射光谱发生了明显的蓝移,可能归因于配体到金属的电荷转移。

早期肺腺癌组织中人天冬氨酸β-羟化酶、CD44V6的表达水平及临床意义

目的观察早期肺腺癌组织中人天冬氨酸β-羟化酶(ASPH)、CD44V6的表达情况,并分析其与临床病理特征及预后的关系。方法选取2016年10月-2022年6月烟台业达医院行手术治疗且完成3年随访的120例早期肺腺癌患者的癌组织标本,并根据组织分化程度另取配对的30例早期肺腺癌患者癌旁组织标本为对照。采用免疫组织化学法检测癌组织及癌旁组织中ASPH、CD44V6的表达情况。结果癌组织中ASPH、CD44V6阳性率均高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。临床分期为ⅠB期、分化程度为低分化的早期肺腺癌患者癌组织中ASPH阳性表达率高于临床分期为ⅠA期、分化程度为中高分化的癌组织,差异有统计学意义(P<0.05);年龄≥60岁、临床分期为ⅠB期、分化程度为低分化的早期肺腺癌患者癌组织中CD44V6阳性表达率高于年龄<60岁、临床分期为ⅠA期、分化程度为中高分化的癌组织,差异有统计学意义(P<0.05)。经Somers′d检验结果显示,临床分期、分化程度与ASPH表达呈正相关(d>0,P<0.05);年龄、临床分期、分化程度与CD44V6表达呈正相关(d>0,P<0.05)。经卡方检验Phi系数显示,ASPH与CD44V6表达在早期肺腺癌中呈正相关(Phi=0.906,P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,ASPH与CD44V6阳性表达是早期肺腺癌患者预后不良的危险因素(OR>1,P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线显示,ASPH、CD44V6预测早期肺腺癌患者预后的敏感度分别为0.960、0.920,特异度分别为0.284、0.242。结论早期肺腺癌组织中ASPH和CD44V6阳性表达率高;年龄、临床分期、分化程度与CD44V6阳性表达有关,临床分期、分化程度与ASPH阳性表达有关;ASPH、CD44V6表达与早期肺腺癌患者预后情况有关。

半乳糖与精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸共修饰聚酰胺-胺树状大分子纳米粒的制备及其对肝癌的靶向性研究

目的构建半乳糖(Gal)与精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)共修饰聚酰胺-胺(PAMAM)纳米粒,研究其肝癌靶向性。方法采用乳化法制备Gal和RGD共修饰纳米粒(Gal/RGD-NPs),考察其形态、粒径、电位等理化性质。通过细胞摄取实验和肝癌肿瘤球穿透实验考察Gal/RGD-NPs与肝癌Hep G2细胞的亲和力和肿瘤组织穿透能力。结果制备的Gal/RGD-NPs粒径为(102.7±17.6)nm,电位为(3.92±1.37)m V。体外细胞摄取实验表明,Hep G2细胞对Gal/RGD-NPs的摄取效率分别是Gal-NPs和RGD-NPs的2.6倍和3.1倍,差异有统计学意义(P<0.01)。细胞摄取实验和肿瘤球摄取实验结果表明,Gal/RGD-NPs具有良好的肝癌细胞亲和力。结论 Gal与RGD共修饰纳米粒具有良好的肝癌靶向性,是一种潜在的肝癌靶向给药系统。

脯氨酰羟化酶抑制剂对PC12细胞SDF-1α表达的影响

目的研究脯氨酰羟化酶抑制剂对基质细胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1 alpha,SDF-1α)表达的影响及可能的机制。方法体外培养PC12细胞,予以不同浓度氯化钴(CoCl_2)、去铁胺(DFO)、二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG)处理。CCK-8法检测细胞活性,RT-PCR检测药物诱导后细胞内SDF-1αmRNA的表达,Western印迹法和ELISA法分别检测低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)、SDF-1α蛋白表达。结果 CCK-8法结果显示,低浓度CoCl_2能够促进PC12细胞的增殖能力,但随着浓度增高,DFO、CoCl_2、DMOG均能使细胞增殖能力降低。RT-PCR结果显示,DFO、CoCl_2、DMOG各组细胞内SDF-1αmRNA表达减少。Western印迹法结果显示,CoCl_2、DFO和DMOG组HIF-1α表达量较对照组显著增高。ELISA法结果显示,CoCl_2、DFO、DM OG组SDF-1α水平均显著下降。结论脯氨酰羟化酶抑制剂CoCl_2、DFO和DMOG均可上调HIF-1α的表达,下调SDF-1α的表达。

