天香丹胶囊预处理激活ERα介导的AKT/eNOS通路减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤的实验研究

目的:观察天香丹(TXD)胶囊通过雌激素受体(ER)α介导的蛋白激酶B(AKT)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)通路对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的改善作用,并探讨其作用机制。方法:将70只SD雌性大鼠随机分为正常对照组(Control组,10只)和去卵巢组(OVX组,60只),OVX组摘除双侧卵巢。将OVX组分为假手术组(Sham组)、模型组(MIRI组)及雌二醇组(OVX+MIRI-E2组,0.8 mg/kg)、OVX+MIRI-TXD高剂量组(0.6 g/kg)、OVX+MIRI-TXD中剂量组(0.4 g/kg)、OVX+MIRI-TXD低剂量组(0.2 g/kg),每组10只,连续灌胃给药60 d。通过结扎心脏冠状动脉左前降支30 min后再灌注60 min方法建立大鼠心肌缺血-再灌注损伤模型。记录各组大鼠心脏血流动力学指标;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织形态学变化,微量法检测大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、一氧化氮(NO)水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清雌二醇水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测心肌组织雌激素受体ERα、AKT蛋白磷酸化水平、eNOS磷酸化水平。结果:与MIRI组比较,OVX+MIRI-E2组及OVX+MIRI-TXD各剂量组大鼠心脏血流动力学指标、心肌组织形态结构改善,血清LDH、CK和MDA含量降低,NO、SOD和ERα蛋白含量升高,抗氧化能力、AKT和eNOS磷酸化水平增强(P<0.05)。结论:TXD胶囊预处理可减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤,其机制可能与激活ERα介导的AKT/eNOS信号通路、增加内源性NO释放、舒张血管、减轻心脏负荷和心肌需氧量、对心肌缺血的保护作用有关。

天香丹胶囊治疗冠心病心绞痛37例疗效观察

目的:观察天香丹胶囊治疗冠心病心绞痛的临床疗效。方法:将106例确诊病例随机分为三组,治疗组37例服用天香丹胶囊,每次3粒,日3次;对照Ⅰ组36例服用天香丹颗粒,每次9 g(1袋),日2次;对照Ⅱ组服用通心络胶囊治疗,每次3粒,日3次,三组均4周为1个疗程。结果:治疗组、对照Ⅰ组、对照Ⅱ组心绞痛症状改善有效率分别为83.79%、86.11%和81.82%,三组比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗组、对照Ⅰ组、对照Ⅱ组心电图有效率分别为70.27%、72.22%和69.70%,三组比较差异无统计学意义(P>0.05)。三组NST和ΣST与治疗前相比有显著差异(P<0.01);治疗组胸闷、气短、乏力等症状的改善优于对照Ⅱ组(P<0.01或P<0.05)。结论:天香丹胶囊治疗气虚血瘀证冠心病心绞痛有效、安全。

天香丹胶囊质量标准研究

目的:建立天香丹胶囊(红景天、丹参、降香)的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法鉴别本制剂中红景天、丹参、降香,高效液相色谱法将本制剂中红景天苷和酪醇同时测定,丹酚酸B和丹参酮ⅡA同时测定,并以外标两点法计算含量。红景天苷和酪醇色谱条件:流动相:甲醇-乙腈-0.1%磷酸(5∶5∶90),检测波长:221nm。丹酚酸B及丹参酮ⅡA色谱条件:流动相:甲醇(A)-1%甲酸(B),线性梯度洗脱:A∶B=(45∶55)洗脱15min;A∶B=(80∶20)洗脱15min,检测波长:270nm。流速均为1mL/min,柱温均为(30±5)℃,进样量均为10μL。结果:薄层色谱可鉴别出红景天、丹参、降香的特征斑点;HPLC法测定的红景天苷含量线性范围为0.2～1.0μg(r=0.9991),平均回收率=99.6%,RSD=4.10%(n=9)。酪醇含量线性范围为0.2～1.0μg(r=0.9993),平均回收率=99.5%,RSD=2.56%(n=9)。丹酚酸B含量线性范围为1.98～9.90μg(r=0.9995),平均回收率=98.6%,RSD=3.09%(n=9)。丹参酮ⅡA含量线性范围为0.3～1.5μg(r=0.9993),平均回收率=100.1%,RSD=2.79%(n=9)。结论:本法专属性强,重现性好,结果准确可靠,可作为天香丹胶囊的质量控制方法。

