光谱法研究天然牛磺酸与肝硬化门静脉高压大鼠的肝组织蛋白相互作用

目的:通过光谱法研究天然牛磺酸(Taurine)与肝硬化门静脉高压大鼠的肝组织蛋白相互作用并探讨其作用机制。方法:将120只大鼠按随机数字法分成正常组、模型组、心得安组、天然牛磺酸组四组,每组30只,除正常组外,其余组用四氯化碳(carbon tetrachloride, CCL4)制备肝硬化门脉高压大鼠模型,造模同时给药。心得安组喂心得安,天然牛磺酸组喂天然牛磺酸,模型组喂等量生理盐水,疗程10周,治疗后对比各组门脉高压数值,并测定不同温度下各组天然牛磺酸药物-大鼠肝组织蛋白体系荧光光谱和天然牛磺酸紫外吸收光谱,根据光谱数据进行分析。结果:天然牛磺酸组大鼠门脉血流量(portal vein flow, PVF)、门脉压力(portal vein pressure, PVP)、门脉阻力(PVR)较心得安组、模型组更低,平均动脉压(mean arterial pressure, MAP)较高。各组大鼠肝组织蛋白的Kq值均大于最大动态猝灭速率2.0×10^(10)L/(mol·s)。大鼠肝组织蛋白体系:焓变(△H):-8 707.633 6;熵变(△S):33.413 95。正常组吉布斯自由能变化(△G)、△H均为负值,△S为正值;天然牛磺酸组△G、△H均为正值,△S为负值,模型组无明显规律。正常组、模型组、天然牛磺酸组R值分别为1.77、2.35、2.28 nm, r值分别为1.24、1.31、6.56。结论:天然牛磺酸具有抗肝纤维化,减轻门脉高压的作用,其机制可能是改变了肝硬化门脉高压大鼠的肝脏组织蛋白结构,从而减轻肝损害。

车螺肉酶解液中提取分离天然牛磺酸工艺

以新鲜车螺肉为原料,采用酸性蛋白酶先酶解再水煮工艺提取天然牛磺酸。在料:水=1:3(W/V),酶解温度35℃,酶解pH2.5前提下,酸性蛋白酶最适的提取条件为加酶量E/S=2000U/g,酶解时间4h,水煮时间0.5h。用H+型强酸性阳离子交换树脂从酶解提取液中分离提纯牛磺酸,结果表明该工艺能有效地将牛磺酸与甘氨酸、赖氨酸等其他氨基酸分离。在25×400(mm)离子交换柱湿装柱量为120ml,洗脱速度1.5BV/h条件下,最适上柱量0.5mg氨基氮/ml湿树脂,在pH0.9-3.3范围内的洗脱液是牛磺酸流出的高流分部分。

天然牛磺酸抗大鼠肝纤维化及抑制门静脉高压的机制研究

目的:研究天然牛磺酸抑制大鼠肝硬化门静脉高压症的疗效及可能机制。方法:采用复合因素法制作肝硬化模型,60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、天然牛磺酸治疗组,每组20只。检测治疗前后各组门静脉压力(PVP)、门静脉血流量(PVF),平均动脉压(MAP)、心率(HR),肝功能,血清Ⅳ-C、PCⅢ、HA、LN含量,肝脏组织学,采用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量,化学比色法测定一氧化氮合酶(NOS)活性,放射免疫法检测环鸟苷酸(cCMP)含量。结果:天然牛磺酸组PVP、PVF降低,MAP升高,HR减慢,与模型组相比差异有显著意义(P<0.05);ALT降低,ALB升高,与模型组相比差异有显著意义(P<0.01);TBIL无明显变化,与模型组相比差异无显著意义(P>0.05);Ⅳ-C、PCⅢ、HA、LN含量均显著降低,与模型组相比差异有显著意义(P<0.01);NO、cCMP含量及NOS活性也均有不同程度的降低,与模型组相比差异有显著意义(P<0.05);同时肝脏组织结构有所改善。结论:天然牛磺酸能够有效地降低大鼠肝硬化门静脉压力,对肝硬化门静脉高压的形成机制有"双向"调节作用,具有良好的临床开发和应用前景。