甲钴胺对大鼠缺血-再灌注损伤神经细胞凋亡及Caspase-3 mRNA表达的影响

目的探讨甲钴胺对缺血-再灌注大鼠脑组织半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)mRNA表达的影响。方法将大鼠按随机原则分为假手术组、模型对照组、尼莫地平组、甲钴胺小剂量组、甲钴胺大剂量组,每组30只。假手术组与模型对照组分别灌胃给予0.9%氯化钠溶液20 m L·kg^(-1)·d^(-1);尼莫地平组灌胃尼莫地平1 mg·kg^(-1)·d^(-1);甲钴胺小、大剂量组分别灌胃甲钴胺50,100μg·kg^(-1)·d^(-1),给药1周。采用线栓法栓塞大脑中动脉3 h制作大鼠脑缺血-再灌注模型;观察再灌注24 h后神经功能缺损评分,于6,12,24 h用TUNEL法检测顶叶皮质细胞凋亡、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Caspase-3 mRNA的表达。结果模型对照组神经功能缺损评分为(2.70±0.52)分,尼莫地平组、甲钴胺小剂量组、甲钴胺大剂量组分别为(1.30±0.51),(2.20±0.75),(1.30±0.81)分,与模型对照组比较,均差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与尼莫地平组比较,甲钴胺大剂量组差异无统计学意义(P>0.05),与甲钴胺小剂量组比较,甲钴胺大剂量组差异有统计学意义(P<0.05)。尼莫地平组、甲钴胺小、大剂量组各时间点神经细胞凋亡较模型对照组明显减少;甲钴胺大剂量组24 h时较尼莫地平组差异有统计学意义(P<0.01);6~24 h较甲钴胺小剂量组差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。假手术组Caspase-3 mRNA少量表达,与假手术组比较,模型对照组6~24 h Caspase-3 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.01);与模型对照组比较,尼莫地平组、甲钴胺大、小剂量组6~24 h Caspase-3 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与尼莫地平组比较,甲钴胺大、小剂量组各时间点Caspase-3 mRNA差异无统计学意义(P>0.05),与甲钴胺小剂量组比较,甲钴胺大剂量组于24 h差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲钴胺对脑缺血-再灌注损伤保护机制与抑制Caspase-3 mRNA表达有关,且以大剂量效果较好。

氯胺酮对谷氨酸诱导的神经元样PC12细胞c-fos mRNA表达的影响

目的 研究N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂氯胺酮对谷氨酸所致神经元样PC12细胞株损伤c—fos基因表达的影响，从基因水平探讨氯胺酮的神经保护作用及其机制。方法 将分化好的神经元样PC12细胞株（2×10^6／孔）接种在6孔板中孵育18h，随机分成对照组（C组）、10mmol／L谷氨酸损伤组（G组）、0．1mmol／L氯胺酮处理组（K1组）、0．5mmol／L氯胺酮处理组（K2组）和1．0mmol／L氯胺酮处理组（K3组）。K1～K3组均含有终浓度为10mmol／L的谷氨酸。加药5、15、30、60、120、240和360min后收集细胞，提取细胞总RNA，经逆转录-聚合酶链反应得到cDNA扩增产物，用c—fos基因扩增产物的密度与GAPDH基因扩增产物的密度比值表示c—fosmRNA的表达水平。结果G、K1和K2组加药后15min，c—fos mRNA表达增多，30～60min达最高峰，120min时下降，360min时回到基线水平。G组c—fos mRNA的表达水平较对照组明显升高（P〈0．01），与G组相比，K1～K3组c-fos mRNA表达显著降低（P〈0．05），呈剂量依赖性。结论氯胺酮对神经细胞损伤有一定的神经保护作用，c—fos可能参与了氯胺酮神经保护的分子机制。

