LC-MS/MS法测定人血浆中奈比洛尔浓度及其在中国人体内的药代动力学

本文建立了一种快速测定人血浆中奈比洛尔血药浓度的LC-MS/MS法,并研究其在中国健康人体内的药代动力学行为。以氨氯地平作为内标,采用C18反相柱(150 mm×2.0 mm,4.6μm),柱温35℃。流动相为乙腈-水(含0.05%甲酸)(45∶55),流速0.2 mL/min;电喷雾离子化(ESI),正离子扫描,选择性反应监测(SRM)药和内标分别为:奈比洛尔m/z406.2→151.0;氨氯地平m/z 409.0→238.2。在本文建立的方法下,奈比洛尔在0.025～25 ng/mL呈良好的线性关系,r=0.998 6,最低检测浓度为0.008 ng/mL,低、中、高浓度下的回收率、日内及日间精密度均符合方法学要求。健康受试者口服5 mg奈比洛尔片后的t1/2,AUC0-t,cmax,MRT分别为:(14.4±5.5)h,(7.35±2.48)ng.h/mL,(1.05±0.35)ng/mL,(16.5±5.3)h。结果表明:该方法专属性强,适用于奈比洛尔血样的定量分析。

奈比洛尔对自发性高血压大鼠循环和主动脉肾素-血管紧张素系统的影响

目的:探讨奈比洛尔(Nebivolol)对自发性高血压大鼠循环和主动脉肾素-血管紧张素系统(RAS)的影响。方法:18只自发性高血压大鼠(SHR)和6只同源正常血压大鼠Wistar-Kyoto(WKY)随机分为:(1)奈比洛尔组(n=6):SHR给予奈比洛尔5mg·kg-1·d-1;(2)卡托普利组(n=6):SHR给予卡托普利15mg·kg-1·d-1;(3)SHR对照组(n=6);(4)WKY对照组(n=6)。奈比洛尔、卡托普利溶于蒸馏水中灌胃,对照组给予等体积蒸馏水灌胃。给药8周后测定血浆肾素活性(PRA),血浆和主动脉血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、一氧化氮(NO)浓度,NO/AngⅡ和血管紧张素转化酶(ACE)活性。结果:与WKY比较,SHR血浆和主动脉NO含量降低,AngⅡ水平显著增加,NO/AngⅡ降低;主动脉ACE活性明显增加,而血浆ACE活性则降低;但PRA在两组间无显著性差异。奈比洛尔治疗对SHR血浆AngⅡ含量和ACE活性无影响,但可降低主动脉AngⅡ水平,抑制主动脉ACE活性,从而增加血浆及主动脉NO含量和NO/AngⅡ。结论:奈比洛尔抑制肾素-血管紧张素系统,可能是其降低血压的机制之一。

奈比洛尔对自发性高血压大鼠主动脉血管反应性的影响

目的观察奈比洛尔对自发性高血压大鼠(SHR)血压、主动脉对不同收缩和舒张药物反应性的影响。方法实验动物随机分成5组,SHR对照组、WKY对照组:等量蒸馏水灌胃;奈比洛尔组:SHR灌胃奈比洛尔8mg/(kg.d);阿替洛尔组:SHR灌胃阿替洛尔80mg/(kg.d);WKY奈比洛尔组:正常血压WKY大鼠灌胃奈比洛尔8mg/(kg.d)。给药8周,每周用无创法测定尾动脉收缩压。实验结束后,处死动物后,取胸主动脉,观察血管对内皮素(ET-1)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、苯肾上腺素(PE)、KCl的收缩反应以及对乙酰胆碱(Ach)、硝普钠(SNP)的舒张反应。结果与SHR对照组相比、奈比洛尔,阿替洛尔可明显抑制SHR血压升高(P<0.05),且奈比洛尔在用药4周后可使收缩压维持稳定水平。SHR主动脉对KCl、PE、AngⅡ的收缩反应均大于WKY组(P<0.05);对Ach的舒张反应明显弱于WKY组(P<0.05),但是对ET-1的收缩反应及对SNP的舒张反应在两组无统计学意义。奈比洛尔可以抑制SHR主动脉对KCl、PE、ET-1、AngⅡ的收缩反应(P<0.05);增加SHR主动脉对Ach的舒血管效应(P<0.05),但对SNP的反应性无显著性影响。结论奈比洛尔可以抑制SHR主动脉对不同收缩药的收缩反应,增加主动脉对Ach的舒张效应,改善SHR血管反应性。

