二甲双胍对妊娠期糖尿病大鼠MEK/ERK通路及心肌凋亡的影响

目的:研究二甲双胍对妊娠期糖尿病大鼠MEK/ERK通路及心肌凋亡的影响。方法:构建妊娠期糖尿病大鼠模型。将实验大鼠分为正常对照组、模型对照组、二甲双胍处理组,每组12只。二甲双胍处理组大鼠每日腹腔注射70 mg/kg的二甲双胍。采用ELISA试验、苏木精—伊红染色法(HE染色)、Tunel、实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、蛋白印迹法(western blotting)法及超声心动图分别检测各组大鼠的血清中血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白(cTnI)、肌酸激酶心型同工酶(CKMB)含量水平、心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二酫(MDA)及一氧化氮(NO)水平、心肌组织凋亡水平、凋亡相关基因和蛋白、心脏功能、心肌形态学及二甲双胍对大鼠MEK/ERK通路的影响。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠血清中LDH、cTnI、CK-MB含量显著上升(P<0.05)。与模型对照组相比,二甲双胍处理组血清中LDH、cTnI、CK-MB含量显著降低(P<0.05);二甲双胍显著改善了大鼠心肌形态学,降低了炎症细胞浸润,改善了心肌细胞变性、水肿;与正常对照组相比,模型对照组大鼠心肌组织中凋亡细胞数量显著上升。与模型对照组相比,二甲双胍处理组大鼠心肌组织中凋亡细胞数量显著降低;与正常对照组相比,模型对照组大鼠心肌组织中Bax/Bcl2、active-caspase 3及active-caspase 9水平显著上升(P<0.05)。与模型对照组相比,二甲双胍处理组大鼠心肌组织中Bax/Bcl2、active-caspase 3及active-caspase 9水平显著降低(P<0.05);超声心动图结果表明二甲双胍显著改善了大鼠心脏功能;与正常对照组相比,模型对照组大鼠心肌组织中p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2、SIRT1蛋白相对表达量显著降低(P<0.05)。与模型对照组相比,二甲双胍处理组大鼠心肌组织中p-MEK/MEK、pERK1/2/ERK1/2蛋白相对表达量显著上升(P<0.05);与正常对照组相比,大鼠心肌组织中SOD、NO水平显著降低,而MDA水平显著上升(P<0.05)。与模型对照组相比,二甲双胍显著提高大鼠心肌组织中SOD、NO水平(P<0.05),显著降低MDA含量(P<0.05)。结论:二甲双胍能显著抑制妊娠期糖尿病诱导心肌损伤,其机制可能与激活MEK/ERK信号通路有关。

葫芦巴碱对妊娠期糖尿病大鼠血脂代谢及胰岛素抵抗的影响

目的探讨葫芦巴碱(trigonelline,TRG)对妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)大鼠血脂代谢及胰岛素抵抗的影响。方法随机选取8只雌性Wistar大鼠普通喂养,剩余大鼠高脂喂养8周,均合笼交配确认妊娠后,取普通喂养大鼠作为对照组,高脂喂养大鼠腹腔注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)35 mg/kg诱导构建GDM模型,成模大鼠随机分为模型组、TRG低剂量组(15 mg/(kg·d))、TRG高剂量组(45 mg/(kg·d))及盐酸二甲双胍(MH)(200 mg/(kg·d))组,每组各8只,对照组及模型组大鼠仅灌胃给药等量生理盐水,连续14 d。称重并测量大鼠空腹血糖(fasting blood glucos,FBG)水平及24 h尿白蛋白(albumin,Alb)含量;收集血液,检测血脂(高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG))、肝功能(天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT))及肾功能(血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(serum creatinine,SCr));检测各组大鼠空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)含量;计算胰岛素抵抗指数(HOMA-insulin resistance index,HOMA-IR)及胰岛素敏感指数(HOMA-insulin sensitivity index,HOMA-ISI);观察大鼠胰腺组织病理学变化;检测胰腺组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)水平。结果成功构建GDM大鼠模型;与对照组比较,模型组、TRG低、高剂量组及MH组大鼠BM、24 h Alb、AST、ALT、BUN及SCr、FBG水平、血清LDL-C、TC和TG含量、FINS、HOMA-IRI值、胰腺组织中MDA、TNF-α和IL-6水平升高,血清HDL-C含量、HOMA-ISI值及胰腺组织中SOD、CAT活性水平降低(P<0.05),胰腺组织见有不同程度的病理变化;与模型组比较,TRG低、高剂量组及MH组大鼠BM、24 h Alb、AST、ALT、BUN及SCr、FBG水平、血清LDL-C、TC和TG含量、FINS、HOMA-IRI值、胰腺组织中MDA、TNF-α和IL-6水平降低,血清HDL-C含量、HOMAISI值及胰腺组织中SOD、CAT活性水平升高(P<0.05),胰腺组织病理损伤逐渐减轻;TRG低、高剂量组及MH组作用效果逐渐增强(P<0.05)。结论TRG可降低GDM大鼠血糖水平,改善肝肾功能及异常血脂代谢,减轻胰岛素抵抗并提高胰岛素敏感性,其作用效果可能与降低炎性及氧化水平有关。

