头孢西丁纸片扩散法筛选耐甲氧西林葡萄球菌

目的:评价头孢西丁纸片法筛选耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的方法。方法:采用2004年NCCLS推荐的30μg/片头孢西丁纸片法检测MRS,以PCR方法检测mecA基因为"金标准"。结果:在60株临床分离的葡萄球菌中,金黄色葡萄球菌36株,凝固酶阴性葡萄球菌24株。用PCR方法检测mecA基因阳性43株(金黄色葡萄球菌25株,凝固酶阴性葡萄球菌18株),阴性17株(金黄色葡萄球菌11株,凝固酶阴性葡萄球菌6株);用头孢西丁纸片法筛查MRS耐药(+)41株(金黄色葡萄球菌23株,凝固酶阴性葡萄球菌18株),敏感(-)19株(金黄色葡萄球菌13株,凝固酶阴性葡萄球菌6株)。以PCR检测mecA基因法为"金标准",头孢西丁纸片法的敏感度和特异度分别为95.3%(41/43)、100%(17/17)。准确度为96.7%(58/60)。结论:头孢西丁纸片法筛查MRS与mecA基因检测法具有很好的一致性,该方法适合在临床微生物实验室中推广使用。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的 以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因(mecA基因法)为标准,评价头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌的灵敏度和特异性。方法 PCR扩增葡萄球菌的特异性mecA基因片段,头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌,药敏试验方法按标准K B(Kirby Bauer)法进行。结果 在190株临床分离的葡萄球菌中金黄色葡萄球菌(金葡菌)138 株,表皮葡萄球菌30株,溶血葡萄球菌22株,经PCR法检测mecA基因,金葡菌中耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为81.2%(112/138)、96.1%(50/52)。头孢西丁纸片扩散法检测金葡菌中MRSA和CNS中MRCNS的发生率分别为81.2%(112/138)、94.2%(49/52),与mecA基因法结果相比较,头孢西丁纸片扩散法检测葡萄球菌中MRS的灵敏度和特异度分别为99.4%(161/162)、100.0%(28/28), 两者符合率为99.5%(189/190),2种方法所获得的结果经统计学处理,两者差异无显著性。结论 头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌具有很高的灵敏度和特异度,适合在临床微生物实验室中进行推广。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌的临床应用

目的以PCR检测耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）mecA基因为金标准，评价头孢西丁纸片扩散法检测MRS的临床应用。方法收集各种细菌感染性标本分离到的葡萄球菌，细菌的鉴定采用法国梅里埃全自动微生物分析系Vitek-60，分别采用PCR扩增mecA法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和抗青霉素结合蛋白2a（抗PBP2a）胶乳凝集法检测葡萄球菌中MRS。结果经PCR检测mecA证实西安地区SA中MRSA的发生率为69．2％（54／78），CNS中MRCNS的发生率为67．7％（65／96）；其余三种方法检测SA中的MRSA发生率分别为67．9％，57．7％，66．7％，CNS中MRCNS的发生率分别为64．6％，58．3％，63．5％。头孢西丁纸片扩散法与mecA基因法结果相比较检测MRSA，其灵敏度和特异度分别为98．1％和100．0％，两者符合率为98．7％；MRSCoN的灵敏度和特异度分别为95．4％扣100．0％，两者符合率为96．9％。结论头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感度和特异度高于苯唑西林纸片扩散法，与PCR检测mecA法具有较好的一致性，可作为临床实验室常规检测MRS的常规方法。

头孢西丁扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌异质性耐药菌株的评价

目的:评价头孢西丁扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌异质性耐药菌株的可靠性和临床实用性。方法:将临床分离得到的葡萄球菌310株,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准操作规程进行苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法实验,并以PCR检测葡萄球菌mecA基因为判断标准,比较4种方法的敏感性及特异性。结果:经mecA基因检测,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为57.1%(113/198),耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)为62.5%(70/112)。头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性均为100%,检测MRCNS敏感性为98.6%,特异性为100%。结论:头孢西丁纸片扩散法操作简便,结果可靠,可作为临床实验室检测耐甲氧西林葡萄球菌的常规方法。

