冬虫夏草子囊孢子及其无性型在培养过程中的形态学观察

在显微镜下挑取冬虫夏草弹射的单子囊孢子接种于平板上,18℃培养,在显微镜下观察其生长过程,发现单子囊孢子产生芽管后,直接进行微循环产孢,产生被粘液包裹的球状分生孢子团,经过缓慢生长形成菌落后,开始无性繁殖产生大量分生孢子。取其分生孢子接种到液体培养基中,在18℃下振荡培养,观察其生长过程。分生孢子液态培养主要经过:(Ⅰ)分生孢子萌发进行微循环产孢;(Ⅱ)孢子萌发产生菌丝;(Ⅲ)菌丝产生芽生孢子;(Ⅳ)芽生孢子生长形成新的芽孢。结果表明,分离得到的冬虫夏草的无性型是中国被毛孢,且分生孢子在液体培养中也存在微循环产孢的现象。

酿酒酵母子囊孢子单倍体形成和制备的研究

实验研究了二倍体酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株GJ2008和GGFS16的孢子形成和分离条件,并获得了相应的单倍体细胞。实验结果表明,酿酒酵母GJ2008和GGFS16在McClary培养基上22℃培养7d,产孢率分别为91.46%和87.20%。在此条件下,以浓度为0.3g/L的蜗牛酶37℃水浴处理,孢子释放率分别为66.15%和67.35%。对获得的单倍体菌株进行发酵实验,并测定其酒精发酵性能,为融合实验做好铺垫。

粗腿羊肚菌子囊孢子萌发过程及其细胞核行为

用4μg/mL 4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)对细胞核染色,采用激光共聚焦显微成像技术观察粗腿羊肚菌(Morchella crassipes)子囊孢子的萌发过程。新鲜的粗腿羊肚菌子囊孢子呈椭圆状,大小13.0~15.3μm×21.5~24.0μm,成熟子囊孢子的细胞核数量为18~32个;CYM液体培养基,23℃培养6h后子囊孢子体积逐渐膨大至初始体积的1.7~2.9倍,泡囊化现象明显;6~12h开始形成芽管,泡囊逐渐消失,出芽点在椭圆形细胞的一端形成或两端先后形成,数量不等的细胞核由子囊孢子内迁至芽管中,形成多核丝状;芽管生长至20~30μm后,在出芽点与孢子连接处形成隔膜,12~24h后,随着芽管的持续生长,形成新的隔膜和菌丝细胞,菌丝细胞多核;芽管及初生菌丝直径6~8μm,约为子囊孢子直径的1/3;24h内没有观察到初生菌丝之间发生细胞融合现象。

油菜菌核病菌子囊孢子对茎叶的直接侵染研究

为了解苗期发生油菜菌核病的致病机理,采用室内人工接种法,研究不同温度、接种浓度、接种方法、添加外源营养物等条件下核盘菌子囊孢子对甘蓝型油菜叶片和茎秆的直接侵染特性。结果表明,核盘菌子囊孢子在温度为10-30℃之间均可萌发,当温度为20-25℃时最适宜孢子萌发和芽管生长;在20-25℃子囊孢子接种油菜无伤或刺伤叶片、茎秆发病率最高;刺伤叶片或茎秆与无伤组织相比有利于子囊孢子侵染;与茎秆相比,子囊孢子更容易侵染油菜叶片;106/mL子囊孢子液及在子囊孢子液中添加2%蔗糖或葡萄糖有利于子囊孢子侵染油菜;用子囊孢子液接种油菜叶片和茎秆,其发病率显著低于菌丝块和带菌花瓣接种。

黑脉羊肚菌子囊孢子的形态和细胞学特征

黑脉羊肚菌子囊孢子绝大多数（92.8％）呈椭圆形，少数（7．2％）为圆形。细胞核的数目不等，多数单核，少数为双核。细胞质的密度以及细胞核的形状和在孢子内的定位也有一定的差别。萌发初期，孢子因吸水体积膨胀，多数孢子的核不发生分裂，直接转移到孢子的一极，细胞核所在位置的壁向外凸出形成芽管，细胞核也随之进入到芽管，位于或靠近芽管的顶端。

红外高温热敏对桑椹菌核病菌子囊孢子的杀灭试验

桑椹菌核病是制约果桑生产的一个瓶颈性问题,目前多采用化学药剂对其进行防治.试验用红外高温热敏对桑椹菌核病菌的子囊盘进行照射,设立3个不同处理时间,即30s,45s,60s,研究红外线对子囊孢子杀灭的瞬时温度.结果表明,当红外高温热敏装置对其子囊盘照射30s和45s可使子囊盘变形皱缩,但不能使子囊盘内的子囊孢子灭活;照射60s,其温度上升为125℃,不仅能使子囊盘明显变形皱缩,而且可以有效地杀灭子囊盘内的子囊孢子.其试验结果可为工业上生产手持式红外高温热敏装置提供生物学实验依据.