奈比洛尔对高血压患者big-ET、CRP及HbA1c的影响

目的探讨奈比洛尔对高血压患者内皮功能、炎症反应及糖代谢的影响。方法选择原发性高血压患者80例,随机分为奈比洛尔组和阿替洛尔组,每组40例。阿替洛尔组口服阿替洛尔,25～50mg/次,2次/d;奈比洛尔组口服奈比洛尔,5mg/次,1次/d。共治疗12周,观察2组血压、内皮功能、炎症反应及糖化血红蛋白(HbA1c)的变化情况。结果奈比洛尔组在血压下降的同时内皮功能及炎性指标较治疗前明显改善(P<0.05),且治疗后与阿替洛尔组比较也有统计学意义(P<0.05)。HbA1c在奈比洛尔组治疗前后变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05),阿替洛尔组治疗后有所升高,前后比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论口服奈比洛尔治疗可改善内皮功能及抑制炎症反应,对糖代谢无明显影响,可以改善高血压患者的预后。

奈比洛尔对冠心病人内皮勃起功能及C反应蛋白的影响

目的观察第三代倍他受体阻滞剂奈比洛尔及第二代倍他受体阻滞剂美托洛尔对稳定型冠心病病人内皮功能、勃起功能及炎症指标的影响。方法本研究采用随机、对照的方法。80名35～67岁稳定型冠心病病人。符合入选条件者随机分为奈比洛尔和美托洛尔组。服药12周后比较两组病人血液中血管内皮功能变化及炎症的相关指标及勃起功能的变化。结果奈比洛尔组内皮功能相关指标一氧化氮（NO）水平、血流介导的血管扩张（FMD）明显高于服药前，而血管性血友病因子（vWF）水平、CRP（C反应蛋白）明显低于服药前。两组之间经过独立样本的t检验差异有显著性意义（P〈0．01），勃起功能明显好转。美托洛尔组内皮功能变化及炎症指标及勃起功能无显著性变化。结论第三代倍他受体阻滞剂奈比洛尔对稳定型冠心病病人具有改善血管内皮功能、勃起功能及炎症反应作用。

奈比洛尔联用卡托普利对原发性高血压大鼠动脉舒血管效应的影响

目的 观察奈比洛尔对原发性高血压大鼠（SHR）血压以及不同动脉对血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利舒血管效应的影响.方法 将16只SHR随机分成奈比洛尔治疗组（奈比洛尔8 mg·kg^-1·d^-1灌胃,n=8）和SHR组（灌胃等量蒸馏水,n=8）.以同周龄的雄性正常血压Wistar-Kyoto（WKY）大鼠作为对照（n=8）.给药8周后,无创法测定尾动脉收缩压;处死动物后取胸主动脉、颈动脉、肾动脉、股动脉,观察卡托普利（1×10^-8～3×10^-4 mol/L）舒血管效应的变化.结果 与SHR组相比,奈比洛尔可明显抑制SHR血压升高[（152±27）mm Hg比（203±36）mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa,P〈0.05）.SHR组颈动脉对卡托普利的最大舒张效应（Emax）小于WKY对照组,使预收缩张力舒张50%所需浓度（EC50）大于WKY对照组（均P〈0.05）;主动脉、肾动脉、股动脉的Emax和EC50在SHR组与WKY对照组间比较差异无统计学意义.奈比洛尔可增加SHR组主动脉、颈动脉、肾动脉、股动脉对卡托普利的Emax,并降低主动脉、股动脉EC50（均P〈0.05）,而对颈动脉和肾动脉EC50则无影响.结论 奈比洛尔可增加SHR血管对卡托普利的舒张效应.

