一种检测奶样中布鲁氏菌抗体免疫层析方法的建立

通过制备脂多糖(LPS)并将其作为检测抗原,建立了一种检测奶样中布鲁氏菌抗体的酶联免疫层析方法。通过对处理方法和反应条件的优化,制备出敏感性高、特异性强的布鲁氏菌抗体检测试纸条。该试纸条敏感性为98.0%,抗体滴度为1:2~1:8,特异性为96.0%,且与其他常见病原无交叉反应,批内、批间重复性良好。保存期加速试验显示,该试纸条在2~30℃下可保存12个月;符合率验证显示,该方法与标准奶样的符合率达94.9%。上述结果表明,该检测方法具有敏感性高、特异性强以及方便、快捷等优点,适用于现场大批量检测,因而可应用于奶牛场布鲁氏菌病的快速诊断。

一个大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)奶样的成分和营养分析

一个大熊猫（Ａｉｌｕｒｏｐｏｄａｍｅｌａｎｏｌｅｕｃａ）奶样的成分和营养分析潘文石２，３）ＯｌａｖＴ．Ｏｆｔｅｄａｌ３）朱小健２）ＳａｒａＣｈｉｌｄｓ３）王大军２）ＤｅｖｒａＧ．Ｋｌｅｉｍａｎ３，２）（２）北京大学生命科学学院，北京，１００８７１；３...

磁性微球表面光引发聚合制备金属配位印迹层及选择性富集奶样中氟喹诺酮类药物残留

目的发展一种金属配位印迹磁性微球的制备方法,并用于奶样中氟喹诺酮类药物残留的选择性富集。方法采用简便的溶剂热法合成磁性纳米粒子,再采用溶胶-凝胶法制备磁性硅胶微球,然后在磁性硅胶微球表面接枝光引发剂,在125 W紫外灯辐射下合成恩诺沙星-Co（Ⅱ）配位印迹层,并用于磁分散萃取奶样中恩诺沙星、环丙沙星和洛美沙星。结果该方法的加标回收率为89.6%~100.8%,相对标准偏差为1.4%~5.5%,其中环丙沙星的检出限和定量限分别为1.72μg/kg和5.74μg/kg,洛美沙星的检出限和定量限分别为2.05μg/kg和6.82μg/kg,恩诺沙星的检出限和定量限分别为1.18μg/kg和3.94μg/kg。结论该样品处理方法是一种选择性好、简单快速的分离检测奶样中氟喹诺酮类药物残留的方法。

奶样不同处理方式对DHI结果的影响

为检验奶样不同处理方式对DHI结果的影响,将奶样分为直接测定、只摇匀、只预热、预热摇匀四组,进行乳脂率、乳蛋白率、乳糖率和体细胞数测定,发现减少部分处理环节虽然对乳蛋白率和乳糖率无影响,但对乳脂率和体细胞数的影响极大。测定乳成分时,奶样必须预热摇匀;测定体细胞数时,奶样不要预热,但需摇匀。由此可见,目前奶样的测定方法(预热、摇匀之后既测乳成分又测体细胞数)会导致体细胞数偏低(低于实际数)。应在奶样未预热之前先摇匀测体细胞数,然后再预热、摇匀测乳成分。

基于大缸奶样检测两病的应用及挑战

牛结核病和布鲁菌病在民间俗称“两病”,不仅是影响奶牛业发展的重要疫病,还给公共卫生也带来巨大威胁。随着“两病”控制及净化力度的不断加大,对两病的安全高效检测及监测手段也提出了更高的要求。奶样检测具有无应激、适合监测、降低成本等天然的优势;基于大缸奶样的检测方法作为群体监测的重要方法在国外很早就有应用,不仅用作常规的监测,还能够作为预警,对新发传染病的传入做出快速反应。我国基于大缸奶样的牛病检测刚刚起步,很多养殖企业或相关单位对该方法还不甚了解。本文从大缸奶样检测的优势、可行性及应用现状等方面进行了介绍,以期为基于大缸奶样检测的临床实践提供指导。

生鲜乳奶样的规范采集及保存

本文介绍了奶牛养殖者和收奶现场奶样采集的规范操作方法,包括采样工具、所需容器、采样方法、采样量和样品分装等,以确保采样准确。采样工作看似简单,但采样是否规范、是否准确、是否真正具有代表性将直接影响着奶质的最终检测结果,直接影响奶价,影响生鲜乳的收购,进而影响乳品企业和奶牛养殖者的良好合作。

原奶质量管控：——大罐奶样体细胞数总在20万上下波动究竟是怎么回事？（13）

多年前在拜访全国各规模化奶牛场期间，谈及如何做好原奶质量管控工作，总是反复提醒同道们对于亚临床乳房炎的管控应该是：“如履薄冰、如临深渊、枕戈待旦、警钟长鸣!”