天然牛磺酸对肝硬化大鼠MMP-9、Integrin-β1表达的调控

天然牛磺酸广泛存在于海洋生物中,研究发现具有一定抗纤维化作用,基质金属蛋白酶(MMP-9)、整合素β1(Integrin-β1)与肝纤维化密切相关,实验中通过给予肝硬化大鼠不同剂量天然牛磺酸(0.3、0.6、1.2 g/kg·d),采用放射免疫法检测血清肝纤四项含量;实时荧光定量PCR检测大鼠肝组织MMP-9、Integrin-β1 mRNA表达,免疫蛋白印迹法(Western-blot)检测相应蛋白的表达。结果表明,肝硬化大鼠MMP-9、Integrin-β1 mRNA及蛋白表达显著升高,天然牛磺酸能显著减少模型大鼠血清肝纤四项水平,降低MMP-9、Integrin-β1 mRNA及相关蛋白表达,以0.6 g/kg·d剂量组效果最佳。天然牛磺酸下调肝硬化大鼠MMP-9和Integrin-β1的表达,与其发挥肝保护作用密切相关。

天然牛磺酸对肝硬化门静脉高压大鼠门静脉血流动力学及内皮细胞的影响

目的探讨天然牛磺酸对肝硬化门静脉高压(PHT)大鼠门静脉系统血流动力学及内皮细胞的影响。方法建立肝硬化PHT大鼠模型。将45只肝硬化PHT大鼠随机分为对照组、结合牛磺酸组(A组)及天然牛磺酸组(B组),每组15只。A组给予结合牛磺酸灌胃,B组给予天然牛磺酸灌胃,对照组给予等量0. 9%氯化钠溶液灌胃。21 d后,比较3组大鼠门静脉血流量(PVF)、门静脉压力(PVP)、门静脉阻力(PVR)、平均动脉压(MAP)以及肝脏血流灌注量(HPV)水平,并在超微电镜下观察门静脉内皮细胞超微结构。结果 A组及B组PVP、PVR、PVF均低于对照组(均P <0. 05);对照组、A组、B组MAP、HPV水平依次升高(P <0. 05)。电镜下可见对照组门静脉内皮细胞变性或脱落,基底膜完整性遭破坏,A组及B组内皮细胞结构完整,B组基底膜正常。结论天然牛磺酸可减轻肝硬化门脉高压大鼠门静脉压力,改善效应内皮细胞的超微结构,且其效果优于结合牛磺酸。

平板超滤膜法在分离纯化天然牛磺酸中的应用

介绍了天然牛磺酸提取工艺中存在的问题及膜分离技术,研究了4种不同规格超滤膜在章鱼下脚料中提取天然牛磺酸中的应用,从膜通量、蛋白去除率、牛磺酸收率、膜污染和膜清洗等各方面考察了不同材质、不同切割分子量的平板超滤膜分离性能.得出了1#平板超滤膜(MWCO 30 000g/mol,CA)为从章鱼下脚料中分离牛磺酸的较佳分离膜.

天然牛磺酸对大鼠肝纤维化组织学及血清学的影响

[目的]观察天然牛磺酸对大鼠肝纤维化的影响。[方法]采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,Wistar大鼠随机分正常对照组、模型组、合成牛磺酸组、天然牛磺酸组,应用免疫组化及放射免疫等方法研究天然牛磺酸对大鼠肝组织纤维化的影响。[结果]天然牛磺酸较模型组相比能显著改善大鼠肝组织纤维化程度(P<0.05),促进活化HSC凋亡,提高SOD含量,降低MDA及TGF-β1的含量以及降低血清中ALT,HA,PCⅢ和LN的水平(均P<0.01);天然牛磺酸组促进HSC凋亡优于合成牛磺酸组(P<0.01)。[结论]天然牛磺酸具有一定的抑制肝纤维化作用。

