新四代头孢菌素β-内酰胺酶稳定性的研究

目的 研究第四代注射用头孢菌素头孢匹罗对 8株包括质粒介导与染色体介导产酶菌株 β -内酰胺酶的稳定性 ,并与其它 4种头孢菌素进行比较 .方法 采用超声波破碎法提取细菌 β -内酰胺酶 ,紫外分光光度法测定酶对抗生素的水解率 .结果 头孢匹罗对各产酶菌株 β -内酰胺酶的相对水解率 <5 % ,尤其对质粒介导的超广谱 β -内酰胺酶TEM - 3、SHV - 4及染色体介导Ⅰ型 β-内酰胺酶的稳定性明显优于头孢噻肟及其他头孢菌素 .结论 头孢匹罗对 β

新疆某院5年间大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶和头孢菌素酶的分布及耐药特征分析

目的了解该院2011年1月至2015年12月大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)在感染中的分布及耐药特征。方法细菌鉴定采用法国生物梅里埃公司VITEK2-compact的GN鉴定卡;药敏实验采用纸片扩散(KB)法;双纸片增效法检测ESBLs;头孢西丁三维实验法检测AmpC酶;应用Whonet5.6、SPSS19.0软件进行统计分析。结果共分离出1 134株大肠埃希菌,主要来自尿液、呼吸道痰及气管抽吸物,分别占38.45%、37.65%;其中老年病科分离率最高,占17.72%;检出产酶株637株,占56.17%。单产ESBLs、单产AmpC及同产ESBLs+AmpC的大肠埃希菌分别为555、23、59株,分别占48.94%、2.03%、5.20%。产酶检出率最高的是老年病科,占67.16%。5年间以2015年的产酶检出率最高,占63.68%。各年龄组中产ESBLs与AmpC检出率,以大于75岁年龄组最高,占66.33%。产酶株与非产酶株对氨曲南、头孢一到四代、加酶抑制剂的阿莫西林/棒酸、替卡西林/棒酸、氨苄西林/舒巴坦;氨基糖苷类的妥布霉素、庆大霉素、喹诺酮类的左氧氟沙星和环丙沙星、磺胺类的磺胺甲噁唑/甲氧苄啶等15种抗菌药物的耐药率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。同时产ESBLs与AmpC菌株中出现了对碳青霉烯类抗菌药物耐药的细菌。单产AmpC大肠埃希菌耐药率相比于单产ESBLs要高,同时产ESBLs与AmpC大肠埃希菌耐药率相比于单产AmpC和单产ESBLs更高。总耐药数据显示,碳青霉烯类抗菌药物抗菌活性最强,其他依次是头孢替坦、阿米卡星、呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦及头孢西丁。结论产酶的大肠埃希菌耐药严重,合理使用抗菌药物以减少耐药率。

注射头孢菌素头孢他美钠β-内酰胺酶稳定性研究

对新三代头孢他美钠 (cefetamet)对临床分离产酶耐药菌 β 内酰胺酶稳定性进行了研究 ,并与头孢噻肟、头孢哌酮、西力欣、凯塞欣等其它 4种头孢菌素做了比较。结果表明头孢他美具有很强的β 内酰胺酶稳定性。在临床分离产酶耐药菌所产 β 内酰胺酶中 ,头孢他美钠表现出与头孢噻肟、西力欣、凯塞欣相似的相对水解率 。

宁波市耐三代头孢菌素志贺菌携带β-内酰胺酶与基因分型

目的了解本市耐三代头孢菌素志贺菌携带ESBLs及其基因型,为疾病防控提供依据。方法采用直接和增菌培养法,分离患者标本中志贺菌;药敏采用K-B法,ESBLs志贺菌表型确证采用纸片法;CTX-M、OXA、TEM和SHV耐药基因采用PCR法;耐药基因分型采用核苷酸序列法,用BLAST分析比较确定基因型别。结果药敏筛检出69株耐三代头孢菌素志贺菌,占ESBLs志贺菌的74.19%。检出CTX-M(CTX-M-1群和CTX-M-9群)、OXA和TEM耐药基因,检出率分别为79.71%、79.01%和26.09%,未检出CTX-M-2群和SHV耐药基因。DNA序列比对CTX-M-1群以CTX-M-15型为主,还检出7个其它型;CTX-M-9群则以CTX-M-14型多,其它型检出6个;49株OXA和18株TEM耐药基因测序后均为1型(OXA-1型和TEM-1型)。携带2种以上耐药基因的志贺菌21株,占30.43%。结论本市志贺菌对头孢曲松等三代头孢菌素耐药率较高,检出的ESBLs酶型种类多,CTX-M(CTX-M-1群的CTX-M-15型和CTX-M-9群的CTX-M-14型)是主流酶型,且可同时携带多种耐药基因,给疾病防控带来困难。OXA-1型的高携带率,提示我们应加强分析。B群志贺菌无论是表型的耐药性,还是耐药基因检出率均高于D群志贺菌,该发现有助志贺菌的扩散与流行研究。

