通过调控VEGF信号通路探讨补肾通络方对子宫内膜损伤后HUVECs促增殖、血管生成和迁移作用

目的探析补肾通络方对子宫内膜损伤后人脐静脉内皮细胞模型(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)促增殖、血管生成和迁移作用,及对调控血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)信号通路的影响。方法选择2020年1月—2021年12月,购自武汉大学典型培养物保藏中心的12份HUVECs,给予50 ng/mL VEGF处理后,分别实施20%、10%、5%补肾通络方含药血清和无补肾通络方含药血清干预处理。比较补肾通络方对子宫内膜损伤后,VEGF信号通路的影响及对HUVECs增殖、迁移、血管生成的影响。结果比较20%、10%、5%补肾通络方含药血清和无补肾通络方含药血清干预后24 h的HUVECs活性和24 h细胞生长检测所得OD值,差异无统计学意义(P>0.05);20%补肾通络方含药血清组48 h、72 h的HUVECs活性、细胞生长检测所得OD值及VEGF表达量、HUVECs细胞迁移数均高于10%、5%补肾通络方含药血清组和无补肾通络方血清组,差异有统计学意义(P<0.05)。20%补肾通络方含药血清干预组的血管网状结构完整度优于10%、5%补肾通络方含药血清和无补肾通络方血清,无补肾通络方血清干预组的血管网状结构完整度最差,补肾通络方可逆转VEGF抑制细胞活性的趋势,促进HUVECs的血管形成。结论将补肾通络方应用到子宫内膜损伤中,可逆转VEGF抑制细胞活性的趋势,增强HUVECs的细胞活性,促进细胞增殖、迁移,促进血管新生,促进内皮细胞网络结构的重建,利于促进内皮细胞损伤的修复,利于子宫内膜功能的恢复,且与补肾通络方含药血清浓度呈一定量效关系。

羊膜细胞外基质与膀胱细胞外基质材料修复大鼠子宫内膜损伤

背景:大量研究已证实,羊膜细胞外基质与膀胱细胞外基质材料均可作为干细胞载体用于子宫内膜损伤的治疗,但是有关两种材料的比较研究相对少见。目的:对比羊膜细胞外基质与膀胱细胞外基质材料作为干细胞载体治疗子宫内膜损伤的差异。方法:采用全骨髓贴壁法分离纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞。分别制备SD大鼠羊膜细胞外基质与膀胱细胞外基质材料,然后将骨髓间充质干细胞分别接种于两种材料表面,检测细胞增殖与黏附情况。将40只SD大鼠随机分为4组(n=10),除假手术组外,子宫内膜损伤组、羊膜细胞外基质组、膀胱细胞外基质组均通过机械干预的方式建立子宫内膜损伤模型,分别将羊膜细胞外基质/骨髓间充质干细胞复合物、膀胱基质细胞外基质/骨髓间充质干细胞复合物移植至羊膜细胞外基质组、膀胱细胞外基质组大鼠损伤内膜部位,移植后14,28 d取材检测,苏木精-伊红染色观察大鼠子宫内膜组织形态,酶联免疫吸附法分析子宫内膜组织中碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子1与血管内皮生长因子水平,免疫组化染色分析子宫内膜组织中波形蛋白与CD34表达。结果与结论:(1)两种细胞外基质材料均有利骨髓间充质干细胞的增殖,相较于膀胱细胞外基质材料,羊膜细胞外基质材料可促进骨髓间充质干细胞的黏附;(2)相较于假手术组,子宫内膜损伤组碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子1与血管内皮生长因子水平降低(P <0.01),子宫内膜组织形态发育不良,内膜厚度与腺体数量减少,波形蛋白与CD34阳性表达减少(P <0.01);相较于子宫内膜损伤组,羊膜细胞外基质组、膀胱细胞外基质组碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子1与血管内皮生长因子水平均升高(P <0.05或P <0.01),子宫内膜组织形态明显改善,内膜厚度与腺体数量增加,波形蛋白与CD34阳性表达增加(P <0.05或P <0.01),并且羊膜细胞外基质组的改善作用优于膀胱细胞外基质组(P <0.05);(3)结果表明,相较于膀胱细胞外基质材料,羊膜细胞外基质材料作为骨髓间充质干细胞的载体可进一步促进损伤子宫内膜的修复。

