慢性热应激期营养调控对放牧妊娠牛生殖激素含量、免疫功能及抗氧化能力的作用

本试验旨在研究营养调控对慢性热应激状态下的放牧妊娠牛生殖激素含量、免疫功能以及抗氧化能力的作用。试验选取夏季持续热应激期天然草场放牧的妊娠牛18头,随机分为试验组(营养调控)和对照组(仅放牧),每组9头。对照组妊娠牛每天自然放牧,试验组妊娠牛在此基础上归牧后进行补充饲喂精料2.5 kg/d。预试期10 d,试验期60 d。每天记录草场温湿指数,在试验期第1、30和60天早晨空腹进行颈静脉采集血液样本,测定其生殖相关激素含量、免疫功能及抗氧化能力相关指标,比较研究试验组和对照组间妊娠牛的各项血清指标的差异,及在试验组和对照组组内组间(不同时间点)的差异。结果表明:试验动物长期处于气温日较差较大的热应激环境,在试验第60天,试验组血清孕酮(PROG)、雌二醇(E2)含量显著高于对照组(P<0.05)。试验组组内组间血清催乳素(PRL)、三碘甲状腺原氨酸(T_(3))含量增加显著(P<0.05)。妊娠牛血清促卵泡素(FSH)含量在试验组组内组间均无显著差异(P>0.05)。在试验第60天,试验组血清白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-4(IL-4)含量显著高于对照组(P<0.05),试验组组内组间血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白G(IgG)含量均有显著提高(P<0.05),2组血清溶菌酶(LZ)含量均无显著差异(P>0.05)。试验组组内组间血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总抗氧化能力(T-AOC)显著增加(P<0.05),且试验组血清GSH-Px活性显著高于对照组(P<0.05)。2组血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量组内组间均无显著差异(P>0.05),但试验组血清SOD活性有高于对照组的趋势。综上所述,营养补饲有效地提高了放牧条件下妊娠牛的免疫功能和抗氧化能力,缓解了热应激对肉牛健康的危害,且显著提高了妊娠牛血清繁殖激素含量,对母牛繁殖性能的发挥具有积极作用。

妊娠牛子宫捻转的诊断要点和矫正治疗

1诊断要点 若兽医检查时发现妊娠母牛阴道前端狭窄，阴道壁通常出现歪斜的螺旋状，说明了子宫捻转的方向，据此可以得出诊断。虽然很难触诊到子宫颈，但仔细触诊可发现皱褶伸入阴道，将手指润滑后轻轻向前推，可进入部分扩展的子宫颈。若扭转位点位于子宫颈前，则阴道所受的影响不大，可通过直肠触诊子宫进行诊断。捻转不超过180度则胎儿一部分可进入阴道，可将这类难产误诊为胎位异常引起的。

牛妊娠相关糖蛋白20真核表达及其结构与功能预测

旨在真核表达牛妊娠相关糖蛋白20(bovine pregnancy associated glycoproteins 20,BoPAG20),并对蛋白质结构与功能进行预测。参考GenBank中BoPAG20基因密码子进行优化并合成,构建真核表达载体pcMV3-BoPAG20,转染至293F细胞中进行瞬时表达。SDS-PAGE和Western blot检测表达效果,Ni^(2+)亲和磁珠纯化蛋白,用纯化后的蛋白免疫小鼠验证免疫原性,并对BoPAG20结构与功能进行预测分析。结果:优化后的BoPAG20基因长度为1143 bp,编码380个氨基酸残基,密码子适用指数(CAI)由原来的0.77提高到0.96,GC含量由48.91%提高到55.29%;成功构建了pcMV3-BoPAG20真核表达载体,转染至293F细胞中成功表达,获得BoPAG20蛋白相对分子量约为58 kDa;纯化后BoPAG20蛋白免疫小鼠,34 d后测定血清效价达到1∶10^(5);BoPAG20蛋白无跨膜螺旋区,为分泌性蛋白,信号肽是N端15个氨基酸,存在6个糖基化位点(Ser^(36)、Ser^(56)、Ser^(57)、Ser^(76)、Ser^(80)、Thr^(115))和8个B细胞抗原表位,二级结构由α-螺旋(18.68%)、无规则卷曲(45%)和延伸链(30.79%),无β-转角;与BoPAG20互作蛋白包括β-淀粉样蛋白(APP)和β-淀粉样前体样蛋白2(APLP2)。本研究成功表达并纯化出BoPAG20蛋白,证实其具有良好的免疫原性,并进行了结构和功能预测,为该蛋白的结构和功能研究奠定基础。

