姬松茸多糖和姬松茸多糖铁对DSS诱导的大鼠溃疡性结肠炎预防效果研究

为了探究姬松茸多糖和姬松茸多糖铁预防葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的大鼠溃疡性结肠炎(UC)效果,试验将64只SD大鼠随机分成8组,即空白对照组、模型组及姬松茸多糖和姬松茸多糖铁低剂量(50 mg/kg)、中剂量(100 mg/kg)、高剂量(200 mg/kg)组,姬松茸多糖和姬松茸多糖铁各剂量组大鼠按低、中、高剂量每只灌胃给予50,100,200 mg/kg姬松茸多糖和姬松茸多糖铁溶液1 mL,每天1次,连续灌胃14 d,空白对照组和模型组灌胃等体积的生理盐水。从第15天起,停止灌胃,除空白对照组外,其余组饮水全部替换成含4.5%DSS的水溶液,自由饮用,连用7 d,建立溃疡性结肠炎大鼠模型。干预结束后,测定大鼠体重、结肠长度,进行疾病活动指数(DAI)评分;采用H.E.染色法观察结肠组织病理学变化;采用ELISA法测定血清中炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α);荧光定量PCR方法检测结肠组织中紧密连接蛋白相关基因ZO-1、Occludin和Claudin-1 mRNA的表达,以及肠道菌群Mucispirillum schaedleri、普拉梭菌、大肠杆菌、乳酸杆菌和双歧杆菌16S RNA的相对表达量。结果表明:与空白对照组相比,模型组大鼠从试验第18天起体重开始持续下降,结肠长度极显著缩短(P<0.01),DAI评分增加,结肠病变严重;血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平极显著升高(P<0.01);结肠组织中紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1基因mRNA的相对表达量均极显著下降(P<0.01);肠道菌群Mucispirillum schaedleri和大肠杆菌16S RNA相对表达量极显著升高(P<0.01),普拉梭菌、乳酸菌和双歧杆菌16S RNA相对表达量极显著下降(P<0.01)。与模型组相比,试验第18,21天姬松茸多糖和姬松茸多糖铁各剂量组的大鼠体重有所回升,结肠长度缩短较少,DAI评分和血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);姬松茸多糖和姬松茸多糖铁中、高剂量组紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1基因的mRNA相对表达量升高;姬松茸多糖各剂量组中普拉梭菌、乳酸菌及双歧杆菌16S rRNA基因相对表达量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),Mucispirillum schaedleri和大肠杆菌16S rRNA基因相对表达量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);当姬松茸多糖铁浓度增大时,Mucispirillum schaedleri和大肠杆菌16S rRNA基因相对表达量表现为先下降后升高,并在高浓度时显著高于中剂量组(P<0.05),随姬松茸多糖铁浓度的增加,双歧杆菌和乳酸菌的16S rRNA相对表达量表现出先升高后降低趋势。说明姬松茸多糖和姬松茸多糖铁对DSS诱导的大鼠急性UC均具有预防效果,但姬松茸多糖铁在纠正肠道菌群平衡方面表现出不足,提示其作为结肠炎预防药物还需要进一步的研究。

姬松茸多糖铁(Ⅲ)合成方法的研究

采用姬松茸多糖(ABMP)和三氯化铁(FeCl3)为原料合成姬松茸多糖铁(Ⅲ)(ABMP-Fe(Ⅲ))复合物,在单因素实验设计基础上,设计正交实验优化合成工艺,通过红外光谱、X射线光电子能谱(XPS)和X射线衍射(XRD)对ABMP和ABMP-Fe(Ⅲ)的理化性质进行初步分析。结果表明,姬松茸多糖铁为无定型红棕色粉末,易溶于水,与Fe3+形成稳定的配合物,不存在游离Fe3+,ABMP-Fe(Ⅲ)合成的最佳条件为:柠檬酸三钠:姬松茸多糖=1:2、pH8、时间2 h、温度70 ℃,其中合成的姬松茸多糖铁(Ⅲ)中铁含量为(16.24±0.44)%。