金丝桃苷纳米粒与骨髓间充质干细胞协同给药修复子宫内膜损伤

目的体外细胞实验评价金丝桃苷壳聚糖纳米粒(hyperoside/chitosan-nanoparticles,Hyp/CS-NPs,Hyp-NPs)对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的影响及作用机制;体内动物实验探讨Hyp-NPs与BMSCs协同修复大鼠子宫内膜损伤的效果。方法采用流式实验鉴定BMSCs;采用离子交联法制备Hyp-NPs,激光粒度分析仪及透射电镜进行表征评价;采用划痕实验检测Hyp-NPs对BMSCs的迁移作用;以及构建NRF2慢病毒载体,检测Hyp-NPs对BMSCs的氧化损伤模型的作用机制;动物实验将Hyp-NPs与BMSCs协同移植入子宫内膜损伤大鼠模型宫腔中,利用HE、Masson、IHC、TUNEL及ELISA实验从子宫内膜的一般病理、纤维化、干细胞募集及炎症情况,评价其对大鼠子宫内膜损伤的修复作用及妊娠功能。结果成功分离培养BMSCs;成功制备Hyp-NPs;划痕实验表明Hyp-NPs可促进BMSCs迁移;通过成功构建BMSCs的慢病毒NRF2载体以及细胞氧化损伤模型,表明Hyp-NPs可通过激活NRF2调控BMSCs生物轴;动物实验表明Hyp-NPs与BMSCs协同给药可增加子宫内膜厚度及腺体数量,抗纤维化、抗凋亡及抗炎等促进干细胞归巢,恢复子宫内膜损伤大鼠的妊娠功能。结论Hyp-NPs与BMSCs协同给药可修复子宫内膜损伤。

防治子宫内膜损伤的策略

子宫内膜损伤是指由宫腔内有创诊疗操作、炎性损伤、物理辐射、化学药物损伤及分娩相关憩室等多种因素导致的内膜基底层损伤。应用透明质酸、脱细胞基质、羊膜、富含血小板血浆、间充质干细胞(尤其是基于支架的治疗递送)可减少损伤后瘢痕形成,促进子宫内膜生长修复,为修复受损的子宫内膜,提高其容受性,改善生育结局提供新的治疗思路。

加味四物乌沉汤治疗肝郁血瘀证子宫内膜损伤致月经量少的临床效果及相关机制

目的 探讨加味四物乌沉汤治疗肝郁血瘀证子宫内膜损伤致月经量少的临床效果及相关机制。方法 选取2020年1月—2022年12月收治的180例肝郁血瘀证子宫内膜损伤致月经量少,随机分为对照组、观察组,每组90例,对照组予以常规西药治疗,观察组在此基础上予以加味四物乌沉汤治疗,连续治疗6个月经周期。比较2组临床疗效、中医证候积分、子宫内膜厚度、经血量、行经时间、子宫内膜动脉血流情况[血流搏动指数(PI)、血管阻力指数(RI)、收缩期最高流速(PSV)]、性激素[雌二醇(E_(2))、黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)]、血管内皮生长因子(VEGF)/转化生长因子-β1(TGF-β1)信号通路相关因子及不良反应。结果 观察组总有效率91.11%(82/90)高于对照组76.67%(69/90)(P<0.05)。治疗3、6个周期,观察组各中医证候积分低于对照组,经血量、子宫内膜厚度高于对照组,行经时间长于对照组(P<0.05);治疗3、6个周期,观察组RI、PI、PRL、FSH低于对照组,PSV、E_(2)、LH、VEGF、TGF-β1高于对照组(P<0.05)。2组不良反应发生率比较无显著差异(P>0.05)。结论 加味四物乌沉汤治疗肝郁血瘀证子宫内膜损伤致月经量少具有良好的临床效果,能改善临床症状及子宫内膜血流灌注,其机制可能与改善子宫内膜厚度、调节性激素水平及VEGF/TGF-β1信号通路有关。

