伊犁地区马媾疫的诊断与治疗效果的观察

【目的】为研究新疆伊犁地区马媾疫的发病情况和药物治疗效果,【方法】对疑似有马媾疫的马匹,通过ELISA方法检测马匹血清中马媾疫抗体,采用PCR方法检测马匹生殖道黏膜拭子中马媾疫锥虫,伊氏锥虫PCR检测排除假阳性,对确诊马媾疫的马匹使用抗锥虫药物治疗并监测治疗效果。【结果】21匹临床表现疑似马媾疫的马匹,ELISA抗体检测结果显示阳性率为19.05%(4/21);用PCR检测出3匹马呈阳性,同时该3匹马均为抗体检测呈阳性马匹,PCR与ELISA检测阳性符合率75%;抗体阳性而PCR阴性马匹使用伊氏锥虫PCR检测呈阴性,结合流行病学分析该马匹也为马媾疫。4匹阳性马经抗锥虫药物治疗后,2匹马痊愈,1匹联合抗菌药物巩固治疗后痊愈,1匹死亡。【结论】马媾疫ELISA抗体检测联合PCR分子检测可提高马媾疫的检出率,诊断时需排除伊氏锥虫感染。早期发现马媾疫通过药物治疗后易痊愈,疾病进展至后期难以治愈成功。本研究为新疆伊犁地区马媾疫的诊断和治疗提供科学依据。

河北省滦县部分地区驴马媾疫病发病情况的调查

马媾疫是马属动物交配时,在其生殖器官粘膜上感染锥虫科锥虫属的马媾疫锥虫(Trypanosoma equiperdum)所引起的慢性原虫病。马媾疫锥虫主要侵害马、驴和骡,一般呈慢性经过或隐性感染。河北省滦县地处燕山南麓,近年来驴不断发生马媾疫病,从1991年3月中旬起,在滦县南部的陈庄、前羿各庄、后羿各庄、姚庄等四个村发生驴的马媾疫病。病源是陈庄的个体配种户吴仲民家的两头种公驴传播的。3月21日开始在上述四个村。

马媾疫锥虫SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立

为建立一种特异、快速的媾疫锥虫检测方法,本研究通过PCR方法从马媾疫锥虫动基体基因组中扩增得到395 bp的特异的保守序列,将其克隆到pMD-18T载体中构建重组质粒标准品,以10倍倍比稀释的质粒标准品为模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立马媾疫锥虫荧光定量PCR的检测方法。结果表明:该方法的检测灵敏度可达到1拷贝/μL,并且与马属动物其他传染病无交叉反应。其组间及组内变异系数分别小于3.183%和3.842%。该方法的建立为快速及特异性检测马媾疫锥虫提供了有效的方法。

伊氏锥虫、马媾疫锥虫、布氏锥虫、刚果锥虫的18S rDNA部分序列测定与系统发育关系

对伊氏锥虫(Trypanosomaevansi):新疆株(XJCA)、湖北株(HBM)、云南株(YNB)、广东株(GDB2);马媾疫锥虫(Trypanosomaequiperdum)、布氏锥虫(Trypanosomabrucei)、刚果锥虫(Trypanosomacongolense)提取基因组DNA,根据已报道的伊氏锥虫株18SrDNA基因序列设计合成引物,用PCR扩增了锥虫虫株基因组DNA,伊氏锥虫新疆株、湖北株、云南株、广东株、布氏锥虫、刚果锥虫均为373bp的片段;马媾疫锥虫为372bp的片段,PCR产物经电泳鉴定后用试剂盒回收纯化,纯化后PCR产物经连接、转化后测序,将测得的序列用DNAMAN软件分析并与国外已发表的相应序列进行了同源性比较,并绘制了系统发育进化树。结果与国外AJ009153、AJ223564、D89527株同源性达到99%～100%,与另外11株同源性75%。本研究为锥虫分子流行病学研究及分类研究打下基础。

