肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群及天然杀伤细胞活性的检测——附121例报告

目的：探讨肿瘤患者细胞免疫功能的变化及其临床意义。方法：应用流式细胞仪间接免疫荧光染色检测法检测了121例肿瘤患者和110名正常人的外周血T淋巴细胞亚群的分布及天然杀伤细胞（NK细胞）活性，并进行对比分析。结果：肿瘤患者外周血T淋巴细胞表面分化抗原（分化群，CD）中的CD3＋、CD4＋和NK细胞的CD（16＋56）＋比正常人显著降低（P ＜0．05），CD8＋比正常人显著升高（P ＜0．05），CD4＋／CD8＋比值比正常人明显下降（P ＜0．05）。结论：肿瘤患者的细胞免疫功能严重受损；上述指标可作为肿瘤的免疫诊断和监测指标。

分娩发动后外周血及蜕膜中NK、NKT细胞的构成变化和外周血中Th细胞变化

目的探讨孕足月产妇分娩发动前后蜕膜与外周血单个核细胞中自然杀伤(NK)细胞、自然杀伤T(NKT)细胞的构成变化,并分析外周血单个核细胞产生Th1、Th2型细胞因子的变化。方法随机选取正常孕足月孕妇分为分娩发动经阴道分娩组(分娩组)32例和分娩未发动行选择性剖宫产术组(剖宫产组)34例,分离蜕膜及外周血中单个核细胞后采用流式细胞术检测NK、NKT细胞的构成变化;另检测两组外周血单个核细胞培养后Th1/Th2平衡变化。结果分娩组蜕膜中NK、NKT细胞比例均低于剖宫产组(P<0.01),而外周血中NK、NKT比例均高于剖宫产组(P<0.01)。分娩组外周血中单个核细胞培养后Th1细胞比例高于剖宫产组(P<0.01),Th2细胞比例与剖宫产组无统计学差异(P>0.05)。结论分娩发动后NK、NKT细胞在体内重新分布,机体存在Th1偏倚,推测母胎界面的免疫变化与分娩发动有关。

人外周血Vα24 NKT细胞抗肿瘤免疫机制的初步研究

目的进一步认识Vα24 NKT细胞在抗肿瘤免疫中的作用。方法从正常人外周血中扩增并纯化得到Vα24 NKT细胞,通过流式细胞术检测其表型、活化后的细胞因子、细胞坏死相关因子的表达情况,采用DIOC18染色及流式细胞术测定Vα24 NKT细胞对肿瘤细胞的杀伤率,并利用不同的阻断剂进行阻断实验。结果Vα24 NKT细胞分泌高水平的IFN-γ和IL-4,并表达TNF-α、穿孔素(perforin)、FasL、TRAIL等细胞坏死相关因子。Vα24 NKT细胞对表面表达CD1d分子的肿瘤细胞株的杀伤率高于不表达CD1d分子的肿瘤细胞株,同时在α-GalCer存在时,Vα24 NKT细胞的杀伤活性增强。对Perforin、FasL、TNF-α、TRAIL进行阻断后,ConA对Vα24 NKT细胞的杀伤作用的阻断效果最为明显。结论Vα24 NKT对肿瘤的杀伤作用是CD1d分子限制性和抗原特异性的。Vα24 NKT通过穿孔素途径和TNF家族成员发挥其细胞毒作用,而穿孔素途径是其肿瘤杀伤的最主要途径。

慢性心力衰竭患者外周血CD4^+ CD25^+ CD127^-调节性T细胞和自然杀伤细胞的变化

目的探讨慢性心力衰竭(CHF)患者外周血CD4+ CD25+ CD127-调节性T细胞(Treg细胞)和自然杀伤细胞(NK细胞)的水平及意义。方法采用流式细胞仪检测53例CHF患者(CHF组)和20例正常对照者(对照组)外周血CD4+ CD25 +CD127-Treg细胞和NK细胞比例。结果与对照组相比,CHF组CD4+ CD25+ CD127-Treg细胞/CD4+细胞比例、NK细胞/淋巴细胞比例明显降低[(6.95±0.72)%vs(5.02±1.14)%,(18.45±3.13)%vs(13.94±4.13)%,P<0.01],差异有显著性;与心功能Ⅰ～Ⅱ级组相比,心功能Ⅲ～Ⅳ级组两细胞比例明显降低[(5.88±0.92)%vs(4.19±0.55)%,(16.37±3.99)%vs(11.61±2.70)%,P<0.01],差异有显著性;缺血性心脏病组与非缺血性心脏病组相比,两细胞比例差异均无显著性(P>0.05)。结论CHF患者外周血CD4+ CD25+ CD127-Treg细胞和NK细胞明显降低,并且与心功能恶化相关,而与基础疾病是否是IHD可能无关。提示CHF患者存在免疫调节功能受损。

