亲水亲油平衡固相萃取小柱结合气相色谱-串联质谱法测定大果木姜子药材中禁用农药残留

目的建立检测大果木姜子药材中禁用农药残留量的亲水亲油平衡(HLB)固相萃取小柱结合气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法。方法样品经正己烷-乙腈-饱和氯化钠水溶液三相分配除去部分杂质,农药组分转移至乙腈提取液中,以加强型HLB固相萃取小柱净化,采用GC-MS/MS多反应监测模式(MRM)进行测定,以基质内标法定量。结果大果木姜子药材中禁用农药残留物在各自质量浓度范围内与待测成分峰面积/内标峰面积线性关系良好(R2>0.99,n=6);在3个添加水平下,平均回收率为61.80%~125.53%,RSD为1.90%~14.77%(n=6)。15批大果木姜子药材中均未检出禁用农药残留。结论该方法操作简便、准确性和重复性好,可用于大果木姜子药材中禁用农药残留量的测定。

毛叶和红叶木姜子果实性状特征及显微特征的鉴别

目的:鉴别毛叶木姜子和红叶木姜子果实的性状特征和显微特征。方法:采用性状鉴定方法比较研究毛叶木姜子和红叶木姜子果实的外观形态特征,采用切片、粉末制片等方法比较毛叶木姜子和红叶木姜子果实的横切面及粉末显微特性。结果:毛叶木姜子和红叶木姜子果实性状特征相似,外表面、果皮和子叶等存在差异;毛叶木姜子中果皮和内果皮细胞周围可见大量的草酸钙方晶,表面观内果皮细胞之间界限不清晰,层纹不明显,有的可见孔沟;红叶木姜子外果皮含有红棕色物质,表面观内果皮细胞垂周壁波状弯曲,层纹明显,油细胞含有黄色或棕黄色分泌物。结论:毛叶木姜子和红叶木姜子果实的性状特征和显微鉴别特征能为木姜子的分类和鉴别提供参考依据。

大果木姜子果实倍半萜类成分及神经保护作用研究

为探究大果木姜子的倍半萜类成分及神经保护作用,采用硅胶柱色谱、反相柱色谱和半制备高效液相等色谱技术对大果木姜子果实乙醇提取物的进行分离纯化,通过理化性质与核磁共振波谱数据并结合参考文献鉴定化合物的结构。从大果木姜子果实提取物中分离鉴定了25个倍半萜类化合物:camganoid B(1)、4,10-diepi-guaiol(2)、愈创醇(3)、(+)-异愈创木醇(4)、magnodelavin C(5)、(4S,5R,7S)-4,11-dihydroxy-guaia-1(2),9(10)-dien(6)、(1S,4S,5S,7R)-4,13-dihydroxyguaia-10-ene(7)、pancherione(8)、lancilimbnoid D(9)、lancilimbnoid E(10)、山姜烯酮(11)、litsemene B(12)、stachytriol(13)、α-桉叶醇(14)、β-桉叶醇(15)、6α-hydroxy-4(15)-eudesmen-1-one(16)、ent-4(15)-eudesmen-1α,11-diol(17)、7-epi-4-eudesmene-lβ,11-diol(18)、rosifoliol(19)、6,8-cycloeudesm-4(15)-en-1-ol(20)、1-oxo-5α,7αH-eudesma-3-en-14-al(21)、假虎刺酮(22)、anhuienosol(23)、4-eudesmene-lβ,11-diol(24)、α-香附酮(25)。其中,化合物2~7、9~25为首次从大果木姜子中分离到。活性筛选结果表明,化合物3、10、12、19在30μmol/L下对N-甲基-D-天冬氨酸损伤的PC12细胞具有保护作用。该研究结果丰富了大果木姜子化学成分库,为进一步研究与开发利用大果木姜子提供了一定的科学依据。

毛叶木姜子栽培技术

毛叶木姜子(Litsea mollis Hemsl),也称为山胡椒、大木姜、香桂子或山姜子,是樟科木姜子属的一种落叶灌木或小乔木。本文详细探讨了毛叶木姜子的形态特征、育苗方法、造林技术、日常管理及病虫害防治策略,旨在为种植者提供科学指导,以促进毛叶木姜子的产业化发展。

