妊娠相关性疟疾及其研究进展

恶性疟疾是对人类健康危害最为严重的传染病之一。生活在疟疾流行区的人随着年龄的增长和感染次数的增加会逐渐获得保护性免疫即临床免疫。然而,孕妇尤其是初孕妇女在妊娠过程中感染恶性疟原虫后往往呈现急性感染症状,甚至危及孕妇和胎儿的生命。妊娠相关性疟疾(pregnancy-associated malaria,PAM)主要是由于受恶性疟原虫感染的红细胞和单核细胞在胎盘绒毛间大量聚集引起的。大量的研究表明,黏附在子宫粘膜上的虫体表达一种具有特殊生物活性和抗原性的蛋白质(var2CSA)。Var2CSA可特异性地与子宫粘膜上的硫酸软骨素A(Chondroitin sulfateA,CSA)结合。此外,由于var2CSA的序列相对保守,机体在感染几次以后较容易产生交叉免疫保护反应。对PAM的研究是疟疾领域内的重要内容,目前在很多领域(病原学、分子致病机理、免疫学等)已经取得重要进展。本篇综述概括了近年来在PAM研究方面的进展,包括虫体表达的主要膜蛋白质的功能、相关的人体受体以及免疫学方面等内容。

妊娠期疟疾的症状、防治及产科处理

维和任务区疟疾发病率很高,孕妇是疟疾主要的成年高危人群,孕妇感染疟疾(包括感染和临床疾病)的风险比非妊娠妇女高,症状更严重,危及她们自身及其胎儿的健康,妊娠期疟疾的防治非常重要,可以说妊娠期疟疾(malaria in pregnancy,MIP)是击退疟疾战略的一个优先领域。笔者就其对母体和胎儿的影响,症状表现和防治及其产科处理等作详细介绍。

恶性疟原虫海南株var2csa基因DBL区蛋白的原核表达及功能分析

目的克隆、表达恶性疟原虫海南株变异抗原基因(var)家族之一var2csa基因的血型抗原结合基团(duffy anti-gen-binding ligand,DBL)4、DBL5、DBL6区,比较其与硫酸软骨素A(chondroitin sulfate A,CSA)黏附能力的差异。方法 PCR扩增恶性疟原虫海南株基因组DNA中3个目的片段,将扩增产物与pMD18-T克隆载体连接,经酶切、测序鉴定正确后克隆至表达载体pET-22b上,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白,并用组氨酸标签融合蛋白纯化柱(His GraciTrap)纯化,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹(Western blotting)检测目的蛋白。ELISA检测不同DBL区重组蛋白与CSA的结合情况。结果 PCR扩增获得目的片段分别为996、859和894bp,酶切及DNA测序结果均显示重组质粒构建成功,在大肠埃希菌BL21(DE3)中成功表达并纯化3个DBL区重组蛋白,DBL4区、DBL5区和DBL6区的相对分子质量分别为Mr 439800,Mr 34500,Mr 36000。West-ern blotting检测结果显示,目的蛋白具有反应原性。ELISA结果显示,不同蛋白浓度条件下DBL5区均明显比其他两个DBL区的吸光度(A405值)高(P<0.05),表明DBL5区与CSA的黏附能力较强。结论 var2csa基因3个DBL区重组蛋白表达成功,DBL5区与CSA的黏附能力较强。

275例妊娠合并疟疾的临床分析

目的分析275例妊娠合并疟疾患者的临床特征及临床治疗方案、效果。方法以275例妊娠合并疟疾患者为研究对象,分析患者的临床特征、统计不同妊娠分期下及不同产次下患者的发病率。同时,将本组275例患者随机分为观察组138例和对照组137例。对照组患者在常规治疗的基础上行奎宁注射液治疗,观察组患者在常规治疗的基础上行青蒿琥酯粉针治疗,评价2组患者的临床治疗效果。结果本组275例患者中,妊娠中期患者疟疾的发病率高于妊娠早期和妊娠晚期(P<0.05),初产妇患者疟疾的发病率高于产次为2次及以上产妇的发病率(P<0.05)。观察组患者临床治疗的总有效率为96.37%,对照组为95.62%,2组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。但治疗后2个月内,观察组患者的复燃率为6.52%,对照组为14.60%,2组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论本组275例非洲妊娠合并疟疾患者中,妊娠中期及初产妇的发病率较高,在临床治疗上青蒿琥酯较奎宁治愈率高、复燃率低,可作为首选治疗药物。

恶性疟原虫var基因相关研究新进展

本文通过对恶性疟原虫变异抗原基因var基因家族的相关变异机制,在7号染色体var基因区域(pfemp1)和抗药基因pfcrt的特定区域的相关研究报道,以及变异var基因与妊娠感染疟疾的相关致病机制进行综述。

CC型趋化因子与疟原虫感染关系的研究进展

疟疾是目前人类面临的严重危险性疾病，在疟原虫感染机体的过程中，会引起许多趋化因子水平的变化，趋化多种炎性细胞的募集浸润从而对疟原虫进行清除，同时在脑型疟疾、妊娠疟疾等重症疟疾中，趋化因子募集的炎性细胞也会进一步加重病理反应。CC型趋化因子是趋化因子中的一个亚家族，在疟原虫感染的过程中大量表达，参与疟原虫入侵所引发的相关炎性过程，其中CCL2、CCL3、CCL5、CCL7、CCL11、CCL20和CCL21趋化因子的生物学作用同疟原虫感染具有一定的相关性。

恶性疟原虫海南株var2csa基因的克隆、表达及免疫识别研究

目的克隆、表达恶性疟原虫海南株HN(2)var2csa基因DBL4、DBL5、DBL6区,通过ELISA方法比较其与硫酸软骨素A(CSA)的亲和能力差异,以及人体对恶性疟原虫海南株HN(1)、(2)VAR2CSA不同DBL区的免疫应答差异。方法根据DBL区序列设计3对引物,PCR扩增目的片段,并与pMD18-T克隆载体连接。经PCR、酶切、测序鉴定正确后克隆至表达载体pET-22b,通过转化、诱导、纯化表达重组蛋白质,SDS-PAGE和Western blot检测。通过ELISA方法进行重组蛋白质与CSA的粘附实验以及与患者血清的免疫识别实验。结果酶切及DNA测序结果均表明表达载体构建成功,表达并纯化3个DBL区重组蛋白质,分子量与预计大小相同,Western blott检测目的蛋白质具有免疫反应性,ELISA显示不同蛋白浓度条件下DBL5区均明显比其它两个DBL区有更高的OD405值,并且DBL5区被妊娠相关疟疾病人血清识别水平显著高。结论 var2csa基因3个DBL区重组蛋白质表达成功,DBL5区与CSA的粘附能力较强,人体对DBL5区的免疫应答反应可能在抗病免疫过程中起到关键作用。