人类天冬胺酰基β-羟化酶的表达及其单克隆抗体的制备

旨在深入研究人类天冬胺酰基β-羟化酶(HAAH)在肿瘤早期诊断中的作用机制。应用RT-PCR方法从肝癌组织中获得人类天冬胺酰基β-羟化酶HAAH编码基因,并在原核表达载体pBV-IL1中进行融合表达,将Ni柱纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,获得了3株稳定的阳性单克隆细胞株(H3/E10、E4/F12、G4/D8),间接ELISA和Western blotting鉴定单抗的特异性和灵敏度,以单抗H3/E10介导的间接免疫荧光检测HAAH在各种肿瘤细胞系中的表达,可见特异的荧光。试验中成功构建了可表达HAAH基因的原核表达载体pBV-IL1-HAAH,并制备了3株抗HAAH的单克隆抗体,为HAAH的结构和功能的研究奠定了基础,同时也为进一步将该抗体应用于肿瘤的早期诊断以及研究HAAH在肿瘤发生转移中的机理提供了重要工具。

丹皮酚通过调控动脉粥样硬化中的miR-152-3p/ASPH轴抑制氧化低密度脂蛋白诱发的小鼠血管内皮细胞凋亡、炎症反应和氧化应激

目的揭示丹皮酚通过调控miR-152-3p/ASPH轴在ox-LDL诱导的血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)进展中的作用。方法首先,用不同浓度的氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)(0、25、50、100μg·mL^(-1))处理小鼠VECs,选取100μg·mL^(-1)ox-LDL进行实验。然后,用不同浓度的丹皮酚(30、60、120μmol·L^(-1))或辛伐他汀(30μmol·L^(-1))处理VECs。接着,使用细胞计数试剂盒-8和流式细胞术分别用于测定细胞活力和凋亡。此外,使用酶联免疫吸附法分析了IL-1β和IL-6的水平,并使用相关试剂盒检测了活性氧、乳酸脱氢酶和丙二醛的含量。此外,通过qRT-PCR或Western blot检测miR-152-3p和天冬氨酰(天冬酰胺)β-羟化酶(aspartate-β-hydroxylase,ASPH)的表达。miR-152-3p和ASPH之间的相互作用由starBase预测,然后通过双荧光素酶报告基因实验和RNA结合蛋白免疫沉淀实验证实。结果100μg·mL^(-1)ox-LDL显著抑制VECs活力,并促进细胞凋亡、炎症反应和氧化损伤。而丹皮酚的处理以剂量依赖性的方式增加细胞活力,抑制ox-LDL诱导的细胞凋亡。丹皮酚以剂量依赖性的方式降低ox-LDL诱导的IL-1β和IL-6的水平,以及以剂量依赖性的方式减弱ox-LDL对ROS、MDA和LDH含量的促进作用。另外,ox-LDL对miR-152-3p表达的抑制作用和对ASPH表达的促进作用也被丹皮酚逆转,且120μmol·L^(-1)丹皮酚效果最好。120μmol·L^(-1)丹皮酚能够上调miR-152-3p或下调ASPH,进一步促进丹皮酚对VECs生长的保护作用,miR-152-3p靶向负调控ASPH表达。结论丹皮酚通过调节miR-152-3p/ASPH轴减弱ox-LDL对小鼠VECs生长的影响,为AS的治疗提供理论基础。