大果木姜子油的提取工艺优化及其对心肌缺血改善作用的研究

目的采用响应面法优化大果木姜子油的提取工艺,并探讨不同来源大果木姜子油对心肌缺血的改善作用。方法采用单因素实验法考察提取溶剂、液料比、物料粒径、提取温度和提取时间5个单因素对大果木姜子油得率的影响,并在此基础上运用响应面法就液料比、物料粒径和提取温度3个因素进行大果木姜子油提取工艺的优化。建立大鼠心肌缺血模型,采用免疫印迹法检测大鼠心肌组织中兔抗人单克隆抗体(Bcl-2 assaciated xprotein,Bax)及B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白的表达、采用聚合酶链式反应检测心肌组织中碱性成纤维生长因子(fibroblast growth factor 2,FGF-2)的表达、采用免疫组化法检测心肌组织中纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)及组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogenactivator,TPA)的表达,并采用苏木精-伊红染色法观察心肌组织病理变化。结果经响应面法分析大果木姜子油的最佳提取工艺为:液料比7:1(mL:g),粒径过80目,提取温度90℃,得率为51.23%。药理实验表明:与空白组相比,模型组中Bcl-2、FGF-2和TPA的水平下降,而Bax和PAI-1水平上升,经大果木姜子油治疗后Bax、PAI-1的水平下降,而FGF-2、TPA和Bcl-2水平上升。结论响应面法优化后的大果木姜子油的提取工艺条件稳定、可行,且大果木姜子油具有改善心肌缺血的作用。本研究为提取和应用大果木姜子油提供了坚实的理论基础。

大果木姜子油调控miR-328基因抗心律失常H9c2细胞的机制研究

目的:探讨大果木姜子油通过调控miR-328基因抗心律失常H9c2细胞的可能机制。方法:慢病毒转染构建miR-328过表达H9c2细胞株,再运用生物机能实验系统构建H9c2细胞和miR-328过表达H9c2细胞心律失常模型。将H9c2细胞分为正常对照组、模型组、大果木姜子油组、miR-328过表达组和miR-328过表达+大果木姜子油组。根据分组条件培养结束后,qPCR检测H9c2细胞中miR-328相对表达量;ELISA检测炎性因子IL-1β、IL-6、TGF-β含量;比色法检测SOD活性和MDA浓度;DCFH荧光探针检测ROS水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot检测H9c2细胞L型钙通道相关蛋白表达。结果:成功构建H9c2细胞和miR-328过表达H9c2细胞心律失常模型。与正常对照组比较,模型组和miR-328过表达组细胞TGF-β、SOD活性及CaM、CaMKⅡ、p-CaMKⅡ蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、miR-328及CaV1.2蛋白表达和IL-1β、IL-6、MDA、ROS水平显著升高(P<0.01)。经大果木姜子油干预后,心律失常模型细胞形态改善,上述指标均被显著逆转(P<0.01)。结论:大果木姜子油可改善心律失常H9c2细胞,其作用机制可能与调控miR-328基因降低炎症因子水平、调节氧化应激、抑制细胞凋亡及调节L型钙通道相关蛋白表达有关。

不同提取方法对大果木姜子挥发油成分及其抑菌活性的影响

比较超声提取(UE)、微波提取(ME)、索氏提取(XZ)、水蒸气蒸馏(SD)提取的大果木姜子挥发油的化学成分,并考察其对大肠杆菌(Eco)、金黄色葡萄球菌(Sta)、枯草芽孢杆菌(Bs)、铜绿假单胞菌(Pak)的抑菌能力。结果表明:SD、UE、ME、XZ提取的大果木姜子挥发油分别鉴定出69、65、72、60种成分,相对含量分别占其总挥发油的91.382%、88.323%、85.709%、89.864%。4种挥发油对Eco的最小抑菌浓度(MIC)为SD<XZ=UE=ME,对Sta的MIC为SD<XZ=UE<ME,对Bs的MIC为XZ=UE<ME<SD,对Pak的MIC为ME<XZ=UE<SD;4种挥发油对4种供试菌的抑菌效果均高于甲醇。相关性分析表明,醇类和烃类的含量与Bs的抑制作用呈正相关。