洋香瓜黑点根腐病菌子囊孢子在土壤中的分布与发芽

在全球发生严重的洋香瓜黑点根腐病的病原菌是属于子囊真菌的Monosporascus cannonballus,其每个子囊内仅产生一个、或偶有两个子囊孢子为其主要特征.该子囊孢子被认为是本病原菌在土壤中的存活单位及最初感染源,由于子囊孢子不易发芽,故它在土壤中之生态行为仍尚未全明了.本研究利用一般的网筛法发现其在田间土壤中的子囊孢子数不超过5.2 ascospores/g soil,而使用新研发的循环沉淀法发现子囊孢子在田间表土0-10 cm的水平分布介于3.3-20.2(平均9.9)ascospores/g soil,而垂直分布(0-50 cm)则介于4.1-12.3 ascospores/g soil,经统计分析,差异不显著(p=0.05).在实验室内比较网筛法与循环沉淀法从人工病土中萃取子囊孢子的回收率,则分别为27.5与98.6%.在子囊孢子发芽方面,利用Stanghellini等人研发的土壤试管法发现供试之葫芦科作物皆能促使黑点根腐病子囊孢子发芽,非葫芦科作物则否.但本法仅能观察到已发芽的子囊孢子对植株根部之侵入率,未能反应准确的发芽率,因此本研究新研发包埋子囊孢子试管法,试验结果显示子囊孢子的发芽受到时间、植株根圈效应与土壤等多因子的影响,越靠近根表的子囊孢子越早发芽,且发芽率越高,其中处理后第21与28天,在距离根表2 mm内子囊孢子发芽率皆高达83%以上.

冬虫夏草子囊孢子的弹射

在四川康定和西藏那曲两地,对虫草子座的光照强度处理,结果表明:两地的虫草子囊孢子弹射时间有差异;光照强度不同,子囊孢子弹射的数量、时间和萌发率均不同。要使冬虫夏草子囊孢子正常弹射和提高萌发率,必须满足温度、湿度和日照三个基本条件。本结果为人工培植冬虫夏草奠定基础。

环境诱导酵母产生子囊孢子的营养条件研究

研究了诱导酵母子囊孢子产生的营养条件。在氮源缺乏条件下 ,单独的乙酸盐可以诱导酵母菌子囊孢子的产生 ,在葡萄糖配合下 ,丙酸钠、草酸钠、柠檬酸钠等羧酸盐皆可以诱导子囊孢子产生 ,蛋白胨和过量的微量元素抑制子囊孢子的产生。

冠突散囊菌子囊孢子粗多糖抗氧化活性的比较分析

采用超微粉碎法、超声波法、反复冻融-研磨法,对冠突散囊菌子囊孢子进行破壁处理,探讨不同破壁方法对孢子粗多糖抗氧化活性的影响。结果表明,破壁率由高至低依次为反复冻融-研磨法(93.73%)、超微粉碎法(82.27%)、超声波法(66.54%),粗多糖的提取率分别为2.18%、2.06%、1.84%,均显著高于未破壁孢子(1.15%)。抗氧化试验表明,3种破壁孢子粗多糖均具一定抗氧化活性,且与质量浓度间存在着显著量效关系。以超微粉碎法破壁孢子粗多糖活性为最强,在其质量浓度为2.50 mg/mL时,对DPPH、OH、ABTS^+三种自由基清除能力分别为89.13%、95.22%、80.26%,铁离子还原能力为0.78。反复冻融-研磨组和超声波组粗多糖活性低于超微粉碎组,说明此型号粉碎机低温下的高速剪切作用对冠突散囊菌子囊孢子多糖分子造成的损伤低于超声空化作用与反复冻融,适宜用于冠突散囊菌子囊孢子的破壁。

油菜苗期室内抗菌核病性研究──Ⅱ．花期子囊孢子喷雾接种法鉴定抗性

油菜苗期室内抗菌核病性研究──Ⅱ．花期子囊孢子喷雾接种法鉴定抗性刘红雨，刘勇，曾正宜关键词油菜，菌核病，子囊孢子接种，抗性鉴定ＳＴＵＤＩＥＳＯＮＴＨＥＲＥＳＩＳＴＡＮＣＥＯＦＲＡＰＥＳＥＥＤＳＥＥＤＬＩＮＧＳＴＯＳｃｌｅｒｏｔｉｎｉａｓｃｌｅｒｏｔｉ...

