子宫内膜整合素αvβ3表达与体外受精-胚胎移植反复种植失败的相关性研究

目的研究整合素αvβ3在人各时期子宫内膜及蜕膜组织的表达,并探讨其与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)反复种植失败的相关性。方法以40例IVF-ET治疗反复种植失败的患者为研究对象,以40例因男性因素行卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的患者及5例正常孕早期患并作为对照,获取患者各个时期的子宫内膜及蜕膜组织,采用免疫组织化学法检测整合素αvβ3蛋白的定位和表达,并对所获得的结果应用Image-Pro P1us 6.0图像分析软件测定阳性反应强度。结果整合素αvβ3蛋白折定位于子宫内膜腺上皮细胞和腔上皮细胞的细胞浆;增殖早、中、晚期及分泌早期内膜上均无表达,分泌中期、晚期内膜明显表达,蜕膜中表达最强(P<0.05)。反复种植失败患者子宫内膜整合素αvβ3的表达同样存在周期性变化,但其在分泌中、晚期的表达要明显弱于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论整合素αvβ3在正常子宫内膜组织中的表达呈现明显周期依赖性,与胚胎种植密切相关;而其在IVF-ET反复种植失败患者种植窗期子宫内膜组织中的表达明显减弱,可能是导致胚胎种植失败的原因之一。

慢性盆腔炎性不孕患者体内子宫内膜整合素αVβ3表达

盆腔炎不孕占不孕冈素的30％～40％，虽慢性盆腔炎所致不孕与病原菌感染有关，但并非生殖道感染均导致不孕。

红藤煎剂对盆腔炎模型大鼠子宫内膜整合素αvβ3表达影响的实验研究

目的:探讨红藤煎剂对盆腔炎模型大鼠子宫内膜容受性的可能作用机制。方法:采用输卵管注射苯酚糊剂建立盆腔炎模型,实验随机分为正常对照组、模型对照组、西药对照组(庆大霉素组)、中药对照组(康妇栓组)及红藤煎剂灌胃组、灌肠组,每组10只。各组给予相应处理30 d后,免疫组化检测盆腔炎模型大鼠子宫内膜腺上皮整合素αvβ3蛋白表达。结果:与模型组比较,各给药组均能明显增强子宫内膜整合素αVβ3蛋白的表达,统计学分析有显著性差异(P﹤0.05);其中红藤煎剂灌肠组与庆大霉素组、康妇消炎栓组比较亦有显著性差异(P﹤0.05),与正常对照组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:红藤煎剂能够提高盆腔炎模型大鼠子宫内膜整合素αVβ3蛋白的表达,从而改善妊娠结局。

整合素α_vβ_3和骨桥蛋白在多囊卵巢综合征患者植入窗期子宫内膜的表达

目的探讨整合素α_vβ_3和骨桥蛋白(OPN)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者植入窗期子宫内膜的表达。方法选取15名典型PCOS患者(其中7例为自主排卵,8例为促排卵)为PCOS组,同期选择15例月经周期规律妇女为对照组。阴道超声监测排卵,排卵日测定子宫内膜分型及厚度;免疫组织化学技术测定植入窗期的子宫内膜整合素α_vβ_3和骨桥蛋白的表达;放射免疫法测定内膜活检当天的血清雌二醇(E_2)和孕酮(P)的浓度。结果与对照组比较,PCOS组植入窗期子宫内膜整合素α_vβ_3和OPN表达均显著下调(P<0.01),两者之间不伴有比例的失调;排卵日子宫内膜厚度两组无显著差异(P>0.05);子宫内膜分型有显著性差异(P<0.05);血清E_2水平显著高于对照组(P<0.01),E_2/P比值亦显著高于对照组(P<0.05),而P显著低于对照组(P<0.01)。结论 PCOS患者植入窗期子宫内膜整合素α_vβ_3和OPN表达均下调,子宫内膜容受性降低,影响了胚泡着床。

