姜黄素修饰透明质酸的自组装特性及其对Aβ40聚集的抑制作用:透明质酸相对分子质量的影响

淀粉样β蛋白(amyloidβ-peptide,Aβ)的聚集是阿尔兹海默症的主要病因.姜黄素(curcumin,Cur)是一种良好的Aβ聚集小分子抑制剂,但其存在水溶性和稳定性差等缺点.针对该问题,笔者先前将Cur修饰在透明质酸(hyaluronic acid,HA)上形成自组装纳米粒子CHA,不仅改善了Cur的水溶性和稳定性,而且还提高了Cur对Aβ聚集的抑制效果.为进一步考察HA的相对分子质量对纳米粒子自组装特性及其对Aβ聚集的抑制作用的影响,本研究将Cur分别以不同修饰度(substitution degree,SD)修饰在相对分子质量40、300和1,000的HA上,得到3类CHA.实验结果表明:HA相对分子质量能影响CHA的纳米结构及其最佳SD,HA相对分子质量越大,形成的CHA纳米结构越疏松,因而其最佳SD越大;在最佳SD下,相对分子质量为300的HA自组装形成的CHA的纳米结构最为合适,其抑制效果最好.研究结果对自组装纳米药物的设计具有重要的参考意义.

透明质酸介导姜黄素靶向脂质体的制备及质量评价

目的制备透明质酸-姜黄素脂质体(HA-CUR-L),并考察其包封率及质量评价。方法采用逆相蒸发法制备HA-CUR-L,测定其包封率、HA结合率、形态分布、粒径及体外释放度。结果脂质体平均包封率为88.75%,HA结合率为71.69%;脂质体平均粒径为160 nm;36 h后,累计释药量为82.26%。结论选用逆相蒸发法制备HA-CUR-L,处方合理,工艺简便可行,包封率高。

姜黄素联合负载透明质酸修饰的乙醇质体治疗抗银屑病的临床研究

目的研究姜黄素联合负载透明质酸修饰的乙醇质体改善银屑病的临床效果。方法选取2017年10月—2018年12月经医院诊断为银屑病的90例患者为研究对象,根据每例患者的银屑病皮损面积和严重度指数(PASI)评分,将其分为3组:PASI30(A组,n=23);25<PASI<30之间(B组,n=35);20<PASI<25之间(C组,n=32)。通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)定量方式测定其治疗前后皮损组织中核因子(NF)-κB mRNA的表达情况,联合采用免疫比浊法测定血清中的免疫球蛋白IgA和IgG的含量以及采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定细胞因子白细胞介素(IL)-2和IL-4的表达情况并根据患者治疗前后的PASI评分,分析姜黄素联合负载透明质酸修饰的乙醇质体治疗银屑病的临床效果。结果在姜黄素联合负载透明质酸修饰的乙醇质体治疗后,银屑病患者的PASI评分均降低。银屑病患者的皮损组织中NF-κB mRNA的表达量、免疫球蛋白IgA和IgG和细胞因子IL-2和IL-4高于健康正常对照组。通过姜黄素联合负载透明质酸修饰的乙醇质体治疗后,患者皮损组织中NF-κB mRNA的表达量以及免疫球蛋白IgA和IgG和IL-2和IL-4有所下降。结论姜黄素联合负载透明质酸修饰的乙醇质体通过调节免疫系统,调节皮损组织中NF-κB mRNA的表达、免疫球蛋白IgA和IgG和IL-2和IL-4的含量,从而有效缓解银屑病的临床治疗。

