女贞子中主要活性成分红景天苷和特女贞苷的逆转铁过载促进骨形成相互作用研究

目的评价女贞子中主要活性成分红景天苷和特女贞苷的逆转铁过载促进骨形成抗绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis,PMOP)效应,并探讨其相互作用关系。方法建立柠檬酸铁铵诱导的斑马鱼骨质疏松模型,分别评估红景天苷(1、5、25、50、100μmol/L)、特女贞苷(1、5、25、50、100μmol/L)及其两种成分混合溶液(1∶1)对骨矿化的影响;茜素红染色后以骨骼染色面积和累积光密度评价其骨矿化程度,并运用等效线法和等辐射分析法评价红景天苷、特女贞苷抗PMOP的相互作用。结果红景天苷、特女贞苷及其混合溶液均有较好地逆转铁过载所致的骨形成抑制作用,且在1~100μmol/L内呈现显著的浓度依赖性;在等效线法中,经半数有效浓度(EC50)计算得混合组γ>1,表明二者无明显的协同作用;在等辐射分析法中,混合组中相应成分的EC50比值分数总和为1.16,其复合点落在95%可信限内(P>0.05),表明两者呈相加作用关系,且未见明显协同作用。结论红景天苷和特女贞苷均可逆转铁过载诱导的骨形成抑制,且当红景天苷和特女贞苷联合使用时,两者呈相加作用。

黑豆与黄酒共制女贞子炮制工艺优化

目的优化黑豆与黄酒共制女贞子炮制工艺。方法在单因素试验基础上,以蒸制时间、蒸制次数、烘制温度为影响因素,外观性状,红景天苷、特女贞苷、女贞苷G13、醇溶性浸出物含量,DPPH、ABTS自由基清除率的总评“归一值”(OD值)为评价指标,星点设计-响应面法优化炮制工艺。结果最优工艺为蒸制时间70 min,蒸制次数7次,烘制温度90℃,OD值为0.8415。结论该方法简便可靠,稳定可行,可用于黑豆黄酒共制女贞子。

基于HPLC指纹图谱结合多元统计分析九制女贞子炮制过程中成分变化

目的建立3个不同批次九制女贞子样品的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱及多成分含量测定方法,结合化学模式识别分析评价九制女贞子的质量差异。方法采用HPLC法建立不同批次九制女贞子的指纹图谱并进行5种成分的含量测定,通过相似度分析、主成分分析(PCA)和最小偏二乘法-判别分析(PLS-DA)评价不同批次九制女贞子质量差异,找寻炮制过程中成分含量的动态变化情况。结果建立了九制女贞子的HPLC指纹图谱,标定了26个共有峰,指认了其中5个成分,分别是羟基酪醇(峰9)、红景天苷(峰10)、特女贞苷(峰19)、女贞苷G13(峰24)、Oleonuezhenide(峰25),含量变化明显。方法学考察结果显示,各成分的线性关系良好(r≥0.990),平均回收率为99.90%~103.19%。27批样品的指纹图谱与对照指纹图谱相似度均>0.953。PCA结果提取了4个主成分,PLS-DA能将3批不同批次九制女贞子明显区分,并根据变量重要性投影值(VIP)>1的原则筛选出了7个主要差异成分,并指认了Oleonuezhenide、女贞苷G13、特女贞苷这3个是与九制女贞子相关性较强的化学成分。不同批次之间九制女贞子质量差异较大。结论建立的九制女贞子HPLC指纹图谱方法简便,与模式识别方法相结合可为九制女贞子药材质量评价提供参考,炮制过程中含量呈现动态变化,羟基酪醇整体呈现不变趋势,红景天苷整体呈现增加趋势、特女贞苷、女贞苷G13、Oleonuezhenide整体呈现减少趋势,在炮制过程中,特女贞苷、女贞苷G13、Oleonuezhenide发生了转化,但具体转化机制有待后续研究发现,九制女贞子的指纹图谱结合化学模式识别方法,不仅为九制女贞子质量提供参考也可继续深入探讨九制女贞子潜在的质量标志物。