基于NMDA-NO通路探讨亚麻醉剂量氯胺酮对术后认知功能障碍大鼠的影响及作用机制

目的探讨亚麻醉剂量氯胺酮调控N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)-一氧化氮(NO)通路对术后认知功能障碍大鼠的影响及作用机制。方法选取30只健壮的SD大鼠,将其随机分为空白组、手术组、手术+麻醉组,每组10只。手术+麻醉组采用结扎双侧颈总动脉致其重度狭窄的方法建立模型并腹腔注射腔注射盐酸氯胺酮麻醉,手术组只分离双侧颈总动脉不结扎,空白组不做处理。对大鼠行水迷宫实验;测定各组组织一氧化氮合酶(NOS)活力、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、中枢特异性蛋白(S-100β)蛋白水平,NMDA受体(NMDAR)2B蛋白阳性表达,NMDA受体蛋白表达。结果手术组潜伏时间在术后第1、3天显著增加,象限百分比在术后第1、3天明显下降(P<0.05);与空白组和手术+麻醉组比较,手术组NOS活力、TNF-α、IL-6、S-100β蛋白水平、NMDAR2B蛋白阳性表达率和判定评分、受体蛋白表达水平均显著较高(P<0.05)。结论亚麻醉剂量氯胺酮可以调控NMDA-NO通路阻滞大鼠发生术后认知功能障碍。

血清天冬氨酸-天冬酰胺β羟化酶(ASPH)分子联合AFP和GP73检测对原发性肝癌的诊断意义

目的探讨联合检测血清天冬氨酸-天冬酰胺β羟化酶(ASPH)、甲胎蛋白(AFP)以及高尔基体糖蛋白73(GP73)对于原发性肝癌的诊断意义。方法分别检测50例原发性肝癌患者、50例肝炎肝硬化患者和50例健康人血清中AFP、GP73和ASPH的含量,分析ASPH联合AFP、GP73检测对原发性肝癌的诊断意义。结果肝炎肝硬化组和健康对照组AFP、GP73和ASPH含量明显低于原发性肝癌组,差异有统计学意义(P<0.05);单独检测AFP、GP73和ASPH对诊断原发性肝癌的灵敏度分别为76.00%、86.00%和80.00%,特异度分别为88.00%、98.00%、86.00%,准确度分别为82.00%、92.00%、87.00%;GP73灵敏度、特异度及准确度均为三项中最高。联合检测AFP、GP73和ASPH三项灵敏度为96.00%,特异度为98.00%,准确度为97.00%,均高于单项检测。结论联合检测AFP、GP73和ASPH可作为诊断原发性肝癌的重要指标,可提高早期原发性肝癌的诊断率。

快速起效抗抑郁药研发策略:单胺(5-HT)-非单胺(Glu/GABA)长反馈神经环路候选假说的提出

抑郁症已成为全球性严重的公共卫生问题,目前临床一线抗抑郁剂大多是基于经典的“单胺假说(策略)”研发的,这些药物普遍存在起效缓慢、有效率不高、损伤认知和致自杀倾向等缺陷,因此,突破经典单胺策略框架,发展快速起效、兼可增强认知和低毒副作用抗抑郁药物是目前全球性重大需求和方向。2019年,S-氯胺酮和别孕烯醇酮(brexanolone)等快速起效抗抑郁药的上市为基于N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)和γ-氨基丁酸A(GABAA)等受体的非单胺策略开辟了全新的前景。目前快速起效抗抑郁药研发总体趋势主要有二:即基于优化多靶标的单胺策略(现代单胺策略)和基于谷氨酸(Glu)-GABA平衡调控的非单胺策略。根据本实验室和国外同行的研究,我们提出单胺-非单胺即“5-羟色胺(5-HT)-Glu/GABA长反馈神经环路”候选假说,认为脑内单胺调控机制(如5-HT神经元,位于中缝核)与非单胺调节机制(Glu/GABA神经元,位于前额皮质等脑区)均是快速起效抗抑郁药机制的一部分,二者共同组成长反馈神经环路,介导前额皮质和海马等效应脑区快速增强的突触可塑性。基于该环路提出5个方面抗抑郁快速起效的候选策略:①通过解除GABA中间神经元对Glu锥体神经元的抑制或直接激活Glu锥体神经元,实现快速兴奋/抑制(E/I)平衡;②借助5-HT1A等受体同时调控5-HT神经元活性和兴奋/抑制平衡(同时增强单胺-非单胺环节);③直接激活哺乳动物西罗莫司(雷帕霉素)靶蛋白复合物1(mTORC1),快速增强脑源性神经营养因子(BDNF)-mTOR通路;④刺激脑内BDNF的快速释放。⑤正向变构调节GABAA受体。希望这些思路和策略为进一步发现快速抗抑郁候选靶标提供有益的借鉴。