淫羊藿苷与透明质酸结合物的制备及其对膝关节软骨缺损兔软骨组织的保护作用

目的制备淫羊藿苷与透明质酸的结合物,并观察其对膝关节软骨缺损兔软骨组织的保护作用。方法利用甘氨酸氨基保护反应,将淫羊藿苷转化为氨基淫羊藿苷,利用其氨基与透明质酸的羧基进行偶联结合(摩尔比1∶10),得到淫羊藿苷与透明质酸结合物。将24只右侧膝关节软骨缺损兔随机分为空白对照组、透明质酸钠组、淫羊藿苷组、结合物组,各6只。模型制备后第3周,空白对照组、透明质酸钠组、淫羊藿苷组、结合物组右侧膝关节腔内分别注射0.2 mL生理盐水、1%透明质酸钠注射液、淫羊藿含药血清冻干粉溶液及淫羊藿苷与透明质酸结合物;1次/周,共5周。各组分别于术后第4、8、12周采用空气栓塞法各处死2只,切开膝关节,观察膝关节大体形态并进行ICRS评分。各组术后第12周取股骨内髁软骨缺损修复区域,HE染色后进行组织学评分,采用抗原-抗体特异性反应检测软骨组织Ⅱ型胶原阳性表达率。结果术后第12周,空白对照组膝关节软骨表面的缺损区外形修复不完全,表面不平,股骨内髁关节软骨面不完整,可见软骨下骨暴露。结合物组膝关节软骨表面缺损区外形基本完全修复,关节软骨表面较光滑,呈乳白色,关节内未见明显粘连。淫羊藿苷组和透明质酸钠组膝关节软骨面修复接近完整,但关节软骨表面不平。结合物组术后4周膝关节ICRS评分高于空白对照组及淫羊藿苷组,术后8、12周均高于空白对照组、淫羊藿苷组、透明质酸钠组(P均<0.05)。透明质酸钠组、淫羊藿苷组、结合物组HE染色组织学评分均低于空白对照组,结合物组HE染色组织学评分低于透明质酸钠组、淫羊藿苷组(P<0.05或<0.01)。空白对照组、透明质酸钠组、淫羊藿苷组、结合物组软骨组织Ⅱ型胶原阳性表达率依次升高,组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01)。结论成功制备了淫羊藿苷与透明质酸结合物;该结合物可提高膝关节软骨缺损兔软骨组织Ⅱ型胶原表达并发挥软骨保护作用。

姜黄素抗肺纤维化大鼠细胞外基质过度形成的实验研究

目的:研究姜黄素抗博莱霉素诱导大鼠肺纤维化细胞外基质过度沉积的作用。方法:SD雄性大鼠144只,分为假手术组,模型组,姜黄素高、中、低剂量组,醋酸泼尼松组,每组24只。除假手术组外其余各组大鼠气管内一次性滴注盐酸博莱霉素,假手术组大鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水。造模后第1天开始给药,持续到处死动物的前一天。姜黄素高,中,低剂量组分别为200,100,50 mg.kg-1.d-1,醋酸泼尼松组为0.56 mg.kg-1.d-1,假手术组,模型组分别灌服等体积的生理盐水。各组动物于7,14,28 d随机处死8只,分别观察大鼠肺组织羟脯氨酸(HYP)和血清中Ⅲ型胶原,Ⅳ型胶原及层黏连蛋白和透明质酸的含量,同时取肺组织进行HE,Mallory染色。结果:姜黄素可降低肺纤维化大鼠血清Ⅲ,Ⅳ胶原,层黏连蛋白及透明质酸含量,减轻肺组织纤维性增生。结论:可能是通过降低肺纤维化大鼠细胞外基质含量而发挥治疗肺纤维化作用。

姜黄素对肝星状细胞增殖及分泌细胞外基质的影响

观察姜黄素对大鼠肝星状细胞 (HSC)增殖及分泌细胞外基质的影响。用不同浓度的姜黄素处理大鼠肝星状细胞 ;以MTT比色法测定细胞的增殖 ;放射免疫法测定透明质酸和层粘连蛋白 ;酶联免疫吸附法 (ELISA)测定Ⅰ型胶原的水平。姜黄素可剂量依赖性地抑制HSC增殖 ,不同程度抑制Ⅰ型胶原、透明质酸和层粘连蛋白分泌。姜黄素可显著抑制HSC的增殖及分泌细胞外基质。

