妊娠期特异性beta1糖蛋白9 HLA-A3限制性细胞毒性T淋巴细胞表位的鉴定

目的:鉴定来自食管癌细胞中特异性高表达的妊娠期特异性beta1糖蛋白9(PSG9)的HLA-A3限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位。方法:首先运用RT-PCR方法检测PSG9mRNA在食管癌细胞EC9706、EC-1及EC-109中的表达情况。然后通过Bimas和Syfpeithi预测,再结合NetCTL1.2选取4条来源于PSG9的HLA-A3限制性的表位。候选表位P336的2位的氨基酸由异亮氨酸替换为亮氨酸,9位的氨基酸由酪氨酸替换为赖氨酸。候选表位P378的9位氨基酸由精氨酸替换为赖氨酸。候选表位通过标准的Fmoc化学法合成,通过结合力实验检测表位与T2A3细胞表面HLA-A3分子的结合力水平,通过细胞毒实验检测对EC-1细胞毒活性。结果:PSG9在肿瘤细胞EC9706、EC-1以及EC-109中都有表达。候选表位P107、P201和P336-2L9K与HLA-A3分子有弱结合力,P336、P378和P378-9K与HLA-A3分子有中等结合力。细胞毒实验结果显示P336-2L9K、P378和P378-9K对EC-1细胞均有一定的杀伤作用。结论:多肽P336-2L9K、P378和P378-9K能诱导体外抗肿瘤免疫反应,有可能成为PSG9阳性肿瘤细胞的共同CTL表位。

人感染 H7 N9禽流感病毒血凝素蛋白线性 B 淋巴细胞抗原表位的预测及鉴定

目的：预测并鉴定人感染H7N9禽流感病毒血凝素（HA）蛋白的线性B淋巴细胞抗原表位及H7亚型的特异性。方法选取绍兴市人民医院提供的人感染H7 N9患者不同时间的三份血清样本和一份健康对照血清样本，采用TMHMM Sever v．2．0预测蛋白质胞外区，采用DNAStar Lasergene’ s Protean、BcePred和ABCpred预测其优势B淋巴细胞抗原表位，并用间接酶联免疫吸附试验（ ELISA）验证预测的B淋巴细胞抗原表位的免疫原性。使用Clustal X2．1软件将预测抗原表位与GenBank上H7N9和H1～H16亚型流感病毒HA蛋白的氨基酸序列进行多重序列比对以分析预测抗原表位的H7亚型特异性，采用Cn3D 4．3．1软件分析预测的线性B淋巴细胞抗原表位在H7N9禽流感病毒HA蛋白中的分布情况。结果 HA蛋白可能的B淋巴细胞表位位于胞外区N端的第172～183、363～380、452～472和第491～506四个区段。 ELISA结果表明，四个预测的B淋巴细胞表位均与已确诊患者血清发生阳性反应。多重序列比对结果发现第172～183和452～472区段与其他亚型氨基酸序列差异最大，可能具有更好的H7亚型特异性。 HA蛋白的三维结构进一步证明预测的四个B淋巴细胞抗原表位均位于HA蛋白表面。结论鉴定出了四个 HA蛋白线性B淋巴细胞抗原表位，其中第172～183和452～472区段具有更好的H7亚型特异性，可作为新型疫苗表位设计和H7抗原和抗体的特异性检测的依据。

