人参二醇皂苷对失血-内毒素二次打击模型大鼠肿瘤坏死因子α和白细胞介素6含量的影响

目的:探讨失血-内毒素二次打击模型大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)含量的变化,以及人参二醇皂苷(PDS)对其影响。方法:Wistar大鼠随机分为假手术对照组(S组)、失血性休克组(H组)、失血-内毒素双打击组(HL组)、地塞米松预治疗组(HLD组)及PDS预治疗组(HLP组)。在失血性休克首次打击的基础上,用内毒素作为第二次打击复制大鼠难治性休克模型,6 h后处死动物,用放射免疫分析法测定血清TNF-α和IL-6的含量。结果:血清TNF-α和IL-6含量,H组、HL组与S组比较均明显升高,但以HL组尤为明显(P<0.01,P<0.001),而HLP组和HLD组的TNF-α含量和IL-6含量则明显地低于HL组(均P<0.01)。结论:在失血性休克基础上给予内毒素可显著地提高TNF-α和IL-6的血清水平;PDS和地塞米松有类似的抑制TNF-α和IL-6的释放,保护失血-内毒素二次打击大鼠的作用。

盐酸戊乙奎醚对失血性休克-内毒素二次打击大鼠肾损伤的保护作用

目的探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)对失血性休克-内毒素二次打击大鼠肾损伤的保护作用。方法 45只成年Wistar大鼠随机分为假二次打击组(S组)、二次打击组(M组)和PHC1mg/kg组(PHC1组)、2mg/kg组(PHC2组)、3mg/kg组(PHC3组)。取动脉血2ml测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-8(IL-8)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN),测定肾粘附分子-1(ICAM-1)和核转录因子-κB(NF-κB),HE染色观察肾的病理改变。结果 PHC1、PHC2、PHC3组与M组相比,血清TNF-α、IL-1、IL-8、Cr、BUN含量明显降低,肾组织ICAM-1和NF-κB表达明显减弱(P<0.05)。与PHC2、PHC3组比较,PHC1组血清TNF-α、IL-1、IL-8、Cr、BUN明显降低(P<0.05)。光镜下PHC1、PHC2、PHC3组肾小管损伤均比M组轻。结论 PHC可抑制失血性休克-内毒素二次打击大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-8、Cr、BUN及ICAM-1、NF-κB在肾脏表达,减轻肾功能和肾小管的损伤程度,以1mg/kg作用最显著。

氯胺酮对失血性休克-内毒素二次打击大鼠肺损伤的保护作用

目的探讨氯胺酮对失血性休克-内毒素二次打击大鼠肺损伤的影响。方法40只SD雄性大鼠随机分为假手术组(S组)、失血-内毒素双重打击组(C组)、低剂量氯胺酮组(LK组)、高剂量氯胺酮组(HK组)。在失血性休克"首次打击"基础上,尾静脉注入内毒素2 mg/kg作为"二次打击"急性肺损伤模型。在液体复苏时S组、C组腹腔注射生理盐水5 mL,LK组和HK组分别腹腔注射氯胺酮2 mg/kg和10 mg/kg。取肺组织测定肺水含量、髓过氧化物酶(MPO)和NF-кB活性,取动脉血测TNF-α、IL-1、IL-8含量。结果与S组相比,C组、LK组和HK组肺水含量、MPO和NF-кB活性均增高(P均<0.05);与C组相比,LK组和HK组肺水含量、MPO和NF-кB活性均降低(P均<0.05),且呈剂量依赖性。与S组相比,C组、LK组和HK组血清TNF-α、IL-1、IL-8浓度均增高(P均<0.05);与C组相比,LK组和HK组血清TNF-α、IL-1、IL-8浓度均降低(P均<0.05),且呈剂量依赖性。结论氯胺酮对失血性休克-内毒素二次打击所致的大鼠急性肺损伤有保护作用,且呈剂量依赖性。

人参二醇皂苷对“失血-内毒素双打击”大鼠肺的保护作用及对血清肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6的影响

目的:研究失血-内毒素双打击大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量的变化,以及人参二醇皂苷(PDS)对其的影响,探讨人参二醇皂苷对"双打击"大鼠肺的保护作用,为人参二醇皂苷临床治疗的应用奠定基础.

