淋病奈瑟菌NHBA蛋白经鼻腔免疫后保护效果评估

目的表达纯化淋病奈瑟菌NHBA蛋白,通过鼻腔免疫途径制备其多克隆抗体并对NHBA抗血清的免疫保护效果进行评估。方法构建NHBA蛋白原核表达菌株并进行目的蛋白的表达及纯化。小鼠随机分为2组:NHBA组:NHBA蛋白+霍乱毒素B亚单位(CTB)佐剂;磷酸盐缓冲液(PBS)组:PBS+CTB佐剂。通过对小鼠进行鼻腔免疫NHBA蛋白制备其多克隆抗体,ELISA测定免疫后血清中IgG抗体效价。蛋白免疫印迹法鉴定NHBA蛋白在淋病奈瑟菌菌株中的表达情况。利用血清杀菌活性实验、调理吞噬杀伤实验及抗体粘附抑制实验评估NHBA抗血清的免疫保护效果。结果成功表达纯化NHBA蛋白。鼻腔免疫小鼠后血清中产生了高滴度的IgG抗体。蛋白印迹实验结果显示抗血清能识别淋病奈瑟菌菌株中天然表达的NHBA蛋白。血清杀菌活性实验和调理吞噬杀伤实验的有效杀菌滴度分别为1/200、1/400。抗体粘附抑制实验结果显示NHBA抗血清能有效抑制淋病奈瑟菌粘附ME-180细胞。结论淋病奈瑟菌NHBA蛋白经鼻腔免疫后获得的抗血清具有免疫保护效果,未来可以作为淋病奈瑟菌鼻黏膜疫苗的有效靶点。