产超广谱β-内酰胺酶及头孢菌素酶肺炎克雷伯菌耐药现状及防治

肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae，Kpn）为革兰阴性菌，属于肠杆菌科，兼性厌氧，常寄殖于人体上呼吸道和肠道，是重要的条件致病菌和院内感染常见的病原体之一。

第三四代头孢菌素对细菌产超广谱β-内酰胺酶的影响

目的 了解第 3 ,4代头孢菌素的使用及其与细菌产超广谱 β 内酰胺酶的关系 ,以指导临床合理用药。方法 选取江汉大学附属医院确诊为下呼吸道感染的住院患者 44 3例 ,对每例患者送检的晨痰标本经涂片筛检合格后再培养分离 ,共培养出 473株致病菌 (真菌除外 )。采用Kirby Bauer扩散法进行药敏分析。对每例患者使用第 3 ,4代头孢菌素情况进行统计。结果 2 0 0 1,2 0 0 2 ,2 0 0 3年第 3 ,4代头孢菌素使用率分别为 3 6 67% ,41 46%及 46 67% ;大肠埃希菌产超广谱 β 内酰胺酶分别为 17 65 % ,3 8 0 0 % ,3 9 0 2 % ;肺炎克雷白杆菌产超广谱 β 内酰胺酶分别为 19 2 3 % ,43 90 % ,44 74%。结论 第 3 ,4代头孢菌素的使用率增加 ,细菌产超广谱 β 内酰胺酶亦逐年增加。

细菌β-内酰胺酶对4种头孢菌素的水解作用及三唑巴坦的抑酶效应研究

目的比较头孢噻肟(CTX)与头孢噻吩(CET)、头孢哌酮(CPZ)和头孢唑林(CEZ)对细菌β-内酰胺酶的稳定性及不同浓度的三唑巴坦(TB)之抑酶效应,为进一步研究开发头孢菌素/TB复方制剂提供依据。方法用超声破碎法提取11株临床分离菌和4株标准产酶菌的β-内酰胺酶,用紫外分光光度计测定酶对抗生素的水解率,并计算4种配伍比例的三唑巴坦(头孢菌素/TB分别为4∶1、3∶1、2∶1和1∶1)的抑酶率。结果CTX对酶的稳定性最高,其水解率(15.95±17.40)%明显低于其余三种药物(P<0.05);CPZ和CEZ的稳定性相当,其水解率分别为(45.10±12.68)%和(39.55±19.66)%(两者比较,P>0.05);CET的稳定性明显低于其它三种药物(P<0.05)。加用TB后,酶对4种抗生素的水解率明显降低。其中TB对CPZ和CEZ的抑酶保护作用相当(其平均抑酶率多大于70%,且2/3的细菌酶的抑制率在50%以上),对CTX保护作用也较强(平均抑酶率在50%以上)。但同一药物的4种配伍制剂中头孢菌素的水解率无显著性差异(P>0.05)。结论TB能有效抑制酶对所试4种头孢菌素的水解,4种配伍比例的TB对酶的抑制作用无显著差异。

鸽源大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶与头孢菌素酶基因型分析

为研究鸽源大肠杆菌的耐药性及其产超广谱β-内酰胺酶(Extended-Spectrumβ-lactamase,ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC betalactamase,AmpC)的基因型,从临床上分离出352株鸽源大肠杆菌,通过药敏试验进行耐药性分析,再采用三维试验从以上结果中筛选出211株产ESBLs、156株产AmpC的大肠杆菌进行基因型分析。结果表明:产ESBLs的菌株共有211株(59.94%),产AmpC的菌株共有156株(44.32%),其中FOX基因型共47株(30.13%),TEM基因型共129株(61.14%),分别为2种酶的主要基因型。鸽源大肠杆菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类、磺胺类和四环素类等抗菌药物均有较强耐药性,表现有多重耐药性。

铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶和头孢菌素酶表型检出与耐药分析

铜绿假单胞菌(pseudomonos aeruginosa,Pa)广泛分布于自然界,是医院感染最常见的革兰阴性杆菌之一[1],在临床的抗感染治疗过程中,容易对临床常用的抗生素产生耐药性,且耐药机制复杂。