奈比洛尔对自发性高血压大鼠心肌连接蛋白43重构的影响

目的探讨奈比洛尔对自发性高血压大鼠(SHR)心肌连接蛋白43(Cx43)重构的影响。方法动物随机分成:SHR组(等量蒸馏水,灌胃),奈比洛尔组(奈比洛尔8 mg·kg^(-1)·d^(-1),灌胃),WKY(Wistar-Kyoto)组(等量蒸馏水,灌胃)。给药8周,期间每周测定尾动脉收缩压。试验结束后,3%戊巴比妥钠(30 mg/kg)麻醉大鼠,分离心脏,利用免疫组织化学方法和蛋白质印迹技术观察心肌Cx43的分布和表达的影响。结果与WKY组相比,SHR收缩压持续上升,奈比洛尔则可显著降低收缩压。免疫组织化学与蛋白质印迹法结果显示,WKY组Cx43阳性表达规则分布于闰盘,SHR组Cx43阳性颗粒排列紊乱位于侧边或胞内,且蛋白表达水平明显降低。奈比洛尔可使Cx43规则分布于闰盘处,Cx43表达升高。结论奈比洛尔在显著降压的同时,可改善SHR心肌Cx43分布和表达。

基于蛋白质组学分析奈比洛尔改善UUO大鼠肾间质纤维化

目的:观察奈比洛尔改善单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化(RIF)的作用,并利用蛋白质组学探讨其机制。方法:SD大鼠分为:Sham组;UUO组;Neb组(UUO大鼠给予奈比洛尔10 mg·kg^(-1)·d^(-1),i.g.)。各组分别在造模7 d,14 d和21 d时,麻醉大鼠,分离左侧梗阻肾。HE染色观察肾脏结构,Masson染色测RIF程度。利用蛋白质组学筛选造模21 d,UUO/Sham和Neb/UUO之间共有,且奈比洛尔回调差异蛋白,进行生物信息学分析。Western blot验证关键蛋白表达。结果:与Sham组比较,UUO大鼠RIF呈渐进性加重。奈比洛尔给药21 d显著改善UUO大鼠左肾RIF。与UUO/Sham比较,奈比洛尔回调差异蛋白179个。KEGG富集分析和PPI网络显示,回调差异蛋白主要涉及剪接体通路。Western blot证实Rbm8a、Srsf9、Sart1蛋白表达与蛋白组学结果一致。结论:奈比洛尔改善UUO大鼠肾间质纤维化可能与调节剪接体密切相关。

抗高血压新药奈比洛尔

奈比洛尔为一新型第三代β-肾上腺素受体阻滞剂,与同类药物相比,具有独特的药理学特性。现对其药理作用、药动学、临床研究、不良反应及药物相互作用进行综述。

奈比洛尔抑制心衰和非心衰心肌细胞中一氧化氮合酶活性的作用研究

目的:研究奈比洛尔在心衰和非心衰的心肌细胞中对一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响。方法:采用免疫组化的方法测定应用奈比洛尔、卡维地洛和美托洛尔等药物后人、鼠心室心肌细胞中eNOS蛋白水平移位及eNOSser1177磷酸化结果。结果:与未加药物的对照组比较,应用奈比洛尔后,非心衰受试者的心室心肌细胞中的eNOS移位及eNOSSer1177磷酸化未见明显差异(P>0.1) ;与用药前比较,2种指标在非心衰大鼠心肌细胞中用药后也未见明显差异(P>0.1) ,但在心衰受试者的左室心肌细胞中,可见2种指标明显受抑(P≤0.05)。卡维地洛、美托洛尔在所有心肌组织中均不影响eNOS活性。结论:奈比洛尔不影响非心衰的左室心肌细胞eNOS活性,但可抑制心衰细胞eNOS活性,由此发挥其不同的有益的临床作用。

奈比洛尔通过AMPK/NOX/ROS抑制高糖诱导HK-2细胞上皮-间质转化

目的:研究奈比洛尔抑制高糖诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间质转化(EMT)的机制。方法:不同浓度奈比洛尔、DPI(NOX抑制剂)、AMPK抑制剂化合物C、AMPK激动剂AICAR预处理1.5 h后,加入高糖(30 mmol·L^-1)刺激HK-2细胞48 h,倒置显微镜观察细胞形态,荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS),MTT法检测细胞增殖,Western Blot检测细胞蛋白表达。结果:高糖降低HK-2细胞p-AMPK/AMPK,增加NOX4和p22phox蛋白表达,升高细胞内ROS水平,诱导EMT发生。奈比洛尔10和20μmol·L^-1抑制高糖诱导EMT,且10μmol·L^-1奈比洛尔对HK-2细胞增殖无影响。奈比洛尔和DPI减少高糖诱导HK-2细胞NOX4和p22phox蛋白表达,降低ROS水平,抑制EMT。奈比洛尔与AICAR增加p-AMPK/AMPK,抑制EMT,此作用可被化合物C拮抗。结论:奈比洛尔通过AMPK/NOX/ROS通路改善高糖诱导HK-2细胞EMT。