联用阿米洛利与姜黄素预防大鼠肝纤维化的实验研究

目的 观察联用阿米洛利与姜黄素预防大鼠肝纤维化的疗效。方法 建立二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化模型 ,观察阿米洛利与姜黄素预防后 ,肝 /体和脾 /体比值、血及肝组织生化、羟脯氨酸、透明质酸及层黏连蛋白含量变化。结果 除阿米洛利组 ,各预防组较模型组肝功能得到改善 (P <0 0 0 1) ;阿米洛利和姜黄素预防组较模型组血清透明质酸、层黏连蛋白和肝组织羟脯氨酸含量降低 (P <0 0 5) ;预防组肝组织内SOD、GSH_PX较模型组升高 ,而MDA低于模型组 (P <0 0 1) ;尤以合用组效果最佳。结论 阿米洛利与姜黄素对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化均有预防作用 。

透明质酸修饰的PAMAM纳米胶束的制备及性质研究

目的采用透明质酸(HA)修饰聚酰胺-胺(PAMAM)树状大分子,以姜黄素、阿霉素为模型药物,构建HA-PAMAM纳米胶束肿瘤主动靶向给药系统。方法采用酰胺化反应合成不同透明质酸取代度的HA-PAMAM;采用溶剂挥发法制备HA-PAMAM单药和双药联合载药胶束;采用高效液相色谱法测定姜黄素、阿霉素的包封率和载药量;通过体外透析法研究载药胶束的释药特性。结果采用溶剂挥发法制备阿霉素、姜黄素单药或联合载药胶束,载药胶束的包封率与载药量较高(姜黄素分别为66.70%、6.57%,阿霉素分别为82.14%、33.15%)。HA-PAMAM载药胶束体外释放显示出良好的缓释性能。结论透明质酸修饰的PAMAM是一种具有良好肿瘤靶向性应用前景的纳米载药系统。

水溶性姜黄素纳米粒的制备

[目的]利用水溶性高分子材料透明质酸(HA)作为药物载体材料增加姜黄素的自身稳定性和溶解度低的问题。[方法]利用化学键结合的方法使姜黄素和透明质酸之间形成酯键制备姜黄素偶合物(HA-Cur)并在水中溶解自组装成纳米粒,用高效液相色谱仪检测姜黄素的含量。[结果]实验中利用核磁共振表征证明我们成功地将姜黄素接枝到透明质酸上,大大增加了姜黄素的水溶性,在水中溶解后具有良好的粒径分布,说明该接枝物在水溶液中自组装成了姜黄素纳米粒,同时我们利用高效液相色谱仪检测该纳米粒子中姜黄素的含量为6.9%。[结论]成功制备透明质酸-姜黄素(HA-Cur)偶合物,该偶合物能够在水中形成姜黄素纳米粒子,增加了姜黄素的水溶性和稳定性,而透明质酸能靶向CD44受体的性质也一定程度上增加了姜黄素抗肿瘤的靶向性。

透明质酸修饰姜黄素壳聚糖纳米粒的制备及初步细胞毒性考察

采用离子交联法制备姜黄素壳聚糖纳米粒,然后通过共价连接将透明质酸连接到纳米粒表面。所得透明质酸修饰姜黄素壳聚糖纳米粒呈球形,平均粒径(205.3±11.4)nm,包封率和载药量为42.7%和28.4%,透明质酸的平均结合率为39%。体外细胞毒性试验显示,该制品对高表达CD44受体的A549细胞增殖的抑制率明显高于未修饰纳米粒和游离药物。而对于CD44低表达的Hep G2细胞,修饰和未修饰纳米粒的抑制率相当。