富血小板血浆在子宫内膜损伤修复中的研究进展

子宫内膜损伤是生殖医学中面临的棘手问题,常由严重创伤或感染所致。临床上常表现为不孕,反复流产以及反复种植失败。改善生育结局仍是子宫内膜损伤治疗中的难点。富血小板血浆是抽取外周血液,通过离心方式获取的血小板浓缩物,富含多种生长因子,近年来被广泛应用于组织的再生修复。本文旨在通过综述富血小板血浆在子宫内膜损伤修复中的作用机制以及研究现状,为修复子宫内膜损伤提供新思路。

子宫内膜损伤病因研究进展

子宫内膜损伤是指由各种致病因素作用下导致的子宫内膜基底层受损及内膜修复障碍导致的疾病。宫腔操作、宫腔感染、遗传因素等均与子宫内膜损伤的发生密切相关。其病因复杂,在临床上缺乏有效的预防及治疗措施,其严重影响女性的身心健康。本文就子宫内膜损伤的病因研究进展进行综述,为子宫内膜损伤的预防及治疗提供理论依据。

制备金丝桃苷纳米粒修复子宫内膜损伤

背景:金丝桃苷具有抗炎、抗氧化等多种药理作用,但将其应用于修复子宫内膜损伤的研究并不多见。目的:制备金丝桃苷纳米粒,利用泊洛沙姆407搭载金丝桃苷纳米粒,研究其对大鼠子宫内膜损伤的修复作用。方法:分别制备金丝桃苷纳米粒、泊洛沙姆407水凝胶与泊洛沙姆407水凝胶搭载金丝桃苷纳米粒。取24只雌性SD大鼠,随机分4组,每组6只:模型组、单纯水凝胶组、载药水凝胶组以搔刮法建立子宫内膜损伤模型,分别向子宫内注射PBS、泊洛沙姆407水凝胶、泊洛沙姆407水凝胶搭载金丝桃苷纳米粒,空白对照组仅行开腹不进行造模。造模7 d后取材,苏木精-伊红染色观察子宫内膜形态学变化,采用ELISA法检测子宫内膜组织中白细胞介素1β、白细胞介素8、肿瘤坏死因子α水平,免疫荧光染色检测宫内膜组织中血管内皮生长因子、角蛋白、波形蛋白的表达。结果与结论:①苏木精-伊红染色显示,与空白对照组比较,模型组大鼠子宫内膜层变薄,内膜结构不完整,血管及腺体及明显减少稀疏;与模型组比较,单纯水凝胶组大鼠子宫内膜增厚、内膜结构较完整,载药水凝胶组大鼠子宫内膜增厚、内膜结构较完整、腺体较丰富;②与空白对照组比较,模型组的白细胞介素1β、白细胞介素8、肿瘤坏死因子α水平均升高(P<0.01);与模型组比较,单纯水凝胶组、载药水凝胶组的白细胞介素1β、白细胞介素8、肿瘤坏死因子α水平均下降(P<0.01);③免疫荧光染色显示,与空白对照组比较,模型组的血管内皮生长因子、角蛋白、波形蛋白表达均降低(P<0.01);与模型组比较,载药水凝胶组血管内皮生长因子、角蛋白、波形蛋白表达均升高(P<0.01),单纯水凝胶组血管内皮生长因子表达升高(P<0.01);④结果表明,水凝胶搭载金丝桃苷纳米粒对大鼠子宫内膜损伤有修复作用。

