高铁血红蛋白还原试验在G6PD缺乏症女性杂合子筛查中的应用价值

目的探讨筛查G6PD缺陷症特别是女性杂合子的较好筛查方法,以提高诊断率,以期对因G6PD缺陷而造成的新生儿黄疸、核黄疸实施早期干预。方法应用高铁血红蛋白还原试验(MHB-RT)和荧光斑点法对2019年5月-9月在我院孕检的妊娠妇女进行G6PD筛查检测,荧光PCR熔解曲线法确诊。结果女性G6PD缺陷症总检出率为12.36%(259/2096),在女性G6PD缺乏纯合子及双重杂合子检测中,MHB-RT法和荧光斑点法均可100%检出。在女性杂合子检测中,MHB-RT法的假阳性率为1.2%,假阴性率为14.3%。荧光斑点法的假阳性率为0.5%,假阴性率81.9%。结论应用MHB-RT法作为初筛实验联合高分辨荧光熔解曲线法确诊实验可大大提高女性杂合子检出率,降低因G6PD缺乏引起的新生儿黄疸的漏诊率,对临床有重要指导意义,客观准确的诊断G6PD缺陷症并找出本地区的优势突变,对于基层医院实验室也有重要的实用价值。

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症女性杂合子基因突变检测的临床意义

目的:探讨基因突变检测在检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症女性杂合子中的临床价值。方法:采用G6PD活性生化表型检测方法和核酸扩增导流杂交基因检测法对无血缘关系的女性血液标本分别进行G6PD活性检测和常见14种突变基因检测,对未检测到基因突变的G6PD阳性样本进行测序检测分析,对2种检测结果进行分析比较。结果:无血缘关系的女性体检者共493例接受检测,其中酶活性正常473例,酶活性降低20例,G6PD酶活性降低检出率为4.06%。全部受检女性中,130例女性检出G6PD基因突变,包括c.1311 C>T突变在内检出率为26.37%,致病基因突变检出率为8.11%,2种方法对女性G6PD缺乏症检出率有明显差异(P<0.01),G6PD酶活性检测可造成49.94%女性杂合子漏检。本研究共检出8种基因突变13种突变变异型,大多为单核苷酸替代错义突变,除单纯c.1311 C>T突变之外,最常见突变为c.1376G>T、c.1388G>A、c.95 A>G 3种突变。20例G6PD活性降低女性人群中,19例检测到致病基因突变,473例G6PD活性正常女性人群中,21例检测到致病基因突变,杂合子基因突变占90.88%。结论:G6PD酶活性检测不足以满足女性杂合子检测需要,采用覆盖本地区常见基因突变类型的基因检测方法可有效鉴定酶活性正常G6PD缺乏症女性杂合子人群。

女性杂合子葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的检测-酶紫外比值法的改良设计

目的:研究两种改良方法与现有的WHO公认的红细胞G6PD/6PGD酶紫外比值法(UVST法)对女性杂合子的检出率。方法:抽取经变性高效液相色谱法(PE/DHPLC)确诊的女性杂合子全血标本200份分别用WHO公认的UVST法(常规方法 A)及两种改良法(改良方法 B和C)检测,分析两种改良方法与常规方法对G6PD缺乏症检测结果的差异性和对G6PD缺乏症杂合子的检出率。结果:改良方法 B、C的G6PD/6PGD比值与常规方法 A比较差异有统计学意义(P<0.05)。PE/DHPLC检测(尤其是家系调查)结果表明对女性杂合子的检出率:改良方法 C为98%,优于改良方法 B的检出率(92%),明显高于常规方法 A的检出率(79.5%)。结论:在WHO的UVST法的基础上进行改良的方法 C可提高G6PD缺乏症女性杂合子的检出率。

G6PD/6PGD定量比值法检测新生儿女性杂合子的临床分析

目的探讨G6PD/6PGD定量比值法检测女性杂合子的临床意义。方法使用G6PD/6PGD定量比值法对广西医科大学第四附属医院2005年1月至2008年1月出生的4124名新生儿的脐血进行G6PD缺乏症检测。结果女性杂合子检出率占估计值18.09%。结论G6PD/6PGD定量比值法在检测女性杂合子中的实际检出率低,容易造成大部分杂合子女性漏诊,对一级亲属中有G6PD缺乏者的高危女性应提高其防范意识,减少G6PD缺乏症对新生儿的危害。