基于CiteSpace和VOSviewer对女贞子的研究现状与热点分析

利用CiteSpace和VOSviewer对女贞子近三十年的中文文献进行计量学分析,以探究女贞子的研究现状及发展趋势。本研究整理收集中国知网、维普、万方及中国生物医学文献数据库中近三十年(1993年至2023年)女贞子相关研究文献,通过Java语言环境下的VOSviewer与CiteSpace软件对其发文量、作者、发文机构、关键词进行可视化分析。本文纳入的1 240篇文献可视化,结果显示,发文量最多的作者是刘慧仁(首都医科大学);发文量最多的机构是山东中医药大学(22篇);通过对关键词的分析发现,女贞子的研究热点集中在化学成分的测定、质量标准的制定、药理作用的探索、配伍机制的研究、“女贞子-墨旱莲”(二至丸)的配伍、临床经验的总结等方面。当前,女贞子研究的重点和热点是复方(中药)/治疗应用、化学成分分析和“二至丸”配伍分析。

基于网络药理学和分子对接技术探讨淫羊藿-女贞子药对治疗哮喘的作用机制

支气管哮喘简称哮喘,哮喘是一种以慢性气道炎症为特征的呼吸系统疾病,其临床症状表现为反复发作的喘息、呼吸困难、胸闷和咳嗽等[1-2]。世界卫生组织发布的《全球哮喘负担报告》显示全球大约有3亿人口患有哮喘疾病,估计到2025年世界范围内将增加至4亿哮喘患者[3]。哮喘疾病是仅次于癌症的全球第二大致死和致残疾病。西医对哮喘的治疗主要通过皮质激素类药物缓解哮喘的急性发作,但是患者若长期服用此类药物,容易产生不良反应甚至致使病情加重[4]。哮喘与中医“哮病”理念有着紧密的联系,其主要的发病机制归结于肺部有痰,痰因肺脾肾功能失常,津液凝聚而成。现代中医研究支气管哮喘常基于肺和肾虚、痰湿疾病来讨论气道炎症、气道重塑等病理特征然后提供不同的预防和治疗方法。中医药在治疗哮喘方面独具特色,不仅能通过抑制气道炎症和舒张支气管来治疗哮喘,而且在治疗哮喘的同时还能提高患者的自身免疫力[5-6]。中药淫羊藿味辛、甘,性温,归肝、肾经。不仅具有补肾阳、强筋骨、祛风湿的功效[7],还具有抗衰老、增强免疫的功效[8]。女贞子甘、苦,性凉,归肝、肾经,具有滋补肝肾、明目乌发的功效[9]。根据中医“久病成虚”“缓则治本”的理论,平补肾中阴阳立法的药对淫羊藿-女贞子是名老中医徐辉光教授积30余年临床之经验而精选创制[10],临床4∶3配伍作为支气管患者缓解期用药。研究发现淫羊藿和女贞子配伍能减轻哮喘大鼠气道重塑的病理改变,改善胶原沉积和杯状细胞增生的现象[11]。目前尚未有系统研究淫羊藿-女贞子治疗哮喘作用机制的相关报道。本研究利用网络药理学及分子对接技术探讨淫羊藿-女贞子药对治疗哮喘的核心成分以及作用机制,为淫羊藿-女贞子药对治疗哮喘的药效物质基础和作用机制研究提供依据。