马媾疫锥虫PCR检测方法的研究

根据GenBank中公布的马媾疫锥虫大环kDNA基因序列,设计合成一对特异性引物,通过对PCR扩增条件的优化,建立了检测马媾疫锥虫的PCR方法。用建立的PCR方法检测马媾疫锥虫、马伊氏锥虫和马焦虫,仅马媾疫锥虫扩增出与实验设计相符的395bp的条带,其余病原体检测均为阴性。灵敏性试验表明:建立的PCR方法最低能检出0.2 pg/μL的马媾疫锥虫DNA。研究建立的马媾疫锥虫PCR方法,具有快速、敏感、特异等优点,可用于临床上马媾疫锥虫感染的检测。

马媾疫微量补体结合的改良试验

利用美国国家兽医服务实验室 (NationalVeterinaryServicesLaboratories)提供的抗原、标准阳性/阴性血清和中国兽药监察所提供的溶血素、补体 ,建立马媾疫微量补体结合试验方法。该试验方法简便易行 ,结果易判定 ,重复性强 ,在不降低敏感性的条件下又缩短了试验时间。

马混合感染马媾疫锥虫与马巴贝斯虫病的诊治

妊娠后期母马混合感染马媾疫锥虫与马巴贝斯虫 ,临床症状较复杂 ,经实验室检查确诊后 ,主要用贝尼尔等对症及辅助治疗后 。

建议将伊氏锥虫和马媾疫锥虫更名为布氏锥虫伊氏亚种和马媾疫亚种

伊氏锥虫(Trypanosoma<Trypanozoon>evansi<Stell,1885>Balbiani,1888)和马媾疫锥虫(T.(T)equiperdum,Doflein,1901)是我国广泛存在的两种对家畜有致病性的锥虫。在分类上。

马媾疫的综合防治

马媾疫是媾疫锥虫所引起的慢性原虫病,寄生于马属动物的泌尿生殖器官黏膜内。1病原马媾疫锥虫是一种单形性虫体,长18—34微米,宽1—2微米。呈卷曲的柳叶状,前端尖锐,后端稍钝,虫体中央有一个椭圆形的核,并有由后向前延伸的鞭毛和波动膜。锥虫在宿主体内进行分裂增殖,一般沿体长轴纵分裂,由一个分裂为二个虫体。它的传播主要是因病畜与健康畜交配时,由于生殖器官黏膜的接触而感染。

布氏锥虫马媾疫亚种体外培养的研究

用小白鼠腹腔巨噬细胞滋养层系统和无细胞培养系统成功地培养了布氏锥虫马媾疫亚种。开始建立无细胞培养系统培养时,从第6天起每日补种少量滋养层细胞系统培养的虫体,于3周内逐步建立了适应于无细胞培养系统的锥虫群体。长期连续培养两种系统培养物的虫密度均可稳定保持在7—10.O×10~5/ml左右,虫体有规律地呈岛屿状密集分布。培养液内2—ME和马血清的适宜浓度分别为0.3mM和20%,添加0.1mM次黄嘌呤可使培养物虫密度增加1倍左右,用烛罐可取代CO_2培养箱。体外连续培养120天。锥虫仍保持细长形态,具表面被膜,对小白鼠有感染性。

媾疫锥虫、伊氏锥虫差异抗原的分离鉴定

以50％饱和硫酸铵沉淀的兔抗伊氏锥虫高免血清球蛋白制备琼脂糖-4B免疫吸附柱,对马媾疫锥虫超声全虫可溶性抗原进行反亲和层析免疫吸附。当抗原量在抗体吸附范围内时,最先洗脱下来的成分即为媾疫锥虫特异性抗原(差异抗原)。该抗原与媾疫锥虫血清抗体反应较强,与伊氏锥虫血清抗体反应较弱,经SDS-PAGE检测,其为分子量大于68000的大分子蛋白。