天冬氨酰-(天冬酰胺酰)β-羟化酶在肝癌中的作用研究进展

肝细胞癌的发病率逐年上升,且伴有较高的术后复发及转移率,但其机制尚未明确。最初研究发现天冬氨酰-(天冬酰胺酰)β-羟化酶(Aspartyl/Asparaginyl beta-hydroxylase, ASPH, AAH)在肝癌和胆管细胞癌中表达增加,且与肝细胞癌的多种生物学行为相关。本文综述了近年来有关ASPH在肝细胞癌中的作用的相关研究,以期为其治疗提供新的理论依据。

抗纤维化短肽对大鼠矽肺纤维化MCP-1、ED-1表达的影响

目的探讨抗纤维化短肽N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠肺内单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、ED-1表达的影响在拮抗矽肺纤维化形成过程中的作用。方法气管内灌尘法制作大鼠矽肺纤维化动物模型,实验大鼠随机分为6组,包括:对照1组,对照2组和矽肺模型1组,矽肺模型2组,矽肺抗纤维化治疗组,矽肺预防治疗组。采用HE染色对矽肺纤维化病变及其变化特点进行形态学观察;采用羟脯氨酸法对矽肺大鼠肺内胶原含量进行检测;采用免疫组织化学方法检测各组大鼠肺组织中MCP-1的表达与巨噬细胞(ED-1阳性)的数量。结果抗纤维化治疗组与矽肺模型1组与2组相比,矽结节面积下降到84.28%和67.93%,羟脯氨酸含量下降到70.89%和58.18%,MCP-1蛋白表达下降到82.3%和84.1%,MCP-1阳性细胞数下降到67.4%和72.5%,ED-1蛋白表达下降到78.7%和79.3%,ED-1阳性细胞数下降到54.4%和66.8%;预防治疗组与矽肺模型2组相比,矽结节面积下降到61.13%,羟脯氨酸含量下降到60.27%,MCP-1蛋白表达和阳性细胞数分别下降到85.2%和86.3%,ED-1蛋白表达和阳性细胞数分别下降到87.2%和74.9%。结论AcSDKP具有拮抗矽肺纤维化的作用,这可能与其抑制巨噬细胞在肺内的浸润、聚集,减轻了尘性肺泡炎的程度相关。

抑制p38MAPK通路对帕金森病模型小鼠黑质BAD和caspase-3表达的影响

目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路对亚急性帕金森病(PD)模型小鼠中脑黑质Bcl-xl/Bcl-2死亡相关因子(BAD)和半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达调控作用,探讨PD中脑黑质多巴胺(DA)能神经元进行性变性丢失的可能机制。方法健康雄性C57BL/6N小鼠45只,随机分为3组,(1)1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)模型组:腹腔注射MPTP(30 mg/kg,溶于生理盐水),1次/d,连续5 d;(2)抑制剂组:在每次MPTP注射前1 h腹腔注射SB203580(10 mg/kg,溶于5mg/ml DMSO)1次/d,连续5 d;(3)对照组:注射与模型组和抑制剂组等量的生理盐水和DMSO。观察模型小鼠行为学变化,中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)、BAD、caspase-3和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)的表达变化,及给予p38MAPK通路特异性抑制剂SB203580对上述表达变化的影响。结果模型小鼠出现典型的PD行为学症状,中脑黑质区TH阳性神经元和蛋白水平分别下降约60%和65%(P<0.01),p-p38MAPK、BAD和caspase-3阳性细胞数及蛋白水平显著增加(P<0.01);经p38MAPK特异性抑制剂SB203580处理后,PD小鼠行为学症状改善,TH阳性神经元和蛋白水平下降程度明显减轻;中脑黑质BAD、caspase-3和p-p38MAPK阳性细胞数显著减少,蛋白水平下降明显(P<0.01)。结论p38MAPK通路在亚急性PD模型小鼠黑质BAD和caspase-3表达中可能有重要调控作用,p38MAPK通路特异性抑制剂SB203580对PD小鼠具有一定的神经保护作用。