赤芍承气汤对内毒素二次打击后急性肝损伤大鼠细胞因子的影响

目的:研究赤芍承气汤对内毒素二次打击后急性肝损伤大鼠细胞因子的影响,阐述其对肝衰竭的防治机制。方法:将75只SD大鼠随机分为正常组(A),模型组(B),赤芍承气汤低(C)、中(D)、高(E)剂量组,培菲康组(F),造模前3天开始灌胃,末次灌胃1h后,除正常组外其余组大鼠通过D-氨基半乳糖腹腔注射24 h后成肝衰竭模型对SD大鼠制造第一次打击,之后给予赤芍承气汤或培菲康治疗,再腹腔注入脂多糖(LPS,内毒素的主要成分)作为第二次打击。观察大鼠行为学变化,二次打击后2h、8h处死大鼠,测定各组大鼠血清天门冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TBil)、内毒素(ET)水平、血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6、IL-1β,观察肝组织病理学。结果:二次打击致各组大鼠ALT、AST、TBil、ET、TNF-α、IL-6、IL-1β水平明显高于正常组,肝脏内炎细胞浸润、坏死明显,药物干预组大鼠相关指标较模型组明显降低(P<0.05),肝组织病变减轻。结论:赤芍承气汤对内毒素二次打击急性肝损伤大鼠具有防治作用,该方能减轻其肝脏的损伤,改善肝脏功能,提高其大鼠生存率,其疗效机制可能与减轻内毒素血症从而切断了部分内毒素的信号传导通路,有效抑制炎症信号通路的激活,减轻TNF-α等炎症介质的释放进而减轻肝损伤有关。

人参二醇皂甙对“两次打击”全身炎症反应综合征大鼠肺CD14和NF-κB表达的影响

目的探讨人参二醇皂苷(PDS)对“二次打击”全身炎症反应综合征(SIRS)肺损伤保护作用的分子机制。方法Wistar大鼠随机分为假手术对照组(S组)、失血-内毒素二次打击组(HL组)、地塞米松预治疗组(HLD)及PDS预治疗组(HLP组)。大鼠经失血性休克引起的“一次打击”和内毒素引起的“二次打击”后,导致SIRS模型。提取肺总RNA和蛋白,分别以RT-PCR检测CD14和IκBa mRNA表达,应用Western blot检测CD14和NF-κB的蛋白表达。结果肺组织CD14 mRNA和蛋白质表达丰度以HL组最高,HLP组、HLD组均明显低于HL组(P<0.05)。而IκBamRNA表达水平,HL组明显低于S组(P<0.01),HLP组和HLD组明显高于HL组(P<0.05和P<0.01),而与S组相近(P>0.05)。HL组的NF-κBP65蛋白质表达水平明显高于S组,HLD和HLP组的NF-κBP65蛋白质表达水平也低于HL组(P<0.05),接近S组(P>0.05)。结论PDS与DEX对“两次打击”SIRS肺损伤有类似的保护作用,抑制LPS介导的CD14和NF-κB信号转导通路的过度激活是实现对肺保护作用的重要机制。

PDS对二次打击大鼠RAS系统相关基因的影响

目的探讨二次打击时肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAS)相关基因的变化和应用人参二醇组皂苷(PDS)后对相关基因的影响。方法利用失血性休克对Wistar大鼠进行首次打击,给予PDS预治疗;应用脂多糖(LPS)腹腔注入的方式进行二次打击,6h后处死动物,留取肺脏组织和血清,检测大鼠肺脏组织中血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素原(AGT)、血管紧张素(Ang)Ⅱ受体1和2(AT1和AT2)的表达,放免法检测大鼠血清AngⅠ、AngⅡ的变化和应用PDS后对以上各指标的影响。结果二次打击大鼠模型肺脏组织ACE、AGT表达水平明显高于对照组(P<0.01),应用PDS后ACE、AGT表达水平较二次打击模型组明显降低(P<0.05)。免疫组化染色结果显示二次打击模型组大鼠肺组织中ACE蛋白和AngII蛋白呈强阳性表达;应用PDS后大鼠肺组织中ACE蛋白和AngⅡ蛋白呈弱阳性表达。放免法检测结果显示:二次打击6h后血清中AngⅡ含量明显高于对照组(P<0.05);应用PDS后AngⅡ含量明显低于二次打击模型组(P<0.01);而AngⅠ变化不明显。结论二次打击可激活RAS,通过增加ACE、AGT表达,促进AngⅡ生成增加,加重肺损伤。而应用PDS可降低ACE和AGT的表达,减少AngⅡ生成,减轻肺损伤。