耐第三代头孢菌素革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶及耐药基因分析

目的了解革兰阴性杆菌对第三代头孢菌素耐药的分子机制。方法采用常规琼脂2倍稀释法测定11株(CR01-CR11)临床分离革兰阴性杆菌,对13种β-内酰胺类抗菌药物的敏感性,纸片扩散法检测耐药菌的ESBLs表型,通过PCR扩增检测其耐药基因。结果MIC结果表明,11株病原菌对几种常见的第三代头孢菌素具有明显的耐药性;表型确证实验表明,除CR07外,其余10株均为产ESBLs菌株;酶的水解底物轮廓实验表明,10株产ESBLs株菌所产生的β-内酰胺酶均能高效水解头孢哌酮和头孢孟多,而对头孢他啶水解活性较低。结论10株产ESBLs革兰阴性杆菌的酶活性、等电点及耐药基因在一定程度上揭示了病原菌产ESBLs与其耐药性之间的关系。

β-内酰胺酶抑制剂联合不同β-内酰胺类抗生素对耐多药结核分枝杆菌临床菌株体外活性研究

目的体外评估5种β-内酰胺类抗生素和不同β-内酰胺酶抑制剂组合对耐多药结核分枝杆菌(MDR-TB)活性的影响,以期发现针对耐多药结核病最有效的β-内酰胺类抗生素和β-内酰胺酶抑制剂组合。方法选取2021年河南省耐药监测项目收集的MDR-TB菌株,使用最小抑菌浓度(MIC)法测定5种β-内酰胺类抗生素或联合β-内酰胺酶抑制剂对临床MDR-TB的MIC值,并采用聚合酶链式反应(PCR)和DNA测序法分析菌株的bla C突变情况。结果共纳入105株MDR-TB,MIC检测结果显示,多尼培南对MDR-TB抗菌活性最高,其MIC 50值为16μg/mL。与β-内酰胺酶抑制剂联合后,大部分β-内酰胺类抗生素的MIC值明显下降。共有13.33%(14株)的菌株存在bla C基因的突变,主要为3种核苷酸替代突变,分别为AGT333AGG、AAC638ACC、ATC786ATT。BlaC蛋白Ser111Arg和Asn213Thr与同义单核苷酸突变相比,增强了克拉维酸/舒巴坦与美罗培南对MDR-TB的协同作用。结论多尼培南和舒巴坦组合对MDR-TB具有最强的抗菌活性。而BlaC蛋白Ser111Arg和Asn213Thr的替代突变使MDR-TB对美罗培南的敏感性在克拉维酸/舒巴坦协同时增强。

血液病房产超广谱β-内酰胺酶菌分布情况及药物敏感性分析

目的分析2020年1月至2021年11月江西省九江市第一人民医院(以下简称“本院”)血液病房产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌分布情况及药物敏感性。方法选取2020年1月至2021年11月江西省九江市第一人民医院血液病房138例患者作为研究对象,收集患者的分泌物进行病原菌培养,并对产ESBLs菌分布情况和药物敏感性进行分析。结果革兰氏阴性菌居多,共分离出160株,占比80.00%,其次是真菌和革兰氏阳性菌,各分离出22株和18株。其中以铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌最为常见。本院血液病房病原菌共检出200株,检出情况主要以痰、中段尿、咽拭子居多,以肛拭子、大便检出较少;200株病原菌共检出产ESBLs菌56株,占比28.00%,以中段尿、咽拭子检出居多,脓液、肛拭子、大便中未检出。本院血液病房产ESBLs菌除对亚胺培南、美罗培南耐药率较低外,对大部分抗菌药物的耐药率均较高。结论本院血液病原菌以革兰氏阴性菌为主,且对抗菌药物的耐药率较高,临床应重点关注此类菌株感染,需引起重视,加强院感的防控,避免发生耐药菌的暴发和流行。

β-内酰胺酶抑制剂的稳定性与降解反应特性

β-内酰胺酶抑制剂与广谱β-内酰胺抗生素的联合使用是一种有效解决细菌耐药的策略之一。目前上市的β-内酰胺酶抑制剂按其化学结构主要包括氧青霉烯类(克拉维酸)、青霉烷砜类(舒巴坦和他唑巴坦)和二氮杂二环辛烷类化合物(阿维巴坦),本文对临床常见的β-内酰胺酶抑制剂的稳定性与降解反应特性进行综述,并结合当前药典标准中的有关物质检查项,探讨上述β-内酰胺酶抑制剂的杂质谱控制策略。

