套式PCR法检测外周血肺炎衣原体DNA

目的 探讨外周血单个核细胞（PBMC）中肺炎衣原体（Cpn）DNA的检测方法。方法 用淋巴细胞分层法和低渗溶血法提取PBMC。设计2对引物用套式PCR（nPCR）法测定150例冠心病患者（冠心病组）外周血PBMC中Cpn—DNA。同期临床55例非冠心病患者作对照组。结果 冠心病患者肺炎衣原体DNA阳性率32．7％，对照组阳性率为1．8％，两组差异显著（P〈0．001），OR26．2，95％CI 3．52～194．98。冠心病组中无症状组阳性率为29．1％，不稳定型心绞痛组阳性率为39．6％。急性心肌梗死组阳性率为29．9％，各亚组间差异不显著（P〉0．05）。结论 用nPCR法检测PBMC中Cpn-DNA，可为临床Cpn感染的诊断提供依据。

用套式PCR检测蓝舌病病毒

美国I.E.Aradaib等从BTV17型（BTV—17）的非结构蛋白1基因中选择了2对寡核苷酸引物对（BTV1、BTV4和BTV2、BTV3）,用于套式多聚酶链反应（PCR）试验中的两步扩增。第一步,使用外引物对BTV1和BTV4进行扩增,获得一个有826个碱基对（bp）的产品;第二步,用套式或内引物对BTV2和BTV3进行扩增,产生一种有517bp的PCR产品。应用这种套式PCR测定法,可以检测出在细胞培养物中繁殖的北美原型血清型2、10、11、13和17BTV的RNA。使用套式引物对BTV2

兰州地区献血员及静脉毒瘾者血清中TT病毒核酸检测及意义

目的 研究兰州地区献血员及静脉毒瘾者中TT病毒(TTV)的感染状况。方法 利用套式PCR技术检测献血员及静脉毒瘾者血清中TTV DNA。结果 献血员中TTV DNA检出率为7.5％(9/120)。静脉毒瘾者中TTVDNA枪出牢为26.8％(15/56),明显高于献血员组,结论 首次报道兰州地区存在TTV感染。静脉毒瘾者为了TTV感染的高危人群,其致病性较弱。关于TTV的病原学、流行病学、病理学及临床意义等有待进一步探索。

丙型肝炎病毒2a型E2区基因cDNA的变异分析

目的 了解丙型肝炎病毒 2a型基因组E2区序列的一级结构及变异特征 ,为进一步研究HCV包膜蛋白的生物学功能打下基础。方法 用逆转录套式多聚酶链反应 (RT -nPCR)法从 1例NANB型肝炎患者血清中扩增出一条约 110 0bp的片段 ,以限制性内切酶EcoRI、HindⅢ双酶切后连入pUC19载体中 ,转化感受态细胞 ,经限制性内切酶长度多态性分析 (RFLP)和PCR法证实为阳性克隆后 ,用全自动序列分析仪测序。结果 测得约 110 0bp的核苷酸序列 ,其核苷酸序列及其编码的氨基酸序列分别与HCV - 1、HC -C2、HCV -BK、HC -J6、HC -J8相应序列作比较 ,显示分离株HCV在核苷酸水平上与以上分离株的同源性分别为 6 3.1%、6 4 .2 %、6 4 .1%、86 .9%、6 9 3% ,在氨基酸水平上的同源性分别为 6 9.6 %、70 .7%、6 9.6 %、86 .2 %、83.1%。结论 分离株 (HCV -JF)与HC-J6同属 2a型。

原发性肝癌HCV、HBV感染状况调查

原发性肝癌ＨＣＶ、ＨＢＶ感染状况调查徐艳云（中国人民解放军第１５５医院开封市４７５００３）原发性肝癌（ＨＣＣ）抗－ＨＣＶ阳性率各地报道不一，本组为探讨当地ＨＣＣ患者ＨＣＶ、ＨＢＶ感染状况，作者对３５例ＨＣＣ患者的血清进行了抗－ＨＣＶ、ＨＢＶＭ测定，结...

两种RT-PCR检则猪水泡病病毒RNA

英国Lin,F.等试验评价了逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和逆转录套式多聚酶链反应(RT-nPCR)检测猪水泡病病毒(SVDV)RNA方法。用这两种PCR检测了7个种系差异的SVDV猪群,其肠道病毒为阴性。当结合使用市售诊断试剂盒快速提取RNA时,可用RT-PCR检测临床SVD猪的上皮和粪样中的SVDV,然后再增添第二个扩增步骤以建立套式PCR(RT-nPCR)。

徐州及周边地区丙肝基因型分布调查

目的：了解徐州及周边地区HCV基因分型情况，为HCV感染者的诊断和治疗提供依据。方法：选择2009年1月～2013年1月徐州市中医院及徐州市传染病医院门诊及住院患者100例病毒载量较高的丙肝患者血清标本为试验组，10例健康体检者血清标本为对照组。应用丙型肝炎病毒（HCV）核酸扩增（PCR）荧光定量检测试剂盒对2组进行HCV—RNA定量检测，应用丙型肝炎病毒基因分型检测芯片试剂盒对2组HCV—RNA含量≥1．0×10^4拷贝／ml的阳性标本进行基因分型检测。结果：100例阳性标本中HCV1b型76例，HCV2a型18例，HCV1b／2a混合型6例。结论：徐州及周边地区HCV基因型主要为1b型（76％），2a型次之（18％），同时存在HCVlb／2a混合型（6％）。