女性杂合子X-连锁肾上腺脑白质营养不良诊断及治疗的研究进展

X-连锁肾上腺脑白质营养不良（X-ALD）是最常见的过氧化物酶体病，属单一过氧化物酶体酶缺陷性疾病，由ABCD1基因缺陷导致血浆及组织中极长链脂肪酸的堆积。男性患者临床表型多样已被频繁讨论报道，其中进展性的脊髓神经病变是最常见的。对于X染色体连锁隐性遗传疾病，人们多认为女性杂合子携带者一般临床表型不明显，仅有少数关于X—ALD女性携带者临床表型的研究，而此类患者亦需深入研究和探讨。现对X-ALD女性携带者的临床表现、诊断及治疗的研究进展进行综述，加强对其临床诊疗的认识，为准确的预后评估与诊治提供依据。

逆遗传方向研究男性G6PD缺乏症及其母亲的表型与基因型

目的分析女性G6PD酶活性检测真实的漏检率以及女性G6PD酶活性与基因突变的关系。方法收集124名男性确诊为G6PD缺乏症半合子,收集其母亲标本,荧光斑点试验和硝基四氮唑蓝法分别进行G6PD酶活性筛查与酶活性直接测定,探针熔解曲线分析技术检测中国人常见G6PD基因突变。结果所有男性子代G6PD酶活性介于1.10～8.58 U/gHb;母亲酶活性介于1.44～31.20 U/gHb;男性子代G6PD基因检测中除1例外,均检出G6PD基因突变,其母亲除1例未检出突变外,余均检出突变。母亲酶活性正常占70.2%(87/124),仅检测出单一突变;母亲酶活性中度/轻度缺乏者占16.1%(20/124),除2例为双重基因突变外,余均为单一突变;母亲G6PD重度缺乏者占13.7%(17/124)均检测为双重突变(其中一例推算为双重杂合子)。结论女性携带单一突变基因,酶活性呈连续性大跨度分布,表型筛查检出率低;男性酶活性仅约为携带相同基因突变女性的1/6。女性携带双重突变者严重影响G6PD酶活性,与男性半合子相当。女性筛查优先采用分子诊断技术可减少大量病例漏诊。

东莞东南区域不同人群的 G6PD 筛查结果分析

目的：研究东莞东南区域不同人群的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase，G6PD）基因缺乏率和酶活性测定法在女性杂合子中的检出率。方法收集东莞市塘厦医院2007年1月-2013年4月的39475例标本，通过遗传平衡定律计算出不同人群的基因频率和女性杂合子的检出率。结果不同人群的男性 G6PD 缺乏率分别是成人组（A）5.03％，新生儿组（B）5.10％，总组别（C）5.06％，各组之间差异无统计学意义（χ^2＝0.0404，P ＝0.980）。A，B 和 C每组的女性杂合子的检出率分别是27.13％，14.49％和23.87％，各组之间差异有统计学意义（χ^2＝32.26，P ＝0.000）。结论G6PD 缺乏症在该地区发病率为5.06％，不同人群的 G6PD 缺乏率无差异，以及采用酶活性检测法在女性杂合子检出率中效果不理想，尤其是在 B 组中，这有利于在遗传咨询、产前诊断和新生儿出生缺陷等方面提供更全面的信息。

8140例新生儿脐带血G6PD筛查结果分析

目的研究新生儿脐带血的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶男性缺乏率和酶活性测定法在女性杂合子中的检出率。方法全自动生化分析仪测定G6PD酶活性,根据测定的结果,计算出新生儿脐带血的基因频率和女性杂合子的检出率。结果新生儿脐带血的G6PD缺乏症在本地区发病率为3.07%,男性的G6PD缺乏率是4.04%,酶活性测定法在女性杂合子中的检出率是21.95%。结论采用酶活性检测法在女性杂合子检出率中效果不理想,这有利于在遗传咨询和新生儿出生缺陷等方面提供更全面的信息。