青海地区畜禽源志贺菌产超广谱β-内酰胺酶和头孢菌素酶表型检测及基因型分析

为了解青海省不同动物源志贺菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)的基因型分布情况,对75株志贺菌进行表型筛选,PCR法确定其ESBLs和AmpC酶基因型。结果:酶表型筛选呈阳性菌株共50株,其中:1株为单产ESBLs阳性菌,42株为单产AmpC酶阳性菌,7株同时产ESBLs和AmpC酶。40株携带AmpC基因(acc、mir-1、dha、fox),未检出mox和cmy-2基因,其中:17株为单基因型,以MIR-1和ACC为主要基因型;5株同时携带3种基因型;18株同时携带2种基因型,以ACC+MIR-1和FOX+MIR-1型为主要基因型。同时,3株检出ESBLs基因(tem、shv、ctx-m、oxa)。在产ESBLs和AmpC酶的3株菌中,1株菌携带acc、dha、ctx-m、tem、shv基因;1株菌携带oxa、tem、fox基因;1株菌携带mir-1和oxa基因。试验表明,临床分离的产ESBLs与AmpC酶志贺菌携带多种耐药基因的比率较高,对指导临床抗菌治疗具有重要意义。

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶、头孢菌素酶和qnr基因检测及耐药分析

目的检测痰标本中肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(Amp C酶)和qnr基因的存在情况及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法收集痰标本中分离到的肺炎克雷伯菌114株,用琼脂稀释法检测耐药性,三维试验法和聚合酶链式反应(PCR)法检测ESBLs酶、Amp C酶及qnr基因存在情况。结果 114株肺炎克雷伯菌中,ESBLs阳性58株(50.88%),产Amp C酶14株(12.28%),同时产ESBLs和Amp C酶10株(8.77%),qnr阳性2株;产酶株对抗菌药物的耐药率显著高于不产酶株。结论痰标本中肺炎克雷伯菌耐药基因的检测率较高,多重耐药明显;碳青霉烯类具有较好的抗菌活性。

革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶头孢菌素酶状况及耐药性研究

目的了解本院目前常见的革兰阴性杆菌菌种分布及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)情况,分析产酶菌耐药谱特征。方法用法国生物梅里埃公司的VITEK-2细菌鉴定与药敏系统对革兰阴性杆菌进行鉴定,对可疑产ESBLs、AmpC的菌株,用标准纸片扩散法和三维试验法进行两种酶的表型确证,再用纸片扩散法行药物敏感性检测。结果检出单产ESBLs、单产AmpC、同时产ESBLs和AmpC的细菌分别为175株(43.8%)、54株(13.5%)和28株(7.0%)。ESBLs检出率以肺炎克雷伯菌最高,为60.3%;AmpC检出率在阴沟肠杆菌中最高,为46.7%。单产ESBLs菌株对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦以及哌拉西林/三唑巴坦的敏感性较高,耐药率分别为2.3%、26.3%和33.1%;单产AmpC菌株对亚胺培南和头孢吡肟具有较高的敏感性,耐药率分别为3.7%和29.6%;同时产AmpC和ESBLs的菌株仅对亚胺培南敏感,未发现耐药株。结论革兰阴性杆菌产ES-BLs、AmpC率较高,该类菌对大多数新型广谱β-内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感。

新三代口服头孢菌素头孢布烯(ceftibuten)β-内酰胺酶稳定性研究

头孢布烯对２０株临床分离产酶耐药菌和８株标准产酶菌株以及２株产头孢菌素酶菌株β－内酰胺酶稳定性进行了研究，并与头孢唑林、头孢呋辛、头孢哌酮、头孢噻肟及头孢他啶等５个头孢菌素作了比较。结果表明头孢布烯具有很强的β－内酰胺酶稳定性，它不被ＴＥＭ－１、ＴＥＭ－２、ＯＸＡ－１、ＯＸＡ－２、ＯＸＡ－３、ＳＨＶ－１、Ｋ１、Ｄ３１ 等酶水解，其相对水解率（ＲｅｌａｔｉｖｅＨｙｄｒｏｌｙｓｉｓＲａｔｅ，ＲＨＲ）＜ ２％ 。在２０株临床分离产酶耐药菌所产β－内酰胺酶中，有３ 株可以缓慢水解头孢布烯，其ＲＨＲ分别为７．９％ 、６．８％ 和１１．１％ ．而另外１７ 株菌所产酶对头孢布烯的ＲＨＲ均＜ ２％ 。头孢布烯的相对水解率与头孢他啶相近，两者均为具有高度酶稳定性的头孢菌素，明显优于头孢唑林、头孢呋辛、头孢哌酮及头孢噻肟等其它４种头孢菌素。