女贞子-墨旱莲药对提取物的指纹图谱和化学成分鉴定研究

目的建立女贞子-墨旱莲药对提取物的HPLC指纹图谱以控制其质量,并对提取物中所含有的化学成分进行结构鉴定。方法采用HPLC法,固定相为ZORBAX Extend C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-体积分数为0.1%甲酸溶液梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为265 nm,柱温为35℃,进样量为10μL;建立15批不同产地女贞子-墨旱莲药对提取物的HPLC指纹图谱,对其进行相似度评价、聚类分析和正交偏最小二乘方判别分析;采用超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)联用技术,分别在正、负离子扫描模式下对提取中的化学成分进行检测,基于高分辨质谱一级和二级数据进行结构鉴定。结果由不同产地药材随机组合的15批女贞子-墨旱莲药对提取物的相似度介于0.865~0.992之间,药对指纹图谱中共确定了16个共有峰,指认了其中7个色谱峰;液质联用共检测到55个化合物,采用对照品准确鉴定了7个成分的化学结构,并推测了其它48个化合物的可能化学结构。结论建立的指纹图谱方法简便可靠,重复性好,可用于女贞子-墨旱莲药对提取物的质量控制研究;UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS联用技术可实现对女贞子-墨旱莲药对提取物中化合物的结构鉴定,为其后续研究奠定了基础。

基于中医“肾-脑-骨”轴探讨女贞子及其活性成分的多脏器药理作用及潜在调控机制

女贞子作为一种传统的补益肝肾中药,在中医药临床应用中具有重要地位。随着现代科技的发展,对女贞子的药理学活性研究也日益深入。“肾-脑-骨”轴的概念源于“肾主骨,生髓,通于脑”的中医理论,女贞子的多脏器药理学活性与该理论内涵具有紧密的契合点。基于“肾-脑-骨”轴的理论基础,旨在探讨女贞子及其活性成分的多脏器药理学作用及潜在调控机制,以期为临床应用与药物开发提供理论依据。

HPLC测定酒女贞子配方颗粒中红景天苷的含量

目的建立HPLC法测定酒女贞子配方颗粒中红景天苷含量的方法。方法采用C18色谱柱,以甲醇-水(15∶85)为流动相,等度洗脱,流速1.0mL·min^(-1),检测波长275nm。结果红景天苷在0.5~5.0mg·mL^(-1)浓度范围内呈良好的线性关系,回收率为99.94%,RSD为1.43%(n=6)。结论该方法操作简便,重现性好,稳定性高,可用于酒女贞子配方颗粒的质量控制。

女贞子防治骨质疏松症药理机制的研究

骨质疏松症是常见的骨代谢疾病,随着中国人口老龄化程度的不断加重,已成为广泛关注的公共健康问题。女贞子作为传统的补肾中药,对骨质疏松症的治疗有着独特优势。研究显示女贞子具有骨保护作用,能够减少骨质流失,改善骨质疏松症,但其作用机制尚不清晰。为此,本文利用中国知网、PubMed等数据库,以骨质疏松、女贞子、成骨等为关键词,检索了近15年国内外相关文献。根据现有研究,本文主要从钙平衡、氧化应激、骨代谢及激素样作用4个方面综合论述女贞子防治骨质疏松症的机制,以期为女贞子抗骨质疏松的进一步研究提供参考及为中药防治骨质疏松症提供思路。

基于网络药理学探讨女贞子治疗糖尿病肾病作用机制

目的 探究女贞子治疗糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法 通过网络药理学数据库筛选女贞子和DN作用靶点,进行蛋白互作(PPI)、基因本体论(GO)数据库和京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库分析。结果 得到女贞子作用于DN的关键靶点18个,分别与细胞转录、生长、信号转导、炎症等相关;KEGG富集分析发现,女贞子与晚期糖基化产物、动脉粥样硬化、炎症因子等通路密切相关。结论 初步探究了女贞子治疗DN的作用机制,为后续实验提供理论基础。

响应面分析法优化女贞子蛋白质提取工艺及功能性研究

为了进一步研究和开发女贞子在食品领域的应用,以提高女贞子蛋白质的提取率为目的进行研究。将超声辅助碱溶酸沉法提取干燥女贞子果实中的蛋白质工艺作为基础,通过单因素实验和响应面实验考察提取温度、提取时间、液料比、pH值4个因素对女贞子蛋白质提取率的影响,以确定最佳的提取工艺并测定其功能性。实验结果表明,女贞子蛋白质的最佳提取条件为提取温度45℃、提取时间40 min、液料比为25∶1、pH值9.0,该条件下最高提取率为85.09%,实际提取率与模型预测值无显著性差异。此时所得的女贞子蛋白质在持水性、乳化性、乳化稳定性方面均高于市售成品大豆蛋白,持油性、起泡性、泡沫稳定性均低于大豆蛋白,且具有较强的抗氧化能力。因此,该方法提取的女贞子蛋白质具有很高的应用价值和发展潜力,可为女贞子在饮品、调味品等食品领域的高值化利用提供理论依据。