透明质酸磷脂酰衍生物修饰姜黄素脂质体的制备及细胞毒性

采用逆相蒸发法制备了姜黄素脂质体。由于透明质酸脂溶性较差,先将其制成磷脂酰衍生物(透明质酸-磷脂酰乙醇胺,HA-DOPE),再用以修饰载药脂质体。所得脂质体的平均包封率为89%,该衍生物与脂质体的结合率为72%。脂质体于4℃保存30 d包封率无明显改变,但结合率有轻微下降。细胞毒性试验显示,游离姜黄素、姜黄素脂质体及修饰后脂质体对高表达CD44受体的人肺腺癌A549细胞的IC50值分别为0.054、0.032和0.021 mol/ml,未修饰和修饰后的姜黄素脂质体对低表达CD44受体的人肝癌HepG2细胞作用相当。

磷酸钙骨水泥复合透明质酸-姜黄素对成骨细胞增殖及成骨能力影响的研究

目的采用透明质酸(hyaluronic acid,HA)对姜黄素(curcumin,CUR)进行改性,探讨磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)复合HA/CUR后对成骨细胞增殖及成骨能力的影响。方法首先将HA与CUR成酯化共价结合制备HA/CUR,观察其性状并行红外光谱测试。然后,将HA、CUR以及HA/CUR按照5%(W/W)分别与CPC混合,制备HA-CPC、CUR-CPC、HA/CUR-CPC,行凝结时间检测、扫描电镜观察以及可注射性能、压缩强度测试;以单纯CPC作为对照。取新生SD大鼠颅骨分离培养成骨细胞,取第2代细胞分别与上述骨水泥复合培养,经扫描电镜观察、活/死细胞荧光染色、细胞计数、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)免疫荧光染色、ALP染色以及茜素红染色,评估HA/CUR-CPC对成骨细胞增殖及成骨能力的影响。结果红外光谱测试显示HA及CUR成功共价结合。骨水泥观测显示,HA/CUR-CPC组初凝时间、终凝时间、压缩强度以及可注射率与其他组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);扫描电镜观察示HA/CUR散在分布于CPC表面。骨水泥与成骨细胞复合培养后,扫描电镜显示成骨细胞黏附于HA/CUR-CPC且形态良好,具有成骨细胞的生长特征;HA/CURCPC组细胞存活率与其他组比较差异无统计学意义(P>0.05),细胞较其他组明显增多(P<0.05);OPN免疫荧光染色、ALP染色及茜素红染色程度均强于其他组。结论 HA/CUR-CPC具有良好的生物相容性及力学特性,能促进成骨细胞增殖并增强其成骨能力。

载姜黄素的胆固醇-透明质酸聚合物胶束的制备及评价

通过化学交联法将胆固醇(Chol)与透明质酸(HA)连接,合成两亲性胆固醇-透明质酸聚合物(CH-HA),用薄膜分散-超声法制得载抗肿瘤药姜黄素的聚合物胶束。动态光散射(DLS)和透射电镜(TEM)的表征结果显示,载药胶束的粒径为(148.9±3.1)nm,ζ电位为(-29.7±2.4)mV,外观呈球形且粒度分布较均匀。本品包封率为(79.58±0.36)%,载药量为(7.57±0.36)%,在pH 7.4磷酸盐缓冲液中10和48 h时累积释放率约为45%和55%,提示其具有一定的缓释性能。初步稳定性考察结果显示,本品在4℃放置30 d,粒径略增大但包封率明显下降。体外细胞毒性试验表明,空白胶束对肿瘤细胞A549及正常细胞L929均无明显细胞毒性,展现出良好的生物相容性;而载药胶束对A549细胞具有浓度依赖性的抑制作用,但对L929细胞的毒性较小。细胞摄取试验显示,A549细胞对载药胶束的摄取率明显高于L929细胞,并且肿瘤细胞的相对摄取率随时间延长而显著降低。