妊娠母牛流产原因分析与防控

妊娠母牛流产,也即妊娠中断,一般指母牛妊娠过程中受到各种因素影响致使胎儿或胚胎同母体间的生理关系被破坏,进一步导致胎儿或胚胎的一系列生理变化,胎儿直接死亡或活胎流出母体,妊娠由此中止。导致母牛流产的原因不拘一格,就这些原因加以分析,并以此为基础探寻针对性的防控对策是势在必行之举,本文主要就此展开探究,以期尽可能地减少妊娠母牛流产问题,提高妊娠母牛的生产率。

妊娠母牛饲养管理中应注意的重点和难点问题试析

长期以来,为节约成本,坪地彝族乡的肉牛养殖主体多采用自繁自养的模式。然而,由于妊娠母牛饲养管理的特殊性,以及部分养殖主体饲养管理能力薄弱,导致实际的饲养管理中存在较多的问题,影响了养殖效益。基于此,在概括介绍妊娠母牛饲养管理的基础上,归纳总结出饲养管理方面的重点和难点问题,并提出科学的饲养管理建议,为养殖主体提升饲养管理能力与效果提供参考。

妊娠母牛流产原因分析与防控

母牛在妊娠期间流产是一种常见现象,不仅威胁母牛的健康,还会对养殖业造成严重的经济损失,甚至可能反映出更严重的健康和管理问题。流产的原因多种多样,在实际养殖过程中,需对妊娠母牛流产的原因进行详细分析,并采取有效的防控措施,以提高兽医公共卫生水平,优化养殖管理策略。

营养补饲对放牧条件下妊娠牛体况、血清营养代谢指标、免疫指标及抗氧化能力的影响

选用放牧饲养条件下产前3个月、平均体质量为(583±22.5)kg的健康西门塔尔妊娠母牛12头,按照体质量相近原则随机分为2组,分别为放牧组(草场自然放牧采食)和补饲组(放牧+补饲精料),每组6头牛。预试期8 d,正试期60 d。结果显示,与放牧组相比,补饲组妊娠牛平均日增重(ADG)和体况评分(P<0.05)显著提高。试验结束后,与放牧组相比,补饲组血清总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著高于放牧组(P<0.05),且丙二醛(MDA)含量显著低于放牧组(P<0.05)。与放牧组相比,补饲组试验牛血清中IL-2、IgA及IgG含量有升高趋势,但IL-1β、IL-4和IgM含量无显著性差异(P>0.05)。补饲组血清总蛋白(TP)、尿素氮(BUN)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量均显著高于放牧组(P<0.05)。结果表明,补饲精料可显著改善放牧饲养条件下妊娠牛的体况和营养代谢状况,并对其抗氧化和免疫功能的提高具有促进作用。

妊娠母牛流产原因分析与防控

本文分析了母牛流产的原因、临床症状,提出了预防措施,并从原因分析、对症治疗、加强饲养管理方面阐述了治疗措施,以期为养殖户提供参考。

母牛早期妊娠诊断技术研究进展

简单、准确的早期妊娠诊断,是减少空怀,提升母畜繁殖力、提高养殖场经济效益的重要手段。直肠触诊、B超检查、孕酮检测等传统妊娠诊断方法,虽然为养殖生产提供了重要技术支撑,但还未实现母牛配后最早检测,部分养殖场还难以满足较高的技术要求或实验室条件。胚胎滋养层细胞分泌的妊娠相关蛋白(PAGs)是奶牛妊娠过程中的重要蛋白,其血液含量变化规律为妊娠诊断方法研发提供了新思路。本文简要概述了现有妊娠诊断方法,详细论述PAGs诊断方法发展历程,展望未来妊娠诊断技术发展方向,使其在“早”、“准”、“简便性”上取得重要进展,并为相关研究提供了重要参考。

