6-姜酚肟裂解规律的质谱研究

用干姜提取的姜酚合成了6-姜酚肟,采用气质联用仪测定了所获结晶姜酚肟的色谱与质谱行为,并根据6-姜酚肟的电离质谱图分析了其开裂过程.分析结果表明6-姜酚肟没有C4与C5间的热解脱水反应,肟基具有α-开裂、麦氏重排等开裂特点,反式6-姜酚肟具有数量多、峰强度高的奇数碎片离子峰.这些结果表明,所获得的结晶为6-姜酚肟的差向异构体的混合物,6-姜酚肟比反应物6-姜酚更为稳定.

姜酚和姜酚肟对K562细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究生姜活性成分姜酚及其衍生物姜酚肟对慢性粒细胞系K562细胞的增殖活性、细胞周期及凋亡的影响。方法:采用CCK-8法检测姜酚和姜酚肟对K562细胞增殖活性的影响,PI单染检测其对K562细胞周期的影响,Annexin V-PI双染检测早期细胞凋亡,Hochest 33258染色观察细胞形态学的变化。结果:(1)姜酚作用于K562细胞48、72 h后,显著抑制K562细胞增殖,48 h的IC50值为15.75μg/mL,且具有时间及剂量依赖性。姜酚肟的抑制作用亦有时间及剂量依赖性,但较姜酚抑制作用弱。(2)姜酚15μg/mL组细胞周期阻滞于S期,姜酚肟作用组细胞周期与对照组比较无明显差异(P>0.05)。(3)姜酚和姜酚肟作用48 h后出现早期凋亡群,姜酚各浓度组间的早期凋亡率差异显著(P>0.05),随着药物浓度的增加凋亡率升高。(4)荧光显微间观察出现少量的细胞胞核固缩,核边集,出现凋亡小体。结论:姜酚和姜酚肟对K562细胞有显著的抑制作用,姜酚较姜酚肟抑制作用强,姜酚的抑制机制可能与影响细胞周期及诱导细胞凋亡有关,姜酚肟的抑制机制可能与诱导细胞凋亡有关。

以6-姜酚肟为内标测定生姜及其制品中6-姜酚的含量

建立了一种以6-姜酚肟代替6-姜酚为标样,采用高效液相色谱法,精确测定生姜及其制品中6-姜酚的方法。采用的色谱柱为Diamonsil C_(18)柱,流动相为乙腈-水系统梯度洗脱,流速1mL/min,检测波长280nm。结果表明:6-姜酚在10.55～2700βg/mL、6-姜酚肟在10.43～2670μg/mL时峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9983和0.9998。6-姜酚的检测限为2.12μg/mL,6-姜酚肟的检测限为2.09μg/mL。6-姜酚对6-姜酚肟的相对校正因子为1.285,相对保留时间为1.728。6-姜酚肟的加标回收率为96.3%～102.2%,相对标准偏差<2.4%。用内标法和外标法测得的结果无显著差异,测得鲜姜、干姜和姜酒中6-姜酚含量分别为1.86、3.04、0.115 mg/g。用6-姜酚肟做内标测定6-姜酚的方法准确可靠,可用于生姜及其制品中6-姜酚的测定。

姜酮、脱氢姜酮、姜酚肟对两种自由基的清除作用

为研究生姜及其制品中的具有清除自由基能力的有效成分,本文研究了姜酮(Zingerone)、脱氢姜酮(Dehydrozingerone)、姜酚肟(Gingeroloxime)对超氧阴离子(superoxideanionfreeradical,SARF)和DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhdrazyl)的清除作用。结果表明姜酮和脱氢姜酮对两种自由基都有显著的清除作用,量效关系明显。姜酚肟对于超氧阴离子的清除能力较弱。这些结果说明姜酮是生姜及其制品中清除自由基的一种有效成分。而脱氢姜酮有望作为一种新的抗氧化剂。