滋养细胞分泌14-3-3 τ蛋白对子宫内膜基质细胞表达整合素α_vβ_3蛋白的影响

目的探讨滋养细胞分泌14-3-3τ蛋白对子宫内膜基质细胞容受性分子整合素αvβ3表达的影响。方法RNA干扰技术下调人绒癌滋养细胞株Be Wo细胞14-3-3τ蛋白的表达。Western blot法检测Be Wo细胞及培养液中14-3-3τ蛋白的表达。建立14-3-3τ蛋白表达下调的Be Wo细胞与人子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESC)的共培养体系,Western blot法检测共培养体系培养液中14-3-3τ蛋白的表达,以及ESC容受性分子整合素αvβ3的表达变化。结果与si RNA阴性对照组相比,特异性si RNA显著下调Be Wo细胞和培养液中14-3-3τ蛋白的表达(P<0.05)。共培养体系中,与si RNA阴性对照组相比,与14-3-3τ蛋白表达下调的Be Wo细胞共培养的ESC整合素αvβ3的表达显著上调(P<0.05),提示ESC容受性增加。与单独培养的ESC相比,培养液中添加14-3-3τ重组蛋白的ESC培养24 h后整合素αvβ3的表达显著下调(P<0.05),提示ESC容受性降低。结论14-3-3τ蛋白可以被滋养细胞分泌至细胞外,并可能发挥调控ESC容受性的作用,但其作用机制仍需进一步研究。

输卵管性和内异症性不孕患者黄体中期子宫内膜整合素α_vβ_3表达的差异

目的探讨输卵管性和内异症性不孕患者黄体中期子宫内膜整合素αvβ3表达的差异。方法收集行手术治疗的9例内异症性不孕患者和进行IVF/ICSI-ET的20例输卵管阻塞患者黄体中期子宫内膜,应用免疫组化方法检测整合素αvβ3的表达。结果子宫内膜腔上皮细胞中整合素αvβ3表达H-score平均分内异症组较输卵管组低,差异有显著性(P<0.05),而两组间腺上皮细胞中整合素αvβ3表达H-score平均分比较差异无显著性(P>0.05)。结论内异症不孕患者和输卵管阻塞不孕患者黄体中期子宫内膜整合素αvβ3表达的差异,可能提示内异症对子宫内膜容受性存在不利影响。

慢性盆腔炎性不孕患者子宫内膜整合素α_vβ_3表达及与甾体激素关系的研究

【目的】研究慢性盆腔炎性不孕患者子宫内膜整合素αvβ3的表达,并分析其体内甾体激素与整合素αvβ3表达的相关性。【方法】选取25例慢性盆腔炎性不孕症患者,同时选择15例具有正常生育能力的育龄妇女,分别设为实验组和对照组,采用流式细胞荧光标记测量技术对子宫内膜中整合素αvβ3的表达进行定量检测。在同期内取血清检测实验组及对照组体内雌孕激素水平,分析甾体激素与子宫内膜整合素αvβ3表达在植入窗口期(种植期)的相关性。【结果】(1)两组黄体中期血清雌二醇(E2)水平及雌二醇/孕酮(E2/P)比值比较均无显著性差异(P>0.05),而血清P水平比较有显著性差异(P<0.05)。(2)两组黄体中期(分泌中期)子宫内膜整合素αvβ3表达比较差异有显著性意义(P<0.05)。(3)雌激素与子宫内膜整合素αvβ3无相关性,而孕激素与整合素αvβ3显示正相关性,孕激素的表达水平越高,整合素αvβ3表达水平相应也越高。【结论】整合素αvβ3在正常育龄妇女子宫内膜种植窗期的表达高于慢性盆腔炎性不孕患者;整合素的表达水平与卵巢分泌的甾体激素孕激素的表达呈一致性,孕激素影响着整合素αvβ3表达的水平。

GnRH—a对内异症术后患者黄体中期子宫内膜整合素αVβ3和PR表达的影响

子宫内膜异位症（内异症）是一种激素依赖性妇科常见病，多见于生育年龄妇女，近年来发病有上升趋势，其就诊主要症状为痛经及不孕。时至今日，内异症不孕患者的治疗仍非常棘手，关键在于不孕原因复杂，涉及卵泡功能、内分泌、宫腹腔环境、盆腔解剖结构等方面的改变，而有越来越多的证据表明，内异症患者的在位内膜对胚胎的接受能力下降，

子宫内膜异位症不孕患者子宫内膜整合素av、β3表达的初步探讨

目的：探讨子宫内膜异位症是否影响子宫内膜容受性而造成不孕。方法：前瞻性研究我院2004年1月到2005年6月经手术病理确诊的子宫内膜异位症不孕患者胚胎种植窗期血清孕激素、雌激素浓度，组织学分期和子宫内膜整合素av、β3的表达，并与同期已育妇女的指标作比较。结果：15例子宫内膜异位症不孕患者中工期和Ⅱ期共8例（研究1组），Ⅲ期和Ⅳ期共7例（研究2组），与16例对照组比较，血清孕激素和雌激素浓度差异无统计学意义。病理组织学确诊的黄体功能不足差异无统计学意义。子宫内膜整合素β3的表达差异无统计学意义，子宫内膜整合素av的表达差异有统计学意义（P〈0．05），且仅Ⅲ期和Ⅳ期子宫内膜异位症子宫内膜整合素av的表达差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：初步证实Ⅲ～Ⅳ期子宫内膜异位症不孕患者子宫内膜容受性标记物-子宫内膜整合素av的表达下降，与其导致不孕和流产相关，值得进一步进行大样本的研究。