中医药防治人流术后子宫内膜损伤的研究进展

目前,我国人工流产的妇女呈现低龄化、未婚未育、重复流产率高的趋势。人工流产术可造成子宫内膜不可逆的损伤,易导致宫腔粘连、薄型子宫内膜、盆腔炎,表现为月经失调、下腹痛、不孕、复发性流产等,严重影响女性身心健康。防治人工流产术后子宫内膜损伤对保护女性生育力尤为重要。然而,人工流产术后子宫内膜损伤及修复机制复杂,现代医学暂无确切诊疗手段修复损伤子宫内膜,临床上也主要采用雌孕激素类药物治疗,尚存在局限性及不良反应。祖国医学从“治未病”理念出发,运用整体观及辨证论治思想,体现了中医药在防治人流术后子宫内膜损伤方面的优势,同时无明显不良反应,且远期疗效稳定。本研究从病因病机、中医药治疗两方面进行阐述,以期使防治人流术后子宫内膜损伤的中医药治疗方案更好应用于临床。

不同负压对不全流产以及子宫内膜损伤的影响

目的 通过对自愿终止妊娠的早孕患者应用不同最大负压行人工流产术（人流）的研究,寻求安全有效的措施,以减少对子宫内膜的损伤.方法 选择在武警北京市总队医院门诊因早孕5～7周拟行无痛人流的健康患者877例,胎囊直径在1.0～2.5 cm,随机分为3组：组1共288例,负压最大500 mmHg;组2共291例,负压最大450 mmHg;组3共298例,负压最大400 mmHg;3组均由同一长期从事计划生育手术的高年资主治医师实施手术.术后观察：子宫穿孔、漏吸、术后感染及羊水栓塞;术后出血时间;不全流产率及子宫内膜损伤率.结果 3组患者手术并发症情况比较,3组患者均未发生子宫穿孔、漏吸、术后感染及羊水栓塞,仅组2中有1例因不全流产行二次刮宫术.对可疑内膜损伤的患者进行宫腔镜检查,宫腔粘连（IUA）发生率组1为9.38%,组2为4.48%,组3为0.67%,3组间差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 在孕早期实施人工流产术,选择400 mmHg作为最大负压进行吸引,并不增加不全流产的发生率,且能减少对子宫内膜的损伤,值得推广.

中医药对子宫内膜损伤修复相关信号通路的影响

子宫内膜损伤是指由于各种宫腔内的手术操作不当或次数过多,损伤子宫内膜的基底层,造成患者术后子宫内膜薄化、宫腔粘连,可引起月经及妊娠异常等表现。近年来研究结果显示,有一些细胞因子参与到了子宫内膜损伤形成过程,细胞因子通过彼此之间的传导通路产生相互作用,进而可以修复受损子宫内膜。针对影响子宫内膜损伤修复的主要细胞因子及重要信号通路的作用进行综述,为进一步探讨子宫内膜损伤的发病机制及临床治疗新手段提供参考。

子宫内膜损伤在辅助生殖中应用的研究进展

现代辅助生殖技术中,生殖医生主要通过优化胚胎质量、提高子宫内膜容受性及内膜与胚胎的同步性来提高成功率。子宫内膜损伤是在胚胎种植前通过对子宫内膜的局部机械性轻微损伤,诱导其自身修复,进而改善子宫内膜容受性,提高胚胎着床率的一种方法。目前子宫内膜损伤在临床上应用的有效性及安全性仍具有争议,关于子宫内膜损伤的目标人群尚无定论,但对反复移植失败的患者及宫腔内人工授精(IUI)患者具有改善妊娠结局的潜能,子宫内膜损伤的操作时机及具体作用机制仍需大量的研究进行探索。本文将主要从子宫内膜损伤的机制、时机及适用人群进行综述,以期为子宫内膜损伤在临床的应用提供参考。