头孢西丁纸片评价耐甲氧西林葡萄球菌的探讨

目的评价头孢西丁纸片法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的特异性和灵敏度。方法收集临床分离金黄色葡萄球菌100株、凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)52株,分别进行头孢西丁纸片法、添加4% NaCl的头孢西丁纸片法、添加2% NaCl的苯唑西林纸片法以及苯唑西林-盐琼脂法检测,以苯唑西林-盐琼脂法作为MRS检测标准,按CLSI2006版标准判读结果。结果头孢西丁纸片、添加4% NaCl的头孢西丁纸片、添加2% NaCl的苯唑西林纸片检测MRS特异性均达100.0%;对于金黄色葡萄球菌3种纸片法的灵敏度分别为82.7%、79.3%、72.4%;对于凝固酶阴性葡萄球菌,3种纸片法的灵敏度分别为97.9%、95.8%、95.8%。加盐与不加盐头孢西丁纸片法检测MRS的差异无显著性(P>0.05),耐药株抑菌圈直径(mm)分别为10.68±6.42、13.36±7.37(P<0.01)。结论加盐与不加盐头孢西丁纸片法均能可靠检测MRS,前者对耐药株结果更易判读。

耐甲氧西林葡萄球菌检测方法的比较

目的以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因为金标准,比较头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和乳胶凝集法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的优缺点。方法对临床分离的70株葡萄球菌(其中金黄色葡萄球菌40株,凝固酶阴性的葡萄球菌30株)分别用PCR法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和乳胶凝集法检测耐甲氧西林葡萄球菌,药敏试验方法按标准KB(Kirby Bauer)法进行。结果经PCR法检测mecA基因,耐甲氧西林的金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为75.0%(30/40)和80.0%(24/30);头孢西丁纸片扩散法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为93.3%、95.9%;90.0%和100%;苯唑西林纸片扩散法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为90.0%、87.5%;90.0%和83.3%;乳胶凝集法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为100.0%、100.0%;100.0%和100.0%。与PCR结果比较,3种方法所获得的结果经统计学分析,差异无显著性。结论头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法是成批检测的理想方法;乳胶凝集法检测快速,结果可靠,但检测成本高;实验室应选择合适的方法,以提高MRS的检出率。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌多重耐药研究

目的了解本地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的多重耐药情况。方法收集经头孢西丁纸片扩散试验和青霉素结合蛋白2a胶乳凝集实验分离出的51株MRSA,用β-内酰胺酶实验、D试验、Kirby-Bauer法检测MRSA产β-内酰胺酶以及对红霉素、克林霉素、4种氟喹诺酮类药物(氧氟沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、加替沙星)和万古霉素耐药性。结果51株MRSA头孢西丁纸片抑菌圈直径介于6～20mm,产β-内酰胺酶率为84.3%,对红霉素、克林霉素、氟喹诺酮类、万古霉素耐药率分别为98.0%、86.3%、88.2%、0,红霉素诱导克林霉素耐药率为50.0%(3/6)。结论MRSA呈多重耐药,轻度感染可根据药敏结果选万古霉素与氟喹诺酮类?生素联合用药。

四种初筛试验检测耐甲氧西林葡萄球菌的评价

目的评价四种初筛试验检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的价值。方法收集临床分离金黄色葡萄球菌100株、凝固酶阴性葡萄球菌51株,分别进行头孢西丁纸片、MHA中添加4%NaCl的头孢西丁纸片、MHA中添加2%NaCl的苯唑西林纸片、苯唑西林-盐琼脂,以PBP2a胶乳凝集作为MRS检测标准,按CLSI2006版标准操作和判读结果。结果对于金黄色葡萄球菌,头孢西丁纸片、MHA中添加4%NaCl的头孢西丁纸片、MHA中添加2%NaCl的苯唑西林纸片、苯唑西林-盐琼脂检测MRS灵敏度和特异性分别为96.3%和100.0%、85.2%和100.0%、77.8%和100.0%、92.6%和94.5%,其中2株苯唑西林-盐琼脂24h未生长但延长至48h生长,48h内敏感性100.0%;对于凝固酶阴性葡萄球菌,四种方法检测MRS灵敏度和特异性分别为97.8%和80.0%、95.6%和80.0%、95.6%和80.0%、100.0%和80.0%(P>0.05)。结论四种方法均能可靠检测MRS,头孢西丁纸片和苯唑西林-盐琼脂具有较高应用价值。