芒果苷对妊娠期糖尿病大鼠血清中TNF-α、IL-6和糖代谢的影响

目的研究芒果苷对妊娠期糖尿病大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和糖代谢的影响。方法用链脲佐菌素构建妊娠期糖尿病大鼠模型,以20mg/kg、40mg/kg、80mg/kg剂量的芒果苷腹腔注射14d,血糖仪测定大鼠空腹血糖水平,胰岛素放射免疫分析试剂盒检测血清中胰岛素水平。取腹主动脉血,ELISA法测定血清中TNF-α、IL-6、白细胞介素-1β(IL-1β)含量,用紫外分光光度计检测血清中丙二醛(MDA)和TAOC的水平。结果妊娠期糖尿病大鼠模型在7d、14d空腹血糖高于正常妊娠大鼠(P<0.05),而胰岛素水平低于正常妊娠大鼠(P<0.05)。40mg/kg、80mg/kg剂量的芒果苷治疗7d、14d和20mg/kg芒果苷治疗14d后妊娠期糖尿病大鼠血糖水平降低,胰岛素水平升高,与未经治疗的大鼠模型比较,差异有统计学意义(P<0.05)。妊娠期糖尿病大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β含量升高,T-AOC水平降低,MDA水平也升高,与正常妊娠大鼠比较,差异有统计学意义(P<0.05)。芒果苷治疗后的妊娠期糖尿病大鼠模型血清中TNF-α、IL-6、IL-1β含量降低,T-AOC水平升高,MDA水平降低,与未经治疗的大鼠模型比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论芒果苷能够改善妊娠期糖尿病大鼠胰岛素释放和糖代谢,减少大鼠血清中炎症因子的释放,抑制氧化应激。

葛根素提取物改善妊娠期糖尿病大鼠的氧化应激损伤

本文研究葛根素提取物对妊娠期糖尿病模型大鼠氧化应激的作用。建立妊娠期糖尿病模型大鼠,采用葛根素提取物进行干预。检测大鼠空腹血糖(FPG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、白介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),醌氧化还原酶1(NQO1)、血红素氧合酶-1(HO-1)及核因子E2相关因子2(Nuclear factor E2 related factor 2)Nrf2蛋白的含量水平。结果表明,葛根素高剂量组FPG、LDL-C和HDL-C分别为9.05 mmol/L、0.79 mmol/L和0.72 mmol/L(p<0.05);葛根素高剂量组MDA、NO和SOD分别为7.15 nmol/mg、90.76μmol/L和9.29 U/mg(p<0.05);葛根素高剂量组IL-6、CRP和TNF-α分别为135.51 ng/L、7.18 mg/L和15.06μg/μL(p<0.05)。结果说明葛根素提取物可降低空腹血糖,改善MDA、NO及SOD水平。

Snail1基因表达在妊娠期糖尿病大鼠氧化应激及肝脏损伤的作用机制

目的:探讨Snail1基因表达在妊娠期糖尿病大鼠氧化应激及肝脏损伤的作用机制。方法:健康成年C57BL/6雌性大鼠32只作为研究对象。采用高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素注射的方式构建妊娠期糖尿病大鼠模型。将所有大鼠分为正常妊娠组,正常妊娠+Snail1过表达组,妊娠期糖尿病组,妊娠期糖尿病+Snail1过表达组。采用qRT-PCR检测大鼠Snail1的m RNA表达水平,并检测大鼠妊娠期体重、氧化应激指标、炎症指标和肝功能指标。结果:与正常妊娠组相比,正常妊娠+Snail1过表达组、妊娠期糖尿病组、妊娠期糖尿病+Snail1过表达组的孕鼠体重、胎鼠体重、胎盘重量、Snail1 m RNA,明显更高(P<0.05),且妊娠期糖尿病+Snail1过表达组孕鼠体重、胎鼠体重、胎盘重量、Snail1 m RNA均显著高于正常妊娠+Snail1过表达组和妊娠期糖尿病组(P<0.05);与正常妊娠组相比,正常妊娠+Snail1过表达组、妊娠期糖尿病组、妊娠期糖尿病+Snail1过表达组的FBG、FINS、HOMA-IR明显更高(P<0.05),且妊娠期糖尿病+Snail1过表达组FBG、FINS、HOMA-IR均显著高于正常妊娠+Snail1过表达组和妊娠期糖尿病组(P<0.05);与正常妊娠组相比,正常妊娠+Snail1过表达组、妊娠期糖尿病组、妊娠期糖尿病+Snail1过表达组的ROS、GSH-Px、MDA明显更高(P<0.05),且妊娠期糖尿病+Snail1过表达组ROS、GSH-Px、MDA均显著高于正常妊娠+Snail1过表达组和妊娠期糖尿病组(P<0.05);与正常妊娠组相比,正常妊娠+Snail1过表达组、妊娠期糖尿病组、妊娠期糖尿病+Snail1过表达组的TNF-α、IL-1β、IL-18明显更高(P<0.05),且妊娠期糖尿病+Snail1过表达组TNF-α、IL-1β、IL-18均显著高于正常妊娠+Snail1过表达组和妊娠期糖尿病组(P<0.05);与正常妊娠组相比,正常妊娠+Snail1过表达组、妊娠期糖尿病组、妊娠期糖尿病+Snail1过表达组的GPT、GOT、ALP明显更高(P<0.05),且妊娠期糖尿病+Snail1过表达组GPT、GOT、ALP均显著高于正常妊娠+Snail1过表达组和妊娠期糖尿病组(P<0.05)。结论:妊娠期糖尿病大鼠Snail1基因的表达上调可加重糖脂代谢紊乱,并激活下游氧化应激和炎症反应,进而加重大鼠肝脏损伤。