天香丹胶囊挥发油包合工艺研究

目的优选天香丹胶囊挥发油最佳包合工艺。方法通过比较不同的包合方法后确定最佳包合方法。再在单因素试验基础上对影响包合质量的因素投料比、包合时间、包合温度三因素进行正交试验综合考察,以包合率、产率为指标,综合评分后进行评价,筛选最佳包合工艺条件。结果挥发油最佳包合工艺条件为加5倍量水制成β-环糊精饱和液,加入β-环糊精1/6量的挥发油,研磨10 min。结论该工艺合理、稳定、可行。

用天香丹胶囊对行冠脉搭桥术的患者实施术后康复治疗的效果探究

目的 :探讨用天香丹胶囊对行冠脉搭桥术的患者实施术后康复治疗的临床效果。方法 :对近年来在我院进行冠脉搭桥手术的82例患者的临床资料进行回顾性研究。我们在这82例患者知情的情况下,将他们随机分为观察组和对照组,每组各有41例患者。在这两组患者手术后,我院对对照组患者进行常规康复治疗,对观察组患者在进行常规康复治疗(方法与对照组患者相同)的基础上,加用天香丹胶囊进行治疗。治疗结束后,比较两组患者进行康复治疗前后左心室射血分数和六分钟步行距离的变化情况。结果 :在治疗前,两组患者左心室的射血分数相比无显著性差异(P>0.05)。在治疗后,两组患者左心室的射血分数均较治疗前有明显的提高,其中观察组患者治疗后左心室的射血分数明显高于对照组患者,二者相比差异具有显著性(P﹤0.05)。在治疗前,两组患者六分钟步行的距离相比无显著性差异(P>0.05)。在治疗后,两组患者六分钟步行的距离均较治疗前有明显的增加,其中观察组患者治疗后六分钟步行的距离明显长于对照组患者,二者相比差异具有显著性(P﹤0.05)。结论 :用天香丹胶囊对行冠脉搭桥术的患者实施术后康复治疗效果显著,可有效地改善患者的心功能。此疗法值得在临床上推广使用。

天香丹胶囊调控雌激素核效应抗心肌缺血作用研究

目的研究天香丹胶囊调控雌激素核效应抗心肌缺血作用的机制。方法建立去卵巢心肌缺血再灌注大鼠双模型,取SD雌性大鼠70只(200±50)g,随机分为空白组、去卵巢组、去卵巢缺血再灌注组、雌二醇干预组(E_(2),0.8×10^(-3)g·kg^(-1)·d^(-1)),天香丹干预高、中、低剂量组(天香丹胶囊,0.8×10^(-3)、0.6×10^(-3)、0.2×10^(-3)g·kg^(-1)·d^(-1)),建立去卵巢大鼠模型,每组每天给药1次,灌胃60 d,可逆性结扎大鼠心脏左前降支使心肌缺血30 min,再灌注180 min。实验过程中心电图实时监测,记录各组大鼠的Ⅱ导联心电图;检测血清中雌激素和心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)水平;伊文氏蓝-2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)双染色法测定心脏梗死面积;HE染色观察心肌组织形态;Western blot分析心肌组织细胞核中雌激素受体α(ERα)、热休克蛋白70(HSP70)、BCL2-Associated X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)蛋白的表达。结果天香丹干预60 d后,与去卵巢缺血再灌注组比较,雌二醇干预组和天香丹高、中、低干预组雌激素水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与去卵巢缺血再灌注组比较,雌二醇干预组和天香丹干预组雌激素水平显著升高(P<0.05),而cTnⅠ水平降低(P<0.05),心肌梗死面积减小,HE染色心脏组织呈现出不同程度的改善,此外,雌二醇干预组和天香丹干预组心肌组织细胞核蛋白中ERα、HSP70、Bcl-2、Bcl-2/Bax蛋白的表达显著高于缺血再灌注模型组,差异有统计学意义(P<0.05),Bax蛋白的表达显著低于缺血再灌注模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论天香丹胶囊调控雌激素核效应可通过激活雌激素核受体α和增加HSP70的表达,从而抑制细胞凋亡发挥抗心肌缺血作用。