正常人外周血TCRVα24^+NKT细胞体外活化特性观察

目的 :探讨正常人外周血自然杀伤T (NKT)细胞的数量以及体外活化后表达CD6 9、IFN -γ和IL - 4的规律并与CD3+ T细胞进行比较。方法 :取正常成人外周血 ,直接三色荧光标记后溶血获取有核细胞 ,或以佛波醇酯 (PDB) +离子霉素 (Ion)刺激并培养 6h ,经三色荧光标记后溶血并获取有核细胞 ,以流式细胞术分析NKT细胞和T细胞的数量以及表达CD6 9和IL - 4、IFN -γ的情况。结果 :NKT细胞约占外周血T淋巴细胞总数的 (1 34± 0 4 2 ) %( x±s) ;PDB +Ion活化 6h后NKT细胞CD6 9表达率为 (96 71± 1 33) % ,明显高于对照组 (11 4 7± 2 86 ) % (P <0 0 5 ) ;同样条件下CD3+ T细胞CD6 9表达率分别为 (98 6 0± 0 4 7) %和 (1 0 7± 0 4 5 ) % (P <0 0 5 ) ;当莫能菌素 (mon ensin)存在时以PDB +Ion刺激 6h后 ,IL - 4阳性NKT细胞的百分比为 4 8 6 2± 2 4 4 ,明显高于对照组 31 5 7± 3 31(P<0 0 5 ) ;IFN -γ阳性NKT细胞百分比为 4 6 6 5± 11 91,也高于对照组 13 4 5± 6 2 9(P <0 0 1)。CD3+ T细胞在刺激后表达IL - 4和IFN -γ均明显升高 ,但IL - 4表达率远远低于NKT细胞 ;而且对照组CD3+ T细胞两种细胞因子表达率都明显低于NKT细胞。结论 :正常成人外周血含有少量的NKT细胞 ,这些细胞IL - 4和IFN -γ?

T细胞、NKT和NK细胞在结核病诊断中的意义探讨

目的探讨CD3+T细胞、CD3+CD16+CD56+N KT细胞及CD3-CD16+CD56+N K细胞在肺结核患者外周血的表达状态及其临床意义。方法采用流式细胞仪分析123例肺结核患者(73例初治肺结核和50例复治肺结核)及83例健康者(43例结核菌素皮试阳性和40例结核菌素皮试阴性)外周血中T细胞、NKT和NK细胞的表达率。结果初、复治肺结核患者的NKT细胞表达率明显高于健康者(P<0.01),但初治肺结核患者的NK细胞、T细胞的表达率与健康者相比差异无统计学意义(P>0.05)。T细胞表达率在不同程度的初治肺结核患者中差异有统计学意义(P<0.01),疾病越重,表达越高。NKT、NK细胞差异无统计学意义(P>0.05)。复治肺结核患者的T细胞表达率显著高于初治肺结核患者(P<0.01),但NK细胞、NKT细胞的表达率在2组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论T细胞、NKT细胞是结核病细胞免疫的重要组成部分。对NKT细胞只在活动性肺结核患者才会呈现高表达,测定外周血NKT细胞可能成为辅助诊断活动性肺结核的手段之一。

与自身免疫T1D相关的控制iNKT细胞发育的基因

iNKT细胞（invariant Natural killer T cells,iNKT cells）,半恒定自然杀伤T细胞,是一群能够调控机体抗病毒、细菌、真菌、寄生虫、肿瘤、同种异体移植物以及自身组织免疫反应的免疫调节性T细胞[1,2]。与传统T细胞相比,iNKT细胞不仅具有CD1d限制性,而且可以同时表达NK细胞表面标志CD161（人类）（鼠类NK1.1）以及恒定的Vα24-Jα18/Vβ11 T细胞受体（TCR）（人类）（鼠类Vα14-Jα18/Vβ8.2、7、2 TCR）。

自然杀伤细胞活性T淋巴细胞亚群在乳腺癌中的分析研究

随着免疫学尤其是肿瘤免疫学的迅速发展,为探索肿瘤与机体免疫状况的关系,近年来测定肿瘤病人外周血中NK活性,T淋巴细胞亚群日渐增多。本文应用2项联合于术前、术后2周、6周3个时期进行测定,并行相关分析研究乳腺癌病人的免疫状况。

肝脏NK/NKT细胞及其生物学意义

对天然杀伤细胞 (NK cell)的研究近年受到高度关注。研究发现 ,肝脏 NK / NKT细胞含量在机体天然免疫反应时可增加 10倍 ,可能是机体最大的专职天然免疫的器官 ,对抵御病毒、寄生菌、恶性转化细胞等的侵害具有十分重要的意义。本文就肝脏 NK/ NKT细胞的功能特点和生物学特性。