补肾培元毓麟汤治疗子宫内膜损伤继发不孕症临床观察

目的探讨补肾培元毓麟汤治疗子宫内膜损伤继发不孕症的临床效果。方法选择南昌市洪都中医院2017年5月—2019年4月治疗的68例子宫内膜损伤继发不孕症患者作为研究对象,根据不同的治疗方法将其分为2组,各34例。接受常规治疗的患者为参照组,接受补肾培元毓麟汤治疗的患者作为研究组。结果研究组患者总有效率94.12%(32/34)高于参照组73.53%(25/34),差异具有统计学意义(P<0.05);研究组20周分娩通过率高于参照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。2组治疗后子宫内膜厚度值相比于治疗前高(P<0.05),2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论对子宫内膜损伤合并不孕症患者实施补肾培元毓麟汤治疗可有效改善患者子宫内分泌环境,刺激内膜增生,从而为妊娠提供良好条件,提高妊娠通过率。

磁共振引导下聚焦超声治疗子宫肌瘤后子宫内膜损伤及恢复情况

目的评估磁共振引导下聚焦超声(MRgFUS)治疗子宫肌瘤后发生即刻子宫内膜损伤和3个月后内膜损伤的影响因素。方法回顾性分析2016年8月至2020年10月在北京协和医院妇科筛查、北京万柳美中宜和妇儿医院行MRgFUS的66例子宫肌瘤患者的临床资料,比较治疗后即刻内膜损伤组与未损伤组之间的差异。采用逐步回归法分析治疗后即刻和治疗后3个月子宫内膜损伤的相关因素,Logistic多元回归探讨年龄、治疗前体积、子宫肌瘤是否多发、国际妇产科联盟(FIGO)分型、T2WI信号强度、治疗耗时是否是治疗后即刻子宫内膜损伤和3个月后内膜损伤的影响因素。结果66例患者中,41例(62.1%)治疗后即刻子宫内膜无损伤,4例(6.1%)为1级损伤,5例(7.6%)为2级损伤,16例(24.2%)为3级损伤;49例(74.2%)治疗后3个月内无损伤,5例(7.6%)为1级损伤,2例(3.0%)为2级损伤,10例(15.2%)为3级损伤。逐步回归分析结果显示,子宫肌瘤FIGO分型与治疗后即刻子宫内膜损伤(B=-0.121,SE=0.045,β=-0.326,t=-2.670,P=0.010)和3个月后子宫内膜损伤(B=-0.125,SE=0.042,β=-0.375,t=-2.989,P=0.004)显著相关。Logistic多元回归分析结果显示,FIGO分型是治疗后即刻子宫内膜损伤[OR=0.518(0.307~0.873),P=0.014]和3个月子宫内膜损伤[OR=0.456(0.253~0.824),P=0.009]的独立影响因素。结论MRgFUS治疗子宫肌瘤引起的子宫内膜损伤可控,FIGO分型是治疗后即刻子宫内膜损伤与3个月后子宫内膜损伤的独立影响因素。

干细胞治疗子宫内膜损伤的研究进展

子宫内膜损伤在临床上分为宫腔粘连和薄型子宫内膜,常见原因是频繁的宫腔操作、感染、缺血等,主要表现为闭经、月经量减少,反复流产,不孕和胎盘异常等。常规的治疗手段效果较差。近年来,随着人们对干细胞研究的不断深入,利用干细胞修复受损子宫内膜成为一种新的选择。现简要综述子宫内膜损伤的机理及不同来源的干细胞修复子宫内膜损伤研究进展。

补肾中药联合西药治疗子宫内膜损伤性不孕1例

1病历介绍患者，女，29岁，因“未避孕未育2a，月经量减少4个月”于2010年6月16日就诊。患者2005年结婚，婚后夫妇同居，性生活正常，婚前曾计划外妊娠，于孕30余天行药流术，