双重打击致急性肺损伤大鼠膈肌中泛素-蛋白酶体途径变化的研究

目的观察大鼠失血性休克（HS）＋内毒素二次打击后膈肌组织内蛋白降解途径之一的泛素一蛋白酶体系统组成成分的变化。方法24只SD大鼠随机分为两组：假手术对照组（C组）和二次打击组（MS组），每组12只。建立“失血性休克一内毒素”二次打击大鼠模型。蛋白免疫印记（Westernblot）方法测定大鼠膈肌内E2—14k、MuRFl的蛋白表达；逆转录一聚合酶链式反应（RT—PCR）技术检测膈肌内泛素和蛋白酶体c2亚基的mRNA表达；采用苏木素一伊红fHE）染色在光镜下观察肺组织病理学改变；另外取膈肌标本固定后做电镜检测。结果蛋白免疫印记结果显示，HS组大鼠膈肌组织中E2—14k及MuRFl的蛋白表达分别为（1．65±0．38、1．88±0．32），与C组（分别为1．17±0．25，1．21±0．24）比较明显增加，差异有统计学意义，P〈0．01。RT—PCR分析结果显示，Hs组大鼠膈肌组织中泛素及蛋白酶体c2亚基的mRNA表达分别为（O．81±O．28、0．50±0．25，与c组（分别为0．89±0．20比0．50±0．15）比较明显增加，差异有统计学意义，P〈0．05。HS组电镜下显示膈肌间线粒体肿胀、嵴减少，外膜模糊、变形，部分溶解破坏等超微结构的改变。结论二次打击大鼠膈肌组织内泛素一蛋白酶体降解途径被激活，可能是引起蛋白降解的重要因素之一。

血管生成素-2在脂多糖＂二次打击＂致大鼠急性肺损伤中的表达及意义

急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征（ALI/ARDS）最主要特征是多种病因诱发的弥漫性肺间质及肺泡水肿,但目前发病机制尚未完全明确[1].血管生成素（angiopoietin,Ang）是一组分泌型内皮细胞特异性生长因子,近年一些研究结果表明,Ang-2在脓毒症的炎症反应、血管渗漏等病理生理过程中起重要作用,同时也展现出广阔诊断与治疗前景[2].

肺表面活性物质对“二次打击”致大鼠急性肺损伤的作用

全身炎性反应综合征（SIRS）是严重创伤病人的主要死亡原因之一。当机体受到创伤、烧伤、大失血后，若继发感染、肠道细菌移位常常可以引起SIRS，从而导致急性肺损伤（Au）或急性呼吸窘迫综合征（ARDS），甚至多器官功能障碍综合征。肺表面活性物质功能异常在ALI／ARDS中起着非常重要的作用。本研究拟观察肺表面活性物质对急性失血性休克合并肺内毒素（LPS）感染“二次打击”致大鼠ALI的作用。

多器官功能障碍综合征大鼠肾组织细胞外基质损伤

目的检测Ⅳ型胶原及基质金属蛋白酶-9在多器官功能障碍综合征（MODS）大鼠肾组织及血清中变化，探讨细胞外基质的破坏与MODS肾功能衰竭的关系。方法实验在三峡大学医学院实验中心完成。将40只成年雄性SD大鼠（随机数字表法）分为健康对照组（8只）、MODS模型组（32只），模型组又分为造模后6、12、24、48h不同时点，每组8只。采用“二次打击”即眼球失血加腹腔注射脂多糖（LPS）制备MODS模型：大鼠左眼球取血2ml／100g，在放血4h后予无菌腹腔注射LPS5mg／kg。对照组予以腹腔注射等量的生理盐水，造模完成后在不同的时相点搜集标本。血生化检测各组血清肌酐（Cr）及尿素氮（BUN）的变化；光镜及电镜观察肾组织的形态及超微结构变化；酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清中Ⅳ型胶原及MMP-9的浓度变化；western印迹技术测定肾组织中Ⅳ型胶原及MMP-9的蛋白水平。组问比较采用单因素方差分析（SNK法）。结果（1）与对照组相比，MODS组各个时点肾功能损害较为明显，cr及BUN均明显增高（P〈0．05）。（2）光镜下对照组肾组织结构无改变；MODS组肾组织损伤较重。电镜下对照组肾组织基底膜胶原纤维连续完整，MODS组肾组织基底膜水肿、胶原纤维分布缺损明显。（3）与对照组比较，造模后6～48h，MODS组大鼠血清中MMP-9水平均明显增高，于造模后12h达到高峰（P〈0．05）。造模后血清Ⅳ型胶原的质量浓度各组均高于对照组，6～12h组升高不明显（P〉0．05），24～48h显著高于对照组（P〈0．01）。（4）造模后肾组织MMP-9的浓度6—12h比对照组明显增加（P〈0．01），24h达到高峰（P〈0．01），随后48h下降。造模后各组肾组织Ⅳ型胶原的质量浓度均较对照组明显降低（P〈0．05）。结论细胞外基质的破坏是引起MODS肾损伤的一个重要因素，可能成为MODS早期肾功能损害的诊疗和干预靶点。