牛妊娠相关糖蛋白18重组载体构建、表达条件优化和生物信息学分析

为了制备牛妊娠相关糖蛋白18(boPAG18),并预测其理化性质和功能,本试验优化密码子并合成boPAG 18基因,构建pET30a-boPAG18重组质粒。以聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定的蛋白质表达量为指标,优化装液量、诱导剂浓度、诱导时间和诱导温度条件,采用亲和层析法纯化boPAG18,SDS-PAGE和免疫印迹法鉴定。预测boPAG18的疏水性、信号肽、修饰位点、结构和蛋白相互作用。结果显示,经双酶切鉴定,pET30a-boPAG18重组质粒构建成功,boPAG 18基因1143 bp,表达蛋白约38 kDa。确定最佳表达条件为在OD 600 nm值为0.6,装液量为40 mL,IPTG终浓度为0.2 g/L,37℃诱导4 h。纯化的boPAG18纯度高达98%,浓度为2.63 mg/mL。该蛋白分子式为C_(1923)H_(3007)N_(519)O_(541)S_(17),分子质量为42.6 ku,等电点为9.31,亲水性平均值为-0.041,为两性蛋白,蛋白质不稳定指数为42.41,在水中不稳定;脂肪系数为88.43,有381个氨基酸;消光系数为47370 mol-1·cm-1,半衰期为30 h。boPAG18前15个氨基酸为信号肽,无跨膜区域;有糖基化修饰位点57个,磷酸化修饰位点68个,B细胞抗原表位13个,二级结构中α-螺旋占比19.42%、β-转角占比5.77%、无规则卷曲占比44.88%、延伸链占比29.92%;有7个相互作用蛋白,可能参与了母体在妊娠期的泌乳、抗菌和神经保护等调节功能。本试验为深入研究boPAG18的结构和功能提供了数据支持。

妊娠母牛产死胎的病因与诊治

妊娠母牛产死胎又被称为妊娠中断,是在不同原因作用下造成的胎儿或胚胎与母体之间的生理关系出现异常,并且胎儿或胚胎出现不同生理变化,排除活的胎儿、死胎或被机体吸收的一种繁殖障碍性疾病,对牛养殖效益和繁育工作的开展具有不利影响,在之后的发展过程中需要多加注意,尽可能地减少死胎及母牛妊娠流产等现象。

牛病毒性腹泻的诊断方法及防控

牛病毒性腹泻是牛较为高发的一种传染病,也被称为牛病毒性腹泻-黏膜病。该病主要以白细胞减少、黏膜糜烂、腹泻、发烧等为主要临床表现,不仅死亡率较高,而且会对病牛生长性能造成严重影响。妊娠母牛在感染牛病毒性腹泻后还会出现产畸形胎、滑胎、流产现象。

六要点促牛保膘与催肥

一、供给充足温水冷水容易刺激牛的肠胃,引发胃肠疾病,并可能造成妊娠母牛流产。另外,冷水还会消耗牛较多热能,浪费饲料。二、注意保温昼夜温差大时,要多垫、勤换栏草,保持牛栏干燥,严防湿栏,以利保温。牛舍内的温度应保持在8~20℃。

牛流产的传染性病因及防控措施

牛流产是牛群中常见的疾病,其传染性病因主要包括病毒、细菌和寄生虫等。牛流产对养殖业影响巨大,不仅直接减少了牛群的繁殖力和生产力,还可能引发其他传染病的暴发。该病传播范围广、发病率和致死率较高,常导致妊娠母牛流产或死胎,严重时甚至损害母牛的生殖机能,进而影响后续的正常生产性能,给养殖场的经济效益和生产安全带来严重威胁。为了有效控制牛流产的传播,养殖户和相关机构需要采取一系列防控措施,包括加强对牛群的健康监测、做好疫苗接种和消毒工作、科学合理地管理牛群环境等。只有全面加强牛流产的防控工作,才能有效遏制病原的传播,保障牛群的健康和养殖业的持续发展。