大果木姜子LlTPS11基因克隆及生物信息学分析

大果木姜子为贵州十大苗药之一,因其挥发油具有独特的香味及药用价值,被广泛应用于食品、药品行业。萜类化合物是植物中重要的次级代谢产物,可影响果实风味和花香,并间接起预防虫害的作用。大果木姜子挥发油主要为萜类物质,萜类合酶(TPS)是萜类物质的合成途径中关键基因。本文以大果木姜子为研究对象,克隆出LlTPS11的全长编码序列。利用生物信息学分析软件对LlTPS11氨基酸序列进行分析,结果表明,LlTPS11编码区序列长1692 bp,编码563个氨基酸,分子质量为65.41 kDa,LlTPS11属不稳定亲水性的酸性蛋白。不具有跨膜结构域及信号肽。该蛋白二级结构中主要含有α-螺旋67.32%,结果与三级结构预测结果一致。LlTPS11具有植物萜烯环化酶催化活性位点,与沉水樟萜类合酶CmTPS具有较高同源性。综上所述,本文对大果木姜子萜类合酶基因进行初步研究,为进一步研究萜类物质合成代谢途径及樟科植物中萜类物质提供理论依据。

广西弄岗五桠果叶木姜子群落结构特征与种群动态

1980年和2001年分别对弄岗国家级自然保护区的五桠果叶木姜子(LitseadilleniifoliaP.Y.PaietP.H.Huang)群落进行了较为详细的调查和分析。结果表明,五桠果叶木姜子群落层次结构完整,植物种类丰富。2次调查结果显示,在600m2的样方内共有维管植物50科86属102种,五桠果叶木姜子的重要值分别达到141.6和108.4,在主林层中的优势非常明显。种群大小级结构及其分布格局的分析结果表明,五桠果叶木姜子种群属介于稳定型和衰退型种群之间的成熟型种群,整个种群呈集群分布。在分析造成五桠果叶木姜子濒危原因的基础上,提出拯救和扩大其种群的基本途径。

大果木姜子油(CV-3)对心房颤动大鼠心房组织中炎症因子及氧化因子表达的影响研究

通过使用大果木姜子油(CV-3)干预心房颤动(atrial fibrillation,AF)大鼠心房组织中炎症因子、氧化因子的表达,探讨CV-3对AF的治疗作用。选取SD大鼠,将其随机分为阴性对照组:生理盐水0.3 mL/kg灌胃;心房颤动组:生理盐水0.3 mL/kg灌胃;心房颤动+CV-3组:大果木姜子油0.3 mL/kg灌胃;心房颤动+维拉帕米组:将维拉帕米片研磨成粉末,配置成浓度为120 mg/10 mL的液体,0.3 mL/kg灌胃,每天1次,连续给药4周后检测各组大鼠心房组织中炎症因子及氧化因子的表达水平。结果显示,与阴性对照组相比,其余三组大鼠的IL-1、IL-6、TGF-β、MDA表达水平均升高(P<0.01),心房颤动组、心房颤动+维拉帕米组大鼠的SOD活力下降(P<0.01);与心房颤动组相比,CV-3干预后IL-1、IL-6、TGF-β的表达水平下降(P<0.01);与心房颤动组相比,心房颤动+维拉帕米组大鼠的MDA表达水平下降(P<0.05),心房颤动+维拉帕米组大鼠的SOD活力上调(P<0.05)。