奈比洛尔对血管内皮细胞胰岛素抵抗的影响

目的观察奈比洛尔改善人主动脉内皮细胞(HAEC)胰岛素抵抗(IR)的作用及机制。方法HAEC分为空白组(正常培养,胰岛素不刺激),对照组(正常培养,胰岛素刺激),不同浓度奈比洛尔+对照组(对照组基础上加奈比洛尔0.1,1,10μmol·L^(-1)),IR组(高糖33.3 mmol·L^(-1)+胰岛素1×10^(-7) mol·L^(-1)),不同浓度奈比洛尔+IR组(IR基础上加奈比洛尔0.1,1,10μmol·L^(-1))。48 h后,细胞无血清饥饿处理12 h。以噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,以葡萄糖氧化酶法测HAEC葡萄糖消耗量,以硝基还原酶法检测上清液一氧化氮(NO)水平,以蛋白质印迹法测定蛋白表达。结果与对照组(100%)比较,IR组细胞活性无显著性改变(95.13±2.10)%,且不同浓度奈比洛尔(0.1、1、10μmol·L^(-1))预处理对IR组和对照组细胞活性均无显著性影响。IR组的细胞葡萄糖消耗量和上清液NO水平分别为(0.53±0.17)mmol·L^(-1),(33.11±1.35)μmol·L^(-1),对照组分别为(1.14±0.24)mmol·L^(-1),(38.50±3.43)μmol·L^(-1);1μmol·L^(-1)奈比洛尔+IR组分别为(0.94±0.15)mmol·L^(-1),(39.15±1.44)μmol·L^(-1),10μmol·L^(-1)奈比洛尔+IR组分别为(0.89±0.19)mmol·L^(-1),(37.31±1.90)μmol·L^(-1),对照组与IR组比较,差异有统计学意义(P<0.05);1,10μmol·L^(-1)奈比洛尔+IR组与IR组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。蛋白质印迹显示IR组细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1),磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt),磷酸化Akt(p-Akt),内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达均较对照组降低,p-IRS-1蛋白表达升高(P<0.05);1μmol·L^(-1)奈比洛尔+IR组以上蛋白表达与IR组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论奈比洛尔调节IRS-1/PI3K/Akt/eNOS改善血管内皮细胞IR。

肺高血流模型大鼠肺动脉重构与奈必洛尔的影响

背景:血管舒张型肾上腺素β1受体阻断药奈必洛尔能否有效降低肺动脉压,对肺血管重构有何影响,目前尚不清楚。目的:观察奈比洛尔对肺高血流模型大鼠肺动脉重构的影响。方法:将40只SD大鼠随机均分为4组,模型组、奈比洛尔组、卡托普利组均制备肺动脉高压并肺血管重构大鼠模型,假手术组仅分离腹主动脉及下腔动脉;造模后5 d,奈比洛尔组、卡托普利组分别于灌胃给予奈比洛尔溶液1 mg/(kg·d)与卡托普利溶液5 mg/(kg·d),模型组与假手术组灌胃给予等体积生理盐水。给药8周后,对比4组平均肺动脉压、右心室肥厚指数、肺动脉形态学变化、肺动脉超微结构及肺动脉环舒张率。结果与结论:与假手术组比较,模型组大鼠肺间小动脉肌化程度明显,平均肺动脉压和右心室湿质量/(左心室湿质量+室间隔湿质量)显著增高(P<0.01或P<0.05),肺动脉环舒张率降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,奈必洛尔组、卡托普利组平均肺动脉压、右心室湿质量/(左心室湿质量+室间隔湿质量)显著降低(P<0.05或P<0.01),肺间小动脉肌化程度降低,肺动脉环舒张率增加(P<0.05或P<0.01)。说明奈比洛尔能够减轻肺高血流模型大鼠的肺动脉重构,其机制与奈必洛尔保护血管内皮和降低肺动脉压有关。

