一株能产生聚乙烯醇降解酶的委内瑞拉链霉菌

以聚乙烯醇(PVA)为唯一碳源,从土壤中筛选到1株能产生胞外PVA降解酶的放线菌GY1.根据扩增出的该菌株的16SrDNA全序列在GenBank中的比较结果,结合生理生化实验、细胞化学成分及菌落形态分析,确定该菌为委内瑞拉链霉菌(Stretopmycesvenezuelae).GY1菌株以PVA为唯一碳源时,产生的PVA降解酶活性达到120UL-1,是以葡萄糖或可溶性淀粉为唯一碳源时的10倍.当在PVA培养基中添加1gL-1至3gL-1的葡萄糖时,该菌株细胞量和PVA降解酶总酶活随着葡萄糖添加量的增加而增加,最大细胞量是未添加葡萄糖时的2.4倍,最高总酶活是未添加葡萄糖时的2.6倍,而单位质量细胞产生PVA降解酶的能力提高不大.但当添加的葡萄糖浓度从3gL-1增至10gL-1时,总酶活随着细胞量的增加出现下降趋势,同时单位质量细胞产生PVA降解酶的能力也大大降低.在相同PVA聚合度下,高醇解度PVA比低醇解度PVA更有利于GY1菌株的生长及产生PVA降解酶.

委内瑞拉链霉菌中氯霉素生物合成基因的克隆

目的克隆委内瑞拉链霉菌(Streptomyces venezuelae)ISP5230中的氯霉素生物合成基因。方法以pabAB基因片段为探针,通过菌落杂交技术从该菌的基因文库中钓取相关基因。结果得到一7.5kbBamHIBamHI DNA片段,突变株的互补实验表明,该7.5kb DNA片段使氯霉素生物合成阻断变株CML-4恢复了氯霉素的生物合成。从野生菌株的染色体上删除该7.5 kb DNA片段中的一段3.5 kbNcoINcoI DNA片段后,野生菌株丧失了氯霉素的生物合成能力。结论该7.5 kb DNA片段含有氯霉素生物合成所需的基因。

委内瑞拉链霉菌Snea253杀线虫活性化合物的分离纯化与结构鉴定

为研究委内瑞拉链霉菌(Streptomyces venezuelae)Snea253发酵液中具有杀线虫活性的脂溶性化学成分,利用薄层层析、柱层析、高效液相色谱等技术对其活性成分进行分离与纯化,以南方根结线虫二龄幼虫为靶标进行活性跟踪,通过HRMS、~1H-NMR、^(13)C-NMR等现代波谱技术,鉴定其结构为邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,简称DBP)。进一步检测DBP对9种植物病原真菌和3种细菌的抑菌活性发现,该化合物对粉红聚端孢菌(Trichothecium roseum)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)也具有抑制作用。

委内瑞拉链霉菌秦岭变种属间接合转移系统的构建及透明颤菌血红蛋白的表达

【目的】构建委内瑞拉链霉菌秦岭变种属间接合转移系统及透明颤菌血红蛋白的表达。【方法】以链霉菌广泛使用的整合型质粒pSET152和复制型pHZ1358为出发质粒,通过供体大肠杆菌(Escherichia coli)ET12567(pUZ8002)进行属间接合转移委内瑞拉链霉菌秦岭变种。【结果】确定了该变种的最佳接合转移条件;通过SOE-PCR(Splicing by overlap extension PCR)技术构建含PermE和vhb结构基因融合片段的整合型表达载体pJD100,转化ET12567(pUZ8002)后属间接合转移委内瑞拉链霉菌秦岭变种。通过PCR和CO结合差光谱验证了vhb基因在委内瑞拉链霉菌秦岭变种中的整合表达。【结论】本文首次探索了委内瑞拉链霉菌秦岭变种接合转移系统,确定了委内瑞拉链霉菌秦岭变种的最佳接合转移条件,并采用基因工程手段使vhb基因在委内瑞拉链霉菌秦岭变种中获得表达。