基于网络药理学及分子对接技术探讨大果木姜子挥发油抑菌作用机制

目的:旨在以网络药理学方法和分子对接技术为基础,对大果木姜子挥发油抑菌的主要有效成分和潜在作用机制进行探究。方法:通过TCMSP、CNKI等数据库检索大果木姜子挥发油的化学成分,并预测大果木姜子挥发油和抑菌有关靶点;构建“有效成分-目标靶点”网络;共有靶点被用于GO和KEGG富集分析以及分子对接,预测有效成分与重点目标靶点的结合度。结果:获得大果木姜子挥发油化学成分9个、相关靶点151个,与抑菌的共有靶点54个,参与癌症的途径、IL-17信号通路等信号通路;分子对接结果显示核心成分7,8-环氧-α-紫罗兰酮与PTGS2、Thymol与ALB有较高的结合活性。结论:大果木姜子挥发油可能通过7,8-环氧-α-紫罗兰酮、百里香酚等成分与靶点结合,参与癌症、炎症等相关信号通路起到抑菌作用。

大萼木姜子挥发油化学成分研究

采用GC-MS联用技术分析了大萼木姜子Litsea baviensis Lec.挥发油的化学成分及相对含量,并与同属植物杨叶木姜子Litsea populifolia(Hemsl.)Gamble、山鸡椒Litsea cubeba(Lour.) Pers.的挥发油化学成分进行了对比。

苗药大果木姜子挥发油成分变化及其地理分布

采用ArcGIS地理信息系统软件的空间分析方法和SPSS13.0统计软件的统计分析方法,分析了大果木姜子化学型及其地理分布。结果显示:(1)大果木姜子果实挥发油的化学组分主要存在3种化学型:HS型、PJ型和LS型,其中PJ型和LS型的化学成分构成较为相近。(2)HS型主要分布在苗岭的西南部、红水河流域800 m以下的区域,以1,8-桉叶素和α-松油醇的百分含量高于60%(1,8-桉叶素大于55%)、α-水芹烯和D-柠檬烯的百分含量低于10%为特征;PJ型主要分布在南北盘江流域、乌蒙山东南部800 m左右的区域,以1,8-桉叶素和α-松油醇的百分含量低于50%(1,8-桉叶素小于40%)、α-水芹烯和D-柠檬烯的百分含量介于(10%—20%)为特征;LS型主要分布在岑王老山900 m以上的区域,1,8-桉叶素小于30%。(3)分布区内的气候在一定程度上影响了大果木姜子果实挥发油的形成与变化,太阳辐射和日照时数是其主要影响因素之一。

柠檬醛分子蒸馏纯化新工艺与毛叶木姜子果油成分分析

利用分子蒸馏技术对毛叶木姜子果挥发油中所含柠檬醛进行了分离纯化工艺的研究。结果所得到的柠檬醛的纯度达到了 95 % ,产率为 5 3% (柠檬醛 /毛叶木姜子果油 ) ,柠檬醛的损失率仅为 15 %。从而表明 。

大果木姜子油抗实验性心律失常作用

目的：观察大果木姜子油（ＣＶ３）抗实验性心律失常作用。方法：采用氯仿、肾上腺素（Ａｄｒ）、毒毛旋花子甙Ｋ（毒Ｋ）、氯化钡（ＢａＣｌ２）建立小鼠、家兔、豚鼠、大鼠心律失常模型，随机分对照组、ＣＶ３组、慢心律组（ＭＸＬ），观察各组对抗心律失常作用。结果：ＣＶ３组能显著降低氯仿致小鼠室颤发生率；推迟及缩短Ａｄｒ致家兔心律失常发生时间及持续时间，提高毒Ｋ致豚鼠心律失常剂量；降低ＢａＣｌ２致大鼠各类心律失常发生率及各类型评分，减慢心率。结论：ＣＶ３具有对抗实验性心律失常作用。作用机理与ＣＶ３阻止心肌细胞膜Ｎａ＋，Ｃａ２＋内流、降低其自律性。

主成分分析法在毛叶木姜子优树选择中的应用

目的:建立用主成分分析法选择毛叶木姜子优良单株的方法,确定其优树选择标准,为毛叶木姜子早期实生选优、良种选育提供理论依据。方法:以重庆万州实生起源的毛叶木姜子人工林为研究对象,采用5株优势木对比法初选72株优树,观测其生长性状和经济性状,并对其进行变异分析、主成分分析。结果:经变异分析可知,各性状间存在丰富的变异。经主成分分析得知,把树高、冠幅面积、东西冠幅、南北冠幅、胸径这5个性状作为其选优的标准;选出4株综合经济性状表现优良的单株,即Y12-4、Y12、Y11-3、Y10。结论:毛叶木姜子丰富的变异性为优树选择提供了前提;研究结果与植株的实际表型相符合,表明采用的方法具有一定的科学性和可行性。