不同蒸、炖工艺的酒女贞子外观性状和主成分比较

为了研究蒸法和炖法对酒女贞子的外观性状及主成分影响的变化规律,探究蒸、炖工艺对酒女贞子的质量影响。按照2020年版《中华人民共和国药典》方法制备蒸、炖酒女贞子样品,结合中式传统色片比较蒸、炖工艺对酒女贞子外观性状的影响,采用高效液相色谱(HPLC)法及药典浸出物测定法测定蒸、炖酒女贞子的主成分及浸出物,比较蒸、炖工艺对酒女贞子的浸出物、特女贞苷及红景天苷含量的影响。结果表明,蒸法和炖法对酒女贞子的外观性状有较大影响,相同的炮制时间炖法酒女贞子颜色为黑色,蒸法颜色为褐色,分别在蒸制10 h、炖制12 h后的饮片性状才能符合2020年版《中华人民共和国药典》标准;蒸法和炖法对酒女贞子浸出物无明显差异;在蒸、炖过程中特女贞苷含量呈降低趋势,在相同时间内蒸法的降低速度快于炖法;红景天苷含量呈上升趋势,相同时间内蒸法的升高速度快于炖法。由此可知,蒸法和炖法对酒女贞子外观性状、内在成分的变化规律影响较大,2种方法的炮制原理虽然相同,但主成分变化率差异较大,结合酒女贞子外观性状及内在成分含量变化,酒女贞子采用蒸法需蒸制10 h以上,采用炖法需炖制12 h以上。

碱水解法提取女贞子中红景天苷的工艺研究

目的:优化碱水解法提取女贞子中红景天苷的工艺条件。方法:按照《中华人民共和国药典》中分析方法验证指导原则对含量测定方法进行方法学验证,再通过单因素试验和正交试验对碱水解提取工艺进行优化。结果:最佳碱水解提取工艺参数为提取时间2 h、液固比40∶1(mL/g)、40%乙醇、1.0%NaOH,碱水解后红景天苷提取率达到1.80%,是未经碱水解提取率的8.5倍。结论:该法操作简单、提取率高、环境污染小,为以红景天苷为主成分的女贞子提取物的开发利用提供了理论依据。

女贞子提取物对运动训练大鼠血清及某些组织相关酶活性的影响

建立力竭跑台训练模型,检测大鼠血清ALT、AST、LDH、CK活性以及肝脏、心肌、股四头肌相关酶活性,研究女贞子提取物对大鼠运动能力和血清酶活性的影响。实验结果,与安静组比较,运动组血清ALT、AST、LDH和CK活性极显著升高(P<0.01),肝脏、心肌、股四头肌相关酶活性极显著升高(P<0.01),与运动组比较,女贞子组血清CK活性有极显著下降(P<0.01),ALT、AST和LDH活性呈显著下降(P<0.05),心肌AST、肝脏LDH活性有极显著下降(P<0.01);肝脏ALT、心肌SDH和股四头肌SDH活性呈显著下降(P<0.05)。说明女贞子提取物可以调节大鼠血清酶和肝脏、心肌、股四头肌相关酶的活性,可能是延缓运动性疲劳的重要因素。