过继骨髓细胞通过分化为NKT细胞并增加自身脂质含量减轻小鼠代谢功能障碍相关脂肪性肝病肝损伤

目的 探讨骨髓细胞过继对于小鼠代谢功能障碍相关脂肪性肝病(MAFLD)的治疗作用,并探索起主要作用的细胞群体。方法 HE染色检测蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)诱导的C57BL/6小鼠MAFLD肝组织病变并通过检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平评估骨髓细胞过继对MAFLD的治疗作用。实时定量PCR检测T细胞、自然杀伤T(NKT)细胞、 Kupffer细胞等肝脏免疫细胞的低密度脂蛋白受体(LDLR)和白细胞介素4(IL-4) mRNA表达。羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记的骨髓细胞经小鼠尾静脉注射,采用冰冻切片观察肝组织CFSE+细胞比例,流式细胞术追踪CFSE+细胞在肝、脾组织的比例。流式细胞术检测CFSE+的过继细胞CD3、 CD4、 CD8、 NK1.1、 CD11b、粒细胞受体1(Gr-1)的表达确定其分化情况。尼罗红脂质染色评估肝组织NKT细胞胞内脂质含量。结果 骨髓细胞过继输入的MAFLD小鼠肝组织损伤明显减轻、血清ALT、 AST水平降低。同时,肝脏免疫细胞上调其IL-4和LDLR的表达。LDLR敲除小鼠给予MCD饮食后引发更严重的MAFLD。骨髓细胞过继细胞治疗效果显著并分化出更多的NKT细胞定殖在肝脏,同时该群NKT细胞胞内脂质显著增多。结论骨髓细胞过继治疗通过分化更多的NKT细胞,同时通过提高该群细胞的胞内脂质含量从而减轻MAFLD小鼠肝损伤。

NKT细胞在大肠癌患者外周血中的表达及意义

目的探讨自然杀伤性T(NKT)细胞与大肠癌临床病理参数的相关性,并推测其在大肠癌发生、发展中的作用。方法采集27例大肠癌患者和25例健康体检者(对照组)外周静脉血,运用流式细胞术检测外周静脉血中NKT细胞的表达情况,并分析其与临床病理参数的关系。结果大肠癌患者外周静脉血中NKT细胞表达较健康体检者明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),但大肠癌患者外周静脉血中NKT细胞的表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、分化程度、有无转移及肿瘤临床分期(TNM),二者比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论大肠癌的发生可能与患者外周血中NKT细胞的异常高表达有关,但其分化程度及分期与NKT细胞的关系仍有待进一步研究确定。

恒定的自然杀伤T淋巴细胞在肝脏抗肿瘤免疫中的作用与机制

恒定的自然杀伤T淋巴细胞(iNKT细胞)是来源于胸腺的T淋巴细胞亚群,同时表达自然杀伤细胞相关受体和T淋巴细胞受体。iNKT细胞广泛分布于全身,在肝脏内富集,表现出独特的功能特性,可以分泌细胞因子并调节微环境其他免疫细胞活性,以达到免疫监视及预防疾病的作用,尤其是在肿瘤微环境中,iNKT细胞能够激发肝脏抗肿瘤免疫反应、逆转免疫抑制微环境状态。就iNKT细胞的生物学特性及其在肝脏免疫稳态中的特殊作用,尤其就iNKT细胞的抗肿瘤作用与机制作一综述。

弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血可溶性白细胞介素-2受体 T细胞亚群及自然杀伤细胞检测的临床意义

目的探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者化疗前后外周血可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平、T细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞的变化及其临床意义。方法收集经病理确诊的初治DLBCL患者30例,分别在第1次化疗前、化疗第2个周期前采集静脉血,运用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定sIL-2R的水平,经流式细胞术检测T细胞亚群及NK细胞。结果 DLBCL患者化疗前组血清sIL-2R水平高于健康者及化疗后组(P均<0.05)。DLBCL患者化疗前组分组为Ⅲ～Ⅳ期亚组、有B症状亚组、化疗无效亚组血清sIL-2R水平分别高于Ⅰ～Ⅱ期亚组、有A症状亚组、化疗有效组(P均<0.05)。DLBCL患者化疗前组sIL-2R、CD4^+T细胞、NK细胞数及CD4^+/CD8^+比值均低于健康者(P均<0.05)。DLBCL患者化疗前组Ⅲ～Ⅳ期血清NK细胞数及CD4^+/CD8^+比值及血清CD8^+T细胞计数与Ⅰ～Ⅱ期比较差异有统计学意义(P均<0.05)。化疗无效组CD4^+T细胞计数、NK细胞及CD4^+/CD8^+比值均低于化疗有效组(P均<0.05)。DLBCL患者化疗前组血清sIL-2R的表达水平与CD4^+T细胞计数、CD4^+/CD8^+及NK细胞计数呈负相关(P<0.01)。结论 DLBCL化疗前高表达sIL-2R与细胞免疫功能低下密切相关,与临床分期、疾病进展相关。动态检测sIL-2R、T细胞亚群及NK细胞的水平可作为DLBCL疗效判断的辅助指标。

自然杀伤细胞/T细胞淋巴瘤2例并文献复习

自然杀伤细胞（NK）／T细胞淋巴瘤（natural killer／Tcell lymphoma）是一种少见的非霍奇金淋巴瘤，多发于面部中线附近，以凝固性坏死、多种类型细胞浸润及出现异形淋巴样细胞为主要特征，临床表现无特征性。现报告2例并进行文献复习。