人子宫内膜抗原的纯化与鉴定

采用胶原酶、250μm、40μm筛和亲和层析技术,自人子宫内膜组织提纯子宫内膜抗原。SDS-PAGE分析见分子量为46、36和25KD的三条区带;过碘酸-Schiff试剂染色证实为糖蛋白。高压液相色谱层析示子宫内膜抗原富含16种氨基酸。各类元素和果糖测定结果表明,子宫内膜抗原含5种元素,不含果糖。

正常人与子宫内膜异位症患者子宫内膜抗原的研究

为了探明子宫内膜异位症(EMT)患者的子宫内膜与正常人子宫内膜的差异,我们对两者子宫内膜抗原(EMAg)进行了对比,现报告如下。1.材料与方法1.1 子宫内膜组织来源5例正常人子宫内膜取自有规则行经周期和正常生育史的妇女,经妇科检查证实无盆腔疾病;EMT患者6例均经腹腔镜检查证实后刮取其子官内膜。两组均采静脉血,分离血清待测。

重组子宫内膜抗原制备及其在蛋白芯片检测中的应用

目的探索一种纯度高、简便、低成本制备抗子宫内膜抗原的系统和便捷的检测方法。方法通过YK537大肠杆菌表达系统制备人重组子宫内膜抗原蛋白。获得蛋白制备蛋白芯片,利用蛋白芯片方法和酶联免疫吸附法(ELISA)方法检测71例不孕患者抗子宫内膜抗体。结果重组子宫内膜蛋白基因序列克隆入表达载体phoA下游并在大肠杆菌中成功表达。SDS-PAGE和HPLC的结果显示重组子宫内膜抗原蛋白纯度大于95%。通过蛋白芯片和ELISA检测显示蛋白芯片和传统ELISA方法的受试者工作特征曲线(ROC曲线)显示结果一致,曲线下面积为0.89。结论新设计的重组子宫内膜抗原蛋白能在大肠杆菌分泌表达系统简便、高效地表达,将获得的新抗原用于蛋白芯片,操作简便,结果可信,有望成为临床检测抗子宫内膜抗体的手段。

抗子宫内膜抗体和子宫内膜异位症

目的：研究抗子宫内膜抗体（ＥＭＡｂ）与子宫内膜异位症（内异症）的关系。方法：改良法提取、纯化正常人及内异症患者的子宫内膜抗原（ＥＭＡｇ），分析其氨基酸组成，并用ＳＤＳＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析两者蛋白质组成及抗原特异性；建立ＥＬＩＳＡ方法并测定、分析正常人及内异症患者血清ＥＭＡｂ。结果：正常人ＥＭＡｇ有２条蛋白质条带（４８０ｋＤ和大于９７．４ｋＤ）；内异症患者则有３条蛋白质条带（４６０、５４０和大于９７．４ｋＤ），前者仅１条蛋白质条带（大于９７．４ｋＤ），后者则３条蛋白质条带可与ＥＭＡｂ特异反应，且两者在氨基酸组成上亦有差异；内异症患者血清ＥＭＡｂ阳性率明显高于正常人及非内异症（其它妇科疾病）患者。结论：ＥＭＡｂ与内异症密切相关。

子宫内膜异位症的免疫学研究

对子宫内膜异位症患者的免疫学状况进行了研究。结果表明，正常人与子宫内膜异位症患者的子宫内膜抗原在组分、组成成分上有明显差异；建立定量检测抗子宫内膜抗体、游离子宫内膜抗原及其免疫复合物的ＥＬＩＳＡ法，发现子宫内膜异位症患者这三项指标的阳性率都有显著升高；同时伴有广泛的细胞免疫、体液免疫紊乱。揭示在子宫内膜异位症患者，抗子宫内膜抗体可能对子宫内膜组织产生免疫病理损伤。