优膜生对子宫内膜损伤修复的案例研究

子宫内膜是一种高度再生的组织,机械损伤、炎症、生殖道结核等原因均会造成基底层损伤,引起子宫内膜再生障碍,或形成病理性修复,导致月经减少、闭经、反复流产及不孕等。在不孕症患者中子宫内膜损伤的发生率为2%~22%。通过临床使用优膜生对子宫内膜损伤修复的案例分析,发现其可促进患者子宫内膜生长与修复,增加子宫内膜的容受性,促进子宫内膜损伤修复,提高临床妊娠率,最终改善妊娠结局,具有重要临床意义。

间充质干细胞在宫腔粘连及其他子宫内膜损伤治疗方面的研究进展

宫腔粘连(IUA)多继发于反复刮宫或者宫腔内感染。主要表现为月经不规则、不孕、反复流产等。目前仍以宫腔镜下粘连分解术(TCRA)并辅以雌激素治疗为主要手段,术后可放置球囊支架、宫内节育器、透明质酸等。但重度宫腔粘连患者术后复发率高、生育功能经常规方法治疗后难以恢复。以往的研究已经证明干细胞能通过促进子宫内膜再生和修复来治疗宫腔粘连,但由于移植成活率低、定向诱导分化困难和干细胞成瘤性等问题,无法广泛应用于临床。本文就近年来利用间充质干细胞治疗子宫内膜损伤及宫腔粘连的文章作一综述,为宫腔粘连的治疗提供新的思路。

水凝胶搭载骨髓间充质干细胞治疗大鼠子宫内膜损伤

背景:水凝胶作为一类组织工程的支架材料,为移植细胞在体内增殖分化提供了良好的物理支持。目的:探讨水凝胶搭载骨髓间充质干细胞对大鼠受损子宫内膜的修复效果。方法:将分离培养的SD大鼠骨髓间充质干细胞进行CM-Dil标记,然后制备成泊洛沙姆407-骨髓间充质干细胞复合物。取30只8周龄SD雌性大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、水凝胶组、干细胞组、复合物组,除假手术组外,其余4组建立子宫内膜机械损伤模型,然后每侧宫角分别注射0.2 mL PBS、泊洛沙姆407水凝胶、骨髓间充质干细胞悬液或泊洛沙姆407水凝胶-骨髓间充质干细胞悬液。观察7 d后取出子宫组织,进行苏木精-伊红染色、免疫荧光染色和酶联免疫吸附检测。结果与结论:①与假手术组相比,模型组、水凝胶组、干细胞组与复合物组内膜厚度变薄(P<0.05),其中水凝胶组、干细胞组和复合物组内膜厚度较模型组均有明显改善(P<0.05),复合物组改善最明显,但水凝胶组与干细胞组间差异无显著性意义(P>0.05);②与干细胞组相比,复合物组CM-Dil标记的骨髓间充质干细胞迁移至子宫内膜数量更多(P<0.01),并且两组细胞均具有向子宫内膜间质细胞分化潜能;③与模型组相比,水凝胶组、干细胞组和复合物组子宫内膜组织中白细胞介素1β、白细胞介素6和和肿瘤坏死因子α水平明显下降(P<0.01),其中,干细胞组和复合物组白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平显著低于水凝胶组(P<0.05),干细胞组白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平低于复合物组(P<0.01),但两组白细胞介素1β水平无显著差异(P>0.05);④结果表明,泊洛沙姆407水凝胶搭载骨髓间充质干细胞治疗子宫内膜损伤具有可行性,为修复受损子宫内膜提供新思路。

子宫内膜损伤性疾病“异病同治”思路探究

根据子宫内膜病理特点以及中医病因病机古今认识,创新性地提出子宫内膜损伤性疾病概念,基于文献整理归纳,从中医学的“异病同治”角度出发,分析思考子宫内膜损伤性疾病的共性病因病机及证治特点,旨在为中西医治疗提供重要参考信息,进一步促进中医妇科学常见共性病机的内涵研究。