超排卵周期中高雌、孕激素水平对着床期子宫内膜整合素αvβ3、骨桥蛋白表达及子宫内膜容受性的影响

目的：探讨体外授精（IVF）超促排卵过程中超生理剂量的雌、孕激素对着床期整合素αvβ3、骨桥蛋白（OPN）表达的影响,从而推测IVF超促排卵所致的高雌、孕激素对子宫内膜容受性的影响。方法：2012年5月~2013年10月于该中心行IVF的33例因卵巢过度刺激综合征或过高孕酮水平取消新鲜周期胚胎移植的不孕症妇女为研究组,根据h CG日雌孕激素水平将研究对象分为3组：高E2组（E2≥5 210 pg/ml、P〈1.05 ng/ml）;高P组（P≥1.05 ng/ml、E2〈5 210 pg/ml）;高E2并高P组（P≥1.05 ng/ml、E2≥5 210p g/ml）,于取卵后7~8天用宫腔负压吸管（Pipelle管）取内膜组织。对照组为11例正常妇女,于超声监测排卵后7~8天同法取内膜,采用免疫组化SP法和组织学积分H-score法对整合素αvβ3、OPN,在种植窗期子宫内膜中的表达进行定位和半定量分析,比较不同雌孕激素水平在着床期对整合素αvβ3、OPN表达的影响,从而推测IVF超促排卵中高雌、孕激素对子宫内膜容受性的影响。结果：种植窗期高E2组、高P组、高E2并高P组患者与对照组比较整合素αvβ3、OPN的表达差异没有统计学意义。结论：仅仅依靠整合素αvβ3、OPN这两项指标的表达来推测子宫内膜的容受性是不可靠的。

补肾助孕方对大鼠胚胎着床期子宫内膜ER、PR及整合素α_5、β_3蛋白表达的影响

目的观察补肾助孕方对大鼠胚胎着床期子宫内膜细胞雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及整合素α5、β3蛋白表达的影响,以阐明该方改善黄体功能不全性不孕症的机制。方法将SD雌性大鼠随机分成空白组、模型组、西药组和中药补肾助孕方低、中、高剂量组,分别对各组大鼠由妊娠至胚胎着床期处死,取子宫中段组织(约1cm),采用Western blot技术分析各组大鼠胚胎着床期子宫内膜ER、PR及整合素α5、β3的蛋白表达等。结果模型组子宫内膜ER、PR的蛋白表达明显高于空白组,补肾助孕方低、中剂量组明显低于模型组(P<0.05);模型组子宫内膜整合素α5、β3的蛋白表达明显低于空白组,补肾助孕方中、高剂量组明显高于模型组(P<0.05)。结论补肾助孕方可下调胚胎着床期子宫内膜ER、PR的水平,提高整合素α5、β3水平的表达,改善黄体功能不全状态子宫内膜的容受性,从而创造了良好的受孕环境。

子宫内膜骨桥蛋白和整合素αvβ3表达与IVF-ET反复种植失败的关系

目的:检测骨桥蛋白(OPN)和整合素αvβ3在人子宫内膜的表达,并探讨它们与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)反复种植失败的相关性。方法:采用免疫组织化学法检测35例反复种植失败患者(研究组)及35例正常妇女(对照组)各时期子宫内膜组织中OPN和整合素αvβ3的表达。结果:OPN在增殖晚期开始表达,整合素αvβ3则在分泌中期开始出现并表现为强表达,两者在分泌中、晚期的表达水平均较其余各期明显增加(P<0.05)。与对照组相比,两者在研究组种植窗期内膜的表达均明显减弱(P<0.05)。结论:OPN和整合素αvβ3在正常子宫内膜中协调表达且呈现明显周期依赖性,参与子宫内膜容受性的建立;两者在反复种植失败患者种植窗期内膜中的表达明显减弱,可能是引起种植失败的原因之一。