天然牛磺酸对人肝星状细胞增殖与凋亡的影响

目的:通过研究天然牛磺酸(Natural Taurine,NTau)抑制人肝星状细胞系(HSC-LX2)的增殖及诱导其凋亡的作用,进一步探讨NTau抗肝纤维化的相关作用机制。方法:在体外培养人肝星状细胞(HSC-LX2),将其分成空白对照组以及低剂量(3.0μg/m L)、中剂量(6.0μg/m L)、高剂量(9.0μg/m L)NTau组,分别在各培养孔内加入相应浓度的含药血清,孵育、培养2天后,采用MTT比色法测定光密度值,然后计算出各组细胞的存活率,并检测各组细胞的增殖活性;联合TUNEL法、流式细胞术计算各组细胞的凋亡数,算出凋亡比,检测各组细胞的晚期凋亡率。结果:高、中、低剂量NTau组HSC-LX2细胞光密度值(Optical Density;OD)均显著低于空白对照组(P<0.05);高、中、低剂量NTau组对HSC-LX2细胞的增殖抑制率均明显高于空白对照组(P<0.05);高、中、低剂量NTau组对HSCLX2细胞的增殖抑制率比较差异有统计学意义(P<0.05);高、中、低剂量NTau组HSC-LX2细胞G0/G1期DNA百分比均显著高于空白对照组(P<0.05);高、中、低剂量NTau组HSC-LX2细胞S期、G2/M期DNA百分比均显著低于空白对照组(P<0.05);空白对照组HSC-LX2细胞晚期凋亡率低于低、中、高剂量NTau组(P<0.05)。结论:NTau可抑制HSC-LX2的细胞增殖,并促进其凋亡,可综合干预肝纤维化的发生、发展进程,并且与剂量呈正相关性。

天然牛磺酸联合中药对大鼠肝纤维化的影响研究

目的观察天然牛磺酸联合中药对大鼠肝纤维化的影响。方法选取SPF级SD雄性大鼠120只,180~220 g。随机分成6组,即正常对照组、模型对照组、天然牛磺酸联合中药组、天然牛磺酸组、中药组、秋水仙碱组,每组20只。正常对照组给予正常喂养;其余5组制作肝纤维化模型。给予6组大鼠生理盐水或药物干预,4周后处死大鼠取腹主动脉血及肝组织进行检测比较。结果 （1）天然牛磺酸联合中药组大鼠肝纤维化程度显著轻于模型对照组（P〈0.05）,脂质空泡少,肝细胞坏死程度轻、变性不明显,肝细胞索放射状排列,肝小叶结构基本完整。（2）6组大鼠肝组织肝纤维化分期、分级比较差异具有统计学意义（P〈0.01）;天然牛磺酸联合中药组肝纤维化程度明显轻于中药组和天然牛磺酸组（P〈0.05）。（3）6组大鼠血清HA、LN、PCⅢ、ⅣC含量比较差异有统计学意义（P〈0.05）;天然牛磺酸联合中药组大鼠血清LN、PCⅢ含量显著低于模型对照组、天然牛磺酸和中药组（P〈0.05）。（4）6组大鼠血清ALT、AST、Alb水平比较差异有统计学意义（P≤0.05）;天然牛磺酸联合中药组大鼠血清ALT和AST水平显著低于模型对照组、天然牛磺酸组及中药组,Alb显著高于模型对照组、天然牛磺酸组及中药组（P〈0.05）。结论天然牛磺酸联合中药在抗肝纤维化方面优于天然牛磺酸或中药。

天然牛磺酸联合肝宁方治疗肝炎后肝硬化腹水的临床观察

目的:探究天然牛磺酸联合肝宁方治疗肝炎后肝硬化腹水的临床疗效。方法选取200例肝炎后肝硬化腹水患者,随机分为观察组和对照组,各100例。观察组采用天然牛磺酸联合肝宁方的方法治疗,对照组则采用单纯西医治疗。观察比较2组患者的临床治疗效果。结果:经治疗后:(1)观察组患者治疗效果的总有效率高达94.0%,显著高于对照组的79.0%(P<0.05);(2)治疗后观察组ALB(44.72±2.09)g/L、ALT(57.25±21.09)U/L、TBLL(41.72±7.09)μmol/L,均优于对照组(40.18±1.06)g/L、(82.58±42.35)U/L、(47.18±15.06)μmol/L(P<0.05)。结论:天然牛磺酸联合肝宁方治疗肝炎后肝硬化腹水临床疗效显著,临床上值得广泛推广使用。