瑞拉菌素产生菌的鉴定

自陕西秦岭太白山土壤中分离到 1株编号为S 5 12 0的放线菌。根据对其生物特征鉴定、生理生化特征分析 ,它与链霉菌属中委内瑞拉链霉菌最为相近 ,但菌种S 5 12 0对梨黑星病菌、苹果腐烂病菌等多种引起植物病害的病原真菌有拮抗和溶菌作用 ,故认为S 5 12 0是委内瑞拉链霉菌的一个新变种 ,定名为委内瑞拉链霉菌秦岭变种(Streptomycesvenezuelaevar .qinlingensis.n .Var)。

放线菌Snea253的鉴定及对大豆胞囊线虫的抑制作用

从土壤中分离筛选到一株具有杀线虫活性的放线菌菌株Snea253,该菌株对多种线虫有毒杀活性。通过形态学特征,生理生化特征及16S rDNA分析,初步鉴定为委内瑞拉链霉菌Streptomyces venezuelae。研究了Snea253菌株代谢物不同倍数稀释液对大豆胞囊线虫卵孵化及二龄幼虫活性的影响,结果表明:发酵原液对大豆胞囊线虫卵孵化的相对抑制率为88.73%;10倍稀释液浓度下,相对抑制率是70.49%,均与无菌水对照差异显著。处理24h后,发酵原液对二龄幼虫的校正死亡率是92.13%,各稀释浓度处理均与无菌水对照差异显著。

聚乙烯醇(PVA)降解菌的筛选、鉴定和降解特性研究

在有聚乙烯醇(PVA)污染的环境中分离到一株能降解PVA的放线菌。该菌能在以PVA为惟一碳源的无机盐培养基中生长。采用16S rDNA序列分析法,并结合常规生理生化鉴定方法对该菌进行鉴定。16S rDNA序列分析结果表明,该菌与委内瑞拉链霉菌(Streptomyces venezuelae)、砖红链霉菌(Streptomyces lateritius)和脱叶链霉菌(Streptomyces exfoliatus)有最高同源性,达到99%;通过进一步的菌株培养特征及生理生化鉴定表明该菌株与Strep- tomyces venezuelae最接近。因此,初步判定该菌株属于Streptomyces venezuelae,并将其命名为Streptomyces sp.PVA。

浅谈氯霉素类眼药剂药品的合理应用

氯霉素类药品主要用于治疗伤寒杆菌、痢疾杆菌、肺炎球菌、大肠杆菌、流感杆菌、布氏杆菌、炭疽杆菌、链球菌、李斯特菌等引起的感染,是由委内瑞拉链霉菌产生的抗生素,属抑菌性广谱抗生素。衣原体、钩端螺旋体、立克次体也对本品敏感。化学中文名称D-苏式-（-）--）N-{a-（羟基甲基）-B-羟基-对硝基苯乙基}-2.2-二氯乙酰胺,其抗菌活性与其含有的丙二醇有关系。少,

碳代谢基因gabT调控生防菌Snea253的γ-氨基丁酸代谢途径影响杀线虫活性

【背景】委内瑞拉链霉菌Snea253是本实验室前期获得的具有杀植物线虫活性的生防放线菌,通过生物信息学分析,γ-氨基丁酸转氨酶基因(gabT)是参与Snea253碳代谢的重要基因之一。【目的】明确gabT基因通过调控Snea253的γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyric acid,GABA)代谢通路,从而影响菌株的活性。【方法】以紫外诱变所得弱毒株(Snea253-R)为材料,以南方根结线虫为靶标,在弱毒株中过表达gabT基因,通过酶联免疫法(ELISA)和高效液相色谱法(HPLC)分别检测菌株中GABA和下游代谢产物琥珀酸的含量及杀线虫活性,同时检测在不同碳源培养条件下野生型菌株gabT基因表达水平、产物含量和杀线虫活性。【结果】过表达菌株R-p IB139的gabT基因上调表达,GABA含量降低,琥珀酸含量升高,杀线虫活性提高了39%;在8种不同碳源培养条件下,gabT基因在野生株中相对表达量较高的培养基碳源是可溶性淀粉和玉米淀粉,其发酵液中GABA含量较低,发酵液中下游代谢产物增多,杀线虫活性较高。【结论】通过改变gabT基因的表达,明确GABA支路在调控Snea253代谢以提高杀线虫的过程中发挥重要作用。