测定6-姜酚标样物质——6-姜酚肟的制取与鉴定

为了获得高纯度的6-姜酚肟,以姜油树脂为原料,通过溶剂萃取、肟化反应和硅胶柱真空层析,获得白色晶体,通过紫外光谱、红外光谱、核磁共振谱、质谱等测定所得白色晶体为6-姜酚肟,并证实了其存在顺反异构。

姜酚肟对谷氨酸诱导PC12细胞损伤的保护作用

【目的】探讨姜酚肟对谷氨酸(glutamate,Glu)诱导PC12细胞损伤的保护作用。【方法】体外培养PC12细胞,建立谷氨酸诱导PC12细胞损伤的模型;采用MTT法检测细胞活力,流式细胞术和Hoechst33258DNA染色法检测细胞凋亡。【结果】经5mmol/L的谷氨酸处理24h后,PC12细胞活力比对照组降低,仅为对照组的58.3%。在一定浓度范围内,姜酚肟能保护PC12细胞免受谷氨酸(5mmol/L)的影响,但较高浓度时对细胞有一定的毒性。经不同浓度姜酚肟(3.125、6.25、12.5、25μg/mL)预处理后,细胞活力明显提高,其保护作用随浓度降低而升高,当浓度为6.25μg/mL时效果最好,使PC12细胞的存活率达到75.2%(P<0.01),浓度为3.125μg/mL时,细胞存活率降为70.2%(P<0.01)。谷氨酸(5mmol/L)能诱导PC12细胞凋亡,处理24h后细胞凋亡率为20.1%,经姜酚肟(3.125、6.25、12.5、25μg/mL)预处理后,细胞凋亡率明显降低,分别为3.5%(P<0.01),2.8%(P<0.01),9.6%(P<0.01),17.7%(P<0.05)。【结论】谷氨酸能诱导PC12细胞凋亡,较低浓度的姜酚肟能有效保护PC12细胞免受谷氨酸诱导的细胞损伤,其中6.25μg/mL的姜酚肟效果最好。

6-姜酚与6-姜酚肟抗氧化性质的比较研究

为比较姜酚及姜酚肟的抗氧化性质,以姜油树脂为原料,用真空层析等方法分离纯化得到高纯度姜酚,并通过肟化反应制得化学性质更加稳定的姜酚肟。对比不同浓度姜酚、姜酚肟、BHT和VE的还原力、清除DPPH与羟基自由基能力及抗油脂氧化能力。结果表明:在浓度为0.2~0.8 g/L时,姜酚肟的还原力(吸光度值:0.23~0.37)低于姜酚(0.52~1.11)高于VE(0.19~0.29),姜酚肟对DPPH和羟基自由基的清除率分别为75~89%和37~62%,低于姜酚和BHT,但与VE无显著差异。在浓度为50~250 mg/kg时,姜酚肟对花生油和葵花籽油的氧化诱导时间分别为3.39~3.57 h和1.71~2.07 h,虽均低于姜酚(3.57~3.83 h和1.90~2.16 h),但明显高于VE(3.06~3.49 h和1.53~1.93 h)。综上所述,这四者的抗氧化能力大小排序为VE≤姜酚肟<姜酚≤BHT,姜酚和姜酚肟均有较好的抗氧化能力,由于姜酚肟化学性质较姜酚更加稳定,使其在抗油脂氧化方面更具潜力。

HPLC内标法同时测定十三香中胡椒碱和6-姜酚的含量

目的:建立快速、准确并同时测定十三香中姜酚和胡椒碱含量的方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速1mL/min,检测波长280nm。结果:内标法与标准曲线法的测定结果一致;胡椒碱在5～160μg/mL、姜酚和姜酚肟在20～640μg/mL时,峰面积与浓度呈良好线性关系;相关系数分别为0.9995、0.9997、0.9995。十三香中胡椒碱和姜酚的含量分别为:20.23、4.33mg/g。结论:用姜酚肟做内标测定产品中姜酚和胡椒碱的方法既不用重复做标准曲线,又可同时测定两种成分的含量。