马媾疫研究进展

马媾疫是严重威胁马属动物的重要疾病,能够引起病畜皮肤丘疹、贫血、瘦弱、运动失调、面部麻痹,最后衰竭死亡。为更加有效防治马媾疫,本文从马媾疫锥虫病的病原学特征、流行病学、临床症状、诊断方法和防治措施等方面进行了综述。此外,对马媾疫的实验室检测、药物研发和疫苗研制提出了新的思路,为马媾疫的实验室诊断、临床治疗及预防提供参考。

布氏锥虫伊氏亚种和马媾疫亚种在不同气相条件下的体外培养

在烛缸和密闭培养的气相下,用我们改良的Baltz无细胞培养系统培养了3个已适应于体外培养的布氏锥虫伊氏亚种虫株、1个布氏锥虫马媾疫亚种虫株和3个未经培养的布氏锥虫伊氏亚种虫株(未适应株),并与常规CO_2培养箱(含5%CO_2的空气)培养作比较。所有适应株和未适应株均可在烛缸和密闭培养条件下正常生长,连续培养1—2月,虫体形态、生长特性和对小白鼠的致病力与CO_2培养箱培养相同。培养物的虫密度,密闭培养明显高于烛缸和CO_2培养箱培养,CO_2培养箱培养一般稍高于烛缸培养。密闭和烛缸培养的成功,对普及锥虫体外培养技术有很大实用价值,也提示应进一步研究培养的最佳气相条件。此外,不经饲养层培养系统适应直接建立3个未适应株的无细胞培养系统的培养也是重要进展。

一例马媾疫的防治体会

近年兰坪县某地马属动物发生了一起公马阴囊、包皮、阴茎水肿,母马阴户、乳房肿胀为主要特征的小范围流行病。诊断为马媾疫,经治疗均愈。疫点内受危害的马属动物及时进行预防注射用药,按＂早、快、严、小＂的要求扑灭了疫情。笔者结合这次马媾疫防治实践,浅谈马媾疫的防治。

治疗马媾疫的几点体会

马媾疫是马属动物的一种寄生性原虫病,病原体是媾疫锥虫,不需要中间宿主,通过交媾而相互感染,由于频繁的畜主交易和私人的不科学配种,马媾疫病马很多,通过对31例母马,6例种公马,2例种公驴媾疫病的治疗,总结出以下几点体会,供兽医同仁参考。①母马患媾疫后,最明显的症状是尿频,尿淋漓,阴唇肿胀,阴道粘膜潮红水肿,有黄色粘性分泌物流出.很象是发情表现,但是直肠检查,卵巢不发育。如果发病时间比较短,用新胂凡钠明(914)进行治疗。同时进行综合治疗,补钙以增强新肿凡钠明的疗效,降低其毒性反应,并有强心作用。阴道消毒剂的使用——乌洛托品可使尿频。

马媾疫的综合防治

2010年7月宁蒗县新营盘乡有2个村发生了马媾疫病17例,通过治疗全部痊愈,现将综合防治经验介绍如下。 1病因 马媾疫锥虫的形态与伊氏锥虫无明显区别,但其生物学特性则有很大差异。

Trypamidium治序马媾疫试验报告

据资料报告Trypamidium对牛、马锥虫病疗效确实,並有一定时限的预防保护作用。但该药对媾疫锥虫(T·eguiperdum)引起的媾疫病的疗效情况尚未见报道。我们于1987年3～11月。在我省鲁甸县龙树区选择媾疫自然发病马25匹,进行了Trypamidium临床疗效的初步观察,现将结果报告于下。 1 材料和方法 1.1 试验动物:鲁甸县龙树区为媾疫重疫区(伊氏锥虫非疫区),选择阴囊、阴门肿胀、消瘦、不孕、跛行等明显症状,並经伊氏锥虫间接血凝常规检验(抗原由曲靖地区兽医站生产,效价1:5260以上.批号8612029)。