β肾上腺素受体阻滞剂的研究进展

β受体阻滞剂广泛应用于心血管疾病和非心血管疾病的治疗,然而,该类药物的作用机制存在明显差异,且目前并没有完全阐释清楚。奈比洛尔是第三代β受体阻滞剂中的一种新药。它是该类药物中唯一的既具有心肌选择性,又能通过间接地产生一氧化氮使血管舒张的药物。现回顾β受体阻滞剂的发展,探讨目前已知的关于β受体阻滞剂的作用机制,评价该类药物并对它们在临床应用中的差异做基础研究。

冠状动脉慢血流现象10例临床分析

冠状动脉慢血流现象（slow coronaryf low phenomenon，SCFP）是指经冠状动脉造影术证实冠状动脉远段血流灌注延迟而无明显狭窄病变，且除外冠脉痉挛、冠脉扩张、溶栓治疗、冠脉成形术、气体栓塞、心肌病、瓣膜病、结缔组织病等引起血流减慢的因素。本研究结合10例冠状动脉慢血流现象的病例探讨其发病机制、影响因素、预后及治疗的最新进展。

盐酸奈必洛尔片治疗轻中度原发性高血压有效性及安全性

目的评价盐酸奈必洛尔片治疗轻、中度原发性高血压的有效性和安全性,同时评价奈必洛尔的降压平稳性。方法用多中心、随机、双盲、阳性药物平行对照设计。经过2周安慰剂导入期,入选315例轻中度高血压受试者,随机分为盐酸奈必洛尔片5 mg.d-1组(试验组)和富马酸比索洛尔片5 mg.d-1组(对照组)。47例受试者进入开放动态血压研究,服用盐酸奈必洛尔片5 mg.d-1,用药前和用药12周后分别行24 h动态血压监测,计算用药前后24 h收缩压和舒张压的谷峰比值。结果治疗12周后,2组受试者的平均坐位舒张压及收缩压较基线有显著下降,2组降压有效率分别为73.4%和69.7%(P>0.05)。动态血压监测治疗后24 h平均收缩压/舒张压、白天及夜间平均收缩压/舒张压与治疗前比较均显著降低,差异有统计学意义(P<0.01);整体法收缩压谷/峰比为78.9%,舒张压谷/峰比为75.3%。2组间不良事件发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论盐酸奈必洛尔能显著降低舒张压和收缩压,其降压作用持续、平稳,其安全性和耐受性良好。

UPLC-DAD Q TOF MS/MS法快速检测降血压类保健食品及中成药中添加的20个化学药物

目的:利用超高效液相-串联四极杆-飞行时间液质(UPLC-DAD Q TOF MS/MS)联用系统,建立快速可靠灵敏的测定降压类保健食品及中成药中违法添加阿奇沙坦、硝苯地平、拉西地平、奈比洛尔等20个化学药物的液质联用检测方法。方法:采用UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS联用仪,以Waters HSS T3 C18(100 mm×2.1 mm, 1.8μm)为色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)和甲醇-乙腈(1∶1)(B)为流动相,梯度洗脱(0 min, 5%A;0~8 min, 5%A→95%A;8~11 min, 95%A;11~11.2 min, 95%A→5%A;11.2~12 min, 5%),流速为0.3 mL·min^(-1);进样体积1μL;ESI正、负离子模式,一级、二级质谱全扫描,进行UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS的定性及定量分析。结果:经方法学验证,本方法在1~50μg·mL^(-1)浓度范围内线性良好、精密度(RSD)小于3%、回收率在80.5%~98.7%。应用该方法在15批样品中均含有非法添加的药物成分,其中14批样品检出2个及以上多种药物成分;9批样品均检出托拉塞米、坎地沙坦酯、拉西地平;另有一批样品检出乐卡地平和奈比洛尔,在降压类保健食品及中成药产品中首次检出。结论:本方法快速、准确,灵敏度高,在涵盖12个补充检验标准中的成分的基础上扩大了检验范围,为快速筛查降血压类保健食品及中成药中非法添加化学药物提供有力技术支撑。