重度子痫前期患者胎盘组织及血清中PSG1的表达研究

目的探讨妊娠特异性β1糖蛋白-1(PSG1)在重度子痫前期(SPE)孕妇胎盘组织及血清中的表达及其与SPE患者临床指标的相关性。方法收集2020年8月至2021年4月住院并分娩的孕妇共57例,其中重度子痫前期(SPE)21例、妊娠期高血压(GH)23例、正常对照组孕妇13例;收集其分娩前血清标本及分娩后的胎盘组织;应用real-time PCR及Western blot分别检测其胎盘组织中PSG1 mRNA及PSG1蛋白的表达;利用ELISA法检测血清PSG1水平,并分析血清PSG1水平与相关指标之间的相关性。结果随着病情的进展,无论在胎盘组织及血清中PSG1的表达均呈一定的下降趋势,具体表现为SPE孕妇胎盘组织及血清中PSG1的表达水平均显著低于GH及对照组孕妇(P<0.05);GH孕妇胎盘组织PSG1 mRNA水平低于对照组孕妇(P<0.05),而血清PSG1水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。PSG1在SPE组孕妇血清中的水平与孕妇收缩压(r=-0.687,P<0.05)、24h尿蛋白定量(r=-0.781,P<0.05)呈显著负相关,与相应胎盘组织中PSG1 mRNA表达水平(r=0.673,P<0.05)呈正相关。结论PSG1在重度子痫前期孕妇胎盘组织及血清中的水平显著降低,提示与重度子痫前期的发生发展密切相关。

妊娠中期脐动脉超声血流参数及血清PSG1对子痫前期的二级预防价值

目的评价孕中期脐动脉超声血流参数及血清妊娠特异性β1糖蛋白-1(PSG1)对子痫前期的预测价值。方法收集2020年6月至2021年8月于本院住院的110例孕妇资料及孕中期血清PSG1检测结果,其中重度子痫前期27例、轻度子痫前期31例、正常对照组孕妇52例。比较三组孕中期各脐动脉超声血流参数及血清PSG1水平,运用受试者操作特征(ROC)曲线分析上述指标对子痫前期的预测诊断价值。结果孕中期时孕妇脐动脉血流搏动指数(PI)、血流阻力指数(RI)、脐动脉收缩期最大流速与舒张末期血流速度比(S/D)水平,重度子痫前期组显著高于轻度子痫前期组,同时轻度子痫前期组显著高于对照组(P<0.05)。孕中期血清PSG1水平中,重度子痫前期组显著低于轻度子痫前期组,同时轻度子痫前期组显著低于对照组(P<0.05)。孕中期脐动脉血流参数及血清PSG1对子痫前期均有一定的预测价值,其中PI、RI、S/D、PSG1预测子痫前期的ROC曲线下面积分别为0.630、0.710、0.670、0.710。通过联合PI、RI、S/D、PSG1指标对子痫前期的预测价值最高,其ROC曲线下面积为0.835。结论孕中期脐动脉超声血流参数及血清PSG1水平对子痫前期均有一定的预测价值,可作为子痫前期的二级预防指标进行推广。

妊娠晚期脐动脉血流S/D值及SP1与母婴不良结局的关系研究

目的探讨妊娠晚期脐动脉血流S/D比值、妊娠特异性β1糖蛋白(pregnancy-specificβ1 glycoprotein,SP1)水平与妊娠期并发症及不良妊娠结局的关系。方法选取100例正常妊娠妇女为正常组,247例妊娠合并症患者作为妊娠并发症组,妊娠并发症组包括109例妊高症妇女(其中重度妊高症47例、轻度妊高症62例)、妊娠期糖尿病妇女73例、妊娠期羊水过少妇女65例分别与妊娠晚期进行脐动脉血流S/D比值、血清SP1水平测定。结果妊娠合并症组、重度妊高症组、GDM组、羊水过少组妊娠妇女的脐动脉血流S/D值显著的高于正常组妊娠妇女且差异均有统计学意义(均P<0.05),妊娠合并症组、重度妊高症组的血清SP1水平显著的低于正常组妊娠妇女且差异有统计学意义(P<0.05),妊娠合并症组妇女的早产率、胎膜早破率、产后出血率均高于正常组妊娠妇女且差异均有统计学意义(均P<0.05),妊娠合并症组胎儿窘迫率、新生儿窒息率均高于正常组且差异有统计学意义(均P<0.05)。结论妊娠晚期脐动脉血流S/D比值升高、血清SP1降低水平提示母婴不良结局发生率增加。