姜黄素超分子包合物抑制HepG2肝癌细胞的增殖

对姜黄素超分子包合物抑制HepG2肝癌细胞增殖的作用进行研究。采用MTT法考察不同浓度的姜黄素超分子包合物(40～640μg/mL)处理HepG2细胞不同时间(24h、48h和72h)后对其细胞存活率的影响。然后,采用流式细胞术和测定Caspase 3/8/9酶活来探讨姜黄素超分子包合物抑制HepG2细胞增殖的作用机理。实验结果表明,随着姜黄素超分子包合物处理时间和浓度的增加,HepG2细胞的存活率呈现出逐渐下降的趋势,当处理时间为72h,姜黄素超分子包合物浓度为640μg/mL时,细胞的存活率达到最低为9.81%±1.00%。进一步的流式细胞术分析得知,HepG2细胞内的凋亡细胞数目随着姜黄素超分子包合物浓度的增加而增加,当细胞经640μg/mL姜黄素超分子包合物处理72h后,其细胞内凋亡细胞的数目(Sub-G1)达到最高为93.43%。通过对Caspase 3/8/9的酶活进行检测发现,Caspase 3/8/9的酶活也是随着姜黄素超分子包合物浓度的增加而增加,当640μg/mL姜黄素超分子包合物处理细胞72h后,Caspase 3/8/9的酶活达到最大。进一步地Western blot实验结果也表明,随着姜黄素超分子包合物浓度的增加,Caspase 3/8/9的蛋白表达水平呈升高趋势。上述实验结果表明,姜黄素超分子包合物是通过线粒体途径和死亡受体途径来诱导细胞发生凋亡从而抑制HepG2细胞增殖。

姜黄素超分子包合物改善乙醇诱导LO2肝细胞DNA损伤的作用机制

该文主要考察了姜黄素超分子包合物(curcumin/β-cyclodextrin polymer inclusion complex,CUR/CDP)保护乙醇诱导LO2肝细胞损伤的分子机制。采用流式细胞仪检测CUR/CDP预处理对乙醇诱导细胞损伤后细胞周期分布的影响;Western blot检测CUR/CDP预处理对乙醇诱导细胞内蛋白表达水平变化的影响;活性氧(reactive oxygen species,ROS)试剂盒检测CUR/CDP预处理对乙醇诱导细胞内ROS水平的影响。结果发现,乙醇能显著提高细胞内G_(2)/M期细胞数目,从空白对照组的(8.83±0.46)%提高到(21.86±0.13)%。而经80μg/mL CUR/CDP预处理后乙醇诱导的细胞损伤显著降低,发现其细胞内G_(2)/M期细胞数目从乙醇处理组的(21.86±0.13)%降低到(4.76±0.36)%。进一步研究发现,CUR/CDP能够显著下调乙醇处理组中的p21、p-ATM、p-P53、γ-H2AX以及p-p38MAPK的蛋白表达量和上调cyclin B1和p-MDM2的蛋白表达量。此外,CUR/CDP作用于细胞后其细胞内ROS的荧光强度显著减弱,表明CUR/CDP能够抑制乙醇诱导细胞内ROS的产生。综上所述,CUR/CDP通过抑制细胞内ROS的产生下调细胞内与DNA损伤相关蛋白的表达,从而改善乙醇诱导的肝细胞损伤。

姜黄素超分子包合物对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护作用

本文考察了姜黄素超分子包合物(Curcumin/Cyclodextrin polymer inclusion complex,CUR/CDP)对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护作用。采用MTT法建立乙醇诱导LO2细胞损伤的模型,通过谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)等试剂盒考察了CUR/CDP对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护效果。结果表明,经CUR/CDP(80μg/mL)处理后,LO2细胞的存活率从54.75%±8.97%(模型对照组)提高到85.27%±2.64%,且细胞培养液中ALT、AST和LDH活力分别从(26.47±0.90)、(41.02±4.41)、(63.77±4.95)U/L(模型对照组)降低到(16.17±0.42)、(22.62±0.79)、(32.25±1.69)U/L(P<0.01),LO2细胞内GSH-PX、SOD活力分别从(21.82±1.34)、(8.45±1.11)U/mg prot(模型对照组)升高到(36.70±0.56)、(16.47±1.27)U/mg prot,LO2细胞内MDA和ROS含量分别从(1.19±0.15)nmol/mg prot、(198.02%±11.76%)(模型对照组)降低到(0.72±0.05)nmol/mg prot、(110.87%±10.22%)(P<0.01)。综上所述,CUR/CDP通过提高LO2细胞相关抗氧化酶的活力和降低细胞内ROS含量来改善乙醇诱导LO2细胞的损伤。