天山茶藨茎黄酮苷元提取工艺优化及其生物活性

为了优化天山茶藨茎5种黄酮苷元(木犀草素、槲皮素、山奈酚、异鼠李素、芹菜素)的酸水解提取工艺,评价其体外抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性,本文利用UPLC-MS/MS法测定天山茶藨茎5种黄酮苷元的提取率,通过单因素实验和正交试验优化天山茶藨茎黄酮苷元酸水解提取工艺。利用DPPH、ABTS自由基清除实验测定天山茶藨茎提取物及5种黄酮苷元的抗氧化活性,并测定了其α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明,5种黄酮苷元的检出限、定量限分别在0.8~1.6、2.9~5.4μg/L,在3.2~207.0μg/L范围内具有良好的线性关系(R 2≥0.9962),方法的稳定性、精密度和重复性良好(RSD≤4.4%)。确定最佳酸水解提取工艺为:90%甲醇溶液(含5%盐酸)、提取温度:70℃、提取时间:100 min,该条件下,总黄酮苷元提取率为4.06 mg/g,RSD<5%,表明正交试验优化的提取条件稳定可行。天山茶藨茎提取物及5种黄酮苷元均具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性和抗氧化活性,其中甲醇盐酸提取物与5种黄酮苷元的α-葡萄糖苷酶抑制活性均高于阳性对照阿卡波糖(IC 50:53.84±2.41 mg/L),槲皮素对DPPH自由基的清除活性最好(IC 50:(2.94±0.18)mg/L),木犀草素、山奈酚对ABTS自由基清除活性较好(IC 50分别为(5.34±0.10)、(5.55±0.17)mg/L),它们的抗氧化活性高于阳性对照V C。本研究建立的UPLC-MS/MS方法灵敏、精确、高效,可以对天山茶藨茎5种黄酮苷元化合物同时进行定量分析。优化的酸水解提取工艺能有效提高天山茶藨茎黄酮苷元的提取率。

UPLC-MS/MS法同时测定天山茶藨茎14个酚类成分及其降血糖活性

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定天山茶藨茎14个酚类成分的含量,并测定其体外降血糖活性。方法:采用ACQUITY UPLC BEH Shield RP 18色谱柱(100 mm×3.0 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^(-1),柱温为30℃;使用三重四极杆质谱仪,采用电喷雾电离源(ESI),负离子,以多反应监测模式(MRM)扫描,进行定量分析,测定其总酚、总黄酮含量及其抗糖尿病活性(α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶抑制活性)。结果:14个酚类化合物在测定的质量范围内具有良好的线性关系(R;≥0.9917),稳定性、重复性、精密度试验的RSD≤4.9%,加样回收率范围在91.0%~102.0%(RSD≤4.6%);天山茶藨茎乙酸乙酯部位的总酚、总黄酮及咖啡酸、表没食子儿茶素、表儿茶素、原儿茶酸的含量最高,分别为(965.51±6.85)mg·g^(-1)、(162.04±8.07)mg·g^(-1)、10452.00μg·g^(-1)、14924.00μg·g^(-1)、3922.50μg·g^(-1)、3546.00μg·g^(-1);并表现出最好的α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶抑制作用,IC_(50)分别为(134.81±3.10)mg·L^(-1)、(457.91±11.94)mg·L^(-1)。结论:本实验建立的UPLCMS/MS方法精确、高效、灵敏,可用于14个酚类成分的定量分析,结合降血糖活性筛选,可以为深入研究天山茶藨的化学成分和生物活性提供科学依据。