奇楠沉香叶的有效成分含量测定及其生物活性评价

【目的】测定不同提取条件下奇楠沉香叶中总黄酮、总多糖、鞣质的含量及其体外抗氧化、抗菌、抗炎活性,同时探讨其相关性。【方法】(1)采用水提法、醇提法,每次加入12倍量的水/70%乙醇对奇楠沉香叶进行加热回流提取,2 h/次,提取2次。(2)以芦丁、D-无水葡萄糖、没食子酸为指标成分,采用紫外-可见分光光度法结合化学显色法测定奇楠沉香叶水提物、70%醇提物中总黄酮、总多糖、鞣质的含量。(3)以抗坏血酸(VC)为阳性对照,采用紫外-可见分光光度法测定奇楠沉香叶水提物、70%醇提物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、2,2’-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)自由基(ABTS+·)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O)的半数抑制浓度(IC50)以及对铁离子(Fe3+)的还原能力。(4)采用微量稀释法测定奇楠沉香叶水提物、70%醇提物对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌、沙门氏菌、福氏痢疾杆菌、大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)。(5)采用耳廓肿胀法测定高、中、低剂量奇楠沉香叶水提物组,高、中、低剂量70%醇提物组(3.33、1.67、0.83 g生药/kg)二甲苯所致小鼠耳廓的肿胀度。【结果】(1)奇楠沉香叶水提物、70%醇提物中的总黄酮、总多糖、鞣质含量依次为:(5.04±0.01)%、(3.78±0.02)%,(6.86±0.11)%、(3.09±0.27)%,(2.16±0.01)%、(1.81±0.01)%。(2)奇楠沉香叶水提物、70%醇提物对DPPH·、ABTS+·、·OH、O的IC50依次为0.31、0.37 mg/mL,0.12、0.16 mg/mL,0.069、0.074 mg/mL,0.71、1.17 mg/mL;同时随着浓度的增加均对Fe3+的还原性增强。(3)奇楠沉香叶水提物、70%醇提物对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌、沙门氏菌、福氏痢疾杆菌、大肠杆菌的MIC范围依次为15.63~>500.0、31.25~>500.0 mg/mL。(4)与空白组比较,高、中剂量奇楠沉香叶水提物组,高、中剂量70%醇提物组小鼠耳廓肿胀度显著降低(P<0.01),但相同剂量水提物组与70%醇提物组相比则无显著性差异(P>0.05)。【结论】奇楠沉香叶中含有较多的总黄酮、总多糖和鞣质成分,同时具有较强的抗氧化、抗菌、抗炎活性,且成分含量与生物活性基本呈正相关性。相比醇提法,水提法制备的奇楠沉香叶提取物具有更多的有效成分和更强的生物活性。