川西地区毛叶木姜子的表型多样性研究

[目的]通过对川西地区毛叶木姜子的表型性状调查,研究其表型变异程度和变异规律,探讨毛叶木姜子的表型特征,为川西地区毛叶木姜子种质资源的保存和利用、良种选育提供科学依据。[方法]在川西地区随机选取具有代表性的56株毛叶木姜子实生单株,对果实、叶片、种子等13个表型性状进行系统比较分析,采用变异系数、方差分析、相关分析、主成分分析等方法,探讨川西地区毛叶木姜子表型多样性。[结果](1)从变异系数和方差分析结果来看,试验区内毛叶木姜子表型性状间存在丰富的变异,且变异幅度大。其中,果实百粒质量的变异系数最大,为15.93%;果形指数的变异系数最小,为2.31%。(2)在相关分析中,各性状间不同程度地存在着极显著或显著的差异。(3)主成分分析显示,果实纵径、果实横径、果实百粒质量、种子纵径、种子横径、种子百粒质量是影响毛叶木姜子表型多样性的主导因子。[结论]毛叶木姜子表型性状变异丰富、变异程度各不相同;表型性状间具有协调发育的特点;果实纵径等6个性状是影响其表型多样性的主导因子。

大果木姜子油对麻醉猫血流动力学的影响

给麻醉开胸猫大果木姜子油０．２ｍｌ·ｋｇ￣（－１）十二指肠给药后，ＳＡＰ及ＤＡＰ缓慢下降，至药后９０ｍｉｎ下降１５．２％及１４．２％，同时，ＨＲ减慢，ＣＯ减少，ＬＶＰ，ＬＶＥＤＰ，ｄｐ／ｄｔ＿（ｍａｘ）及Ｖ＿（ｍａｘ）显著降低，ＬＶＰ－（ｄｐ／ｄｔ）Ｐ￣（－１）环缩小。消心痛与其有类似效应。

毛叶木姜子的组织培养与快速繁殖

为尽快建立毛叶木姜子的快繁体系,以毛叶木姜子成年优株当年生萌条的带芽茎段为外植体,进行了毛叶木姜子组培及快繁技术研究。结果表明:春季(3月)树干基部的半木质化萌条是毛叶木姜子组培的最适宜外植体;1/2MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L为启动培养的最佳培养基,组培苗萌芽率达到80%以上,芽体青绿、长势好;改良MS+6-BA 3.0mg/L+IBA 0.2mg/L为毛叶木姜子组织培养的最适增殖培养基,其有效月增殖倍数为3.8,平均芽长3.66cm;毛叶木姜子组织培养的最适给光条件为:自然光培养、光照强度3500Lux,有效月增殖倍数可达4.8;MS+IBA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖20g/L+活性炭0.05g/L为其最佳生根培养基。其组培苗移栽至泥炭土︰黄心土(3︰1)的育苗基质中,30d后,成活率超过90%。

大果木姜子油对猫急性实验性心肌缺血的保护作用

大果木姜子挥发油（ＣＶ－３）对离体内脏平滑肌和心血管平滑肌有松驰作用。采用结扎猫冠状动脉左前降支致急性实验性心肌缺血，以观察其抗心肌缺血作用。ＣＶ－３０．２ｍｌ／ｋｇ十二指肠给药后，心外膜电图ＳＴ段偏移总和∑－ＳＴ及偏移总导联数（Ｎ－ＳＴ）较生理盐水（ＮＳ）ｔａ显著减少。氯化硝基四氨唑蓝（Ｎ－ＢＴ）染色显示心肌梗塞范围较Ｎ８组缩小（Ｐ＜０．０１），并能降低梗塞后血清乳酸脱氢酶水平，表明ＣＶ－３对猫急性心肌缺血具有保护作用。