用ELISA检测奶样中副结核分枝杆菌抗体

副结核在丹麦奶牛中广为流传。且流行已久,但其流行状况一直不明,为了检测不同地区奶牛副结核的流行率,Nielsen等学者应用一种商品抗原,建立了ELISA方法,用于检测奶样中副结核分枝杆菌抗体。1998年初,采集全国6个地区6个奶站的奶样,样品采用900个奶牛群,占全国奶牛群的7.5％。

用dot-ELISA检测牛奶样中布氏杆菌抗体

布氏杆菌病是严重危害人畜健康的重要传染病,各国对该病的研究均非常活跃。最近印度学者研制了一种用于检测布氏杆菌抗体的dot-ELISA试剂盒,并对其效果进行了评价。试验分两组,1组为来自布病流行场的141份患产科疾病牛的奶样,2组为50份布病净化场的健康牛奶样,用dot-

用单分散磁性颗粒ELISA检测奶样中的葡萄球菌

挪威兽医学院Siamak等,用不同量单克隆抗体(MAb)5G3包被高级常磁单分散颗粒(Dynabeads,M280),建立了单克隆抗体磁性颗粒酶联免疫吸附试验(ELISA),可快速灵敏地检出奶样中的葡萄球菌。用溶葡萄球菌素(Lysostaphin)预处理被检奶样,提高了本方法的灵敏度。

新疆垦区奶牛乳房炎致病菌的调查

本试验选取新疆垦区7个试验牛场,经临床调查和试剂诊断,检测奶牛712 头,采集奶牛乳房炎阳性乳样314份.其中,奶牛隐性乳房炎阳性检出率平均为36.3%,临床性奶牛乳房炎为16.7%.采集阳性奶样经实验室分离鉴定,革兰氏阳性菌仍是引起奶牛乳房炎的主要致病菌,但金色葡萄球菌已基本取代链球菌成为主要的致病菌,其检出率为78.98%.另外,常见环境性致病菌如沙门氏菌、大肠杆菌已明显减少,检出率仅为21.1%和9.24%.相反,绿脓杆菌和蜡样芽孢杆菌的检出率明显增加,其检出率为5.41%和11.15%,而且绿脓杆菌和隐球菌已经引起临床性乳房炎的爆发,其中隐球菌已经成为造成顽固性乳房炎的又一种新型病原.

新疆垦区奶牛乳房炎致病菌的调查

实验选取新疆垦区7个试验牛场,经临床调查和试剂诊断,检测奶牛 712 头,采集奶牛乳房炎阳性乳样 314 份。其中,奶牛隐性乳房炎阳性检出率平均为36 3%,临床性奶牛乳房炎为 16 7%;采集阳性奶样经实验室分离鉴定,革兰氏阳性菌仍是引起奶牛乳房炎的主要致病菌,但金色葡萄球菌已基本取代链球菌成为主要的致病菌,其检出率为 78 98%。另外,常见环境性致病菌[1]如沙门氏菌、大肠杆菌已明显减少,检出率仅为 21 1%和 9 24%。相反,绿脓杆菌和蜡样芽孢杆菌的检出率明显增加,其检出率为5 41%和11 15%,而且绿脓杆菌和隐球菌已经引起临床性乳房炎的爆发,其中隐球菌已经成为造成顽固性乳房炎的又一种新型病原。

通过DHI报告来解读奶牛乳房炎

河北奶牛生产性能测定中心（DHI）每月按着牧场发过来的奶样进行检测,都会有一份比较详尽的报告发给奶牛场,牛场通过报告中的哪几项内容来了解该牛只的健康状况呢？现在就报告的几项内容来和大家了解一下牛只的状况.

奶源大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

目的了解原料乳和乳房炎奶样中大肠杆菌的污染情况及菌株耐药性。方法通过选择培养和聚合酶链式反应方法对2个奶牛场采集到的206份奶样(129份乳房炎牛奶样品和77份原料乳样品)进行大肠杆菌的分离鉴定,采用药敏纸片法对分离株进行25种常用抗生素耐药特征检测。结果206份奶样中大肠杆菌的污染率为8.3%(17/206),其中乳房炎和原料乳样品的污染率分别为7.0%(9/129)和10.4%(8/77)。从17份污染的样本中共分离到34株大肠杆菌,其中乳房炎奶样分离到18株,原料乳分离到16株。药敏结果显示,奶样分离株对氨苄西林耐药最为普遍(44.1%,15/34),对头孢类抗生素也有较强耐药性[如头孢唑啉和头孢噻吩(20.6%,7/34)]。最常见的耐药谱为AMP(11.8%,4/34),AMP-CXM-CFZ-KF-F和AMP-CXM-CFZ-CTX-PRLCRO-KF(5.9%,2/34)。此外,A,B奶牛场分离株的耐药率(P=0.007)和耐药谱总体差异显著(P=0.043)。结论奶样中存在大肠杆菌的污染情况,菌株普遍对氨苄西林和头孢类抗生素耐药且部分对非兽用抗生素也有一定的耐药性。因此,为避免耐药大肠杆菌对人类,尤其是抵抗力较弱的老年人和婴幼儿的感染和中毒,除应加强对奶源地的管理外,还需防止抗生素的滥用。