基因扩增和3种表型筛查法检测耐甲氧西林葡萄球菌的应用评价

目的比较4种方法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的阳性检出率、灵敏度和特异度,以便临床检测MRS时选择。方法用Vitek-32全自动细菌鉴定仪法、苯唑西林琼脂稀释法、头孢西丁纸片扩散法和mecA基因检测法分别检测175株葡萄球菌中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS),经行×列表资料的χ2检验比较阳性检出率,并以mecA基因检测法为"金标准"计算其他3种方法的灵敏度和特异度。结果4种方法检出MRSA的阳性率无差别(χ2=1.640,P>0.05),但检测MRCNS的阳性率有差别(χ2=9.478,P<0.05),其中Vitek-32全自动细菌鉴定仪法和苯唑西林琼脂稀释法检出MRCNS的阳性率高于mecA基因检测法;3种表型检测法检测MRSA的灵敏度和特异度分别为100%、96.3%、96.3%和88.2%、100%、100%,检测MRCNS的灵敏度均为100%,特异度分别为50%、46.1%和65.4%。结论最终判定MRS时,要考虑到mecA基因和苯唑西林最低抑菌浓度两个因素,并区别对待mecA基因介导的MRS和非mecA基因介导的MRS。

4种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的评估

目的:评价4种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)方法的临床应用价值。方法:用mecA基因检测MRSA乳胶凝集法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林微量稀释法对临床分离的160株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较。结果:160株中有127株为MRSA,4种检测方法结果一致。结论:头孢西丁纸片扩散法可作为医院微生物实验室日常工作中检测MRSA的简便又准确的实验方法,并值得推广应用。

几种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的评价

目的对三种检测耐甲氧西林葡萄球菌方法的可靠性和临床实用性进行评价。方法以PCR检测金黄色葡萄球菌甲氧西林决定因子A(mecA)为金标准,按临床实验室标准化委员会(CLSI)操作规程用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法对临床分离的155株金黄色葡萄球菌进行检测。结果 155株金黄色葡萄球菌经mecA基因检测,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为61.9%(96/155);头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性均为100%;苯唑西林纸片扩散法的敏感性为95.8%,特异性为91.5%;苯唑西林琼脂稀释法的敏感性为100%,特异性为98.3%;头孢西丁纸片扩散法优于苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林琼脂稀释法。结论头孢西丁纸片扩散法操作简便、敏感性高、特异性好、结果可靠,可作为医院微生物实验室日常工作中检测耐甲氧西林葡萄球菌的常规方法。

胶体金法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的方法学评估

目的 评估胶体金法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的意义.方法 以胶乳凝集法作为对照,比较头孢西丁纸片扩散法、Vitek32全自动微生物鉴定/ 药敏系统和胶体金层析技术检测MRSA 的敏感度和特异度.结果 采用胶乳凝集法检测出MRSA 113株,阳性检出率为77.9%（113/145）;纸片扩散法检出MRSA 111株,阳性检出率为76.6%（111/145）;Vitek32 全自动微生物鉴定/药敏系统检出MRSA 111株,阳性检出率为76.6%（111/145）;胶体金法检出MRSA 112株,阳性检出率为77.2%（112/145）.结论 胶体金层析技术适用于临床微生物实验室.

三种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法的评估

目的评价PBP2a乳胶凝集法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林纸片扩散法对检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床应用价值。方法以PCR法扩增mecA基因为金标准,用三种方法对临床分离的105株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较。结果105株细菌中有82株mecA基因阳性,头孢西丁纸片扩散法、乳胶凝集法与PCR法结果一致,苯唑西林纸片扩散法与PCR法结果相符合均为98.8%。结论头孢西丁纸片扩散法与PBP2a乳胶凝集法一样比苯唑西林纸片扩散法能更准确检测MRSA,值得推广应用。

