固相支撑液液萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定血中欧夹竹桃苷和欧夹竹桃苷乙的含量

采用高效液相色谱-串联质谱法测定血中欧夹竹桃苷和欧夹竹桃苷乙的含量。血液样品在固相支撑液液萃取柱上分散及固定后,用乙酸乙酯进行洗脱。所得洗脱液用于色谱分离,以Kinetex C_(18)色谱柱为分离柱,以不同体积比的含0.1%(体积分数)甲酸的10mmol·L^(-1)甲酸铵溶液和乙腈所组成的混合液为流动相进行梯度洗脱。在串联质谱分析中,采用电喷雾正离子源多反应监测模式检测。欧夹竹桃苷和欧夹竹桃苷乙的质量浓度均在2~100μg·L^(-1)内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)均为0.5μg·L^(-1)。以空白样品为基体进行加标回收试验,所得回收率在90.0%~98.0%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在2.1%~7.3%之间。

HPLC-MS/MS法快速检测人体血液中的夹竹桃毒素

目的采用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)检测人体血液中夹竹桃苷、夹竹桃苷乙。方法采用乙腈沉淀蛋白法处理血液,HPLC-MS/MS法检测,采用MRM记录方式,保留时间和定性离子对定性,标准曲线法定量。结果夹竹桃苷、夹竹桃苷乙的检测限均在0.5ng/m L,线性范围在1ng/m L^1mg/m L,回收率为75.2%~95.7%。结论本方法操作简便,灵敏度高,可应用于中毒案件中人体血液中两种夹竹桃毒素(夹竹桃苷和夹竹桃苷乙)的快速检测。

LC-MRM^(3)法测定中草药和药酒中3种强心作用的生物碱

目的建立液相色谱-多级多反应监测模式(liquid chromatography-multiple-reaction monitoring cubed,LC-MRM^(3))同时测定中草药和药酒中3种强心作用的生物碱(欧夹竹桃苷、欧夹竹桃苷乙和去甲乌药碱)。方法样品用80%甲醇提取后经30%乙腈稀释后直接进样,在Phenomenex Kinetex C_(18)色谱柱(100×2.1 mm,2.6μm)上进行梯度洗脱,分离后采用LC-MRM^(3)模式检测。结果3种生物碱在相应的浓度范围内呈良好的线性关系(r>0.999),药酒样品检出限为0.019~0.071μg/L,草药样品检出限为0.006~0.022μg/kg,加标回收率为90.31%~97.92%,相对标准偏差为1.14%~2.73%(n=6)。与传统的液相色谱-多反应监测模式(liquid chromatography-multiple-reaction monitoring,LC-MRM)方法相比,LC-MRM^(3)方法的检测灵敏度提升约一个数量级,并且允许简单的样品制备,而不会有基质效应的影响。定性结果通过多级串联质谱(multi-stage mass spectrometry,MS3)扫描得到进一步确认。LC-MRM^(3)的定量结果与LC-MRM的结果基本一致。结论该方法简便、快速、可靠,可用于同时检测中草药和药酒中3种强心作用的生物碱。