女贞子-淫羊藿药对对顺铂所致大鼠肾毒性的保护作用

目的探究女贞子-淫羊藿药对对顺铂所致大鼠肾毒性的保护作用。方法将Wistar雄性大鼠应用随机数字表法分为对照组、模型组、女贞子-淫羊藿药对组,每组10只。除对照组外,其他两组均于第4 d腹腔注射顺铂3 mg/kg;女贞子-淫羊藿药对组在给予顺铂前3 d灌胃350 mg/kg提取物,连续7 d。取材结束后,计算大鼠体重变化率和脏器指数,考察肾功指标和组织病理学变化,采用免疫组化法观察大鼠肾脏肾损伤分子1(Kidney injury molecule-1,KIM-1)和NADPH氧化酶4(Anti-NADPH oxidase 4,NOX4)阳性信号的表达和分布;Western Blot法检测KIM-1和NOX4蛋白表达的影响;试剂盒微量法检测大鼠肾组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)和烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸/还原型辅酶II(NADP+/NADPH)水平的变化;ELISA法检测女贞子-淫羊藿药对对大鼠肾组织中白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平的影响。结果相较于对照组,顺铂导致大鼠体重和肾组织SOD、CAT、GSH和TNF-α水平显著性降低(P<0.05),肾脏器指数、血清血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(creatinine,CREA)、尿酸(uric acid,UA)、肾组织MDA、NADP+/NADPH、IL-1β、IL-6水平显著性升高(P<0.05),HE染色显微镜下显示肾小管上皮细胞坏死脱落,管腔变形空泡化,KIM-1和NOX4阳性信号和蛋白表达均明显增加(P<0.05);相比于模型组,女贞子-淫羊藿药对干预使肾组织SOD、CAT、GSH和TNF-α水平显著升高(P<0.05),肾脏器指数、血清BUN、UA和肾组织MDA、NADP+/NADPH、IL-6水平显著下降(P<0.05),肾组织HE染色显示损伤减轻且KIM-1和NOX4阳性信号和蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论女贞子-淫羊藿药对通过抑制肾组织中KIM-1的表达,激活抗氧化酶的活性和抑制炎症因子的释放,发挥了对顺铂肾毒性的保护作用。

当归、黄芪、女贞子提取物对脂溢性脱发的治疗效果及机制研究

目的:观察当归、黄芪、女贞子提取物外用对睾酮诱导的C57BL/6小鼠脂溢性脱发模型的影响及其机制探讨。方法:外用睾酮3周诱发C57BL/6小鼠脂溢性脱发模型,观察涂抹不同浓度当归、黄芪、女贞子提取物后小鼠背部皮肤的颜色变化,新生长度和毛发覆盖率,观察小鼠皮肤厚度和毛囊组织学变化情况;检测鼠皮肤中α-MSH,TGF-β1和VEGF因子水平。结果:当归、黄芪、女贞子醇提物均能促进脂溢性脱发小鼠的毛发生长,以当归低剂量组效果最好。病理切片显示当归、黄芪、女贞子提取物能够增加小鼠皮肤厚度和生长期毛囊的数量。各给药组均能提升皮肤中α-MSH,TGF-β1和VEGF因子的水平,以当归低剂量组、女贞子高剂量组效果最好。结论:当归、黄芪、女贞子外用可以通过减少皮肤油脂分泌、促进α-MSH,TGF-β1和VEGF的含量来促进脂溢性脱发小鼠的毛发生长。

女贞子盐炙前后质量变化研究

目的优选女贞子盐炙工艺,对盐炙前后女贞子进行质量比较。方法采用L_(9)(3^(4))正交实验法,对盐女贞子的炮制工艺进行优选。对盐女贞子的性状、TLC鉴别、水分、总灰分、浸出物进行观察或测定。建立女贞子HPLC指纹图谱,测定红景天苷、特女贞苷含量。结果盐女贞子最佳炮制工艺为取盐2 g,加水40 mL溶解,加入到100 g净女贞子中,拌匀闷润,置锅内,300℃炒制10 min。女贞子盐炙后总灰分含量增加,水分含量增加,浸出物、特女贞苷和红景天苷含量无明显变化。女贞子盐炙前后指纹图谱无明显差异。结论盐女贞子最佳炮制工艺切实合理可行,可用于控制盐女贞子质量。