耐甲氧西林葡萄球菌3种检测方法的实验比较及临床应用

目的通过对200株临床分离的葡萄球菌耐苯唑西林的检测,比较3种表型检测法的阳性率并对其临床实用性进行评价。方法采用美国NCCLS 2004年制订的头孢西丁-纸片扩散法、V ITEK 32微生物鉴定仪检测及苯唑西林盐琼脂法测试m ecA介导的葡萄球菌耐药。结果200株被检测的葡萄球菌中,头孢西丁-纸片扩散法检出耐苯唑西林的阳性率为68%(136/200);苯唑西林盐琼脂法的阳性率为67.5%(135/200);V ITEK 32仪的阳性率为68.5%(137/200);且耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(M RCN S)的耐药率(86.2%)高于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(26.23%)。3种检测方法结果经χ2检测差异无显著性。结论3种方法操作都简便,但各有优缺点,V ITEK32仪器检测葡萄球菌耐笨唑西林费用高,一般小型医院不具备条件;盐琼脂筛选法判读直观,但要掌握好孵育时间;NCCLS 2004版的纸片扩散法较经济实用,不仅可检测被检菌是否耐笨唑西林,同时还可获得大环内酯-林可霉素-链阳霉素(M LSB)结果,但是当头孢西丁的判断折点在临界时应当复检,建议与盐琼脂筛选法同步检测。

Phoenix-100检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的比较分析耐甲氧西林葡萄球菌全自动微生物鉴定/药敏仪检测与头孢西丁扩散法检测的检出率,对全自动微生物鉴定/药敏仪检测耐甲氧西林葡萄球菌初步评估。方法将临床分离到的257株葡萄球菌用Phoenix-100全自动微生物鉴定/药敏系统检测的同时按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准操作规程进行头孢西丁纸片扩散法检测,比较两种方法的检出率。结果 Phoenix-100法与头孢西丁纸片扩散法耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的检出率分别为:79.4%和78.2%,两种方法差异无显著性。结论 Phoenix-100法操作简便,结果可靠,可以直接根据全自动微生物鉴定/药敏仪结果报告临床,对指导临床合理使用抗生素,有效控制感染具有积极意义。

一种PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌株新方法的建立

目的建立一种PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌株新方法。方法收集2016年1月至2018年12月入住本院ICU的重症患者的脓液、分泌物、血液等标本中分离培养病原菌株,共43个样本,且均为初次分离所得。以mecA基因检测呈阳性为"金标准",对样本分别进行实时荧光PCR检测和纸片扩散法检测。结果实时荧光PCR方法检测法准确度高于头孢西丁及苯唑西林纸片扩散法;所有耐甲氧西林葡萄球菌对青霉素和苯唑西林药耐药性最强,对红霉素和克林霉素次之,对万古霉素、利奈唑胺、替加环素、利福平均表现为敏感,对四环素、庆大霉素等具备一定的敏感性。结论新建立的荧光PCR检测法相比头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林纸片扩散法不仅准确度高,而且特异性好,能够准确检测出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。

病例简介:金黄色葡萄球菌,是甲氧西林敏感,还是耐药

由mecA基因阳性，对苯唑西林敏感，具有诱导耐药性的金黄色葡萄球菌（金葡萄）引起的血流感染。1例接受气管造口术的60岁患者被寄殖的耐甲氧西林金葡菌感染出现了菌血症。应用头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂筛选法和VITEK药敏检测系统的测试结果均显示该菌对甲氧西林敏感。

耐甲氧西林葡萄球菌常规检测方法的比较

目的:比较三种方法对耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的阳性检出率和特异性,寻找适合实验室常规检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)简易,准确的方法。方法通过头孢西丁(30μg/片)纸片扩散法、苯唑西林(1μg/片)纸片扩散法和苯唑西林琼脂筛选法对临床分离的67株葡萄球菌进行MRS检测,比较其MRS检出率,为分析NaCl对头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测结果的影响,同时用含4%NaCl的M-H培养基和普通M-H培养基进行检测,比较其差异。结果67株葡萄球菌中琼脂筛选法检出率为79.1%;头孢西丁纸片扩散法在含4%NaCl和普通M-H培养基检出率相同,均为71.6%,苯唑西林(1μg/片)纸片扩散法在含4%NaCl的M-H培养基检出率为76.1%,普通M-H培养基检出率为73.1%,苯唑西林纸片法在含4%NaClM-H培养基上的检出率高于普通 M-H培养基,分别各有1株金葡和凝固酶阴性葡萄球菌未被检出。结论头孢西丁(30μg/片)纸片扩散法与苯唑西林琼脂筛选法具有很好的相关性,且不受NaCl影响,该法操作简便易行,各医院临床实验室均能开展,是检测MRS值得推荐的方法。