天然牛磺酸提取及分离纯化研究

牛磺酸作为营养强化剂已在食品中,尤其是婴幼儿食品、保健品中得到广泛的应用。综述了天然牛磺酸提取及分离纯化方法研究的最新进展,以期为牛磺酸的深入研究提供参考。

天然牛磺酸对肝纤维化大鼠肝星状细胞调控的代谢组学研究

文章通过超高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC-MS)对天然牛磺酸作用不同时间点的HSC细胞内源性代谢产物进行检测,寻找其与疗效相关的生物标志物和化学物质基础。结果显示天然牛磺酸对肝纤维化大鼠HSC调控机制有可能是通过抑制ATP生成,减少蛋白折叠、脂酸及磷脂类beta细胞氧化的能量供应,从而抑制HSC活化,实现抗肝纤维化作用。

天然牛磺酸对急性抑郁模型小鼠的干预作用

以天然牛磺酸为试验材料,通过建立2种急性抑郁动物模型,研究牛磺酸对抑郁模型动物的干预效果。以ICR小鼠为实验动物,设牛磺酸低(0.5 g/kg bw)、中(1 g/kg bw)、高(2 g/kg bw)剂量组,同时设溶剂对照组、模型对照和阳性(氟西汀)对照组。通过建立行为绝望动物模型,探讨天然牛磺酸对行为绝望小鼠的干预效果;通过行为学、血清和脑组织中相关生化指标,分析牛磺酸对利血平诱导的急性抑郁的干预机制。结果表明:牛磺酸中、高剂量组可显著改善行为绝望小鼠的抑郁样行为,并缓解利血平诱导的小鼠眼睑下垂,同时升高抑郁小鼠脑组织五羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺水平,降低单胺氧化酶活性,提高脑源性神经营养因子含量,降低促肾上腺皮质激素释放因子、促肾上腺皮质激素、皮质醇水平,改善相关生化指标。研究表明:牛磺酸对行为绝望模型和利血平诱导抑郁模型均具有干预抑郁的作用,作用机制可能与增加单胺类神经递质,参与调节肾上腺功能的紊乱有关。

天然牛磺酸抗肝纤维化作用机制研究

目的研究天然牛磺酸(natural taurine,NT)对肝纤维化大鼠的保护作用,进一步探讨NT抗肝纤维化作用机制。方法将75只SD大鼠随机平均分为对照组、模型组、NT不同剂量组(0.3、0.6、0.9 g/d)。对照组大鼠正常饲养;模型组与NT各组大鼠均予皮下注射40%四氯化碳(CCl4)橄榄油溶液,首次剂量5 mL,以后每次3 mL,2次/周,共注射6周;NT各组予NT灌胃治疗,正常组及对照组予等量生理盐水,连续6周。实验末,ELISA检测大鼠血清IL-1β、IL-6、IFN-γ水平以及肝组织TGF-β1、TGF-β3、SOD、MDA及GSH-Px含量;RT-PCR检测肝组织TGF-β1、TGF-β3 mRNA表达量。结果与模型组比较,NT可以有效降低纤维化大鼠血清中炎症因子IL-1β、IL-6以及肝组织MDA、TGF-β1含量;NT可以有效促进肝纤维化大鼠血清IFN-γ及肝组织SOD、GSH-Px、TGF-β3分泌;NT可以下调肝纤维化组织TGF-β1 mRNA表达,促进TGF-β3 mRNA表达。结论 NT具有一定的抗肝纤维化作用,其机制可能与抑制大鼠肝脏的炎症反应、氧化应激作用以及下调TGF-β1 mRNA表达和促进TGF-β3 mRNA表达相关。