温度对油菜黑胫病菌(Leptosphaeria biglobosa)假囊壳和子囊孢子发育的影响

油菜黑胫病是双球小球腔菌(Leptosphaeria biglobosa)引起的一种真菌病害,在油菜产区广泛发生。为了解我国特定气候和栽培条件下的流行规律,通过室内试验和田间试验探讨了温度对罹病油菜茎秆上L.biglobosa假囊壳和子囊孢子发育的影响。室内试验结果表明:在保证环境水分(湿度)充足的条件下,温度影响L.biglobosa假囊壳和子囊孢子的发育进程。在4℃下培养105 d,成熟假囊壳比例仍低于1%,而在10、15、20和25℃下分别培养66.5、57.9、34.5和47.3 d后,成熟假囊壳比例达到50%。可见,10~25℃较4℃更适合L.biglobosa假囊壳和子囊孢子发育。武汉的田间试验结果表明:L.biglobosa越夏后(8月底),在平均气温26℃和平均降雨量为2.7 mm/d的条件下,经过56.3 d成熟假囊壳的比例达到50%。L.biglobosa越秋后(10月底),在平均气温为12℃和平均降雨量为1.5mm/d条件下,仅需28.1 d成熟假囊壳的比例即达到50%。可见秋末冬初的环境条件较夏末秋初更加适合L.biglobosa假囊壳和子囊孢子发育。研究结果还表明:L.biglobosa子囊孢子在水琼脂培养基上培养2 h后(20℃)萌发率达到100%,萌发方式是两端细胞先萌发,中间细胞后萌发,子囊孢子能直接侵染油菜子叶,引起坏死病斑。

酿酒酵母(Saccharomyces cereisiae)子囊孢子形成条件的探讨

本文对几株酿酒酵母在各种不同成分的生孢培养基上进行了生孢比较实验,探讨了酿酒酵母菌子囊孢子形成的最适生理状态、生孢时间及鉴别子囊孢子的染色技术。

面包酵母子囊孢子的形成条件及细胞学研究

通过对面包酵母(Saccharomyces cerevisiae)耐干性菌株 X-8在几种生孢条件下生子囊孢子的研究,发现菌株 X-8生孢的最适培养基为 Kleyn 培养基,最适培养温度为28℃。在液体中生孢菌体需要大通气量,其生孢的最佳细胞群体密度为8.0×10^(?)个细胞/ml。同时还发现,即使在恒温条件下,菌株 X-8在秋天较其他季节更易生孢子。在上述条件下,比较 X-8和不耐干的 CY26菌株,结果菌株 X-8的生孢能力远远大于菌株 CY26。X-8的电镜照片显示出生孢过程中子囊内的一系列变化,即随着生孢时间的增加,造孢剩质逐渐减少,孢子及孢子壁逐渐完善与成熟。孢内的细胞核在孢子形成的整个过程中一直清晰可见。

小麦白粉菌子囊孢子形成过程观察

小麦白粉菌在小麦生长后期发生有性生殖;在病叶上形成黑色的子囊壳。子囊壳经过一段时间的后熟作用才成熟。成熟的子囊壳经保湿培养能够释放子囊孢子。我们对成熟子囊在保湿培养过程中的细胞学变化进行了观察,下面为观察结果。 1.材料和方法 于小麦蜡熟期,在感病植株的下部,采集着生子囊壳多的病叶,置于阴凉处风干,在4℃冰箱中贮存半年左右,取出进行实验。

羊肚菌及其近缘属子囊孢子扫描电镜观察研究

对包括羊肚菌属14个样品、盘菌属1个样品、钟菌属2个样品、鹿花菌属2个样品共19个样品的子囊孢子进行了扫描电镜观察研究,结果表明子囊孢子大小、形态及外壁纹饰在羊肚菌及其近缘属间差异明显,可作为羊肚菌及近缘属的分类特征之一。在羊肚菌属中,依据子囊孢子外壁纹饰可分为2类:一类是子囊孢子表面有肋状条纹,且纹脊较深,包括Morchella angusticeps、M.conica、M.elata、子囊果形态具有三者之间过度特征的种及M.deliciosa,主要属于黑羊肚分枝;另一类是子囊孢子表面光滑或纹脊较浅,包括M.esculenta、M.costata、M.miyabeana、M.crassipes、M.rotunda和M.umbrina,主要是黄羊肚菌分枝。

油菜菌核病菌室内子囊孢子诱导和收集

油菜菌核病(Sclerotinia sclerotiorum(Lib)de Bary)菌核在10℃黑暗、湿润条件下经过2个月以上的低温诱导处理后,在15～20℃自然散射光下即可在室内产生子囊盘。采用真空抽气法可收集到洁净、干燥的新鲜子囊孢子,

冬虫夏草子囊孢子的初步研究

本文通过对冬虫夏草子囊孢子的收集、保存和萌发的研究 ,认为对于子囊孢子的室内收集经济有效 ,收集方法简单方便 ;在 4种保存方法中冷冻方法最好 ,可保持一年以上仍有很好的萌发率 (可达 86 5 % % ) ,生理盐水和甘油浸泡不能成为保存方法 ;

冬虫夏草显微结构再观察和子囊孢子发育研究

经过对冬虫夏草模式标本,来自不同地区包括尼泊尔和不丹的冬虫夏草标本以及类似冬虫夏草的甘肃虫草,阔孢虫草,多虫草和尼泊尔虫草等标本或模式的形态学和子囊孢子发育生理学的研究,证明尼泊尔和多技虫草均为冬虫夏草的同物异名。阔孢虫草和甘肃虫草也可能是冬虫夏草的同物异名。