女贞子-黄芪治疗转移性去势抵抗性前列腺癌的网络药理学机制

本研究利用数据挖掘和网络药理学探讨女贞子(Ligustrum lucidum)-黄芪(Astragalus membranaceus)治疗转移性去势抵抗性前列腺癌(Metastatic Castration-Resistant Prostate Cancer,mCRPC)的作用机制。利用中药系统药理学(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology,TCMSP)数据库与分析平台检索女贞子-黄芪的有效成分和作用靶点;利用R语言对芯片数据集GSE77930进行分析,筛选差异表达的基因;利用Cytoscape 3.8.0软件构建有效成分-靶点网络及蛋白互作网络;利用R语言对核心靶点进行GO富集分析和KEGG分析;采用Cytoscape 3.8.0软件构建女贞子-黄芪活性成分-靶点通路关系网络。结果表明女贞子-黄芪的关键活性成分共33个,包括槲皮素(Quercetin)、山奈酚(Kaempferol)、木犀草素(Luteolin)、异鼠李素(Isorhamnetin)、芒柄花黄素(Formononetin)等;核心作用靶点18个,其中AR、VCAM1、PCNA、NTRK1、TP53、EGFR和FBXO6等靶点可能是女贞子-黄芪治疗mCRPC的重要靶点。KEGG分析发现,女贞子-黄芪主要通过乙型肝炎(Hepatitis B)、前列腺癌(Prostate Cancer,PCa)、细胞周期(Cell cycle)、Vascular Endothelial Growth Factor(VEGF)信号通路(VEGF signaling pathway)和细胞衰老(Cellular senescence)等通路发挥抗mCRPC的作用。本研究结果可为mCRPC的临床治疗提供参考。

女贞子黄酮提取物对腺嘌呤所致老年小鼠肾组织损伤的治疗作用

目的探讨女贞子黄酮提取物对腺嘌呤所致老年小鼠肾组织损伤的影响。方法ICR老年小鼠按体质量随机分为对照组,模型组,阳性对照组,黄酮低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组均每天给予250 mg/kg腺嘌呤溶液经口灌胃,连续灌胃20 d。黄酮低、中和高剂量组每天分别给予100、200和300 mg/kg的黄酮水溶液经口灌胃,阳性对照组给予10 mg/kg甲睾酮水溶液灌胃,连续灌胃20 d。测定各组血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量及肾组织中SOD和MDA含量,实时荧光定量-聚合酶链反应(qPCR)法测定各组肾组织中SOD1、锰SOD2、白细胞介素(IL)-4和IL-6 mRNA水平。结果与模型组比较,女贞子黄酮高剂量组血清Cr水平显著降低(P<0.05);血清和肾组织MDA含量显著降低、SOD含量显著升高(P<0.05),肾组织SOD2和IL-4 mRNA表达水平显著升高,而IL-6 mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。结论女贞子黄酮提取物对肾组织损伤模型老年小鼠有抗肾损伤、抗感染的作用,其机制与抗氧化应激反应有关。

超声波-酶协同提取女贞子总黄酮工艺及其抗氧化活性研究

试验以女贞子为原料,在单因素试验基础上,采用响应面法优化女贞子总黄酮提取工艺,并研究女贞子总黄酮提取液的体外抗氧化活性。结果表明,女贞子总黄酮最优提取工艺参数为乙醇浓度80%、纤维素酶浓度0.3 g/L、超声温度50℃。在此条件下重复测定3次,女贞子总黄酮提取得率的平均值为4.93%,与模型预测值4.98%高度相符,表明该模型可靠,可用于女贞子中总黄酮的提取。女贞子总黄酮提取液体外抗氧化试验表明,总黄酮提取液对1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除的半数抑制浓度(IC_(50))值为186.6 mg/L,对2, 2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS~+)自由基清除的IC_(50)值为166.8 mg/L,表明女贞子总黄酮提取液具有较强的抗氧化活性。研究表明,女贞子总黄酮可作为天然绿色抗氧化剂在动物生产中应用。