天然牛磺酸对肝纤维化大鼠肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的通过观察天然牛磺酸(NT)对肝纤维化大鼠肿瘤坏死因子(TNF)-α表达的影响,研究NT抑制肝细胞炎性状态、延缓肝纤维化进展的相关机制。方法将实验大鼠随机分为对照组、模型组、NT低剂量组(0.3 g/kg)、NT中剂量组(0.6 g/kg)、NT高剂量组(0.9 g/kg),每组15只。对照组给予正常喂养;模型组与NT各组大鼠均给予皮下注射40%CCL4橄榄油溶液3 m L/kg造模,首次剂量5 m L/kg,2次/w,共注射6 w,并饲以高脂饲料;NT各组在造模的同时予天然牛磺酸灌胃,连续给药6 w;实验结束时,称量大鼠体质量和肝脏质量,计算肝体系数,检测大鼠肝功能(ALT、AST、TBIL及ALB)、肝纤维化指标(HA、PCIII、IV-C及LN)、血清TNF-α水平及肝脏组织TNF-αmRNA表达量。结果与模型组相比,NT低剂量组肝体系数差异无统计学意义(P>0.05),NT中剂量组、高剂量组肝体系数明显降低;NT各组肝功能、肝纤维化显著改善,血清TNF-α水平及肝脏组织中TNF-αmRNA表达显著降低。结论NT能维持肝功能、延缓肝纤维化进展,其机制可能与抑制TNF-α相关因子表达,降低炎性介质分泌,减轻炎症反应有关。

天然牛磺酸的提取与应用

天然牛磺酸具有独特的药理及营养保健作用,广泛应用在医药和食品行业中。文章讨论了国内近年来提取牛磺酸的各种原料和提取工艺,并对应用的领域进行了概述。

章鱼下脚料可提炼天然牛磺酸

近日，从厦门东海洋水产品公司获悉，利用章鱼下脚料提炼天然牛磺酸项目，已实现产业化投产，目前已进入批量生产阶段，部分产品已投放市场。

天然牛磺酸对肝硬化大鼠炎症因子和内毒素的影响

目的:观察天然牛磺酸(Natural Taurine, NT)对肝硬化大鼠中相关炎症因子和内毒素(ET)影响,探讨NT对肝硬化大鼠的保护作用。方法:将雄性健康6周龄SD大鼠随机分为5组:空白对照组、CCl4模型组、NT小剂量组(0.3g/d)、NT中剂量组(0.6g/d)、NT大剂量组(0.9g/d),每组15只。采用自动生化分析仪检测肝功能(ALT、AST、TBIL、ALB),ELISA法测定IL-1β、IL-6、IL-10以及TNF-α,基质染色法测定ET含量。结果:与模型组比较,NT各剂量组ALT、AST及TBIL含量均显著降低;NT各剂量组ALB含量均显著下降;NT各剂量组血清TNF-α、IL-1β、IL-6、ET表达水平明显下降;NT各剂量组IL-10含量明显上升。结论:天然牛磺酸能有效减轻减轻炎症、降低内毒素以及改善肝功能,从而发挥保护肝硬化大鼠的作用。

牛磺酸对大鼠肝星状细胞的影响

目的探讨天然牛磺酸对大鼠肝星状细胞的影响。方法采用HSC-T6细胞株为模式细胞,传代培养,MTT法观察天然牛磺酸对HSC-T6细胞增殖的影响,胶原晶格收缩法观察其对HSC-T6细胞收缩的影响,ELISA法观察其对HSC-T6细胞分泌I型胶原(CoI)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。结果天然牛磺酸中、高剂量组对HSC-T6细胞抑制率分别为29·72%,33·04%,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0·01);各剂量组较对照组均能显著抑制HSC-T6收缩(P<0·05或P<0·01),抑制作用与剂量呈依赖关系;中、高剂量组较对照组相比能显著抑制HSC-T6分泌CoI、FN、TGF-β1(P<0·05或P<0·01)。结论天然牛磺酸可抑制HSC-T6增殖、收缩、分泌CoI、FN、TGF-β1。