繁殖母牛分阶段饲养技术

繁殖母牛根据生理阶段主要可以分为空怀母牛、泌乳母牛、妊娠母牛,养殖人员要根据繁殖母牛不同生理阶段采取与之相应的饲养管理举措,充分满足繁殖母牛营养需求、生理需求,进而更好地促进繁殖母牛生长繁育。因此在当前背景下对繁殖母牛分阶段饲养技术展开探讨,具有非常重要的现实意义。

母牛精细化饲养管理技术要点

根据母牛不同阶段的生理特点和营养需要,可分为育成母牛、空怀母牛、妊娠母牛、哺乳母牛等,进行分群分段饲养管理,配制和饲喂适宜营养水平的日粮,降低母牛饲养成本,既使母牛保持适度的膘情、保证胎儿正常发育,又使母牛能正常产犊和哺乳。

母牛肥胖综合征的发生与防控

母牛肥胖综合征也被称为牛脂肪肝病或牛妊娠毒血症,该病主要以母牛分娩前后酮血症、昏迷、心率加快、衰弱、食欲废绝等为临床表现,具有较高的发病率和致死率。笔者分析了母牛肥胖综合征的致病原因和发病机制,深入探讨了母牛肥胖综合征的防控措施及治疗方法,以期为广大母牛养殖人员提供参考。

牛妊娠相关糖蛋白1(bPAG1)的真核表达及纯化

[目的]本研究旨在构建PCDNA3.1(-)-bPAG1重组表达载体,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞细胞中转染表达。[方法]通过基因优化和PCR法扩增得到bPAG1的全基因序列,经T4连接酶将载体PCDNA3.1(-)与酶切bPAG1片段连接,构建PCDNA3.1(-)-bPAG1重组载体后转染到CHO细胞,经SDS-PAGE和Western Blot检测重组牛妊娠相关糖蛋白1(rbPAG1)的表达效果。[结果]PCR扩增得到1218 bp的bPAG1基因片段,构建的重组质粒PCDNA3.1(-)-bPAG1经双酶切获得约5400和1218 bp的2条片段,与预期相符;对重组载体测序,与优化后的基因序列完全一致;SDS-PAGE和Western Blot鉴定显示,获得相对分子质量约为62 kDa的bPAG1重组蛋白,通过Ni柱亲和层析纯化后,rbPAG1纯度可达88%。[结论]本研究为bPAG抗体的制备和奶牛早孕诊断技术的研发奠定了基础。

牛妊娠相关糖蛋白9(bPAG9)的真核表达及纯化

【目的】构建proEM-bPAG9重组表达载体,并在HEK293细胞中转染表达。为进一步抗体的制备和奶牛早孕诊断技术的研究奠定基础。【方法】通过基因优化和PCR法扩增得到bPAG9全基因序列,经双酶切法将bPAG9基因插入到表达载体proEM中,构建proEM-bPAG9重组载体后转到DH5α感受态细胞中,重组质粒转染至哺乳动物细胞HEK293中进行瞬时表达,再通过亲和层析纯化bPAG9重组蛋白(rbPAG9),经SDS-PAGE和Western Blot检测rbPAG的表达效果。【结果】通过全基因合成法得到1 182 bp的bPAG9基因片段,构建的重组质粒proEM-bPAG9经双酶切获得约4 369 bp和1 176 bp的两条片段,与预期值相符;对重组载体测序,与优化后的基因序列完全一致,氨基酸未发生突变;SDS-PAGE和Western Blot鉴定显示,获得相对分子质量约为68 kDa的bPAG9重组蛋白,通过Ni2+亲和层析纯化后,rbPAG9纯度可达90%。【结论】通过基因优化及真核表达获得分子质量为68 kDa的rbPAG9重组蛋白。