输卵管积水术后可改善种植窗期子宫内膜白血病抑制因子和整合素αvβ3的表达

【目的】探讨输卵管积水手术治疗对改善子宫内膜白血病抑制因子(LIF)和整合素αvβ3表达的意义。【方法】选择输卵管积水患者60例,输卵管阻塞患者30例,应用免疫组化方法测定输卵管积水患者手术治疗前后及阻塞组患者种植窗期子宫内膜LIF和整合素αvβ3的表达情况。【结果】LIF和整合素αvβ3在输卵管积水患者手术前种植窗期子宫内膜的表达水平明显低于阻塞组(P<0.05),经手术治疗后,子宫内膜种植窗期的LIF和整合素αvβ3表达水平与阻塞组无明显差异(P>0.05),手术治疗前后子宫内膜种植窗期的LIF和整合素αvβ3的表达水平有统计学差异(P<0.05)。【结论】输卵管积水降低了种植窗期子宫内膜LIF和整合素αvβ3的表达水平,LIF和整合素αvβ3可能是影响输卵管积水患者子宫内膜容受性的重要因子,手术治疗可改善种植窗期子宫内膜LIF和整合素αvβ3的表达。

益气血补肝肾方对子宫内膜整合素αvβ3表达的影响

目的:观察益气血补肝肾方对子宫内膜整合素αvβ3表达的影响,探讨益气血补肝肾方提高妊娠率的机制。方法:600只小鼠随机分为超促排卵组、促排卵组、自然排卵组各200只,每组小鼠中又分为中药干预组与对照组各100只,分别用免疫组织化学、RT-PCR和Western blot法检测整合素αvβ3的表达。结果:超促排卵组和促排卵组小鼠中,中药干预组妊娠率显著高于对照组(P<0.05)。但自然排卵组中药干预后妊娠率与对照组无统计学差异(P>0.05)。免疫组织化学、RT-PCR和Western blot法均显示,超促排卵组和促排卵组小鼠中,中药干预后整合素αvβ3的表达显著升高(P<0.05),而对自然排卵组则无明显影响(P>0.05)。结论:益气血补肝肾可能通过上调超促排卵及促排卵小鼠子宫内膜整合素αvβ3表达,改善子宫内膜容受性,从而提高妊娠率。

外源性LIF和IL-1对围着床期小鼠子宫内膜整合素β_3亚基表达的调节

Objective:To study regulation of external leukemia inhibitory factor(LIF) and interlukin 1(IL 1) on the expression of integrin β 3 in the mouse endometrium during peri implantation period and explore the mechanism which LIF participate in embryonic implantation.Methods:The mice were injected peritoneally with LIF,IL 1 or IL 1ra at different administration on day 2～4 of pregnancy.The level of integrin β 3 protein was measured with Westernblot method and mRNA measured with RT PCR.Results:The levels of integrin β 3 protein and mRNA were increased by LIF and IL 1(P<0.05) and which relied on administration.The level of integrin β 3 mRNA was decreased by IL 1ra (P<0.05).Conclusion:LIF and IL 1 of cytokines can improve the expression of integrin β 3 in the peri implantation endometrium of mouse.Both of them may take part in implantation by regulating cell adhesion molecules.

小鼠早期完整胚胎诱导子宫内膜白血病抑制因子和整合素β_3表达并提高子宫容受性

目的:探讨小鼠早期胚胎诱导子宫内膜容受性改变的空间结构,确定胚胎各个部分能否引起子宫内膜容受性中白血病抑制因子(LIF)和整合素β3改变。方法:选用6～8周昆明雌鼠,体外实验分为子宫内膜培养前组、子宫内膜单纯培养组、子宫内膜全胚胎共培养组、子宫内膜卵裂球共培养组、子宫内膜透明带共培养组,各组培养2 d后收集子宫内膜行下一步检测;体内实验分为胚胎移植前组、单纯培养液移植组、全胚胎移植组、卵裂球移植组、透明带移植组及正常妊娠未干预组,移植后2 d收集子宫内膜行下一步检测。荧光定量PCR检测整合素β3和LIF mRNA表达;免疫组织化学及Western blotting检测整合素β3和LIF的蛋白表达部位及表达水平。结果:体外实验子宫内膜全胚胎共培养组中子宫内膜的整合素β3和LIF表达显著高于其它组,体内实验正常妊娠未干预组的整合素β3和LIF表达显著高于其它组。结论:完整胚胎可显著提升小鼠孕早期子宫内膜容受性因子整合素β3和LIF的表达,而单纯透明带或卵裂球则不能明显增加整合素β3和LIF的表达。早期胚胎诱导子宫内膜容受性可能需要完整胚胎结构的存在。

