分子对接法研究人血清白蛋白对妥布特罗的手性识别作用

利用Autodock4. 2系统地研究了β-肾上腺素药物妥布特罗单旋体与人血清白蛋白的分子识别作用;比较了S-型与R-型对映体蛋白结合性质的差异,为实施S-型与R-型妥布特罗药效和毒性行为的实验研究提供参考。

稳定同位素标记妥布特罗-D_9的合成

以自制的叔丁胺-D9为同位素标记前体,以邻氯苯乙酮为起始原料,溴化后,再与叔丁胺-D9经胺化、硼氢化钠还原后得到稳定同位素标记布特罗-D9。采用均匀设计对胺化步骤进行研究,实验数据通过多元回归分析,得出了优化的工艺条件:反应温度59℃,反应时间5 h,三氯甲烷为25 m L,n(溴代酮)∶n(叔丁胺-D9)=1∶2。目标产物结构经质谱(MS)、核磁(NMR)、高效液相色谱(HPLC)表征,产物纯度高于98.0%,同位素丰度高于97.5%(atom D),可作为食品安全领域检测用同位素内标试剂。

液相色谱-串联质谱法检测大鼠血浆盐酸妥布特罗含量及其贴剂药代动力学的研究

目的建立测定大鼠血浆中盐酸妥布特罗浓度的方法,并对盐酸妥布特罗贴剂药代动力学进行研究。方法采用液相色谱-串联质谱法进行检测,以克仑特罗为内标,安捷伦氨基C18分析柱为色谱柱,A(0.1%甲酸+100%水)及B(甲醇)为流动相进行色谱分离。色谱条件为0~2.5 min,70%A→40%A;2.5~2.6 min,40%A→70%A;2.6~5 min,70%A。采用电喷雾电离源和多反应监测的方式进行正电荷检测,用作定量分析的盐酸妥布特罗和克仑特罗的离子反应对m/z分别为228.2→154.0和277.1→203.0。结果盐酸妥布特罗在0.5~100 ng/m L范围内线性关系良好;最低检测限分别为0.5 ng/m L;盐酸妥布特罗样本的日内及日间精密度和准确度均符合相关生物样品分析的要求,且RSD<10%。盐酸妥布特罗大鼠血浆样品在室温放置7 h、经历3次冷冻-解冻循环及在-80℃中放置120 d等条件下均可保持稳定;该方法成功运用于盐酸妥布特罗贴剂的药代动力学研究。结论该方法具有检测快速且灵敏性好等特点,可对其人体临床相关药动学研究展开探讨。

毛细管电泳环糊精添加剂立体选择性差异的研究

对在毛细管区带电泳环糊精手性拆分体系中手性药物妥布特罗的分离机理进行了探讨。分别测定了α、β、γ环糊精和二甲基、三甲基、羟丙基β环糊精与药物对映体形成包结配合物的稳定常数以及手性拆分过程中的热力学函数的变化。

UPLC-MS/MS法测定动物源性食品中4个四环素类药物和10个β受体激动剂类药物残留

目的：建立同时测定动物源性食品中4个四环素类药物和10个β受体激动剂类药物残留的新型超高效液相色谱-串联质谱方法。方法：样品用三氯乙酸-乙腈提取并去除蛋白质,然后用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱（100 mm×2.1mm,1.7μm）分离,以0.05%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱（0～10.0 min,3.0%A→90.0%A;10.0～10.1 min,90.0%A→3.0%A;10.1～13.0 min,3.0%A）,将待测药物分为多个时间段进行MRM扫描,四环素采用外标法定量,β受体激动剂类药物采用内标法定量。结果：土霉素、金霉素、四环素及强力霉素在5.0～100.0 ng·mL^-1范围内呈良好的线性关系,相关系数（r）均大于0.990;检出限为2.0 ng·mL^-1,定量限为5.0 ng·mL^-1,10种β受体激动剂在1.0～50.0 ng·mL^-1范围内呈良好的线性关系,相关系数（r）均大于0.990;检出限为0.5 ng·mL^-1,定量限为1.0 ng·mL^-1。结论：本研究前处理方法简单快捷,质谱采用多时间段MRM扫描方法,灵敏度显著提高,能够高效、灵敏地同时检测动物源性食品中的四环素类和β受体激动剂类药物。

GC-MS法测定动物性食品中15种兴奋剂残留量

目的:建立GC-MS法测定动物性食品中15种兴奋剂残留量的新方法。方法:样品粉碎后经β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶水解用乙酸钠缓冲溶液提取,SLW固相萃取柱净化,N,O双(三甲基硅基)三氟乙酰胺+三甲基氯硅烷(BSTFA+TMCS,99+1)衍生化。采用选择离子监控模式(SIM)检测,GC/MS测定测定其含量。结果:15种β-兴奋剂不同水平的加标回收率范围为76.2%～101.4%,相对标准偏差为2.65%～9.53%。结论:本方法选择性和灵敏度高,实用性强。

氘代同位素内标液相色谱-串联质谱法测定猪肉、猪肝中8种β受体激动剂类药物残留

目的:建立猪肉、猪肝中8种β受体激动剂类药物残留的液相色谱-串联质谱测定方法。方法:样品先用酶水解后,加入沙丁胺醇-D3、克伦特罗-D9混合同位素内标溶液,采用C18和Oasis MCX小柱进行净化,弃去C18柱,用3%氨水甲醇溶液洗脱MCX小柱,收集洗脱液,氮气吹干,加0.1%甲酸水溶液-甲醇溶液(95+5)溶解残渣,以0.1%甲酸乙腈溶液和0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,LC/MS/MS测定,内标法定量。结果:在猪肝中8种β受体激动剂类药物浓度在0.25μg/kg～5.0μg/kg范围内呈良好线性关系,平均回收率在78.0%～110.0%之间,最低定量检出限为0.02μg/kg～0.3μg/kg。结论:本方法简便、灵敏、重现性好、干扰少、特异性好,能满足猪肉、猪肝中8种β受体激动剂类药物痕量残留的检测要求。