天香丹胶囊预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察天香丹胶囊预处理对去卵巢合并心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌损伤的保护作用。方法将60只SD雌性大鼠摘去卵巢后随机分为假手术组、模型组、对照组和低、中、高剂量实验组,每组10只。假手术组和模型组均灌胃给予等量双蒸水;对照组按0.8 mg·kg^(-1)的剂量灌胃给予雌二醇溶液;低、中、高剂量实验组分别按200.0、400.0和800.0 mg·kg^(-1)的剂量灌胃给予天香丹溶液。6组大鼠连续给药60 d。末次给药12 h后,建立缺血再灌注模型;其中假手术组只穿线不结扎。另取10只正常SD雌性大鼠为正常组(不做任何处理)。用伊文氏蓝-氯化三苯基四氮唑双重染色检测大鼠心肌梗死率,用蛋白质印迹法检测组织中活化胱天蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)、环腺苷酸反应元件结合蛋白(CREB)等相关蛋白的表达情况。结果高剂量实验组、对照组、模型组、假手术组和正常组的心肌梗死率分别为(21.61±2.74)%、(22.08±4.68)%、(61.84±3.92)%、(1.02±0.02)%和(0.85±0.13)%,cleaved caspase-3蛋白相对表达水平分别为0.52±0.03、0.70±0.05、0.98±0.03、0.54±0.07和0.44±0.03,磷酸化CREB蛋白相对表达水平分别为1.12±0.06、1.16±0.04、0.70±0.05、1.32±0.04和1.45±0.03。模型组的上述指标与高剂量实验组、对照组、假手术组和正常组相比,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论天香丹胶囊预处理可以改善I/R引起的大鼠心肌损伤,其作用机制可能是上调环腺苷酸/蛋白激酶A/环腺苷酸反应元件结合蛋白(cAMP/PKA/CREB)通路相关蛋白表达,下调cleaved-caspase-3蛋白表达,进而实现抑制心肌细胞凋亡。

天香丹胶囊通过调节G蛋白偶联雌激素受体保护心肌缺血再灌注损伤

目的探讨天香丹胶囊(TXD)对预处理去卵巢雌性合并心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌损伤的保护作用与其可能机制。方法将60只SD雌性大鼠摘去卵巢后随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、低、中、高3个剂量实验组,每组10只。阳性对照组灌胃0.8 mg·kg^(-1)雌二醇溶液,低、中、高剂量实验组分别灌胃给予0.2、0.4和0.8 g·kg^(-1)天香丹溶液,假手术组、模型组灌胃等量双蒸水。连续处理60 d。末次给药12 h后建立心脏缺血再灌注模型;其中假手术组只穿线不结扎,另取10正常SD雌性大鼠为正常组(不做任何处理)。用酶联免疫吸附试验法检测血清中大鼠心肌肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、三磷酸肌醇(IP3)的含量;用微量法检测血清中乳酸脱氢酶(LDH);用MTB微板法检测心肌组织中Ca^(2+)浓度;用苏木精-伊红染色检测大鼠心肌组织病理变化;用蛋白质印迹法检测心肌组织中G蛋白偶联雌激素受体(GPER)、磷脂酶C(PLC-β)、三磷酸肌醇受体(IP3R)以及肌浆网钙ATP酶(SERCA2)蛋白表达水平。结果正常组、假手术组、模型组、阳性对照组和高剂量实验组的血清中CK-MB活性表达分别为(64.88±4.70)、(65.86±4.40)、(161.40±10.97)、(78.31±6.64)和(79.62±7.43)pg·mL^(-1);Ca^(2+)浓度分别为(3.20±0.11)、(3.41±0.12)、(5.05±0.15)、(4.10±0.12)和(4.18±0.18)mmol·L^(-1);模型组与假手术组比较,高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。正常组、假手术组、模型组、阳性对照组和高剂量实验组的GPER蛋白相对表达水平分别为0.74±0.06、0.73±0.04、0.36±0.03、0.67±0.06和0.65±0.05;模型组与假手术组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);阳性对照组、高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论TXD对I/R大鼠心肌损伤有保护作用,可能与调节GPER/PLC/IP3R通路有关。