某三甲医院细菌耐药健康及经济负担研究——以产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌为例

目的 细菌耐药是全世界共同面对的公共健康难题,产生了严重的健康及经济威胁。本研究从医院视角进一步明确产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌感染导致的健康及经济负担,以期为细菌耐药相关政策干预的评估与优化提供实证依据。方法 选取江西省某三甲医院出院时间在2018—2019年的170,819住院人次样本为研究对象,并设置了ESBLs阳性感染组、ESBLs阴性感染组和无感染及定植组。采用倾向得分匹配(propensity score matching, PSM)对3个组进行1:1:100匹配,并采用Cox比例风险回归模型、多状态模型分别测算ESBLs阳性感染组相对于两对照组的死亡风险比(hazard ratio, HR)和额外床日数,最终基于医院视角测算额外住院成本。结果 经匹配后纳入分析的ESBLs阳性感染组、ESBLs阴性感染组和无感染及定植组的样本分别为885、885和81,245住院人次。ESBLs阳性感染组的死亡风险是无感染及定植组的2.58倍(P<0.001),同ESBLs阴性感染者相比并未显著增大患者的死亡风险(P=0.25)。ESBLs阳性感染组相较于其无感染及定植组和ESBLs阴性感染组产生的额外床日数分别为每例3.69 d和1.92 d,对应的额外住院成本为每例6,570.12元和3,418.60元。结论 产ESBLs大肠埃希菌感染会增加患者死亡风险,延长住院时间并加重患者的经济负担,应采取措施进行防控。

ICU产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌血流感染诊断预测模型的构建和验证

目的:超广谱β-内酰胺酶肠杆菌(extended-spectrumβ-lactamase-producing Enterobacteriaceae,ESBL-E)已成为重症监护室(intensive care unit,ICU)血流感染的主要致病菌之一,严重影响患者的预后。探讨ICU内ESBL-E血流感染的危险因素,构建并验证其诊断预测的模型,可为临床医生在ESBL-E的早期识别、防控提供参考和建议。方法:回顾性分析2020年1月至2022年6月济宁市第一人民医院肠杆菌科细菌血流感染病例的临床资料。将2020年1月至2021年12月收治的患者作为建模组(n=255),2022年1月至6月收治的患者作为验证组(n=51),建模组根据是否产ESBLs将患者分为产ESBLs组(n=131)和非产ESBLs组(n=124),采用多因素Logistic回归分析ESBL-E感染的危险因素,并构建其诊断预测模型,通过受试者操作特征曲线、净重新分类指数、校准曲线、C指数、Brier评分、决策曲线分析和临床影响曲线评估模型的区分度、校准度和获益率,采用Bootstrap法进行内部验证,并通过验证组数据对上述模型进行外部验证。结果:多因素危险因素分析结果显示:急性生理功能和慢性健康状况评价II(acute physiology and chronic health evaluation II,APACHE II)评分(>15)、营养风险筛查2002(nutritional risk screening 2002,NRS 2002)评分(≥3)、2个月内使用过头孢菌素、2个月内使用过喹诺酮类抗生素是ICU中ESBL-E血流感染的独立危险因素。ESBL-E血流感染诊断预测模型回归方程=−1.718+APACHE II评分(>15)×0.989+NRS 2002评分(≥3)×0.989+2个月内使用过头孢菌素×0.648+2个月内使用过喹诺酮类抗生素×0.806。该模型显示出良好的预测能力,预测建模组ESBL-E感染的曲线下面积为0.831(95%CI 0.781~0.881),敏感度为79.4%,特异度为72.6%。净重新分类指数显示该模型优于单一因素模型。Hosmer-lemeshow结果显示感染诊断预测模型的拟合优度较好(P=0.482);采用Bootstrap法重复抽样1000次对该模型进行内部验证,校准曲线趋近于理想曲线,C指数为0.831,Brier评分为0.213。决策曲线分析显示该模型在阈值概率0.07~0.70范围内净获益率均大于0。临床影响曲线显示当阈值概率大于0.7后,预测模型判定为ESBL-E感染高风险人群与实际发生ESBL-E人群高度匹配,证实该预测模型临床有效率高。外部验证中应用该模型预测验证组ESBL-E感染的曲线下面积为0.807,敏感度为80.8%,特异度为80.0%,验证结果与实际一致性较高。结论:ICU患者病情越危重、营养不良、近期应用头孢菌素或喹诺酮类抗生素会增加ESBL-E血流感染的风险。基于APACHE II评分(>15)、NRS 2002评分(≥3)、2个月内使用过头孢菌素或喹诺酮类抗生素构建的诊断预测模型对ICU患者ESBL-E血流感染情况具有较好的预测价值。