整合素avβ3单克隆抗体对小鼠子宫内膜异位病灶的抑制作用

目的研究整合素avβ3单克隆抗体对SCID小鼠子宫内膜异位病灶生长和微血管形成的影响。方法建立人子宫内膜异位症小鼠皮下移植病灶模型。治疗组尾静脉注射整合素avβ3单克隆抗体Lm609(250μg/只),对照组给予相应体积的PBS,1周2次。4周后处死动物,测量病灶,采用免疫组化法检测病灶微血管密度(MVD)及整合素avβ3的表达。结果治疗组与对照组皮下移植病灶质量分别为(0.82±0.09)g和(0.51±0.93)g(P<0.05),病灶组织中MVD则分别为31.2±4.4和14.4±1.8(P<0.05),治疗组病灶受到显著抑制。结论整合素avβ3单克隆抗体通过抑制微血管形成而抑制子宫内膜异位病灶的生长。

控制性超排卵对围着床期小鼠子宫内膜HOXA10、整合素αvβ3和LIF表达的影响

目的:观察围着床期小鼠子宫内膜同源盒基因A10(HOXA10)、整合素αvβ3和白血病抑制因子(LIF)的表达,探讨控制性超排卵(COH)对小鼠子宫内膜容受性的影响。方法:昆明纯种性成熟小鼠经COH模型制备、胚泡移植后,随机分为自然囊胚+自然假孕组、COH囊胚+自然假孕组、自然囊胚+COH假孕组、COH囊胚+COH假孕组。取受孕第6天小鼠,观察各组妊娠率及平均着床位点数,采用Western blot和RT-PCR技术检测受孕第5天小鼠子宫内膜HOXA10、整合素αvβ3和LIF蛋白及mRNA的表达。结果:COH假孕鼠接受囊胚移植后妊娠率、平均着床位点数较自然假孕鼠低;子宫内膜HOXA10、整合素αvβ3和LIF表达显著性低于自然假孕鼠,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:超排卵药物能下调种植窗期子宫内膜HOXA10、αvβ3和LIF的表达,降低子宫内膜容受性,导致临床妊娠率低下。

子宫内膜整合素β_3和细胞外基质的变化及与不孕症的关系

对生育组３１例，原因不明不孕组３４例采用免疫组化方法检测整合素β３及细胞外基质纤维粘连蛋白（ＦＮ）、层粘连蛋白（ＬＮ）、Ⅳ型胶原纤维（ＣＬ）在分泌期子宫内膜上的表达，探讨其变化规律及在调控妊娠中的作用。结果显示整合素β３在生育组腺上皮细胞分泌中期出现，持续至分泌晚期，而不孕组分泌期无表达；细胞外基质在生育组分泌中期呈强表达，早期次之，晚期较弱；不孕组在分泌各期表达均高于生育组。结论认为整合素β３ＦＮ、ＬＮ和Ⅳ型ＣＬ在分泌期子宫内膜上呈周期性变化参与子宫内膜的功能变化及胚泡的着床环节，其异常表达可致着床失败而不孕。

子宫内膜异位症患者组织中骨桥蛋白及配体整合素αVβ3的表达及对血管生成的影响

目的检测子宫内膜异位症患者组织中骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、整合素αVβ3、血管内皮生长因子(VEGF)的表达,探讨子宫内膜异位症的发病机制。方法选取因卵巢子宫内膜异位囊肿行手术治疗的56例患者为研究组,以单纯子宫肌瘤行子宫切除术患者21例为对照组,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP法)检测子宫内膜异位症患者异位内膜及在位内膜中OPN、整合素αVβ3和VEGF的表达,并分析其相关性。结果①异位内膜OPN的阳性表达率(73.21%)与在位内膜(70.00%)相似,与对照组(19.05%)比较,差异有统计学意义(P<0.01);②异位内膜整合素αVβ3的表达率(100.00%)与在位内膜(55.00%)及对照组(4.76%)比较,差异有统计学意义(P<0.01);③异位内膜VEGF的强阳性表达率(76.79%)与在位内膜(60.00%)及对照组(28.57%)比较,差异有统计学意义(P<0.01);④OPN、整合素αVβ3与VEGF在异位内膜组织的表达呈正相关(rs=0.596和0.568,P均<0.01),OPN与整合素αVβ3呈正相关(rs=0.738,P<0.01)。结论异位内膜细胞OPN、整合素αVβ3的高表达促进异位内膜的黏附和侵袭,并可能通过促血管生成,共同促进异位内膜的种植与生长,在子宫内膜异位症的发生发展中发挥重要作用。