载姜黄素的透明质酸-熊果酸-硫辛酸交联纳米粒的制备及其体外抗肿瘤活性

目的 制备载姜黄素的透明质酸-熊果酸-硫辛酸交联纳米粒(Cur/cLA-HU NPs),并进行体外抗肿瘤活性评价。方法 以载药量、包封率为指标,采用超声法,通过单因素考察优化Cur/cLA-HU NPs的制备工艺,并对Cur/cLA-HU NPs的粒径、Zeta电位、形态和体外释药情况进行评价。通过荧光倒置显微镜分析HepG2细胞对Cur/cLA-HU NPs的摄取,以MTT法考察Cur/cLA-HU NPs对HepG2细胞的毒性。结果 最佳载药工艺为:以甲醇为药物姜黄素有机溶剂,以药质比4∶10进行投料,超声于100 W下次数为3次,每次处理3 min,超声程序设置为开2 s、停4 s。Cur/cLA-HU NPs的包封率为(87.91±1.51)%,载药量为(16.64±0.45)%,粒径为(172.3±2.57)nm,PDI为(0.174±0.021),分散均匀,Zeta电位为(-35.3±2.12)mV。Cur/cLA-HU NPs具有还原响应性,释放药物的快慢受到GSH浓度的影响;靶向肿瘤细胞,且被细胞快速摄取;对HepG2人肝癌细胞增殖具有明显抑制作用。结论 Cur/cLA-HU NPs载药量和包封率高,其体外抗肿瘤活性稍优于姜黄素,具有肿瘤靶向性。

口腔黏膜下纤维性变治疗的循证医学研究

口腔黏膜下纤维性变(oralsubmucousfibrosis,OSF)是一种与咀嚼槟榔等因素密切相关的口腔黏膜潜在恶性疾患。OSF的致病机制不明确,无根治方法,目前临床上治疗方法较多,如类固醇、己酮可可碱、番茄红素、姜黄、丹参、芦荟等药物及激光和手术等治疗方法,为了评价这些治疗方法改善OSF最大张口度、灼痛感、舌灵活度等症状的有效性及安全性,近十年学者们已完成了多项循证医学研究。本文对近十年(2014年7月至2024年6月)PubMed、Embase、WebofScience、TheCochraneLibrary、中国知网、万方、维普七大数据库治疗OSF的系统性评价或Meta分析进行归纳总结,为OSF的临床治疗和研究提供参考。当前的循证医学研究表明,己酮可可碱、透明质酸酶联合类固醇、番茄红素、姜黄素、丹参联合类固醇、芦荟等药物可有效改善OSF患者的最大张口度和烧灼感,且安全性好。透明质酸酶联合类固醇、番茄红素、姜黄素、丹参联合类固醇、芦荟证据等级均为A级,己酮可可碱证据等级为B级。番茄红素比其他药物,改善患者最大张口度的效果更好。芦荟在治疗早期比其他药物,改善烧灼感效果更好。此外,抗氧化剂改善OSF的症状效果佳,应用前景好。激光可改善OSF最大张口度、疼痛等症状,但成本较高,证据等级为C级;手术改善OSF最大张口度效果明显,但创伤大,证据等级为C级。目前循证证据纳入的临床研究数量和样本量较少,未来需更多设计良好、随访期长、结局指标标准化的治疗OSF多中心大样本的随机对照临床试验,再进行循证评价。

膝关节骨性关节炎非手术治疗进展

膝关节骨性关节炎(KNee osteoarthritis,KOA)为临床骨科常见病症,以肿胀、疼痛为主要临床病症,主要是以滑膜、关节软骨、软骨下骨质的损伤造成,以中老年为主要发病人群,对人们身体健康与生活质量造成一定影响。目前针对KOA,其中包括保守治疗、手术治疗,其中非手术治疗主要包括物理疗法、药物治疗以及自体富含血小板血浆注射等,以稳定患者病情,改善其预后恢复。故本文就KOA非手术治疗进展做一综述。