液相色谱-质谱／质谱联用技术分析固相合成奈米非肽及其副产物

利用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)联用技术分析固相合成奈米非肽(H-4F-Phe-Hyp -Arg-Gly-Trp-NH_2)粗产物,探讨HPLC-MS/MS技术在固相多肽合成产物和副产物分析中的应用。RP- HPLC分析采用ODS柱(Kromasil 4.6mm×250mm),流动相A为0.1%甲酸水溶液,B为乙腈。洗脱梯度为:0～40min,B相由15%到60%,流速0.5mL/min,检测波长214nm。电喷雾离子源(ESI),正离子检测模式分析。粗产物中主成分即为目标五肽-奈米非肽,根据测量结果改进了实验方案,主成分含量由65.8%提高到80.4%。

HPLC法测定奈米非肽中三氟醋酸含量

目的建立HPLC测定奈米非肽中三氟醋酸含量的方法。方法色谱柱:Apollo C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:流动相A 0.7%磷酸水溶液(PH3.0),流动相B甲醇;流速:1.2ml/min;检测波长:210nm;进样量:10μl。结果在12.0-961.2μg/ml浓度范围内,呈良好线性关系,线性方程为A=0.232 2X-0.062 6,r=0.999 6,平均回收率100.7%,RSD为0.73%(n=6)。结论本法简单可靠,重现性好,可作为奈米非肽中三氟醋酸含量测定方法。