大鼠胚泡植入过程中子宫内膜降钙素的动态表达及其与血清雌、孕激素水平的关系

目的 检测子宫内膜在大鼠胚泡植入过程中降钙素的表达规律及其与血清雌、孕激素水平的关系。 方法 取植入前后不同时期的大鼠子宫 ,通过免疫组织化学染色 ,检测降钙素在子宫内膜的表达规律 ,放射免疫学检测各组动物血清孕酮 (P)、雌二醇 (E2 )水平。 结果 孕第 3天 ,降钙素开始在子宫内膜腺上皮细胞呈阳性表达 ;于第 4天达峰值 ,随后迅速下降 ;第 6天腺腔分泌物、表面上皮细胞及蜕膜细胞呈阳性着色 ;第 7天 ,腺上皮细胞的阳性着色基本消失 ,但表面上皮细胞和蜕膜细胞的阳性着色仍然存在。血清P从孕第 2天开始上升 ,第 5天达到高峰 ,此后下降。血清E2 水平在孕第 4天达到高峰 ,随后逐渐下降。 结论 降钙素在子宫内膜细胞表达水平的动态变化与胚泡植入密切相关 ,与血清雌、孕激素水平呈正相关 ;孕第 4天子宫内膜腺上皮中降钙素和血清雌激素水平达峰值是子宫内膜植入接受态的重要标志。

早孕小鼠子宫内膜上皮葡萄糖转运体3表达对胚胎着床的作用

目的探讨早孕小鼠子宫内膜上皮葡萄糖转运体3(GLUT3)的表达对胚胎着床的影响。方法(1)免疫组化及Western-blot法检测孕2 d、孕4 d和孕6 d小鼠子宫内膜上皮GLUT3表达情况。(2)采用RNA干扰技术低表达GLUT3,研究其对胚胎着床的影响:取孕2 d小鼠,一侧子宫角注射25μl特异性GLUT3-siRNA以低表达上皮GLUT3,另一侧子宫角注射等量无义siRNA为对照;然后于孕4 d冲洗小鼠宫腔收集囊胚,同时收集子宫组织,采用免疫组化、免疫荧光和Western-blot法检测孕4 d小鼠子宫内膜接受态标志分子白血病抑制因子(LIF)和整合素ανβ3蛋白的表达,孕6 d检测胚胎着床情况。结果(1)免疫组化结果显示,GLUT3主要在子宫内膜上皮表达,孕2 d上皮GLUT3表达呈强阳性,而基质表达弱;孕4 d和孕6 d上皮和基质都有表达。Western-blot结果显示,随着孕天数增加GLUT3蛋白表达水平也随之升高(P<0.05),且孕6 d着床区GLUT3表达显著高于非着床区(P<0.01)。(2)孕2 d宫腔内注射GLUT3-siRNA低表达上皮GLUT3后,未显著影响小鼠孕4 d囊胚发育(P>0.05),但孕4 d子宫内膜接受态标志分子LIF和整合素ανβ3蛋白表达显著下降(P<0.05),孕6 d胚胎着床数也显著下降(P<0.001)。结论低表达上皮GLUT3使子宫内膜接受态受损,进而影响胚胎着床。

维生素D受体在小鼠子宫内膜中的表达及功能研究

目的研究维生素D受体(VDR)在小鼠子宫内膜中的表达及其对胚胎着床的影响。方法免疫组化及Western Blot法检测孕1~6 d小鼠子宫内膜VDR表达;孕2 d小鼠一侧子宫角注入25μl 1 mM Calcifediol(VDR抑制剂)处理,另一侧子宫角注入等体积溶剂对照,孕4 d收获小鼠子宫组织,检测子宫内膜接受态标志分子白血病抑制因子(LIF)和整合素ανβ3的表达,或孕6 d观察胚胎着床情况。结果VDR在孕1~5 d小鼠子宫内膜中的表达呈现动态变化,孕1~2 d主要在上皮表达,基质表达较弱,孕3~4 d开始基质表达逐渐增强,孕5 d达到高峰,孕6 d着床区VDR表达显著高于非着床区(P<0.01);与对照侧比较,VDR抑制剂Calcifediol处理组孕4 d小鼠子宫内膜LIF和整合素ανβ3蛋白的表达均显著下降(P<0.05),孕6 d胚胎着床数亦明显下降(P﹤0.05)。结论VDR在孕1~6 d小鼠子宫内膜中呈动态表达,着床区VDR表达显著高于非着床区,而抑制子宫内膜VDR可降低子宫接受态使胚胎着床受损。