高灵敏甲胎蛋白夹心免疫传感器的制备

构建了新型甲胎蛋白(AFP)夹心免疫传感器。采用金纳米粒子-氧化石墨烯-普鲁士蓝纳米立方体(Au NP-GO-PBNCs)纳米复合材料标记甲胎蛋白(AFP)二抗,将制备的金-聚多巴胺-四氧化三铁(Au-PDAFe_3O_4)磁性纳米复合物固定在自制的磁性电极表面,通过吸附作用固定AFP一抗,用牛血清白蛋白(BSA)封闭电极上的非特异性吸附位点。在37℃下与AFP抗原溶液孵育50 min,最后将电极放入Au NP-GO-PBNCs纳米复合材料标记的二抗溶液中孵育,基于此建立了采用普鲁士蓝(PB)标记的的夹心免疫传感器检测AFP的方法。在最佳实验条件下,PB催化H_2O_2氧化的响应电流与AFP的浓度表现出两段线性关系,线性范围分别为0.005~1.000 ng/m L和1~20 ng/m L,检出限(LOD,S/N=3)为1.0 pg/m L。本方法具有灵敏度高、选择性好的特点。

基于一维DNA组装磁性纳米探针的夹心型安培免疫传感器研究

采用Fe3O4／ZrO2（壳）纳米磁珠（zMPs）标记待测物识别抗体，并用HRP酶封闭和DNA链接，建立了一类新型的“珠链状”一维磁性纳米探针制备方法。将甲胎蛋白（AFP）一抗固定于纳米金修饰的玻碳电极表面，构建了免疫电极（GCElAFPAb。）。基于该电极和上述合成探针，通过双抗体夹心法测定免疫产物上HRP酶对过氧化脲（CP）氧化对苯二酚反应的催化电流，研制了一类基于一维纳米结构组装的夹心型安培免疫传感器。研究表明：此一维纳米结构探针不仅大大增加了酶在电极表面的富集量，成倍扩增了催化电流，显著提高了传感器的灵敏度，而且易于通过外磁场与背景液可控分离，简化了分析步骤，并提高了结果的重复性。此传感器对AFP检测的线性范围为0．01～25μg／L；检出限达4ng／L（3σ），并被用于人血清中痕量AFP的测定，结果满意。

基于Au纳米颗粒/还原氧化石墨烯C-反应蛋白免疫传感器的研制

采用还原氧化石墨烯-金纳米颗粒(RGO-Au NPs)作为免疫传感器的固定基质,将C-反应蛋白(CRP)抗体固定在玻碳电极表面,用蒽醌二羧酸作为标记物,制成夹心型的CRP免疫传感器。在最优实验条件下,通过示差脉冲伏安法对CRP的含量进行检测。该传感器在0.25~100 ng/m L范围内具有良好的线性关系,检出限为0.08 ng/m L,线性系数为0.997。该传感器为C-反应蛋白的检测提供了一种新的手段。

以多孔金电极为传感界面的电化学双标记免疫传感器研究

本实验中制备得多孔金纳米电极,并采用层层自组装技术制作三明治电化学免疫夹心传感器。采用二种不同电位响应的中性红(NR)和硫堇(TH)为电活性标记物,利用循环伏安法(CV)和示差脉冲伏安法(DPV)定量测量,抗原浓度在1~100 ng/mL范围内,成功实现了正常兔和正常鼠的同时免疫检测,为未来多抗原同时免疫检测奠定了理论基础并具有一定的临床实验价值。

基于自组装及纳米磁球放大的大肠杆菌O157：H7的压电免疫检测

应用压电免疫传感器快速检测了大肠杆菌O157：H7（E．coli O157 ：H7）．将巯基乙酸（MACA）自组装在AT切向的压电金电极上，以N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）为反应介质，形成酰氨键固定大肠杆菌抗体．并通过α-甲基丙烯酸（MAA）把抗体修饰在纳米磁球上．采用夹心法将抗原夹在两个抗体间，压电石英晶体交流阻抗（PQCI）和循环伏安法对修饰过程进行了表征，抗原浓度与形成夹心复合物前后的PQCI振动频移相关．其免疲传感器能在3h内检测2×10^3～8×10^8CFU/mL范围内的目标细菌，10^6CFU/mL情况下重复性实验的RSD在7％以下。