基于网络药理学研究妇科调气解毒方对慢性子宫内膜炎的治疗作用机制

目的:探讨妇科调气解毒方对慢性子宫内膜炎的作用机制。方法:通过网络药理学,确定妇科调气解毒方作用于子宫内膜炎可能的关键靶点和关键通路。在该理论基础上,建立子宫内膜炎小鼠模型,分为空白组、模型组、西药组(盐酸左氧氟沙星),以及低、中及高剂量组(给予低、中及高剂量的妇科调气解毒方),通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法、实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)及蛋白质印迹法验证网络药理学结果。结果:在妇科调气解毒方中筛选出219个化合物和相应靶点698个;与子宫内膜炎的靶点取交集获得36个关键靶点。京都基因与基因组百科全书通路富集得到77条代谢通路,主要包括核因子κB(NF-κB)信号通路、晚期糖基化终末产物(AGE)-AGE受体信号通路、肿瘤坏死因子信号通路和白细胞介素(IL)17信号通路等。ELISA法结果显示,与空白组相比,模型组髓过氧化物酶(MPO)活性,炎症因子IL-6及IL-1β含量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,妇科调气解毒方低剂量组IL-6含量显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),但组间MPO活性、IL-1β含量的差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组相比,中剂量组、高剂量组及西药组MPO活性、IL-6及IL-1β含量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法结果显示,与空白组比较,模型组子宫组织中磷酸化蛋白65(P-P65)、Toll样受体4(TLR4)的基因及蛋白表达量显著升高,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.001)。与模型组比较,低剂量组不能明显抑制P-P65及TLR4 mRNA及蛋白的表达量(P>0.05),P-P65 mRNA、TLR4 mRNA表达量在中、高剂量组及西药组中明显降低(P<0.05或P<0.01,P<0.001),P-P65蛋白、TLR4蛋白表达量在高剂量组及西药组中明显降低(P<0.01或P<0.05),差异均有统计学意义。各组P65蛋白mRNA及蛋白表达量的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在脂多糖诱导的子宫内膜炎小鼠模型中,妇科调气解毒方可以明显下调炎症因子水平,抑制TLR4/NF-κB信号通路中关键基因蛋白的表达,从而达到抗炎、保护子宫内膜的目的。