基于STAT3/VEGF信号通路探究头顶一颗珠正丁醇萃取物对肝癌大鼠的抑制作用及其机制

目的探讨头顶一颗珠正丁醇萃取物对二乙基亚硝胺(DEN)诱发的大鼠原发性肝癌的抑制作用,探讨其对STAT3/VEGF信号通路的影响,并研究其对抗肝癌血管生成的分子机制。方法将大鼠随机分为G1组(正常对照组)、G2组(模型组)、G3组(华蟾素组)、G4组(头顶一颗珠低剂量组)、G5组(头顶一颗珠高剂量组),除G1组外所有大鼠腹腔注射二乙基亚硝胺建立肝癌大鼠模型。使用头顶一颗珠正丁醇萃取物处理肝癌大鼠,检测大鼠肝脏指数、脾脏指数;检测大鼠的血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)和总胆红素(TBIL)的水平;ELISA法检测血清TGF-β1和VEGF的水平;同时采用Western blot检测VEGF、KDR、STAT3、p-STAT3蛋白水平。结果与G1组比较,G2组大鼠肝脏指数、ALT、AST和TBIL的水平显著增加,ALB的水平显著降低,血清TGF-β1和VEGF的水平显著升高,肝组织VEGF、KDR、STAT3、p-STAT3蛋白水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,头顶一颗珠正丁醇萃取物组大鼠肝脏指数显著降低,血清AST和TBIL水平显著降低,血清TGF-β1和VEGF的水平显著降低,肝组织VEGF、KDR、STAT3、p-STAT3蛋白水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论头顶一颗珠正丁醇萃取物通过抑制STAT3/VEGF信号通路,发挥抗肝癌血管生成作用。

头顶一颗珠正丁醇萃取物对人肝癌HepG2细胞的抑制作用及其对MMP-9、NF-κB p65的表达研究

目的探究头顶一颗珠提取物对人肝癌HepG2细胞抑制作用及其对基质金属蛋白酶-9(matrix metallo proteinases-9,MMP-9)、核转录因子-κB p65(nuclear factorκB p65,NF-κB p65)的表达研究。方法多浓度头顶一颗珠正丁醇萃取物(0、6、12、24、48、96)μmol/L分别作用于人肝癌细胞株(hepatocarcinoma G2,HepG2)24小时、48小时、72小时,使用细胞增殖和毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)法,比较各组肝癌HepG2细胞的生长抑制率。多浓度头顶一颗珠正丁醇萃取物(0、3、6、12、24)μmol/L分别作用于HepG2细胞48小时后,用实时荧光定量PCR(real-timequantitative PCR,qPCR)检测MMP-9、NF-κB p65的表达水平。结果多浓度头顶一颗珠正丁醇萃取物,与对照组比较,HepG2细胞的生长增殖均受到明显抑制(P<0.01),且呈时间和浓度依赖性;MMP-9、NF-κB p65表达水平明显降低(P<0.01),药物浓度越高,MMP-9 mRNA、NF-κB p65 mRNA表达水平越低,MMP-9、NF-κB p65 mRNA表达水平呈正相关性。结论多浓度头顶一颗珠正丁醇萃取物能抑制人肝癌HepG2细胞增殖,且呈时间和浓度依赖性,可能通过抑制MMP-9 mRNA、NF-κB p65 mRNA的表达,从而达到抗肝癌作用。