姜黄素类似物EF24对HepG2及斑马鱼胚胎发育的影响

为探讨姜黄素类似物EF24对肝癌细胞的影响以及对脊椎动物的毒性,以EF24对HepG2和斑马鱼胚胎进行处理,发现低浓度的EF24对HepG2达到较好的杀伤效果,IC50为29.38 umol/L。对斑马鱼胚胎,当受精卵发育6 h为敏感期,EF24的安全浓度达100 mg/L。而从400 mg/L高浓度开始出现畸形和死亡,如卵黄弥散、胚胎在外包期死亡、囊胚期胚胎动物极弥散、脊柱弯曲、发育不全等现象。EF24是一种对肝癌细胞有较强的杀伤效果且安全的潜在药物。

单羰基姜黄素类似物EF24对胃癌细胞凋亡和焦亡的影响研究

目的:研究单羰基姜黄素类似物EF24对胃癌SGC-7901细胞凋亡和焦亡的影响。方法:常规培养胃癌BGC-823和SGC-7901细胞,给予不同浓度的EF24处理细胞,MTT法检测胃癌细胞的活性,细胞集落法检测EF24对SGC-7901细胞集落形成的影响,流式细胞术分别检测EF24对SGC-7901细胞凋亡的影响和细胞内活性氧簇(ROS)含量变化对SGC-7901细胞生长抑制情况的影响,Western Blotting法检测EF24作用SGC-7901细胞对Bcl-2和Bax蛋白的影响,显微成像初步验证EF24通过升高ROS对SGC-7901细胞焦亡的影响。结果:与对照组比较,EF24呈浓度依赖抑制胃癌细胞生长(P<0.05或P<0.01),对BGC-823和SGC-7901胃癌细胞的半抑制浓度(IC50)分别为4.35μmol·L^-1和4.96μmol·L^-1;EF24呈浓度依赖性抑制SGC-7901胃癌细胞集落形成,促进细胞凋亡和促凋亡蛋白Bax的表达,抑制抑凋亡蛋白Bcl-2的表达(P<0.05或P<0.01);EF24升高SGC-7901胃癌细胞内ROS的含量并诱导细胞凋亡和焦亡(P<0.05或P<0.01)。结论:EF24能够抑制胃癌细胞生长,升高SGC-7901细胞的ROS含量,从而诱导细胞凋亡和焦亡。

姜黄素类似物EF24诱导A549细胞自噬及凋亡关系的研究

从细胞自噬及凋亡关系角度探讨姜黄素类似物EF24对人肺腺癌细胞（A549）的杀伤机理。选用不同浓度的EF24对体外培养的A549处理,采用MTT方法检查细胞存活率,吖啶橙染色观察细胞形态,蛋白质免疫印迹（Western blot）方法检测与细胞自噬及凋亡相关蛋白的表达及对AMPK-mTOR-S6K信号通路的影响。结果显示,EF24作用24 h的IC50为8.5μmol/L,对A549细胞生长抑制作用优于姜黄素,而接近顺铂。自噬及凋亡蛋白检测显示,在4μmol/L、8μmol/L时A549细胞以自噬为主,在16μmol/L时以凋亡为主;加入100 nmol/L自噬抑制剂渥曼青霉素（wortmannin）后,细胞存活率同比升高。同时还发现,随着EF24浓度的增加,细胞内AMPK-Thr172磷酸化水平上升,mTOR-Ser2481、S6K-Thr389磷酸化水平的下调。由此可见,EF24可通过AMPK的激活下调mTOR-S6K途径抑制细胞生长,在EF24浓度4~8μmol/L范围内,自噬对凋亡起到促进作用。

姜黄素类似物合成与体外抗肿瘤活性研究

以芳香醛、4-哌啶酮为原料,Claisen-Schimidt缩合制备3,5-(E)-二亚苄基哌啶-4-酮类化合物。采用MTT法测试目标化合物对人类慢性粒细胞白血病急变细胞K562,人结肠癌细胞SW1116增殖的抑制活性。化合物1-19的结构经核磁和质谱确证,化合物7、10、11对SW1116的抑制活性比EF-24强,化合物1-5、9、14、18对K562的抑制活性均比EF-24强。

以成纤维细胞生长因子受体1为靶点的姜黄素类似物的抗肿瘤活性研究

目的寻找以成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)为靶点,并具有良好抗肿瘤活性的小分子抑制剂。方法通过改造单羰基姜黄素类似物3,5-双(2-氟苯亚甲基)哌啶-4-酮(EF24),合成了其类似物[3,5-双(2-溴苯亚甲基)哌啶-4-酮,B6];采用FGFR1酪氨酸激酶实验验证其靶向性;MTT法检测EF24和B6对正常人肝细胞HL7702、4种肿瘤细胞(人大细胞肺癌NCl-H460、人胃癌细胞SGC-7901、人小细胞肺癌A549、人星形胶质瘤细胞株U251)增殖的影响;Western blotting法检测B6(2.5、5、10μmol/L)对NCl-H460细胞bFGF/FGFR下游信号蛋白表达的影响;Caspase-3试剂盒检测Caspase-3因子的表达。结果 EF24类似物B6可以以FGFR1为靶点,抑制NCI-H460细胞FGFR1以及下游信号蛋白丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)和细胞外调节蛋白(ERK1/2)的磷酸化,抑制肿瘤细胞的增殖,促进细胞凋亡。结论成功改造并获得靶向FGFR1的EF24类似物B6,其具有良好的体外抗肿瘤活性,为寻找FGFR1抑制剂候选抗肿瘤药物提供新思路。

新型IKKβ激酶抑制剂的体外抗胃癌活性

目的:探究新型EF24类IKKβ激酶抑制剂H18的体外抗胃癌活性。方法:利用分子对接模拟H18与IKKβ的结合模式;利用MTT实验检测H18对胃癌细胞BGC-823抑制生长的作用;集落克隆实验检测H18对BGC-823增殖的影响;利用DAPI染色检测细胞凋亡情况;利用Western blot实验分析H18对胃癌细胞BGC-823的NF-κB信号通路的影响。结果:H18可与IKKβ的变构位点结合;H18对BGC-823细胞72 h IC_(50)为(1.7±0.3)μmol/L;与IKK抑制剂BMS-345541相比,H18明显抑制细胞的增殖,而对凋亡无明显影响;H18可对胃癌细胞NF-κB信号通路产生明显抑制作用。结论:H18具有良好的体外抗胃癌活性,是一种具有研发前景的IKKβ抑制剂。